1、1.熟悉本類藥物的典型藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)與分析方法的關(guān)系。 2.掌握本類藥典型藥物中的鑒別試驗（重氮化偶合反應(yīng)、三氯化鐵反應(yīng)、重金屬離子反應(yīng)及紅外吸收光譜法） 3.熟悉本類藥物的特殊雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)、危害、檢查方法與含量限度。 4.掌握本類藥物的亞硝酸鈉滴定法、非水滴定溶液滴定法、溴量法和提取酸堿滴定法含量測定的原理、測定的主要條件、終點指示方法和注意事項。,分子結(jié)構(gòu)中都具有對氨基苯甲酸酯的母體（芳伯氨基）,苯佐卡因,鹽酸丁卡因,鹽酸普魯卡因胺,案例7-1,已知某藥物結(jié)構(gòu)式為： 根據(jù)該藥物的結(jié)構(gòu),分析其性質(zhì),設(shè)計合理的化學(xué)鑒別反應(yīng)。,2.水解特性:分子結(jié)構(gòu)中有酯鍵或酰胺鍵，易水解。,1. 芳伯

2、氨基:,受光線、熱、堿的影響；鹽酸丁卡因BABA，苯佐卡因、鹽酸普魯卡因等PABA,重氮化偶合反應(yīng)；與芳醛縮合成Schiff堿；易氧化變色等,4.溶解性：游離堿，油狀液體或低熔點固體難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑；鹽酸鹽白色結(jié)晶粉末，具一點的熔點，易溶于水和乙醇，難溶于有機(jī)溶劑。,3.弱堿性：具脂烴胺側(cè)鏈，弱堿性。叔胺氮原子，生物堿沉淀劑反應(yīng)，非水溶劑滴定,5. UV,6. IR,分子結(jié)構(gòu)中都具有芳酰氨基,（一）基本結(jié)構(gòu)與典型藥物,鹽酸利多卡因,鹽酸布比卡因,1.芳伯氨基：水解后顯芳伯氨基特性,乙酰氨基酚水解較快，利多卡因和布比卡因在酰氨基鄰位存在兩個甲基，由于空間位阻影響，較難水解。,2 水解：水

3、解產(chǎn)物易酯化,COCH3,重氮化偶合反應(yīng)；與芳醛縮合成Schiff堿；易氧化變色等,水解產(chǎn)物(醋酸)+乙醇/硫酸醋酸乙酯,4.弱堿性：具脂烴胺側(cè)鏈，弱堿性，可以成鹽，可與生物堿沉淀試劑發(fā)生沉淀反應(yīng)?？刹捎梅撬味ǚy定含量,5.與重金屬離子發(fā)生沉淀反應(yīng),叔胺氮原子生物沉淀劑沉淀,酰胺氮原子與金屬離子絡(luò)合顯色,重氮化-偶合反應(yīng),水解產(chǎn)物反應(yīng),制備衍生物測熔點,紫外、紅外吸收光譜,重金屬離子反應(yīng),三氯化鐵反應(yīng),氯化物的鑒別反應(yīng),（一）重氮化-偶合反應(yīng)（芳香第一胺反應(yīng)）,直接：鹽酸普魯卡因、苯佐卡因、鹽酸普魯卡因胺,間接：對乙酰氨基酚、醋氨苯砜、非那西丁、貝諾酯,鹽酸普魯卡因 Ch.P.（2010）

4、 【鑒別】（4）本品顯芳香第一胺類的鑒別反應(yīng)（附錄） 取供試品約50mg，加稀鹽酸1ml,必要時緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1mol/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性-萘酚試液數(shù)滴，視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀。,對乙酰氨基酚 Ch.P.（2010） 【鑒別】 （2）取本品約0.1g，加稀鹽酸5ml，置水浴中加熱40分鐘，放冷；取0.5ml，滴加亞硝酸鈉試液5滴，搖勻，用水3ml稀釋后，加堿性-萘酚試液2ml，振搖，即顯紅色。,鹽酸丁卡因中不具有芳伯氨基，無此反應(yīng)，但其分子結(jié)構(gòu)中的芳香仲胺在酸性溶液中與亞硝酸鈉生成N-亞硝基化合物的白色沉淀?？膳c芳伯氨基同類藥物區(qū)別。,具有酯鍵結(jié)構(gòu)的藥物易

5、在堿性溶液中水解,可利用其水解產(chǎn)物進(jìn)行鑒別。,【鑒別】 （1）取本品約0.1g，加水2ml溶解后，加10氫氧化鈉溶液1ml，即生成白色沉淀；加熱，變?yōu)橛蜖钗铮焕^續(xù)加熱，產(chǎn)生的蒸氣，能使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變?yōu)樗{(lán)色；熱至油狀物消失后，放冷，加鹽酸酸化，即析出白色沉淀。,1.鹽酸普魯卡因 Ch.P.（2010）,與銅鹽及鈷鹽生成配合物反應(yīng) 羥肟酸鐵鹽反應(yīng) 與汞鹽反應(yīng),（四）重金屬離子反應(yīng),（三）與重金屬離子反應(yīng),氯仿,黃色,2.羥肟酸鐵鹽反應(yīng)（鹽酸普魯卡因胺）,羥肟酸,羥肟酸鐵,鹽酸利多卡因+Hg(NO3)2,黃色,紅色或橙黃色,對氨基苯甲酸酯類 +Hg(NO3)2,A:芳酰胺類，如鹽酸利多卡因,B

6、.對氨基苯甲酸酯類，如苯佐卡因,例1：下列藥物中，能在碳酸鈉試液中硫酸銅反應(yīng)生成藍(lán)紫色配位化合物的是,A 鹽酸普魯卡因 B 鹽酸利多卡因 C 鹽酸丁卡因 D 對乙酰氨基酚 E 腎上腺素,例2：下列藥物中，Ch.P.直接用芳香第一胺反應(yīng)進(jìn)行鑒別,A 鹽酸普魯卡因 B 鹽酸利多卡因 C 鹽酸丁卡因 D 對乙酰氨基酚 E 鹽酸腎上腺素,例3：鹽酸丁卡因與亞硝酸鈉作用形成的產(chǎn)物是,A 重氮鹽 B 偶氮染料 C N-亞硝基化合物 D 亞硝基苯化合物 E 偶氮氨基化合物,例4：下列藥物中，經(jīng)水解后加碘試液可生成黃色沉淀的是,A 鹽酸利多卡因 B 氨甲苯酸 C 乙酰水楊酸 D 苯佐卡因 E 鹽酸克侖特羅,例

7、5：下列藥物中，在酸性條件下可與CoCl2試液反應(yīng)生成亮綠色的是,A 鹽酸利多卡因 B 氨甲苯酸 C 乙酰水楊酸 D 苯佐卡因 E 鹽酸普魯卡因胺,例8：鹽酸普魯卡因常用的鑒別反應(yīng)有,A 重氮化-偶合反應(yīng) B 水解反應(yīng) C 氧化反應(yīng) D 磺化反應(yīng) E 碘化反應(yīng),例9：下列藥物中，不屬于酰苯胺類的有,A 鹽酸布比卡因 B 苯佐卡因 C 鹽酸利多卡因 D 鹽酸丁卡因 E 鹽酸普魯羅哌卡因,一、鹽酸普魯卡因中對氨基苯甲酸的檢查,雜質(zhì)來源 水解產(chǎn)生,第三節(jié) 特殊雜質(zhì)檢查,Ch.P.（2010）鹽酸普魯卡因及其各種制劑均采用HPLC法檢查對氨基苯甲酸,原料: 取本品，精密稱定，加水稀釋制成每1ml中含鹽

8、酸普魯卡因0.2mg的溶液，作為供試品溶液；另取對氨基苯甲酸對照品適量，精密稱定，加水溶解并定量制成每1ml中含對氨基苯甲酸1.0g的溶液，作為對照品溶液。照高效液相色譜法（附錄V D）測定，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇磷酸鹽緩沖液（0.05mol/L磷酸二氫鉀，0.1庚烷磺酸鈉，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至 3.0）（32：68）為流動相；檢測波長為279nm，理論板數(shù)按對氨基苯甲酸峰計應(yīng)不低于2000，鹽酸普魯卡因和對氨基苯甲酸之間的分離度應(yīng)大于2.0。取對照品溶液10l 注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的20。精密量取供試品溶液與對照品溶液各10l ，分別注

9、入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品溶液色譜圖中如有與對氨基苯甲酸對照品相應(yīng)的雜質(zhì)峰，按外標(biāo)法以峰面積計算，不得過0.5。,對氨基苯甲酸檢查方法Ch.P.(2010),注射液: 精密量取本品適量，加水稀釋制成每1ml中含鹽酸普魯卡因0.2mg的溶液，作為供試品溶液；精密稱取對氨基苯甲酸對照品適量，加水溶解并定量制成每1ml中含對氨基苯甲酸2.4g的溶液，作為對照品溶液。照高效液相色譜法（附錄V D）測定，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇緩沖液（0.05mol/L磷酸二氫鉀，0.1庚烷磺酸鈉，pH 3.0）（32：68）為流動相；檢測波長為279nm，理論板數(shù)按對氨基苯甲酸峰計應(yīng)不低于2000

10、。取對照品溶液10l 注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的20；鹽酸普魯卡因和對氨基苯甲酸之間的分離度應(yīng)大于2.0。精密量取供試品溶液與對照品溶液各10l ，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品溶液色譜圖中如有與對氨基苯甲酸對照品相應(yīng)的雜質(zhì)峰，按外標(biāo)法以峰面積計算，含量不得過1.2。,對氨基苯甲酸檢查方法Ch.P.(2010),二、鹽酸氯普魯卡因注射液中有關(guān)物質(zhì)和光解產(chǎn)物的檢查,三、鹽酸利多卡因注射液中2,6-二甲基苯胺及其他雜質(zhì)的檢查,（三）鹽酸利多卡因注射液中2,6-二甲基苯胺及其他雜質(zhì)的檢查,HCE法:手性分離,HPLC,由于鹽酸氯普卡因注射液在生產(chǎn)和貯藏過

11、程中會產(chǎn)生4-氨基-2-氯苯甲酸，影響療效和成品的顏色，故此需要對降解產(chǎn)物進(jìn)行檢查 1、高效液相色譜法（HPLC） 2、液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用法（LC-MS）,例10：鹽酸普魯卡因需檢查的特殊雜質(zhì)是,A 水楊酸 B 對氨基酚 C 有關(guān)物質(zhì) D 對氨基苯甲酸 E 酮體,練習(xí)題,今有3瓶藥物分別為鹽酸利多卡因（A)、鹽酸丁卡因（B)、和鹽酸普魯卡因（C)，但瓶上標(biāo)簽脫落，請采用適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)方法將三者區(qū)分開。,（一）亞硝酸鈉滴定法 (sodium nitrite method) （二）非水溶液滴定法 (non-aqueous titrimetry) （三）分光光度法 ( spectrometry ) （四

12、）HPLC法(chrometography),（一）亞硝酸鈉滴定法,Ar-NH2; Ar-NHCOR; Ar-NO2均可采用此法,.,具游離芳伯氨基的藥物可用本法直接測定。具潛在芳伯氨基的藥物，如具酰胺基藥物（對乙酰氨基酚等）經(jīng)水解，芳香族硝基化合物（如無味氯霉素）經(jīng)還原，也可用本法測定。,Ar-NHCOR + H2O,Ar-NH2 + RCOOH,H +,Ar-NH2 + NaNO2 + 2HCl,Ar-N2+Cl- + NaCl + 2H2O,(1) 加KBr增加反應(yīng)速度,重氮化的反應(yīng)歷程為：,1.芳伯氨基的游離程度：堿性越弱，游離程度越強(qiáng)，重氮化反應(yīng)速度就快。 2.吸電子基團(tuán)：苯胺環(huán)上（

13、尤其是對位），具SO3、NO2、COOH、X，反應(yīng)加快； 3.推電子基團(tuán)：苯胺環(huán)上（尤其是對位），具OCH2R、CH3、OH，反應(yīng)減慢；,NaNO2 + HCl,HNO2 + NaCl,HNO2 + HCl,NOCl + H2O,(1),(2),KBr + HCl,HBr + KCl,HNO2 + HBr,NOBr + H2O,生成NOBr量大得多 加快反應(yīng)速度, KHBr 比KHCl大300倍,.,重氮化速度加快； 重氮鹽在酸性介質(zhì)中穩(wěn)定； 防止生成氨基偶氮化合物。,(3) 室溫(1030 )條件下滴定(15 以下較準(zhǔn)),(4) 滴定管尖端插入液面下滴定,最后一滴加入后,攪拌1-5min,再

14、確定終點.,3.指示終點的方法,溶液 檢流計,終點前 無過量HNO2 無電流,終點時 過量HNO2 有電流,（1）永停滴定法,淀粉-KI糊劑或試紙,當(dāng)達(dá)到滴定終點時，溶液中稍過量 的NaNO2在酸性條件下氧化KI析出I2，I2遇 淀粉顯藍(lán)色。,滴定時，把淀粉-KI試液滴在白磁板上，用玻璃棒蘸取少量被滴定的溶液，在白磁板上劃，如果立即出現(xiàn)藍(lán)色即已到滴定終點。, KI在酸性條件下遇光能被空氣氧化析出碘，所以，在沒有達(dá)到終點時，就有可能呈現(xiàn)藍(lán)色，而造成誤判。 由于經(jīng)常蘸取溶液進(jìn)行試驗，可造成滴定液的損失而帶來誤差。 方法難掌握。,二、非水溶液滴定法 脂烴胺側(cè)鏈，具弱堿性,鹽酸丁卡因、鹽酸利多卡因和鹽

15、酸布比卡因側(cè)鏈烴胺的叔胺氮具有弱堿性，均可采用非水溶液滴定法測定含量。,改”冰醋酸+醋酐”,“鹽酸溶液,用氫氧化鈉滴定注直接滴定,電位指示,兩個突躍點體積差”,改用HPLC法,取干燥的供試品適量（以消耗滴定液8ml為度），加入冰醋酸1030ml溶解（必要是可溫?zé)崾谷芙?，放冷），若供試品為氫鹵酸鹽，應(yīng)加入5%醋酸汞的的冰醋酸溶液35m，用高氯酸滴定液滴定至終點，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。,250,例 取標(biāo)示量為0.3g的對乙酰氨基酚片10片，總重為3.3660g，稱出44.9mg，置250ml量瓶中，加0.4氫氧化鈉溶液50ml及水50ml，振搖15min，加水至刻度，搖勻，用干燥濾紙濾過。棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液5ml，置100ml量瓶中，加0.4氫氧化鈉溶液10ml，加水至刻度，搖勻，在257nm的波長處測的吸光度為0.583，按C8H9NO2的吸收系數(shù) 為715 計算本片劑的標(biāo)示量%。,A型題,1鹽酸普魯卡因注射液中檢查的特殊雜質(zhì)是 A.水楊醛 B. 間氨基酚 C.水楊酸 D.對氨基苯甲酸 E. 氨基酚 2對乙酰氨基酚中檢查的特殊雜質(zhì)是 A.水楊醛 B. 間氨基酚 C. 對氨基酚 D.苯甲酸 E.苯酚,2 Ch.P.（2010）亞硝酸鈉滴定法測定對氨基水楊酸鈉的含量時，指示滴定終點的方法為（ ） A. 自身指示終點法 B. 永