1、第七章第七章 芳香烴及其代謝產(chǎn)物的測定芳香烴及其代謝產(chǎn)物的測定主要內(nèi)容主要內(nèi)容苯苯甲苯和二甲苯甲苯和二甲苯乙苯和苯乙烯乙苯和苯乙烯多環(huán)芳烴多環(huán)芳烴 理化性質(zhì)理化性質(zhì) 代謝和生物監(jiān)測指標(biāo)代謝和生物監(jiān)測指標(biāo) 樣本采集與保存樣本采集與保存 測定方法測定方法第一節(jié)第一節(jié) 苯苯l C6H6 芬芳氣味 無色透明液體l煤焦油分餾或石油裂解產(chǎn)物 極易揮發(fā)l微溶于水 與有機溶劑互溶l遇熱易燃燒、爆炸l能與氧化劑發(fā)生劇烈反應(yīng)l不能與己硼烷共存進入人體的苯原型由呼吸道排出原型貯存體內(nèi)各組織肝臟代謝（CYP）肝微粒體上的細胞色素P45050%40%10%苯的體內(nèi)代謝產(chǎn)物苯的體內(nèi)代謝產(chǎn)物l體內(nèi)(組織器官)主要代謝產(chǎn)物：

2、 反,反-黏糠酸(t,t-MA)、苯巰基尿酸l苯蒸汽體內(nèi)的代謝產(chǎn)物：苯蒸汽體內(nèi)的代謝產(chǎn)物： 苯酚，隨尿排出 職業(yè)苯接觸生物標(biāo)志物l己二烯二酸 （反，反-黏糠酸，t,t-MA）l苯巰基尿酸（S-PMA）生物監(jiān)測指標(biāo)l尿中的苯酚的排出量 尿酚10mg/L,有苯的接觸l呼出氣體中苯的含量樣品的采集與保存樣品的采集與保存 苯接觸者呼氣中苯含量和尿液中苯酚含量顯著增高l呼出氣呼出氣 氣樣需濃縮 常用Tenax-GC、活性炭 采集接觸苯后次日班前終末呼出氣 打開采氣管活塞， 一端含入口中 ，深呼氣后關(guān)閉活塞 室溫運輸保存 6小時之內(nèi)穩(wěn)定樣品的采集與保存樣品的采集與保存l尿樣檢測己二烯二酸和苯巰基尿酸宜取班

3、后尿檢測苯酚則宜取班末尿室溫運輸 4保存2周氣相色譜測定呼出氣中苯氣相色譜測定呼出氣中苯l原理 終末呼出氣樣品收集在50ml采氣管內(nèi)，然后用氮氣將樣品吹入活性炭內(nèi)，使樣品中的苯吸附在活性炭上。280熱解吸，氮氣將釋放出的苯帶入FFAP柱中，火焰離子化檢測器檢測，以保留時間穩(wěn)定性，峰高或峰面積定量。l樣品處理 將采氣管放置37恒溫箱2小時后取出與活性炭管相連，用100ml注射器推送氮氣，使苯吸附于活性炭氣相色譜測定呼出氣中苯氣相色譜測定呼出氣中苯l注意事項1 采樣要在無污染的室內(nèi)進行2 回收率低于75%時堅持更換活性炭3 活性炭要按照熱解吸條件活化以除去已吸附的有機物HPLC測定黏糠酸和苯巰基尿

4、酸測定黏糠酸和苯巰基尿酸l原理 尿樣中的黏糠酸和苯巰基尿酸經(jīng)強陰離子固相萃取小柱萃取，10%乙酸水溶液洗脫，再用4ml乙酸乙酯萃取，氮氣吹干流動相后后重溶殘留物用于色譜進樣，經(jīng)C18色譜柱分離，紫外檢測器檢測，以保留時間定性，內(nèi)標(biāo)法標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量l樣品處理 取1ml尿樣于離心管中，加入香草酸內(nèi)標(biāo)溶液，混勻后加到預(yù)先分別用3ml甲醇、6ml水活化過的強陰離子固相萃取小柱上，以0.5ml/min的速度通過小柱后分別以3ml水、3ml 5mmol/l的磷酸水溶液、3ml 0.5%乙酸水溶液淋洗小柱，再以4ml 10%的乙酸水溶液洗脫黏糠酸和苯巰基尿酸。尿中苯酚的測定尿中苯酚的測定l氣相色譜法1 原理

5、 尿樣經(jīng)加熱酸解，使結(jié)合態(tài)的酚水解，乙醚萃取，經(jīng)色譜柱將尿中酚與人體內(nèi)正常代謝物對甲酚分離，火焰離子化測器檢測，以保留時間定性，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量2 樣品處理 取5ml尿液于具塞試管中，加入1ml鹽酸，搖勻，加塞。90水浴1h，冷卻至室溫，加水稀釋至10ml。加3ml乙醚震搖1min，靜置分層，補足乙醚至3ml,乙醚層供測定尿中苯酚的測定尿中苯酚的測定l4-氨基安替比林分光光度法1 原理 尿液在酸性條件下水解，游離的酚隨水蒸氣蒸出，堿性條件下在氧化劑鐵氰化鉀存在下，與4-氨基安替比林反應(yīng)，生產(chǎn)紅色化合物，比色定量2 樣品處理與測定 取5ml尿液于蒸餾瓶中，加入1.5mlHCl，搖勻后蒸餾，收集50

6、ml蒸餾液，取10ml于試管中依次加入氨水、 4-氨基安替比林、鐵氰化鉀各1ml并搖勻。于520nm下測定吸光度，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。第二節(jié)第二節(jié) 甲苯和二甲苯甲苯和二甲苯l均為無色透明 芳香氣味 易揮發(fā)液體l均難溶于水 易溶于有機溶劑l甲苯 C6H5CH3 煤焦油分餾或石油裂解產(chǎn)物 體內(nèi)代謝產(chǎn)物為馬尿酸 無色結(jié)晶l二甲苯 C6H4(CH3)2 鄰、間、對三種異構(gòu)體 焦煤油輕油部分分餾或催化重整輕汽油分餾 代謝產(chǎn)物甲基馬尿酸代謝和生物監(jiān)測指標(biāo)代謝和生物監(jiān)測指標(biāo)l甲苯和二甲苯通常用來制作染料，塑料，人造香精和合成纖維l常溫下以蒸汽狀態(tài)進入人體，液態(tài)可經(jīng)消化道和皮膚吸收l對脂肪和類脂質(zhì)的組織親和力強l

7、屬于低毒類有機化合物，大劑量時對中樞神經(jīng)系統(tǒng)有抑制作用，刺激皮膚黏膜進入人體的甲苯原型由呼吸道排出原型由尿液排出體內(nèi)代謝約20%79%1%馬尿酸：生物監(jiān)測指標(biāo)進入人體的二甲苯原型由呼吸道排出肝臟代謝5%95%甲基馬尿酸：生物監(jiān)測指標(biāo)樣品的采集與保存樣品的采集與保存l呼氣 班前或班后采集終末呼出氣氣相色譜測定呼出氣中甲苯和二甲苯氣相色譜測定呼出氣中甲苯和二甲苯l原理 用Tenax GC吸附管濃縮采樣 ，分析時將吸附管于250下解吸，由氮氣直接載入色譜柱分離，火焰離子化檢測器檢測，保留時間定性，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。 低濃度則需增加制冷濃縮程序：解吸后經(jīng)-30冷凝濃縮，再在300下?lián)]發(fā)HPLC測定馬尿酸

8、和甲基馬尿酸測定馬尿酸和甲基馬尿酸l原理 尿液經(jīng)鹽酸酸化后，馬尿酸和甲基馬尿酸用乙酸乙酯萃取，去適量揮發(fā)干，殘渣用水溶解后進樣，經(jīng)反向C18色譜柱分離，紫外檢測器檢測，以保留時間定性，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。本法最低檢測濃度： 馬尿酸：0.015mg/L 甲基馬尿酸：0.03mg/L l樣品處理 取1ml尿樣于10ml離心管中，加入0.1ml鹽酸溶液、0.3g氯化鈉和4ml乙酸乙酯，漩渦混勻1min，1000r/min離心5min。取0.4ml于具塞試管中70水浴或氮氣揮干后，加水溶解作為測試液。第三節(jié)第三節(jié) 乙苯和苯乙烯乙苯和苯乙烯l乙苯 C2H5C6H5 無色透明 甜味 芳香味 易揮發(fā)性液體 難溶

9、于水 易溶于有機溶劑 主要代謝產(chǎn)物為苯乙酸醇 白色結(jié)晶或粉末l苯乙烯 無色至淡黃色 芳香氣味 油狀液體 極微溶于水 與乙醇乙醚混溶 代謝產(chǎn)物有苯乙醇酸和苯乙醛酸氣相色譜測定呼出氣中乙苯和苯乙烯氣相色譜測定呼出氣中乙苯和苯乙烯l原理 用Tenax吸附管或者活性炭管采集呼氣中的乙苯，熱解吸后進樣。經(jīng)FFAP柱分離后，用火焰離子化檢測器檢測。以保留時間定性，峰高或峰面積定量。 本法檢測限 乙苯：2X10-3g 苯乙烯：5X10-3gHPLC測定尿中苯乙醇酸和苯乙醛酸測定尿中苯乙醇酸和苯乙醛酸l原理 尿樣經(jīng)鹽酸酸化后，以乙酸乙酯萃取苯乙醇酸和苯乙醛酸，離心后取上層有機相氮氣吹干，色譜流動相重溶殘留物，

10、C18色譜柱分離，紫外檢測器檢測，保留時間定性，內(nèi)標(biāo)法峰面積比定量。本法檢測限 苯乙醇酸：1.2mg/L 苯乙醛酸：2.5mg/Ll內(nèi)標(biāo)物的要求：l1. 所分析的樣品中要不含有；l2. 要和所有組分都能分開（就是分析時不存在干擾）l3. 保留時間要和目標(biāo)組分較為接近l由于內(nèi)標(biāo)物選擇時較為困難，嚴重影響內(nèi)標(biāo)法的應(yīng)用！ 第四節(jié)第四節(jié) 多環(huán)芳烴（多環(huán)芳烴（PAHs）l指分子中含有兩個及兩個以上苯環(huán)的碳氫化合物，是一類典型的持久性有機污染物l是煤、石油、木材、煙草、有機高分子化合物等不完全燃燒時產(chǎn)生的l有部分具有致癌性，常見四到六環(huán)稠環(huán)化合物如苯并a芘C20H12：淺黃色針狀結(jié)晶 五個苯環(huán)l代謝產(chǎn)物：

11、1-羥基芘 、3-羥基苯并a芘樣品的采集與保存樣品的采集與保存l聚乙烯材質(zhì)凍存管收集班后尿，避光-4，最好當(dāng)日處理分析l-20保存一個月以內(nèi)尿中尿中1-羥基芘的測定羥基芘的測定l（一）高效液相色譜法1 原理 尿液用-葡萄糖苷酸酶將尿液中結(jié)合態(tài)的1-羥基芘水解成游離態(tài)后，以C18固相萃取小柱萃取，甲醇洗脫，反向色譜柱分離，熒光檢測器檢測，保留時間定性，內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。 取尿液2ml時，此法最低檢測濃度：0.02g/L尿中尿中1-羥基芘的測定羥基芘的測定l（二）同步熒光測定法1 原理 尿液經(jīng)-葡萄糖苷酸酶的乙酸-乙酸鈉緩沖液水解，正己烷萃取，NaOH反萃取，水相萃取液進行同步熒光光譜掃描，315nm,405nm，起始掃描，峰值在440nm，用窄基線法進行定量測定。外標(biāo)法計算樣品中的含量尿中尿中3-羥基苯并羥基苯并a芘的測定芘的測定l（一）高效液相色譜法1 原理 尿樣經(jīng)