1、第三節(jié) 基本技術(shù)-3-實(shí)驗(yàn)室及培育苗工廠(chǎng)的設(shè)計(jì),培養(yǎng)基的配制-滅菌 外植體采集-消毒處理,外植體接種在培養(yǎng)基上,培養(yǎng),植物組織培養(yǎng)要求的實(shí)驗(yàn)室,植物組織培養(yǎng)概念,藥品配制室,消毒處理室,接種室,培養(yǎng)室,移栽,大棚,（一）實(shí)驗(yàn)室的基本組成,配 制 室,消 毒 室,接 種 室,培 養(yǎng) 室,觀(guān) 察 室,組培實(shí)驗(yàn)室,馴 化 室,一、實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì),洗 滌 室,洗滌室,1.主要功能,組培用具洗滌、干燥和貯存；材料預(yù)處理與清洗；組培苗出瓶、清洗與整理等。,2.設(shè)計(jì)要求,10m2左右。房間寬敞明亮，方便工作；有電源、自來(lái)水和水槽（池），上下水暢通；地面耐濕、防滑、排水良好，便于清潔。,3.儀器與用具配置,培養(yǎng)

2、基配制室,1.主要功能,培養(yǎng)基的配制、植物材料的預(yù)處理,2.設(shè)計(jì)要求,一般1020m2左右。要求房間寬敞明亮、通風(fēng)、干燥，便于多人操作；有電源、自來(lái)水和水槽（池），保證上下水道暢通。,3.儀器與用具配置,恒溫水浴鍋,電飯煲,磁力攪拌器,磁力攪拌器,酸度計(jì),電爐,電蒸餾水器,水處理中心,自動(dòng)灌裝機(jī),功能：培養(yǎng)基、接種工具等滅菌。設(shè)計(jì)要求：一般為5-10m2。安全、通風(fēng)、明亮；墻壁和地面防潮、耐高溫；配備水源、水槽（池）、電源或煤氣加熱裝置和供排水設(shè)施；保證上下水道暢通，通風(fēng)措施良好。 配備：高壓滅菌器或微波爐、烘干箱等。,3.滅菌室,4、接種室與緩沖間,功能：植物材料的接種或培養(yǎng)物的轉(zhuǎn)移等。 結(jié)

3、構(gòu)：緩沖間+接種室 設(shè)計(jì)要求:宜小不宜大，一般小接種室57m2 ，緩沖間23m2 。密閉、干爽、清潔明亮，地面平坦無(wú)縫、頂棚及墻壁密閉光滑，吊裝紫外光燈，配置橫拉門(mén)。,配備：超凈臺(tái)，工作臺(tái)，擱架，醫(yī)用小平車(chē)， 細(xì)菌過(guò)濾器、解剖鏡、紫外燈、接種工具等。,醫(yī)用小平車(chē),組織培養(yǎng)常用的工具 1.尖頭鑷 2.扁頭鑷 3.槍形鑷 4.彎頭鑷 5.直形鑷 6.彎頭剪 7.尖頭解剖刀 8.解剖刀 9.接種針,組織培養(yǎng)常用的玻璃器皿1.T形管 2.L形管 3.角形培養(yǎng)瓶 4.長(zhǎng)方形扁瓶 5.圓形扁瓶 6.圓形培養(yǎng)瓶 7.三角瓶 8.平型有角試管 9.平型無(wú)角試管 10.細(xì)胞微室培養(yǎng)工具，玻璃杯及蓋玻片、載玻片,

4、5.培養(yǎng)室,5.培養(yǎng)室,設(shè)計(jì)要求：培養(yǎng)室的大小可根據(jù)生產(chǎn)規(guī)模和培養(yǎng)架規(guī)格、數(shù)量及其它附屬設(shè)備而定。不宜過(guò)大，面積1020m2 ，充分利用空間和節(jié)能，有緩沖間或走廊 。 能夠控光控溫（高溫區(qū)和低溫區(qū)）。保持密閉、干爽、整潔明亮，防止微生物感染。要求天花板、墻壁光滑平整、絕熱防火，最好用塑鋼板或瓷磚裝修；地面用水磨石或瓷磚鋪設(shè)，平坦無(wú)縫，方便室內(nèi)消毒，并有利于反光，提高室內(nèi)亮度。,功能：培養(yǎng)離體材料。,擺放培養(yǎng)架，以立體培養(yǎng)為主。 能夠通風(fēng)、降濕、散熱。 培養(yǎng)室外應(yīng)設(shè)有緩沖間或走廊。 培養(yǎng)室內(nèi)用電量大，應(yīng)設(shè)置供電專(zhuān)線(xiàn)和配電設(shè)備，并且配電板置于培養(yǎng)室外，保證用電安全和方便控制。,配備：培養(yǎng)架 工作臺(tái)

5、 解剖鏡 照明設(shè)備 定時(shí)器 空調(diào)器 干濕溫度計(jì) 除濕機(jī) 換氣扇,6.觀(guān)察室,功能：觀(guān)察與鑒定培養(yǎng)材料生長(zhǎng)分化是否正常，是否脫毒和發(fā)生變異。,設(shè)計(jì)要求：室內(nèi)通風(fēng)、清潔、明亮、干燥、安靜，設(shè)備先進(jìn)，保證光學(xué)儀器不振動(dòng)、不受潮、不污染、不受光直射。,配備：生物顯微鏡，切片機(jī)，酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀，PCR擴(kuò)增儀等。,7. 馴化棚室,設(shè)計(jì)要求：據(jù)規(guī)模來(lái)定。能夠控溫調(diào)濕、控光通風(fēng)。,功能：組培苗馴化移栽。,配置：環(huán)控設(shè)施。彌霧裝置、遮陽(yáng)網(wǎng)、暖氣或地?zé)峋€(xiàn)、移栽床等設(shè)施；塑料缽、花盆、穴盤(pán)等移栽容器；草炭、沙子等移栽基質(zhì)。,注：室內(nèi)馴化與設(shè)施下馴化均可。,（二）設(shè)計(jì)原則與總體要求,1、設(shè)計(jì)原則,1.防止污染。2.按

6、照工藝流程科學(xué)設(shè)計(jì)，經(jīng)濟(jì)、實(shí)用和高效。3.結(jié)構(gòu)和布局合理，工作方便，節(jié)能、安全。4.規(guī)劃設(shè)計(jì)與工作目的、規(guī)模及當(dāng)?shù)貤l件等相適應(yīng)。,2、總體要求,1.實(shí)驗(yàn)室選址避開(kāi)污染源，水電供應(yīng)充足，交通便利。2.保證實(shí)驗(yàn)室環(huán)境清潔?？稍O(shè)計(jì)過(guò)道、設(shè)備防塵、外來(lái)空氣的過(guò)濾裝置。3.實(shí)驗(yàn)室必須滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備、無(wú)菌操作和控制培養(yǎng)三個(gè)基本的工作需要。,5.明確實(shí)驗(yàn)室的采光、控溫方式，應(yīng)與氣候條件相適應(yīng)。一般采用人工光照和恒溫控制。實(shí)驗(yàn)室可設(shè)計(jì)為密封式或半地下式。,6.電源并經(jīng)專(zhuān)業(yè)部門(mén)設(shè)計(jì)、安裝和驗(yàn)證合格之后，方可使用。應(yīng)有備用電源。,4.實(shí)驗(yàn)室各分室的大小、比例要合理。培養(yǎng)室與其他分室（除馴化室外）的面積之比為3：2。

7、培養(yǎng)室的有效面積占培養(yǎng)室總面積的2/3，與生產(chǎn)規(guī)模相適應(yīng)。,7.實(shí)驗(yàn)室建造滿(mǎn)足組培的需要,地面、墻壁和頂棚等要采用最小的產(chǎn)生灰塵建筑材料；,墻壁和天花板、地面的交界處宜做成弧形，便于日常清潔；,管道要盡量暗裝，安排好暗敷管道的走向，便于日后的維修，并能確保在維修時(shí)不造成污染；,洗手池、下水道的位置要適宜，不得對(duì)培養(yǎng)帶來(lái)污染，下水道開(kāi)口位置應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)室的潔凈度影響最小，并有避免污染的措施；,設(shè)置防止昆蟲(chóng)、鳥(niǎo)類(lèi)、鼠類(lèi)等動(dòng)物進(jìn)入的設(shè)施。,接種室、培養(yǎng)室裝修材料耐消毒、清潔和沖洗，并設(shè)置能確保與其潔凈度相應(yīng)的控溫控濕的設(shè)施。,（三）實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)例舉,三、組培育苗工廠(chǎng)的設(shè)計(jì),（一）、設(shè)計(jì)原則與總體要求 （二

8、）、基本組成 （三）、組培育苗工廠(chǎng)設(shè)計(jì)范例,（一）、設(shè)計(jì)原則與總體要求,1、設(shè)計(jì)原則 （1）.根據(jù)培養(yǎng)目的和規(guī)模來(lái)設(shè)計(jì)。其規(guī)模大小根據(jù)市場(chǎng)需求、年預(yù)期產(chǎn)苗量、投資額、現(xiàn)有條件等因素綜合確定，體現(xiàn)適用性。 （2）.流水線(xiàn)式設(shè)計(jì)布局合理，符合生產(chǎn)工藝流程和工作程序，便于操作，體現(xiàn)系統(tǒng)性、實(shí)用性，利于提高生產(chǎn)效率。 （3）.防止污染，體現(xiàn)針對(duì)性和可控性。 （4）.降低成本，節(jié)能、安全，體現(xiàn)經(jīng)濟(jì)實(shí)用性。,（1）.選址要求排灌水方便，遠(yuǎn)離污染源，水電供應(yīng)充足，交通便利(遠(yuǎn)離交通干線(xiàn)200m以外)，周邊環(huán)境清潔，地下水位1.5m以下。一般建在城市的近郊區(qū)。 （2）.各車(chē)間大小與相對(duì)比例合理，車(chē)間設(shè)計(jì)和設(shè)施

9、設(shè)備的配置與擺放與其功能相適應(yīng)。 （3）.建筑與裝修材料要經(jīng)得起消毒、清潔和沖洗； （4）.廠(chǎng)房的防水處理應(yīng)高標(biāo)準(zhǔn)，不能有滲漏雨現(xiàn)象； （5）.地基最好高出地面30cm以上。 注：其他要求與實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)相似。,2、總體要求,洗滌車(chē)間,（二）、組培育苗工廠(chǎng)的基本組成,培養(yǎng)基配制車(chē)間,接種車(chē)間,培養(yǎng)車(chē)間,檢測(cè)車(chē)間,組培苗馴化車(chē)間,育苗圃,主要附屬用房,組培苗生產(chǎn)車(chē)間,馴化栽培區(qū),滅菌車(chē)間,原種圃,品種栽培示范區(qū),繁殖圃,1、洗滌車(chē)間,功能：與洗滌室相同。 設(shè)計(jì)要求：見(jiàn)圖,配置:洗衣機(jī)、洗瓶機(jī)、換氣扇、醫(yī)用小推車(chē)。其他與洗滌室相同。,水槽,立體存放架,工作臺(tái),洗滌設(shè)備,洗滌車(chē)間平面設(shè)計(jì),2、培養(yǎng)基配制

10、車(chē)間,設(shè)計(jì)要求：面積一般為4060 m2，其他要求與培養(yǎng)基配制室相同，但要注意儀器設(shè)備在空間內(nèi)的合理擺放。有條件的可在配制車(chē)間內(nèi)單設(shè)藥品間和天平室(或稱(chēng)量室)。 功能、儀器與用具配置：與培養(yǎng)基配制室基本相同。,3、滅菌車(chē)間,功能：與滅菌室相同。 設(shè)計(jì)要求：面積為1530m2。根據(jù)生產(chǎn)能力選擇滅菌鍋。設(shè)置專(zhuān)用電線(xiàn)和配電板（盤(pán)）。必須有消防設(shè)施?？稍跍缇?chē)間內(nèi)單設(shè)1間儲(chǔ)備室（區(qū)），用于存放已滅菌的培養(yǎng)基、無(wú)菌紙和無(wú)菌用具或未用完的培養(yǎng)基等。要求保持較低溫度，避免陽(yáng)光直射，安裝紫外光燈，以便經(jīng)常消毒。其他與滅菌室相同。 配置：除增加中型滅菌鍋外，其他與滅菌室相同。,接種車(chē)間,設(shè)計(jì)要求： 面積根據(jù)工作

11、量的大小決定，可以多設(shè)幾個(gè)小接種間。 選用平流風(fēng)式雙人單面超凈工作臺(tái)為宜。 超凈臺(tái)的擺放要防止各超凈臺(tái)氣流的相互干擾，留有必要的活動(dòng)空間。為方便大規(guī)模操作，可安裝一體化超凈工作臺(tái)。 可在接種車(chē)間內(nèi)可設(shè)計(jì)一個(gè)紫外光消毒間，與培養(yǎng)間相鄰。 在接種車(chē)間外可設(shè)置風(fēng)淋室。配備消防設(shè)施。其他與接種室基本相同。,4、接種車(chē)間,組織培養(yǎng)流水線(xiàn),5、培養(yǎng)車(chē)間,設(shè)計(jì)要求：根據(jù)生產(chǎn)規(guī)模，確定培養(yǎng)車(chē)間的數(shù)量和面積大小。最好設(shè)計(jì)多個(gè)培養(yǎng)間，便于均勻控制培養(yǎng)條件。為便于管理，可單設(shè)一間液體振蕩培養(yǎng)間。最好與紫外光消毒間和接種間相鄰。其他與培養(yǎng)室相同。 配置：配備小推車(chē)和折疊梯子。其他配置與培養(yǎng)室相同。,6、檢測(cè)車(chē)間,檢測(cè)

12、車(chē)間最好與培養(yǎng)車(chē)間相鄰?？蓡卧O(shè)攝影室和暗室。其他與觀(guān)察室相同。,除設(shè)施較先進(jìn)和棚室數(shù)量增加外，其他與馴化棚室要求相同。,7、組培苗馴化車(chē)間,8、育苗圃,功能： 原種圃：用于引進(jìn)和保存育苗所需的無(wú)病毒或珍稀的優(yōu)良種質(zhì)資源，主要采用防蟲(chóng)網(wǎng)室保存（部分種類(lèi)可用試管冷藏保存）； 品種栽培示范區(qū)：主要是栽培本廠(chǎng)生產(chǎn)的各種組培苗的成年植株，展示其優(yōu)良的觀(guān)賞性狀及生產(chǎn)習(xí)性，也作為組織培養(yǎng)材料的采集地； 繁殖圃：包括育苗區(qū)、無(wú)性繁殖區(qū)和培育大苗區(qū)，直接向市場(chǎng)供應(yīng)不同規(guī)格的商品苗木。,設(shè)計(jì)要求：根據(jù)組織培養(yǎng)育苗的規(guī)模與目的，確定育苗圃的大小。 原種圃：原種材料要求不帶病毒，避免重復(fù)感染和發(fā)生變異。每年應(yīng)進(jìn)行1次

13、病毒鑒定。有完整的引種檔案。一般每個(gè)原種材料不少于23株。 品種栽培示范區(qū)：面積根據(jù)品種多少來(lái)確定。選用地勢(shì)平坦、土質(zhì)疏松而肥沃的砂壤土，水源充足，灌溉條件良好，苗木銷(xiāo)售運(yùn)輸方便，并保證苗木純正無(wú)誤。 繁殖圃：滿(mǎn)足商品大苗的養(yǎng)護(hù)和常規(guī)無(wú)性繁殖采穗的需要。,配置： 智能溫室、普通日光溫室或塑料大棚；微灌系統(tǒng)、育苗床、排灌系統(tǒng)、遮陽(yáng)避雨設(shè)施、防蟲(chóng)網(wǎng)室；基質(zhì)、肥料、消毒劑、穴盤(pán)或栽培盆具，以及其他必要的工具與輔助設(shè)施如肥料堆漚場(chǎng)地等。,9、主要附屬用房,1.倉(cāng)庫(kù)：主要用于存放備用的玻璃器皿、器械及試劑等，便于隨時(shí)取用。房間最好背陽(yáng)。 藥品倉(cāng)庫(kù)：要求干燥、通風(fēng)、避免光照，備有藥品柜、冰箱等設(shè)備?；瘜W(xué)試劑等分類(lèi)存放；劇毒物品如HgCl2等需專(zhuān)人密封保存；需低溫保存的藥品和藥液在冰箱中保存。,2.冷藏室：在15下暫存原種材料和待出庫(kù)移栽的組培苗，進(jìn)行種質(zhì)資源的離體保存；低溫處理，控制某些組培苗的分化和生長(zhǎng)速度；打破某些植物休眠。如球根花卉唐菖蒲的小球莖在冷藏室35下冷藏1個(gè)月，就可以解除休眠。 在組培生產(chǎn)車(chē)間的主要作用：對(duì)于按計(jì)劃生產(chǎn)和按時(shí)供應(yīng)