1、實驗室樣本處理,定義,實驗室樣本處理 標準化地收集、保存用于各種研究的正常或病理標本，包括人體器官組織、全血、血漿、血清、生物體液或經(jīng)處理過的生物樣本（DNA、RNA、蛋白等）以及與這些生物樣本相關(guān)的臨床、病理、治療、隨訪、知情同意等資料及其質(zhì)量控制、信息管理與應用系統(tǒng)。,生物樣本庫,政策法規(guī),技術(shù)標準,倫理規(guī)范,ISO標準,實驗室安全,臨床實驗室,倫理,運輸,標準操作規(guī)范（SOPs）,質(zhì)量控制標準,樣本采集,樣本處理,樣本質(zhì)量檢驗,樣本儲存,樣本運輸,DNA質(zhì)量鑒定、RNA質(zhì)量鑒定、蛋白質(zhì)質(zhì)量鑒定,知情同意書,質(zhì)量審查,樣本運輸,樣本轉(zhuǎn)移協(xié)議,倫理委員會,倫理審查,ISO15189:2003

2、 醫(yī)學實驗室質(zhì)量和能力的專用要求 CNAS-CL02 醫(yī)學實驗室-質(zhì)量和能力的認可準則 ISO/IEC17025:2005 檢測和校準實驗室能力的通用要求 CNAS-CL01 檢測和校準實驗室認可準則 ISO9001:2008/GBT19001-2008 質(zhì)量管理系統(tǒng) 要求 GB/T1.1-2009 標準化工作導則：標準的結(jié)構(gòu)和編寫規(guī)則,ISO標準,實驗室安全,GB 19489-2008 實驗室生物安全通用要求 CNAL/AC30-2005 實驗室生物安全認可準則 WS/T233-2002 微生物和生物醫(yī)學實驗室生物安全通用準則 GB 50346-2004 生物安全實驗室建筑技術(shù)規(guī)范,已建立實

3、驗室生物安全管理體系,臨床實驗室,GB/T 20468-2006 臨床實驗室定量測定室內(nèi)質(zhì)量控制指南 GB/T 20469-2006 臨床實驗室設計總則 GB/T 20470-2006 臨床實驗室室間質(zhì)量評價要求 WS/T102-1998 臨床檢驗項目分類與代碼 WS/T224-2002 真空采血管及其添加劑 WS/T225-2002 臨床化學檢驗血液標本的收集與處理 WS/T227-2002 臨床檢驗操作規(guī)程編寫要求 WS/T228-2002 定量臨床檢驗方法的初步評價 WS/T230-2002 臨床診斷中聚合酶鏈反應（PCR）技術(shù)應用 WS/T249-2005 臨床實驗室廢物處理原則 WS

4、/T250-2005 臨床實驗室質(zhì)量保證的要求 WS/T251-2005 臨床實驗室安全準則 WS/T255-2005 臨床檢驗醫(yī)學參考測量實驗室,赫爾辛基宣言 涉及人類為研究對象的生物醫(yī)學研究了國際倫理方針指南 關(guān)于DNA序列申請專利的聲明：專利 關(guān)于早期發(fā)布原始序列數(shù)據(jù)有關(guān)專利申請問題的聲明 關(guān)于DNA取樣的聲明：控制與獲取 世界人類基因組與人權(quán)宣言 涉及人體的生物醫(yī)學研究倫理審查辦法（試行） 人類基因治療申報臨床試驗指導原則 關(guān)于利益共享的聲明 關(guān)于基因治療的聲明 關(guān)于人類基因組數(shù)據(jù)庫的聲明 國際涉及人類的生物醫(yī)學研究倫理準則 人類遺傳數(shù)據(jù)國際宣言綱要 人體生物醫(yī)學研究國際倫理指南,倫理

5、,物流術(shù)語 液氮生物容器 中國民用航空危險品運輸管理規(guī)定 危險物品航空安全運輸技術(shù)細則,運輸,所有從業(yè)人員應取得崗前培訓考核合格證,生物樣本庫工作流程,標本采集,標本處理,入庫登記,標本儲存,質(zhì)控,Yes,No,銷毀,廢棄物處置操作程序,抽檢,No,Yes,標本使用,使用申請,標本發(fā)放,剩余標本回收,數(shù)據(jù)庫,標本采集,生物標本采集和儲存 研究成功的關(guān)鍵 要求 根據(jù)所采樣本的類型和所分析的物質(zhì)而定 在采集和儲存過程中不能受到“污染” 儲存的生物標本在任何時候進行檢測都可以獲得一致的結(jié)果 所有的生物標本都應有詳細的背景材料和鑒別標識,標本采集,舉例,標本采集,尿液標本的保存-最好不超過2h 尿液化

6、學物質(zhì)和有形成份不穩(wěn)定，排出后即開始發(fā)生物理和化學變化，如膽紅素、尿膽原被氧化，細菌生長，尿素酵解生成氨使尿pH升高，尿液有形成份破壞，葡萄糖被細菌利用而降低。 尿液保存常用方法有兩種： 1.冷藏法：4條件下不超過8h 可抑制微生物生長，維持尿液pH恒定，使尿中有形成份的形態(tài)基本不變，但是可導致磷酸鹽和尿酸鹽析出形成沉淀，影響尿沉渣檢查。,標本采集,尿液標本的保存-最好不超過2h 尿液化學物質(zhì)和有形成份不穩(wěn)定，排出后即開始發(fā)生物理和化學變化，如膽紅素、尿膽原被氧化，細菌生長，尿素酵解生成氨使尿pH升高，尿液有形成份破壞，葡萄糖被細菌利用而降低。 尿液保存常用方法有兩種： 2.化學防腐法： 甲苯

7、：（一般用量為1.02.0ml甲苯/100ml尿液），防止細菌污染，通常用于尿酮體、尿糖，尿蛋白質(zhì)等測定 甲醛：每100ml尿液加40%甲醛0.5ml，可抑制細菌生長并固定尿中有形成份，適用于尿液中細胞與管型的測定； 麝香草酚：用10%的麝香草酚異丙醇溶液，達到抑菌及保護代謝物的作用，適用于尿鉀、鈉、鈣等測定 濃鹽酸：每100ml尿標本中加入濃鹽酸1ml即可，使尿液維持在pH 2.0左右。主要可用于17-羥皮質(zhì)類因醇、17-酮類固醇、兒茶酚胺、VMA等定量測定等。,標本采集,標本采集,標本運送,血液標本采集后應盡快從采血現(xiàn)場運送至實驗室，注意是否存在干擾血凝塊。 標本運送過程中要注意樣本的包裝

8、、溫度要求及處理方法等，要確保分析成分的穩(wěn)定性，標本管在運送過程中要保持管口封閉，向上垂直放置，避免劇烈振動 尿液標本從流取到檢驗應在2小時內(nèi)完成，如不能及時送檢分析，必須加防腐劑或冷藏不超過8小時 細菌檢查標本應采用消毒容器，防止細菌污染，室溫條件不超過2小時或4冷藏保存。,標本運送,標本處理和保存,標本采集后應及時處理、分裝后保存 血液標本處理操作規(guī)程 DNA提取和純化操作規(guī)程：血液、糞便、棉拭子、唾液 RNA提取和純化操作規(guī)程：血液、棉拭子 蛋白質(zhì)提取和保存操作規(guī)程,標本處理和保存,血液標本處理操作規(guī)程,全血、血清、血漿、干血片、血凝塊、白細胞,血清：指全血不經(jīng)抗凝處理，在凝固過程中，血

9、漿中除去纖維蛋白原分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿,血漿：離開血管的全血經(jīng)抗凝處理后，通過離心沉淀，所獲得的不含細胞成分的液體，其中含有纖維蛋白原。,全血：由液態(tài)血漿和血細胞組成,標本處理和保存,血液標本處理操作規(guī)程,全血標本的保存 生化檢驗：盡可能在2小時內(nèi)檢驗或分離血清/血漿，不能及時分離或檢驗時，應4低溫冷藏，不能超過24小時。操作時動作應輕柔，避免劇烈振蕩，避免溫度變化過大或凍融，易導致溶血。 DNA檢測： 4保存不超過7天，-20保存不超過一年，-80長期保存 RNA檢測：采集后應盡快分離血細胞、血清/血漿，或加入RNA抑制劑（如trizol）， -20保存不超過2

10、個月，-80保存不超過半年。,標本處理和保存,血液標本處理操作規(guī)程,血清的分離 采血時應采用無抗凝劑的采血管； 采血后，室溫（2225）放置3060min，加促凝劑時凝集加快（515min)，10001200g離心10min，吸取上層淡黃色上清液。有凝膠屏障的分離管可保存在4 ，24小時內(nèi)吸取上層血清；無凝膠屏障的必須立即吸取上層血清。 保存條件 常溫下不超過8小時；4 不超過48小時；48小時以上的應置于-20保存；提取RNA的應立即置于-80 保存。避免反復凍融。,標本處理和保存,血液標本處理操作規(guī)程,血漿的分離 采血時應采用有抗凝劑的采血管； 采血后，10001200g離心10min，吸

11、取上層淡黃色上清液。有凝膠屏障的分離管可保存在4 ，24小時內(nèi)吸取上層血清；無凝膠屏障的必須立即吸取上層血清。 保存條件 常溫下不超過8小時；4 不超過48小時；48小時以上的應置于-20保存；提取RNA的應立即置于-80 保存。避免反復凍融。,質(zhì)量控制,標本入庫前應經(jīng)過質(zhì)量控制，符合質(zhì)量標準的標本才能入庫 符合標本采集、處理的要求，檢查采集和處理記錄 標本信息采集表填寫完整 標本運送符合要求，交接運送記錄完整 標本管無空管、無破損、良好密封，標簽清晰完整、無脫落 檢查標本是否受到污染，核酸質(zhì)量,標本入庫,編號原則 總原則：唯一性、共享性 輔原則：在滿足總原則基礎上，盡量精簡，編號長度盡量保持統(tǒng)一,生物樣本庫信息表,標本入庫,標本編號原則 總原則：唯一性、共享性 輔原則：在滿足總原則基礎上，盡量精簡，編號長度盡量保持統(tǒng)一 舉例： 2017年收到的第102份標本，類型是糞便，目的用于結(jié)腸道菌群分析 1700102D15W21 2017年收到的第256份標本，類型是血清，目的用于心梗的研究 1700256G01BS1,標本使用,使用申請：填寫標本申請單 標本發(fā)放：填寫標本使用登記表 標本銷毀：按照感染性廢棄物，執(zhí)行廢棄物處置操