1、整理課件1整理課件2一 食品安全問題食品安全問題（一）名詞含義名詞含義 1 食品安全是指食品中不應(yīng)含有任何可能損害或威脅人食品安全是指食品中不應(yīng)含有任何可能損害或威脅人體健康的有毒、有害物質(zhì)或因素。食品安全是食品衛(wèi)生的重體健康的有毒、有害物質(zhì)或因素。食品安全是食品衛(wèi)生的重要組成部分。要組成部分。 2 食品安全性是指食品按其原定的用途進行生產(chǎn)和食品安全性是指食品按其原定的用途進行生產(chǎn)和/或或食用時不會對消費者造成損害的一種擔(dān)保。食用時不會對消費者造成損害的一種擔(dān)保。 3 食品安全問題是指食品按其原定的方法食用時可能損食品安全問題是指食品按其原定的方法食用時可能損害或威脅人體健康的物質(zhì)或因素。害或

2、威脅人體健康的物質(zhì)或因素。整理課件3（二）農(nóng)產(chǎn)品安全指標（二）農(nóng)產(chǎn)品安全指標 農(nóng)產(chǎn)品的安全指標主要包括以下內(nèi)容：農(nóng)產(chǎn)品的安全指標主要包括以下內(nèi)容： 1、嚴重危害人體健康的指標，如致病、嚴重危害人體健康的指標，如致病菌、毒素、貝類毒素；菌、毒素、貝類毒素； 2 、農(nóng)產(chǎn)品污染指標，包括化學(xué)和微生、農(nóng)產(chǎn)品污染指標，包括化學(xué)和微生物污染指標，如農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、重金物污染指標，如農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、重金屬、細菌總數(shù)、大腸菌群等；屬、細菌總數(shù)、大腸菌群等； 3、農(nóng)產(chǎn)品摻雜使假，如甲醛、三聚氰、農(nóng)產(chǎn)品摻雜使假，如甲醛、三聚氰胺、增白劑、防腐劑、著色劑等，胺、增白劑、防腐劑、著色劑等， 4、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安

3、全性。、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性。 整理課件4 目前的研究成果表明，農(nóng)產(chǎn)品安全主要存在目前的研究成果表明，農(nóng)產(chǎn)品安全主要存在以下幾方面的問題：以下幾方面的問題： 1 生物毒素生物毒素 生物毒素主要指生物自然產(chǎn)生的毒素，主要包生物毒素主要指生物自然產(chǎn)生的毒素，主要包括：括： （1）貝類毒素）貝類毒素 種類：麻痹性貝類毒素（種類：麻痹性貝類毒素（PSP） 腹瀉性貝類毒素；腹瀉性貝類毒素；(DSP) 特點：加熱不易被破壞，所以其危害性相當(dāng)大。特點：加熱不易被破壞，所以其危害性相當(dāng)大。整理課件5PSPPSP存在：存在： PSPPSP存在于世界各處，龍蝦和許多存在于世界各處，龍蝦和許多蟹類體中發(fā)現(xiàn)蟹類體中發(fā)現(xiàn)

4、PSPPSP毒素。臨床癥狀：該毒素毒素。臨床癥狀：該毒素會引起神經(jīng)系統(tǒng)的疾病，包括顫抖、興奮及會引起神經(jīng)系統(tǒng)的疾病，包括顫抖、興奮及唇舌的灼痛和麻木感，嚴重時會導(dǎo)致呼吸系唇舌的灼痛和麻木感，嚴重時會導(dǎo)致呼吸系統(tǒng)麻木以致死亡，是一種可致命的毒素。統(tǒng)麻木以致死亡，是一種可致命的毒素。DSPDSP存在：存在：DSPDSP在加拿大、亞洲、新西蘭、歐洲在加拿大、亞洲、新西蘭、歐洲等地區(qū)的貝類生物體中發(fā)現(xiàn)。等地區(qū)的貝類生物體中發(fā)現(xiàn)。臨床癥狀：臨床癥狀：PSPPSP毒素可引起輕微的胃腸疾病，毒素可引起輕微的胃腸疾病，但不是一種可致命的毒素。但不是一種可致命的毒素。整理課件6 真菌毒素，有時也俗稱霉菌毒素，是

5、某些真菌真菌毒素，有時也俗稱霉菌毒素，是某些真菌的代謝產(chǎn)物，目前已發(fā)現(xiàn)的真菌毒素有十多種，如的代謝產(chǎn)物，目前已發(fā)現(xiàn)的真菌毒素有十多種，如黃曲霉毒素、赭曲霉毒素、伏馬霉素等，黃曲霉毒素、赭曲霉毒素、伏馬霉素等， 常見的產(chǎn)毒真菌多為曲霉、青霉和鐮刀霉。常見的產(chǎn)毒真菌多為曲霉、青霉和鐮刀霉。 （注意：在發(fā)霉的菌株中，不一定都存在有真菌（注意：在發(fā)霉的菌株中，不一定都存在有真菌毒素。真菌毒素有時從表面上不一定能觀察到有霉毒素。真菌毒素有時從表面上不一定能觀察到有霉變的現(xiàn)象，兩種者之間不存在必然的因果關(guān)系）變的現(xiàn)象，兩種者之間不存在必然的因果關(guān)系）整理課件7 真菌存在于大多數(shù)的農(nóng)產(chǎn)品中，真菌毒真菌存在于

6、大多數(shù)的農(nóng)產(chǎn)品中，真菌毒素直接或間接進入食物鏈會導(dǎo)致動植物食品素直接或間接進入食物鏈會導(dǎo)致動植物食品受到毒素污染。受到毒素污染。 在眾多真菌毒素中，黃曲霉毒素是眾所在眾多真菌毒素中，黃曲霉毒素是眾所周知的最危險的毒素之一，是一類強致癌物。周知的最危險的毒素之一，是一類強致癌物。它是一組化學(xué)結(jié)構(gòu)類似的物質(zhì)，目前已鑒定它是一組化學(xué)結(jié)構(gòu)類似的物質(zhì)，目前已鑒定出出12種，種，B1、B2、G1、G2、M1、M2、P1、Q、H1、GM、B2a和毒醇。其中和毒醇。其中B1毒性最毒性最強。強。整理課件8 轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品的含義為：農(nóng)產(chǎn)品中含有轉(zhuǎn)基因生物成分或者利用轉(zhuǎn)基因生物，如轉(zhuǎn)基因植物、動物或微生物生產(chǎn)的農(nóng)產(chǎn)品

7、 目前還沒足夠的證據(jù)證明轉(zhuǎn)基因食品是否對人類無毒、無副作用，人們對轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品與非轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品是否有著“實質(zhì)等同”、有無顯著差異，還存在疑慮。 目前，世界上較為一致的觀點是生物技術(shù)產(chǎn)品（轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品）對人類健康和生態(tài)環(huán)境具有潛在危險。整理課件9 化學(xué)性物質(zhì)的危害主要包括五個方面：化學(xué)性物質(zhì)的危害主要包括五個方面： 化肥化肥 我國是世界上化肥施用量最大的國家。氮肥我國是世界上化肥施用量最大的國家。氮肥（純（純N N）年使用量）年使用量25002500多萬噸，單位面積施用量為多萬噸，單位面積施用量為世界平均水平的世界平均水平的3 3倍。肥料施用不當(dāng)、濫用化肥生倍。肥料施用不當(dāng)、濫用化肥生產(chǎn)的蔬菜對人體健

8、康的威脅不亞于在蔬菜上殘留的產(chǎn)的蔬菜對人體健康的威脅不亞于在蔬菜上殘留的農(nóng)藥。農(nóng)藥。 這是因為硝酸鹽本身對人體無害，但是它可在這是因為硝酸鹽本身對人體無害，但是它可在土壤、人的口腔和胃中轉(zhuǎn)化為亞硝酸鹽，其對人體土壤、人的口腔和胃中轉(zhuǎn)化為亞硝酸鹽，其對人體有危害。有危害。整理課件10 亞硝酸鹽危害主要表現(xiàn)在兩方面：亞硝酸鹽危害主要表現(xiàn)在兩方面： A A：大量聚集可能引起中毒，長期攝入，可引發(fā)：大量聚集可能引起中毒，長期攝入，可引發(fā)消化系統(tǒng)癌變，如胃癌、腸癌等；消化系統(tǒng)癌變，如胃癌、腸癌等； B B ：NONO3 3- - + NO+ NO2 2- - + + 胺類化合物胺類化合物亞硝胺（高致亞硝

9、胺（高致癌物）癌物） 重金屬危害重金屬危害 鎘、汞、鉛、砷、鉻的危害為：在人體有蓄積鎘、汞、鉛、砷、鉻的危害為：在人體有蓄積性，半衰期較長，能產(chǎn)生急性或慢性毒性反應(yīng)，可性，半衰期較長，能產(chǎn)生急性或慢性毒性反應(yīng)，可能導(dǎo)致畸形，致癌和致突變的潛在危害。危害高低能導(dǎo)致畸形，致癌和致突變的潛在危害。危害高低依次為：鎘、汞、鉛、砷、鉻。依次為：鎘、汞、鉛、砷、鉻。 目前我國兒童金屬鉛污染較為嚴重。目前我國兒童金屬鉛污染較為嚴重。整理課件11 我國是世界農(nóng)藥施用量最大國家，年施用量超過我國是世界農(nóng)藥施用量最大國家，年施用量超過130130萬萬噸，單位面積施用量為世界平均水平的噸，單位面積施用量為世界平均水

10、平的2 2倍倍. . 我國與歐美等發(fā)達國家相比，農(nóng)藥生產(chǎn)、使用存在較我國與歐美等發(fā)達國家相比，農(nóng)藥生產(chǎn)、使用存在較大的差距。主要表現(xiàn)為高毒農(nóng)藥使用量占多數(shù)大的差距。主要表現(xiàn)為高毒農(nóng)藥使用量占多數(shù), ,具體表現(xiàn)在具體表現(xiàn)在以下兩個方面：以下兩個方面： A A：使用農(nóng)藥仍以殺蟲劑為主，占總用量的：使用農(nóng)藥仍以殺蟲劑為主，占總用量的68%68%； B B：在殺蟲劑中，有機磷農(nóng)藥占：在殺蟲劑中，有機磷農(nóng)藥占70%70%以上。以上。 我國每年因農(nóng)藥中毒事件屢屢發(fā)生，特別是蔬菜中有我國每年因農(nóng)藥中毒事件屢屢發(fā)生，特別是蔬菜中有機磷農(nóng)藥中毒更為突出。水果、蔬菜中有機磷農(nóng)藥被人體機磷農(nóng)藥中毒更為突出。水果、蔬

11、菜中有機磷農(nóng)藥被人體吸收后通過血液運到人體的各個臟器吸收后通過血液運到人體的各個臟器, ,損害臟器損害臟器. . 中毒表現(xiàn)中毒表現(xiàn): :出汗出汗, ,肌肉顫抖肌肉顫抖, ,心跳加快心跳加快, ,瞳孔縮小等瞳孔縮小等. .整理課件12 添加劑添加劑 主要表現(xiàn)在主要表現(xiàn)在: : 過量添加著色劑、護色劑、去色劑、防腐劑等過量添加著色劑、護色劑、去色劑、防腐劑等, ,如苯甲酸、山梨酸、亞硝酸鹽、亞硫酸鹽等。如苯甲酸、山梨酸、亞硝酸鹽、亞硫酸鹽等。 還有無知或違法摻假，如甲醛、蘇丹紅、吊白還有無知或違法摻假，如甲醛、蘇丹紅、吊白塊、三聚氰胺等等。塊、三聚氰胺等等。 獸藥藥殘獸藥藥殘 獸藥殘留是指動物產(chǎn)品

12、的任何可食部分所含獸獸藥殘留是指動物產(chǎn)品的任何可食部分所含獸藥的母體化合物及藥的母體化合物及/ /或其代謝產(chǎn)物，以及與獸藥有或其代謝產(chǎn)物，以及與獸藥有關(guān)的雜質(zhì)的殘留。關(guān)的雜質(zhì)的殘留。整理課件13 獸藥殘留的類型包括： 1、原藥； 2、藥物在動物體內(nèi)的代謝產(chǎn)物； 3、藥物或其代謝產(chǎn)物與內(nèi)源大分子共價結(jié)合的物質(zhì)。 藥殘是在畜禽和魚養(yǎng)殖過程中，為了預(yù)防和治療而使用的抗生素、磺胺類等化學(xué)藥品，它們往往造成藥物殘留于食品動物組織中。藥殘通過食物進入人體內(nèi)。整理課件14 動物性食品中的藥物殘留對人類健康的影響，一直是一個眾說紛紜的問題。以前，人們普遍認為藥殘增加人體的抗藥性和耐藥性細菌種群的增長，將增加潛

13、在的安全問題。但近期的研究表明，有效抗生素是致癌物質(zhì)，人體過量食用，將導(dǎo)致細胞癌變。 禁用獸藥：鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺。整理課件15 不論人類知道與否，任何農(nóng)產(chǎn)品中或多或少都存在對人類不論人類知道與否，任何農(nóng)產(chǎn)品中或多或少都存在對人類健康有害物質(zhì)，絕對安全的農(nóng)產(chǎn)品是沒有的；同時，農(nóng)產(chǎn)品健康有害物質(zhì)，絕對安全的農(nóng)產(chǎn)品是沒有的；同時，農(nóng)產(chǎn)品中所含的有害物質(zhì)的量很少，且在正常范圍內(nèi)時，其不會對中所含的有害物質(zhì)的量很少，且在正常范圍內(nèi)時，其不會對人體健康造成危害，因此，農(nóng)產(chǎn)品安全是相對的，而不是絕人體健康造成危害，因此，農(nóng)產(chǎn)品安全是相對的，而不是絕對的。對的。 人類可做的是一方面研究認識農(nóng)產(chǎn)品中的有

14、害物質(zhì)；人類可做的是一方面研究認識農(nóng)產(chǎn)品中的有害物質(zhì)；另一方面則是盡其所能減少或消除農(nóng)產(chǎn)品中有害物質(zhì)的存在，另一方面則是盡其所能減少或消除農(nóng)產(chǎn)品中有害物質(zhì)的存在，吃上安全的農(nóng)產(chǎn)品。吃上安全的農(nóng)產(chǎn)品。整理課件16 （一）農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全快速檢測的特點（一）農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全快速檢測的特點 農(nóng)產(chǎn)品快速檢測簡單地說就是當(dāng)試劑采購準備農(nóng)產(chǎn)品快速檢測簡單地說就是當(dāng)試劑采購準備好后，從試劑配置開始，包括樣品處理時間，能夠好后，從試劑配置開始，包括樣品處理時間，能夠在幾分鐘或十幾分鐘內(nèi)得到檢測結(jié)果是最理想的，在幾分鐘或十幾分鐘內(nèi)得到檢測結(jié)果是最理想的，但是這種方法目前還較少，我們所說的快速檢測是但是這種方法目前還

15、較少，我們所說的快速檢測是個相對概念，即與常規(guī)檢驗或傳統(tǒng)方法比較能夠縮個相對概念，即與常規(guī)檢驗或傳統(tǒng)方法比較能夠縮短短1/21/2或或1/31/3的時間就可得到檢測結(jié)果的方法，就可的時間就可得到檢測結(jié)果的方法，就可認為是較快的方法了。認為是較快的方法了。整理課件17 快速檢測主要從三個方面體現(xiàn)：快速檢測主要從三個方面體現(xiàn)： 1 1 實驗準備簡單，使用試劑較少，實驗準備簡單，使用試劑較少， 2 2 樣品經(jīng)簡單處理后即可測試，或采用樣品經(jīng)簡單處理后即可測試，或采用先進快速的樣品處理方法，提高樣品處理效先進快速的樣品處理方法，提高樣品處理效率。率。 3 3 簡單、快速和準確的分析方法，能夠簡單、快速

16、和準確的分析方法，能夠?qū)μ幚砗玫臉悠吩诙虝r間內(nèi)檢出結(jié)果。對處理好的樣品在短時間內(nèi)檢出結(jié)果。整理課件18 農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全快速檢測技術(shù)始于上世紀50年代，經(jīng)過50多年的發(fā)展，特別是近20多年的快速發(fā)展，檢測技術(shù)已含蓋農(nóng)產(chǎn)品安全的各個方面，快速檢測方法已達百種以上。這些方法按不同的指標可分為不同的種類。目前，主要有下列幾種分類方法： 1 按場地可分為： 現(xiàn)場快速檢驗 實驗室快速檢驗整理課件19 2 從定性定量來分： 定性快速檢驗（多在現(xiàn)場） 半定量快速檢驗（多在現(xiàn)場） 定量快速檢驗 3 按檢測原理分： 活體生物測定法-發(fā)光細菌或敏感性家蠅 分子生物學(xué)法 生物化學(xué)測定法 化學(xué)法有機磷農(nóng)藥速測靈法，氣譜

17、法整理課件20 四.農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全快速檢測技術(shù)發(fā)展的現(xiàn)狀 (一)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全快速檢測技術(shù)發(fā)展現(xiàn)狀 (二)我國農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全快速檢測技術(shù)發(fā)展現(xiàn)狀 農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全快速檢測方法的研究受到各國政府的高度重視，因而成為當(dāng)前研究的熱門課題之一。 成熟的水果、蔬菜農(nóng)藥殘留檢測方法主要有下列幾個方面 1 化學(xué)法 該方法是以氣相色譜法為代表的經(jīng)典分析方法。 特點：靈敏度高、準確，可對幾乎所有農(nóng)藥殘留進行定性和定量檢測，但測定時間周期較長，成本較高，操作復(fù)雜，不適合市場抽查和監(jiān)督管理。整理課件21 2 生物法 活體生物測定法 用發(fā)光細菌或敏感性家蠅作為測定材料； 分子生物學(xué)法 采用免疫反應(yīng)，如酶聯(lián)免疫反應(yīng)，采用

18、特異性的酶聯(lián)免疫試劑盒； 生物化學(xué)測定法 生物化學(xué)測定法是利用膽堿酯酶抑制原理，使用僅限于能抑制膽堿酯酶活性的農(nóng)藥。整理課件22 目前我國成型的農(nóng)藥殘留快速測定方法 1 農(nóng)藥殘留試紙法（農(nóng)藥速測卡法、酶試劑法或STRIP法） 2 酶片法（農(nóng)藥速測卡法） 3 農(nóng)藥殘留分光光度法（抑制率法） 4 酶聯(lián)免沒試劑盒法-分子生物學(xué)方法 5 有機磷農(nóng)藥速測方法整理課件23 一. .檢測原理檢測原理 1.1.酶的特性（膽堿酯酶）酶的特性（膽堿酯酶） 選擇性選擇性 酶的分解和合成具有專一性。酶的分解和合成具有專一性。 活性活性 指酶在常態(tài)下，能完成物質(zhì)的合成或分解指酶在常態(tài)下，能完成物質(zhì)的合成或分解 適宜的條

19、件適宜的條件 PH8 溫度溫度37-38整理課件24 酶酶 + + 底物底物 ( (硫代乙酰膽堿硫代乙酰膽堿)硫代膽堿硫代膽堿+ +乙酸乙酸 乙酰膽堿酯酶乙酰膽堿酯酶+ +擬除蟲菊酯類等農(nóng)藥擬除蟲菊酯類等農(nóng)藥酶活性不酶活性不被抑制被抑制 酶酶 顯色劑顯色劑 底物底物分解產(chǎn)物分解產(chǎn)物黃色溶液黃色溶液整理課件25乙酰膽堿酯酶乙酰膽堿酯酶+ +有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥酶活性被抑制酶活性被抑制 顯色劑顯色劑 酶酶 無分解產(chǎn)物無分解產(chǎn)物無色溶液無色溶液 底物底物 顯色劑顯色劑( (硫代乙酰膽堿硫代乙酰膽堿) ) 少量分解產(chǎn)物少量分解產(chǎn)物淺黃色溶液淺黃色溶液 活性被抑制活性被抑制含

20、有機磷或氨基甲含有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥酸酯類農(nóng)藥底物底物+ +丁酰膽堿酯酶丁酰膽堿酯酶+ +樣本樣本 活性正常活性正常不含有機磷或氨基甲不含有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥酸酯類農(nóng)藥整理課件26 在一定條件下在一定條件下, ,有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶的正常功能有抑制作用膽堿酯酶的正常功能有抑制作用, ,其抑制率與農(nóng)藥其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)的濃度呈正相關(guān). .在正常情況下在正常情況下, ,酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物代謝產(chǎn)物( (乙酰膽堿乙酰膽堿) )水解水解, ,其水解產(chǎn)物與顯色劑反其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)應(yīng), ,產(chǎn)生黃色物質(zhì)產(chǎn)生黃色物質(zhì), ,用分光光

21、度計在用分光光度計在412nm412nm處測定吸處測定吸光度隨時間的變化值光度隨時間的變化值, ,計算出抑制率計算出抑制率, ,通過抑制率通過抑制率可以判定出樣品中是否含有高劑量的有機磷或氨可以判定出樣品中是否含有高劑量的有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在基甲酸酯類農(nóng)藥的存在. .整理課件27 整理課件28 農(nóng)藥農(nóng)藥:A:A：有機磷類：有機磷類 甲胺磷、對硫磷、氧化樂果、甲拌磷、久效甲胺磷、對硫磷、氧化樂果、甲拌磷、久效磷、敵敵畏、殺撲磷等（靈敏度磷、敵敵畏、殺撲磷等（靈敏度0.5-5mg/kg0.5-5mg/kg 甲基對硫磷、水胺硫磷、甲基異硫磷、毒死甲基對硫磷、水胺硫磷、甲基異硫磷、毒死蜱、樂

22、果等（靈敏度蜱、樂果等（靈敏度8-10mg/kg8-10mg/kg）。）。 B B：氨基甲酸酯類：氨基甲酸酯類： 克百威、涕滅威、滅多威、丙硫克百威、丁克百威、涕滅威、滅多威、丙硫克百威、丁硫克百威（硫克百威（0.2-2.5mg/kg0.2-2.5mg/kg）。）。整理課件29 1.專用酶專用酶( (乙酰膽堿酯酶乙酰膽堿酯酶) ) 配制：根據(jù)酶的情況配制：根據(jù)酶的情況, ,用緩沖液溶解用緩沖液溶解. .注意注意: :酶液的活性應(yīng)為酶液的活性應(yīng)為 A A0 00.30.3以上以上 保存：粉狀的酶保存：粉狀的酶( (密封密封) )應(yīng)儲存在冷凍室內(nèi)用應(yīng)儲存在冷凍室內(nèi)用時用提取液溶解，溶解后的酶液分成

23、時用提取液溶解，溶解后的酶液分成2-42-4小小瓶，暫時不用的儲存在冷凍室內(nèi)，用時解凍，瓶，暫時不用的儲存在冷凍室內(nèi)，用時解凍，用后的酶液儲存在冷藏室（用后的酶液儲存在冷藏室（0-50-5）內(nèi)，在）內(nèi)，在四天內(nèi)用完，酶液反復(fù)解凍最多不能超過兩四天內(nèi)用完，酶液反復(fù)解凍最多不能超過兩次，否則會影響酶的活性。次，否則會影響酶的活性。整理課件30 2. 2. 底物底物( (硫代乙酰膽堿硫代乙酰膽堿) ) 配制：取配制：取25mg25mg底物底物, ,加加3.0mL3.0mL蒸餾水蒸餾水溶解溶解, ,搖勻后置搖勻后置4 4冰箱內(nèi)保存冰箱內(nèi)保存. .保存期不超保存期不超過兩周過兩周。 保存：固體保存：固體

24、( (密封密封) )及溶解后的底物及溶解后的底物均應(yīng)保存在凍箱的冷凍室內(nèi)。溶解后如均應(yīng)保存在凍箱的冷凍室內(nèi)。溶解后如長時間不用，應(yīng)貯存在凍箱的冷凍室內(nèi)，長時間不用，應(yīng)貯存在凍箱的冷凍室內(nèi)，用時解凍。用時解凍。整理課件31 3.顯色劑顯色劑(二硫代二硝基苯甲酸二硫代二硝基苯甲酸) 配制：分別取配制：分別取160mg顯色劑和顯色劑和15.6mg碳酸氫鈉碳酸氫鈉,用用20mL緩沖液溶解。緩沖液溶解。 保存：固體及溶解后的顯色劑均應(yīng)在凍箱的保存：固體及溶解后的顯色劑均應(yīng)在凍箱的冷藏室內(nèi)（冷藏室內(nèi)（3-5）保存。）保存。 思考題思考題:為什么用緩沖液配置顯色劑為什么用緩沖液配置顯色劑?整理課件32 4.

25、 提取劑提取劑(PH8.0緩沖液緩沖液) 配制：分別取配制：分別取11.9g無水磷酸氫二鉀與無水磷酸氫二鉀與3.2g磷酸二氫鉀磷酸二氫鉀,用用1000毫升蒸餾水溶解。毫升蒸餾水溶解。 保存：固體及溶解后的提取試劑均可在常溫保存：固體及溶解后的提取試劑均可在常溫下保存。下保存。 思考題思考題:為什么用緩沖液作提取劑為什么用緩沖液作提取劑?整理課件33 葉菜：用取樣器隨機取不同植株的葉片。葉菜：用取樣器隨機取不同植株的葉片。 果菜及水果類：用取樣器沿果菜表面處取果菜及水果類：用取樣器沿果菜表面處取約約1厘米厚的樣本。厘米厚的樣本。整理課件341,1,選取有代表性樣品選取有代表性樣品, ,沖洗掉表面

26、的泥土沖洗掉表面的泥土, ,剪成剪成1cm1cm左右左右見方的碎片見方的碎片, ,取取1g1g樣本，放入提取瓶中樣本，放入提取瓶中, ,加入加入5mL5mL緩沖緩沖液液, ,振蕩振蕩1 12min2min, ,倒出提取液倒出提取液, ,靜置靜置3 35 5minmin, ,待用待用. .2,2,對照溶液測試對照溶液測試: :先于試管中加入先于試管中加入2.5mL2.5mL緩沖液緩沖液, ,再加人再加人0.10.1mLmL酶液酶液,0.1,0.1mLmL顯色劑顯色劑, ,搖勻后于搖勻后于3737放置放置1515分鐘分鐘以上以上( (每批樣品的控制時間應(yīng)一致每批樣品的控制時間應(yīng)一致).).加入加入

27、0.10.1mLmL底物底物搖勻搖勻, ,此時檢測液開始發(fā)生顯色反應(yīng)此時檢測液開始發(fā)生顯色反應(yīng), ,應(yīng)立即放人儀應(yīng)立即放人儀器比色皿中器比色皿中, ,記錄記錄3min3min內(nèi)吸光度的變化內(nèi)吸光度的變化A A0 0. .3,3,樣品溶液的測試樣品溶液的測試: :先于試管中加入先于試管中加入2.5mL2.5mL樣品提取液樣品提取液, ,其他操作同對照相同其他操作同對照相同, ,記錄反應(yīng)記錄反應(yīng)3min3min的吸光度變化值的吸光度變化值A(chǔ) At t. .整理課件35 Ao- At 抑制率（）抑制率（）100% AoAo:對照底物反應(yīng)對照底物反應(yīng)3分鐘后與分鐘后與3分鐘前吸光值分鐘前吸光值之差之差A(yù)t：樣本底物反應(yīng)：樣本底物反應(yīng)3分鐘后與分鐘后與3分鐘前吸光值分鐘