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1、細(xì)菌的革蘭氏染色及觀察細(xì)菌的革蘭氏染色及觀察生物工程學(xué)院生物工程學(xué)院 李中媛李中媛2017.10.27一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?、?shí)驗(yàn)?zāi)康牧私饧?xì)菌革蘭氏染色的原理了解細(xì)菌革蘭氏染色的原理學(xué)習(xí)并掌握革蘭氏染色的方法學(xué)習(xí)并掌握革蘭氏染色的方法二、基本原理二、基本原理革蘭氏革蘭氏染色是染色是細(xì)菌細(xì)菌鑒定和分類的重要性狀鑒定和分類的重要性狀 Gram stain 紫色紫色 紅色紅色 革革蘭氏蘭氏陽性陽性 革蘭氏陰性革蘭氏陰性 G+ G- 細(xì)胞壁成分和結(jié)構(gòu)不同 肽聚糖+脂質(zhì)二、基本原理二、基本原理95%酒精脫色酒精脫色 G+ G-固定固定結(jié)晶結(jié)晶紫初染紫初染碘碘液媒染液媒染番紅復(fù)染番紅復(fù)染95%乙醇脫色乙醇脫色三、

2、實(shí)驗(yàn)材料 試劑：草酸銨結(jié)晶紫，碘液，番紅，95%乙醇，載玻片，顯微鏡等 菌種：大腸桿菌 枯草芽孢桿菌 操作流程：操作流程： (1) 涂片 (2) 固定 (3) 染色：用草酸銨結(jié)晶紫染色1min后水洗。 (4) 媒染：加路哥氏碘液作用1min后水洗、吸干。 (5) 脫色：用95%乙醇脫色直至滴加的酒精不呈紫色為止。一般脫色時(shí)間約為30s。脫色時(shí)可輕輕搖動(dòng)載片使乙醇分布均勻。水洗、吸干。 (6) 復(fù)染：加0.5%的番紅染色液染色1030秒，水洗。 (7) 干燥、油鏡鏡檢觀察。四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果 通過觀察大腸桿菌和枯草芽孢桿菌的染色結(jié)果判通過觀察大腸桿菌和枯草芽孢桿菌的染色結(jié)果判斷其是革蘭氏陰性菌還是陽性菌斷其是革蘭氏陰性菌還是陽性菌五：思考題五：思考題1、革蘭氏染色的關(guān)鍵步驟是什么？、革蘭氏染色的關(guān)鍵步驟是什么？2、當(dāng)對(duì)未知菌進(jìn)行革蘭氏染色鑒定時(shí)，如何保證、當(dāng)對(duì)未知菌進(jìn)行革蘭氏染色

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