1、考法綜述本考點(diǎn)高考?xì)v年都會(huì)涉及，高考命題常從以下角度設(shè)置：從命題內(nèi)容上看，配制原則、掌握無(wú)菌技術(shù)及分離純化微生物的研究思路和對(duì)微生物的利用、微生物培養(yǎng)技術(shù)以及培養(yǎng)基的選用，在高考題中出現(xiàn)的概率相對(duì)較高。從命題思路上看，主要考查相關(guān)實(shí)驗(yàn)的原理、過(guò)程和方法，特別注重實(shí)驗(yàn)過(guò)程中關(guān)鍵操作步驟的考查。命題法1選擇培養(yǎng)基成分及配制方法的分析1.選擇培養(yǎng)基是根據(jù)某一種或某一類微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或?qū)σ恍┪锢?、化學(xué)抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基。利用這種培養(yǎng)基可以將所需要的微生物從混雜的微生物中分離出來(lái)。為選擇酵母菌和硝化細(xì)菌，應(yīng)選用的培養(yǎng)基分別為()A伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基、含青霉素培養(yǎng)基B含青霉素培養(yǎng)基、含氨的無(wú)機(jī)培養(yǎng)基C含

2、氨的無(wú)機(jī)培養(yǎng)基、含青霉素培養(yǎng)基D含青霉素培養(yǎng)基、伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基答案B解析酵母菌是真菌，通?？梢杂煤嗝顾氐呐囵B(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)，因?yàn)榍嗝顾匾种萍?xì)菌生長(zhǎng)，但不能抑制真菌生長(zhǎng)。硝化細(xì)菌為自養(yǎng)型生物，能夠利用氨轉(zhuǎn)變?yōu)閬喯跛岷拖跛崴尫诺哪芰堪褵o(wú)機(jī)物轉(zhuǎn)變?yōu)橛袡C(jī)物以維持自身生命活動(dòng)，利用含氨的無(wú)機(jī)培養(yǎng)基可進(jìn)行選擇培養(yǎng)。2如表所示為某微生物培養(yǎng)基的配方，有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()成分含量成分含量NaNO33 gFeSO40.01 gK2HPO41 g(CH2O)30 g瓊脂15 gH2O1000 mLMgSO47H2O0.5 g青霉素0.1萬(wàn)單位A.依物理性質(zhì)劃分，該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基；依用途劃分，該培養(yǎng)基屬于

3、選擇培養(yǎng)基B由培養(yǎng)基的原料可知，所培養(yǎng)微生物的同化作用類型是異養(yǎng)型，培養(yǎng)的微生物可以是酵母菌或毛霉C本培養(yǎng)基中青霉素的添加滿足了微生物生長(zhǎng)對(duì)特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的要求D若用該培養(yǎng)基分離能分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)除去青霉素和NaNO3，并應(yīng)加入尿素答案C解析由培養(yǎng)基中含有瓊脂可推測(cè)其為固體培養(yǎng)基，由培養(yǎng)基中含有青霉素可推測(cè)其為選擇培養(yǎng)基。培養(yǎng)基中含有有機(jī)碳源，故所培養(yǎng)微生物的同化作用類型是異養(yǎng)型。由于青霉素能抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)而不抑制真菌的生長(zhǎng)，故能培養(yǎng)酵母菌或毛霉。若用該培養(yǎng)基分離能分解尿素的細(xì)菌，則應(yīng)以尿素為唯一氮源，即應(yīng)除去NaNO3，同時(shí)還應(yīng)除去青霉素以防止其抑制目的菌的生長(zhǎng)?！窘忸}法】選擇培養(yǎng)基的制作方

4、法在培養(yǎng)基全部營(yíng)養(yǎng)成分具備的前提下，加入物質(zhì)：依據(jù)某些微生物對(duì)某些物質(zhì)的抗性，在培養(yǎng)基中加入某些物質(zhì)，以抑制不需要的微生物，促進(jìn)所需要的微生物生長(zhǎng)，如培養(yǎng)基中加入高濃度食鹽時(shí)可抑制多種細(xì)菌的生長(zhǎng)，但不影響金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)，從而可將該菌分離出來(lái)；而在培養(yǎng)基中加入青霉素時(shí)可抑制細(xì)菌、放線菌的生長(zhǎng)，從而分離得到酵母菌和霉菌。命題法2大腸桿菌的純化方法及過(guò)程分析3.下圖中甲是稀釋涂布平板法中的部分操作，乙是平板劃線法的操作結(jié)果。下列敘述中錯(cuò)誤的是()A甲中涂布前要將涂布器灼燒，冷卻后才能取菌液B對(duì)于濃度較高的菌液，如甲中的稀釋倍數(shù)僅為102，則所得的菌落不是由單一的細(xì)胞或孢子繁殖而成C乙中培養(yǎng)皿中

5、所得的菌落都符合要求D乙中的連續(xù)劃線的起點(diǎn)是上次劃線的末端答案C解析灼燒后的涂布器如果沒(méi)有冷卻就接觸菌種，會(huì)將菌體殺死，A正確；稀釋倍數(shù)過(guò)低會(huì)導(dǎo)致多個(gè)菌體聚集在一起繁殖成菌落，B正確；平板劃線法中最后一次劃線的末端處形成的菌落才是由單一的細(xì)胞或孢子繁殖而成，這種菌落才符合要求，C錯(cuò)誤；連續(xù)劃線中，除了第一次劃線外，每一次劃線的起點(diǎn)是上一次劃線的末端，目的是使得菌體密度越來(lái)越小，保證最后劃線末端處的菌落是由單一的細(xì)胞或孢子繁殖而成?！窘忸}法】?jī)煞N純化細(xì)菌的方法的比較項(xiàng)目 優(yōu)點(diǎn) 缺點(diǎn) 適用范圍平板劃線法可以觀察菌落特征，對(duì)混合菌進(jìn)行分離不能計(jì)數(shù)適用于好氧菌稀釋涂布平板法可以計(jì)數(shù)，可以觀察菌落特征吸

6、收量較少，較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延適用于厭氧菌和兼性厭氧菌命題法3微生物的篩選與分離4.有些細(xì)菌含有尿素分解酶，能將尿素瓊脂培養(yǎng)基中的尿素分解生成氨，氨溶于水變成氫氧化銨，導(dǎo)致培養(yǎng)基變成堿性，使酚紅指示劑呈現(xiàn)紅色。下列能選擇出分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基是()AKH2PO4，Na2HPO4，MgSO47H2O，葡萄糖，尿素，瓊脂，水BKH2PO4，Na2HPO4，MgSO47H2O，葡萄糖，瓊脂，水CKH2PO4，Na2HPO4，MgSO47H2O，尿素，瓊脂，水DKH2PO4，Na2HPO4，MgSO47H2O，牛肉膏，蛋白胨，瓊脂，水答案A解析選擇含有尿素分解酶的細(xì)菌，要用固體培養(yǎng)基

7、，故培養(yǎng)基中應(yīng)含有瓊脂，培養(yǎng)基中應(yīng)以尿素為唯一氮源，還應(yīng)有碳源、水、無(wú)機(jī)鹽等，A項(xiàng)符合。5地球上植物產(chǎn)生的纖維素中有40%60%被土壤中的某些微生物利用，從土壤中分離并研究這些微生物有利于人們更有效地利用植物秸稈中的纖維素。請(qǐng)回答：(1)分離纖維素分解菌，宜從_的土壤中取樣。纖維素分解菌之所以能夠利用纖維素，是因?yàn)槠浼?xì)胞內(nèi)含有_。(2)培養(yǎng)基除含有碳源、氮源、水和多種無(wú)機(jī)鹽外，還應(yīng)含有_。其中，碳源主要為_(kāi)。對(duì)配制的培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌，目的是_。(3)纖維素分解菌純化培養(yǎng)中常用的接種方法有_。在添加剛果紅的培養(yǎng)基上，可通過(guò)是否產(chǎn)生_來(lái)篩選纖維素分解菌。(4)從纖維素分解菌中提取纖維素酶，可

8、采用_法，如果采用_法對(duì)該細(xì)菌進(jìn)行固定，也可不經(jīng)過(guò)酶的提取和分離等操作即可實(shí)現(xiàn)纖維素發(fā)酵。答案(1)富含纖維素纖維素酶(2)某些特殊的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(生長(zhǎng)因子)纖維素殺死細(xì)菌的芽孢(3)平板劃線法和稀釋涂布平板法透明圈(4)電泳(或凝膠色譜)包埋解析(1)在腐殖質(zhì)較多的土壤中富含纖維素，篩選纖維素分解菌應(yīng)該從這樣的環(huán)境中進(jìn)行取樣。纖維素分解菌細(xì)胞內(nèi)含有纖維素酶，能夠?qū)⒗w維素分解為葡萄糖而加以利用。(2)微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要包括碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽等，有的還需要某些特殊的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(生長(zhǎng)因子)。篩選纖維素分解菌的培養(yǎng)基中的主要碳源為纖維素。對(duì)培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌的目的是殺死細(xì)菌的芽孢。(3)纖維素分

9、解菌純化培養(yǎng)中常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。纖維素與剛果紅染液反應(yīng)呈紅色，纖維素分解菌能夠分解培養(yǎng)基中的纖維素，從而使添加剛果紅染液的培養(yǎng)基出現(xiàn)透明圈，可以通過(guò)透明圈的產(chǎn)生與否來(lái)篩選纖維素分解菌。(4)纖維素酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì)，從纖維素分解菌中提取纖維素酶，可采用電泳法(或凝膠色譜法)。采用包埋法對(duì)該微生物細(xì)胞進(jìn)行固定，可不經(jīng)過(guò)酶的提取和分離等操作實(shí)現(xiàn)纖維素發(fā)酵?！窘忸}法】?jī)煞N微生物篩選方法的比較項(xiàng)目土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離分解纖維素的微生物的分離方法使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)利用富含纖維素的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)原理土壤中不能分解尿素的微生物因缺乏脲酶而不能正常生長(zhǎng)，能夠分解尿素的微生物能利用尿素