1、實(shí)驗(yàn)四 糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn),一、目的要求,1.了解糖發(fā)酵的原理和在腸道細(xì)菌鑒定中的重要作用。 2.掌握通過(guò)糖發(fā)酵鑒別不同微生物的方法。,二、基本原理,糖發(fā)酵試驗(yàn)是最常用的生化反應(yīng)，在腸道細(xì)菌的鑒定上尤為重要。絕大多數(shù)細(xì)菌都能利用糖類作為碳源和能源，但是它們?cè)诜纸馓堑哪芰ι嫌泻艽蟮牟町悾行┘?xì)菌能分解某種糖并產(chǎn)酸（如乳酸、醋酸、丙酸等）和氣體（如氫、甲烷、二氧化碳等）；有些細(xì)菌只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。例如大腸桿菌能分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸并產(chǎn)氣；傷寒桿菌能分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不能分解乳糖；普通變形桿菌分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，不能分解乳糖。,二、基本原理,酸的產(chǎn)生可利用指示劑來(lái)斷定。在配制培養(yǎng)基時(shí)預(yù)先加入溴甲酚紫Ph5.

2、2（黃色）-6.8（紫色），當(dāng)發(fā)酵產(chǎn)酸時(shí)，可使培養(yǎng)基由紫色變?yōu)辄S色。 氣體的產(chǎn)生可由發(fā)酵管中倒置的德漢氏小管中有無(wú)氣泡來(lái)證明。,三、實(shí)驗(yàn)材料,1.大腸桿菌，普通變形桿菌（ Proteus vulgaris）斜面各1支； 2.盛有葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基的試管和乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基的試管各3支（內(nèi)裝有倒置的德漢氏小管），試管架，接種環(huán)等。,圖1 糖類發(fā)酵試驗(yàn),四、操作步驟,1、編號(hào) 用記號(hào)筆在各試管上分別標(biāo)明發(fā)酵培養(yǎng)基名稱和所接種的菌名。 2、接種 取盛有葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基的試管3支，按編號(hào)1支接種大腸桿菌，另1支接種普通變形桿菌，第3支不接種，作為對(duì)照。另取乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管3支，同樣1支接種大腸桿菌，1支接

3、種普通變形桿菌，第3支不接種，作為對(duì)照。 3將上述已接種的葡萄糖和乳糖發(fā)酵試管和對(duì)照管置37溫室中培養(yǎng)24小時(shí)。,注意事項(xiàng)： 接種后應(yīng)輕輕搖動(dòng)試管，使其均勻，防止倒置的小管進(jìn)入氣泡。否則會(huì)造成假象，得出錯(cuò)誤答案。,觀察結(jié)果:,觀察結(jié)果時(shí)，看各管顏色變化及杜氏小管有無(wú)氣泡。 產(chǎn)酸產(chǎn)氣用“”表示； 只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣用“+”表示； 不產(chǎn)酸也不產(chǎn)氣用“”表示。,假如某種微生物可以有氧代謝葡萄糖，發(fā)酵試驗(yàn)應(yīng)該出現(xiàn)什么結(jié)果？,思考題：,9、 人的價(jià)值，在招收誘惑的一瞬間被決定。20.9.2820.9.28Monday, September 28, 2020 10、低頭要有勇氣，抬頭要有低氣。00:57:250

4、0:57:2500:579/28/2020 12:57:25 AM 11、人總是珍惜為得到。20.9.2800:57:2500:57Sep-2028-Sep-20 12、人亂于心，不寬余請(qǐng)。00:57:2500:57:2500:57Monday, September 28, 2020 13、生氣是拿別人做錯(cuò)的事來(lái)懲罰自己。20.9.2820.9.2800:57:2500:57:25September 28, 2020 14、抱最大的希望，作最大的努力。2020年9月28日星期一上午12時(shí)57分25秒00:57:2520.9.28 15、一個(gè)人炫耀什么，說(shuō)明他內(nèi)心缺少什么。2020年9月上午12時(shí)57分20.9.2800:57September 28, 2020 16、業(yè)余生活要有意義，不要越軌。2020年9月28日星期一12時(shí)57分25秒00:57:2528 September