1、體外診斷試劑的方案設(shè)計(jì)要點(diǎn)和統(tǒng)計(jì)分析方法空軍總醫(yī)院國(guó)家藥物臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)空軍總醫(yī)院倫理委員會(huì)王健康kzwangjk討論內(nèi)容1、體外診斷試劑的法規(guī)要求2、臨床試驗(yàn)方案設(shè)計(jì)要求3、產(chǎn)品分析4、對(duì)比試劑的選擇5、受試者的選擇6、常見(jiàn)體外診斷試劑的分類7、體外診斷試劑的統(tǒng)計(jì)方法8、樣本量的計(jì)算體外診斷試劑的法規(guī)要求體外診斷試劑的法規(guī)體系臨床相關(guān)法規(guī)的比較項(xiàng)目藥品器械體外診斷試劑中華人民共和國(guó)藥品管理法(人大，2015年修正)醫(yī)療器械監(jiān)督管理?xiàng)l例(國(guó)務(wù)院，2016)上位法醫(yī)療器械注冊(cè)管理辦法（CFDA，2014）藥品注冊(cè)管理辦法（CFDA，2007，修訂征求意見(jiàn)，2016）體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法（ ，

2、， ）CFDA 2014 2017注冊(cè)法規(guī)藥物臨床試驗(yàn)質(zhì)量管理規(guī)范（CFDA，2003，修訂征求意見(jiàn)2016）醫(yī)療器械臨床試驗(yàn)質(zhì)量管理規(guī)范（衛(wèi)計(jì)委，CFDA，2016）體外診斷試劑臨床實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)原則（CFDA，2014）GCP不良事件(上市后)藥品不良反應(yīng)報(bào)告和監(jiān)測(cè)管理辦法 醫(yī)療器械不良事件監(jiān)測(cè)和再評(píng)價(jià)管理辦法2011（衛(wèi)生部，）（衛(wèi)計(jì)委，CFDA 2010 2016， 試行， 征求意見(jiàn)）FDA :CFR PART 814(PMA)外部法規(guī) ICH-GCP歐盟MEDDEV 2.7/1 revision 4(2016)歐盟MDR(2017)歐盟IVDR(2017)4體外診斷試劑的法規(guī)要求*體外診斷

3、試劑注冊(cè)管理辦法（2014年第5號(hào)）2014.07.30體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式（2014年第44號(hào)）2014.09.05*診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則（2014年第16號(hào)）2014.09.11體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)指導(dǎo)原則（2014年 第17號(hào)）2014.09.11醫(yī)療器械注冊(cè)管理辦法和體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法部分釋疑（2015.02.05）人類遺傳資源采集、收集、買(mǎi)賣(mài)、出口、出境審批行政許可事項(xiàng)服務(wù)指南（2015.07.02）*北京市第二類體外診斷試劑臨床試驗(yàn)指導(dǎo)原則（2016年版）（征求意見(jiàn)稿）（2016.1.11）醫(yī)療器械臨床試驗(yàn)現(xiàn)場(chǎng)檢查要點(diǎn)（征求意見(jiàn)稿） (20

4、16.05.18)食品藥品監(jiān)管總局關(guān)于實(shí)施醫(yī)療器械注冊(cè)管理辦法和體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法有關(guān)事項(xiàng)的通知(2014.08.01)5體外診斷試劑的法規(guī)要求（國(guó)家）涉及體外診斷試劑臨床試驗(yàn)的法規(guī)（部分-國(guó)家局）6體外診斷試劑產(chǎn)品的法規(guī)（北京局）78北京市第二類體外診斷試劑臨床試驗(yàn)指導(dǎo)原則一、臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的選擇臨床評(píng)價(jià)開(kāi)始前，申請(qǐng)人應(yīng)根據(jù)申報(bào)產(chǎn)品特點(diǎn)選擇臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)。臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)具有與申報(bào)產(chǎn)品相適應(yīng)的條件及能力。試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的選擇應(yīng)符合以下要求：（一）應(yīng)選擇至少兩家獲得國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局資質(zhì)認(rèn)可的醫(yī)療機(jī)構(gòu)。醫(yī)療機(jī)構(gòu)的臨床實(shí)驗(yàn)室（簡(jiǎn)稱實(shí)驗(yàn)室）應(yīng)符合醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法（衛(wèi)醫(yī)發(fā)200673號(hào)）

5、的要求，并優(yōu)先考慮經(jīng)中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì)（CNAS）依據(jù)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則（CNAS-CL02等同ISO15189）或檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則（CNAS-CL01等同ISO17025）認(rèn)可的實(shí)驗(yàn)室。（三）實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)人員應(yīng)具有相應(yīng)資質(zhì)（項(xiàng)目負(fù)責(zé)人至少具有相關(guān)專業(yè)中級(jí)或以上技術(shù)職稱）。（四）實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有能力提供臨床評(píng)價(jià)所需的各類樣本。（五）臨床試驗(yàn)必須獲得臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)倫理委員會(huì)的同意。9北京市第二類體外診斷試劑臨床試驗(yàn)指導(dǎo)原則二、參比檢測(cè)系統(tǒng)的選擇以下將申報(bào)產(chǎn)品的檢測(cè)系統(tǒng)稱為考核系統(tǒng)，所選擇的對(duì)照檢測(cè)系統(tǒng)稱為參比系統(tǒng)。（一）實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保證所用檢測(cè)系統(tǒng)的完整性和有效性?？己讼到y(tǒng)和對(duì)

6、照系統(tǒng)的主要分析性能指標(biāo)（如準(zhǔn)確性、精密度、線性范圍等）應(yīng)滿足臨床要求。（二）參比系統(tǒng)的試劑、儀器、校準(zhǔn)品均應(yīng)已取得醫(yī)療器械注冊(cè)證；考核系統(tǒng)的儀器、校準(zhǔn)品應(yīng)已取得醫(yī)療器械注冊(cè)證或與考核試劑同步注冊(cè)，且進(jìn)度基本一致。（三）參比系統(tǒng)應(yīng)選擇與考核產(chǎn)品方法學(xué)原理相同（如同為酶聯(lián)免疫反應(yīng)、同為化學(xué)發(fā)光免疫反應(yīng)等）或相似的，其方法學(xué)分析性能應(yīng)優(yōu)于或近似于考核產(chǎn)品。10北京市第二類體外診斷試劑臨床試驗(yàn)指導(dǎo)原則二、參比檢測(cè)系統(tǒng)的選擇（四）對(duì)于定量產(chǎn)品，參比試劑的性能技術(shù)指標(biāo)（如線性范圍、精密度等）應(yīng)與考核試劑近似或更優(yōu)，兩者的參考區(qū)間不宜差別過(guò)大；對(duì)于定性產(chǎn)品，兩者檢出限/臨界值應(yīng)基本一致；對(duì)于半定量產(chǎn)品，兩

7、者的分段區(qū)間應(yīng)基本一致。（五）定性產(chǎn)品可選性能更優(yōu)的半定量或定量產(chǎn)品作為參比試劑（統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)時(shí)應(yīng)先將定量/半定量測(cè)試結(jié)果按照其自身說(shuō)明書(shū)中確定的參考區(qū)間/臨界值分別劃歸陰性、陽(yáng)性結(jié)果后，再進(jìn)行兩個(gè)試劑測(cè)試結(jié)果間的等效性分析）。同理，半定量產(chǎn)品可選擇定量產(chǎn)品作為參比試劑。11北京市第二類體外診斷試劑臨床試驗(yàn)指導(dǎo)原則三、試驗(yàn)樣本的選擇（一）應(yīng)明確臨床樣本要求，考核系統(tǒng)與參比系統(tǒng)所用樣本及其要求應(yīng)一致。應(yīng)注明樣本采集、預(yù)處理、保存、輸送的要求及條件（如明確采血管種類、抗凝劑要求等）。注：推薦使用新鮮樣本，如果使用貯存樣本時(shí)，應(yīng)注明貯存條件及時(shí)間，在數(shù)據(jù)分析時(shí)應(yīng)考慮其影響并說(shuō)明。應(yīng)明確樣本納入及排除的準(zhǔn)

8、則，對(duì)廠家聲稱的可能對(duì)檢測(cè)結(jié)果有明顯干擾作用的樣本，如溶血、脂血或黃疸等樣本盡量避免使用（分析干擾因素時(shí)除外）。12北京市第二類體外診斷試劑臨床試驗(yàn)指導(dǎo)原則三、試驗(yàn)樣本的選擇（二）應(yīng)考慮樣本中被測(cè)量的分布。樣本量及其分布應(yīng)符合統(tǒng)計(jì)學(xué)及具體產(chǎn)品相關(guān)指導(dǎo)原則的要求。定量測(cè)試的產(chǎn)品，樣本中待測(cè)物濃度原則上應(yīng)覆蓋考核系統(tǒng)檢測(cè)范圍且均勻分布，并應(yīng)包含醫(yī)學(xué)決定水平。落在參考區(qū)間以外的比例應(yīng)不低于試驗(yàn)總量的30。定性測(cè)試的產(chǎn)品，應(yīng)該包含一定數(shù)量的陽(yáng)性、陰性和接近臨界值樣本，陽(yáng)性樣本比例應(yīng)不低于30%。如果檢測(cè)系統(tǒng)同時(shí)可給出諸如OD值、S/CO值等量化結(jié)果，應(yīng)一并給出，以驗(yàn)證其數(shù)據(jù)分布的合理性。半定量測(cè)試的產(chǎn)

9、品，樣本在各分段區(qū)間的試驗(yàn)例數(shù)應(yīng)盡量均勻，且各分段區(qū)間內(nèi)試驗(yàn)例數(shù)不宜低于30例。如果陽(yáng)性樣本數(shù)達(dá)不到上述要求，應(yīng)有充分合理的理由，并應(yīng)由臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具解釋說(shuō)明情況。臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)各自的試驗(yàn)例數(shù)不宜低于100例。13北京市第二類體外診斷試劑臨床試驗(yàn)指導(dǎo)原則三、試驗(yàn)樣本的選擇（三）關(guān)于樣本類型的選擇?？己嗽噭┖蛥⒈仍噭┑臉颖绢愋蛻?yīng)與其各自產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)要求一致。考核試劑聲稱的不同樣本類型（如血液、尿液），應(yīng)分別進(jìn)行臨床試驗(yàn)。如果聲稱同時(shí)適用于血清/血漿/全血樣本，那么血清（或血漿或全血）的試驗(yàn)例數(shù)按照體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則的要求，并同時(shí)在至少兩家臨床機(jī)構(gòu)共驗(yàn)證不少于100例受試者的自身血清、

10、血漿和/或全血樣本測(cè)試結(jié)果間的一致性（采用考核試劑評(píng)價(jià)），其中不同濃度樣本分布情況與總例數(shù)中分布情況應(yīng)一致。14北京市第二類體外診斷試劑臨床試驗(yàn)指導(dǎo)原則七、其他（一）聯(lián)檢（或多方法學(xué)）產(chǎn)品應(yīng)將各項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果分別統(tǒng)計(jì)分析。如存在多項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合判定檢驗(yàn)結(jié)果的情形，臨床試驗(yàn)應(yīng)涵蓋其產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)中列出的各種情形并對(duì)聯(lián)檢結(jié)果與臨床診斷結(jié)果的一致性進(jìn)行分析匯總。（二）除匯總數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析（臨床試驗(yàn)總報(bào)告）外，各臨床機(jī)構(gòu)應(yīng)有獨(dú)立完整的方案、報(bào)告（含數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)），需要進(jìn)行補(bǔ)充試驗(yàn)的，應(yīng)對(duì)各自數(shù)據(jù)重新進(jìn)行分析統(tǒng)計(jì)并出具補(bǔ)充報(bào)告。15幾個(gè)具有代表性的指導(dǎo)原則淺析幾個(gè)具有代表性的指導(dǎo)原則淺析腫瘤標(biāo)志物類定量檢測(cè)試劑注冊(cè)申報(bào)

11、資料指導(dǎo)原則（2011）17腫瘤標(biāo)志物類定量檢測(cè)試劑注冊(cè)申報(bào)資料指導(dǎo)原則二、適用范圍腫瘤標(biāo)志物類定量檢測(cè)試劑是指利用各種方法學(xué)對(duì)人血清、血漿或其他體液中的腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行體外定量分析的試劑。本指導(dǎo)原則適用于進(jìn)行首次注冊(cè)申報(bào)和相關(guān)許可事項(xiàng)變更的產(chǎn)品。從方法學(xué)考慮，本文主要指利用基于抗原抗體反應(yīng)原理的免疫學(xué)方法對(duì)腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行定量檢測(cè)的體外診斷試劑，如酶免疫法、化學(xué)發(fā)光法或微粒子酶免法等（不限于上述方法學(xué)），而不包括組織受體檢測(cè)、生物化學(xué)方法、免疫組化染色法、分子生物學(xué)方法類檢測(cè)試劑，有利之處可參考執(zhí)行。1.腫瘤標(biāo)志物（Tumor Marker）：是指在惡性腫瘤發(fā)生和增殖過(guò)程中,由腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生或機(jī)體

12、反應(yīng)而異常產(chǎn)生和/或升高的，反映腫瘤細(xì)胞特性的一類物質(zhì)。18腫瘤標(biāo)志物類定量檢測(cè)試劑注冊(cè)申報(bào)資料指導(dǎo)原則（十）臨床試驗(yàn)研究1.研究方法（1） 已有同類產(chǎn)品上市的臨床研究選擇境內(nèi)已批準(zhǔn)上市、臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的同類產(chǎn)品作為參比試劑，采用擬申報(bào)產(chǎn)品（以下稱考核試劑）與之進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)研究，證明本品與已上市產(chǎn)品等效或優(yōu)于已上市產(chǎn)品。建議企業(yè)盡量選擇方法學(xué)相同、線性范圍及精密度等性能接近的同類試劑作為參比試劑。（2） 新腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)試劑的臨床研究對(duì)于無(wú)法選擇參比試劑的新腫瘤標(biāo)記物而言，其臨床研究應(yīng)選擇多個(gè)相關(guān)的良惡性疾病組及部分正常人群，驗(yàn)證新標(biāo)記物的臨床靈敏度和特異性，并利用ROC曲線確定合適的參

13、考值（范圍）。另外，還應(yīng)對(duì)至少100例特定的惡性腫瘤患者進(jìn)行治療前后的隨訪監(jiān)測(cè)研究，以驗(yàn)證新腫瘤標(biāo)記物濃度變化與患者病情變化的相關(guān)性。臨床隨訪監(jiān)測(cè)研究應(yīng)結(jié)合臨床治療措施的選擇（公認(rèn)有效的治療手段）、患者治療后恢復(fù)狀況、腫瘤標(biāo)志物代謝周期（半衰期）等因素綜合考慮?；颊卟蓸拥臅r(shí)間點(diǎn)視臨床需要而定，申請(qǐng)人不得隨意干涉。19腫瘤標(biāo)志物類定量檢測(cè)試劑注冊(cè)申報(bào)資料指導(dǎo)原則4.臨床病例選擇如上文所述，絕大多數(shù)腫瘤標(biāo)志物對(duì)于惡性腫瘤診斷的靈敏度和特異性較低，器官定位及對(duì)疾病良惡性的區(qū)分能力都較差。因此，在進(jìn)行臨床研究時(shí)，除選擇目的器官/組織惡性疾病的病例外，還應(yīng)選擇其他器官/組織的惡性病患者、相關(guān)的良性病例等

14、。另外，孕婦或處于生理周期女性亦可見(jiàn)某些激素或胚胎蛋白類腫瘤標(biāo)志物的水平升高，對(duì)于此類腫瘤標(biāo)志物，臨床研究中應(yīng)選擇部分相關(guān)樣本作為受試對(duì)象。臨床研究應(yīng)包括對(duì)部分來(lái)自正常健康人群的樣本作為正常對(duì)照。比較正常組和疾病組結(jié)果，以便對(duì)申報(bào)產(chǎn)品的臨床性能做出全面分析。建議對(duì)健康人群例數(shù)的選擇以不超過(guò)150例為宜。對(duì)于新的腫瘤標(biāo)志物或臨床意義有待進(jìn)一步明確的項(xiàng)目，應(yīng)提供足夠臨床證據(jù)證明其臨床預(yù)期用途。不管是健康人群或不同病種的患者，每一組受試者的最小入選人數(shù)均須滿足統(tǒng)計(jì)學(xué)分析的基本要求。另外，建議在臨床試驗(yàn)中選擇部分含干擾物質(zhì)的標(biāo)本進(jìn)行對(duì)比研究，包括高脂、溶血、黃疸的樣本，RF、ANA陽(yáng)性樣本，易共存的其

15、他腫瘤標(biāo)志物抗原同時(shí)升高的患者標(biāo)本，以從臨床角度驗(yàn)證試劑的特異性。20幾個(gè)具有代表性的指導(dǎo)原則淺析腫瘤個(gè)體化治療相關(guān)基因突變檢測(cè)試劑技術(shù)審查指導(dǎo)原則（2014）21腫瘤個(gè)體化治療相關(guān)基因突變檢測(cè)試劑技術(shù)審查指導(dǎo)原則本指導(dǎo)原則所述腫瘤個(gè)體化治療相關(guān)基因突變檢測(cè)試劑是指利用基于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）方法的核酸檢測(cè)技術(shù)，以腫瘤個(gè)體化治療相關(guān)的突變基因?yàn)闄z測(cè)目標(biāo)，對(duì)人體樣本（包括組織、體液等）提取的核酸組分中的目標(biāo)序列進(jìn)行體外檢測(cè)的試劑。本指導(dǎo)原則所指基因突變的類型包括置換、插入、缺失、基因重排、拷貝數(shù)異常及核糖核酸（RNA）表達(dá)異常等廣義的基因突變。本指導(dǎo)原則的技術(shù)要求是基于熒光探針PCR方法確立

16、的，對(duì)于高分辨熔解曲線PCR方法、Luminex平臺(tái)或核酸檢測(cè)芯片等其他基于PCR的分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)，可能部分要求不完全適用或本指導(dǎo)原則所述技術(shù)指標(biāo)不夠全面，申請(qǐng)人可以根據(jù)實(shí)際產(chǎn)品特性選擇適合的方法或補(bǔ)充需要的評(píng)價(jià)和驗(yàn)證，但需闡述不適用的理由，并驗(yàn)證其科學(xué)合理性，同時(shí)確認(rèn)性能評(píng)價(jià)的充分性。本指導(dǎo)原則所涉及試劑的方法學(xué)不包括熒光原位雜交（Fluorescence in situ Hybridization，F(xiàn)ISH）、核酸序列測(cè)定、染色體核型分析及免疫組化技術(shù)等用于腫瘤個(gè)體化治療指導(dǎo)的其他方法學(xué)。本指導(dǎo)原則適用于進(jìn)行首次注冊(cè)申報(bào)和相關(guān)許可事項(xiàng)變更的產(chǎn)品。22腫瘤個(gè)體化治療相關(guān)基因突變檢測(cè)試劑技

17、術(shù)審查指導(dǎo)原則（十）臨床試驗(yàn)研究對(duì)于國(guó)內(nèi)外尚無(wú)同類產(chǎn)品被批準(zhǔn)上市或無(wú)充足資料證明其臨床預(yù)期用途的新型腫瘤相關(guān)基因突變，相關(guān)檢測(cè)試劑的臨床研究不能單純采用對(duì)比試驗(yàn)的方法，而應(yīng)將試劑盒臨床研究納入相關(guān)藥物的臨床研究或臨床應(yīng)用中，通過(guò)對(duì)特定的腫瘤病人進(jìn)行治療前后的跟蹤隨訪，以臨床對(duì)于患者個(gè)體化治療方案及有效性的綜合判斷為金標(biāo)準(zhǔn)，評(píng)價(jià)此類試劑用于指導(dǎo)腫瘤個(gè)體化治療的臨床性能。其中，有關(guān)診斷試劑臨床研究的臨床試驗(yàn)資料應(yīng)符合辦法、體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)資料基本要求（國(guó)食藥監(jiān)械2007609號(hào)）以及體外診斷試劑臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則的要求。對(duì)于已有同類產(chǎn)品上市的、基因突變類型與腫瘤個(gè)體化治療方案的相關(guān)性已經(jīng)得到

18、確認(rèn)的產(chǎn)品，則申請(qǐng)人既可采用試劑盒檢測(cè)與相關(guān)藥物治療相結(jié)合對(duì)特定的腫瘤病人進(jìn)行治療前后的跟蹤臨床研究的方法，亦可在充分結(jié)合相關(guān)的病例信息的情況下，采用考核試劑與參比方法進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)的研究方法，對(duì)考核試劑的臨床應(yīng)用有效性進(jìn)行評(píng)價(jià)。以下要求均針對(duì)采用對(duì)比試驗(yàn)方法的臨床研究提出。23腫瘤個(gè)體化治療相關(guān)基因突變檢測(cè)試劑技術(shù)審查指導(dǎo)原則1. 參比方法的選擇可以考慮以下幾方面：1.1如已有同類產(chǎn)品上市，其臨床研究可以選擇境內(nèi)已批準(zhǔn)上市、臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的同類產(chǎn)品作為參比試劑，采用擬申報(bào)產(chǎn)品（以下稱考核試劑）與之進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)研究，證明本品與已上市產(chǎn)品等效或優(yōu)于已上市產(chǎn)品。但應(yīng)充分考慮已上市同類試劑的突變

19、位點(diǎn)選擇、靶序列選擇、最低檢測(cè)限等特性，確?？己嗽噭┡c申報(bào)試劑具有明確可比性。1.2申請(qǐng)人亦可采用核酸序列測(cè)定方法作為此類試劑臨床試驗(yàn)研究的參比方法，驗(yàn)證考核試劑檢測(cè)結(jié)果與核酸序列測(cè)定（測(cè)序）結(jié)果之間的一致性情況。臨床研究報(bào)告中應(yīng)對(duì)選用的測(cè)序方法作詳細(xì)介紹，并對(duì)委托測(cè)序服務(wù)的機(jī)構(gòu)（如涉及）資質(zhì)和選擇依據(jù)作簡(jiǎn)要說(shuō)明或提供相關(guān)資料。申請(qǐng)人應(yīng)提供以下關(guān)于測(cè)序部分的詳細(xì)試驗(yàn)資料，需有臨床試驗(yàn)單位或委托測(cè)序服務(wù)機(jī)構(gòu)的簽章確認(rèn)。1.3此外，在充分考慮檢測(cè)結(jié)果具有明確可比性的前提下，也可以選擇熒光原位雜交（FISH）或免疫組化等染色體或蛋白水平的檢測(cè)技術(shù)作為參比方法，但考慮到檢測(cè)結(jié)果之間不具有直接的可比性，

20、建議對(duì)所有陽(yáng)性病例采用其他分子生物學(xué)技術(shù)（如核酸序列測(cè)定）對(duì)結(jié)果予以確認(rèn)。測(cè)序部分資料的提交參考上一條要求。24腫瘤個(gè)體化治療相關(guān)基因突變檢測(cè)試劑技術(shù)審查指導(dǎo)原則2. 臨床研究單位的選擇建議申請(qǐng)人在選擇臨床單位時(shí)，應(yīng)在國(guó)內(nèi)不同區(qū)域選擇臨床單位，盡量使各單位的臨床樣本有一定的區(qū)域代表性；臨床研究單位應(yīng)具有分子病理診斷和分子生物學(xué)方法檢測(cè)的優(yōu)勢(shì)，實(shí)驗(yàn)操作人員應(yīng)有足夠的時(shí)間熟悉檢測(cè)系統(tǒng)的各環(huán)節(jié)（儀器、試劑、質(zhì)控及操作程序等），熟悉評(píng)價(jià)方案。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中，考核試劑和參比方法都應(yīng)處于有效的質(zhì)量控制下，最大限度保證試驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性及可重復(fù)性。4. 病例選擇及陽(yáng)性病例比例臨床試驗(yàn)應(yīng)以腫瘤患者為研究對(duì)象，其中

21、試劑盒規(guī)定范圍的每種突變類型均應(yīng)有一定量的陽(yáng)性病例。對(duì)于陰性病例的選擇，也應(yīng)考慮到交叉反應(yīng)驗(yàn)證的需要，以從臨床角度考察其分析特異性。陰/陽(yáng)性病例均應(yīng)覆蓋所有適用的腫瘤類型。若產(chǎn)品適用于多種樣本類型，則應(yīng)對(duì)所有樣本類型均進(jìn)行臨床驗(yàn)證。6. 結(jié)果差異樣本的驗(yàn)證在數(shù)據(jù)收集過(guò)程中，對(duì)于兩種方法檢測(cè)結(jié)果不一致的樣本，應(yīng)采用“金標(biāo)準(zhǔn)”方法或臨床上普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的第三種同類試劑進(jìn)行復(fù)核，同時(shí)結(jié)合患者的臨床病情對(duì)差異原因及可能結(jié)果進(jìn)行分析。25幾個(gè)具有代表性的指導(dǎo)原則淺析乙型肝炎病毒基因分型檢測(cè)試劑技術(shù)審查指導(dǎo)原則（2015年第32號(hào)）63乙型肝炎病毒基因分型檢測(cè)試劑技術(shù)審查指導(dǎo)原則適用范圍本指導(dǎo)原則旨在指

22、導(dǎo)注冊(cè)申請(qǐng)人對(duì)乙型肝炎病毒（Hepatitis B Virus，HBV）基因分型檢測(cè)試劑注冊(cè)申報(bào)資料的準(zhǔn)備及撰寫(xiě)，同時(shí)也為技術(shù)審評(píng)部門(mén)審評(píng)注冊(cè)申報(bào)資料提供參考。本指導(dǎo)原則是對(duì)乙型肝炎病毒基因分型定性檢測(cè)試劑的一般要求，申請(qǐng)人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對(duì)注冊(cè)申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。26乙型肝炎病毒基因分型檢測(cè)試劑技術(shù)審查指導(dǎo)原則參比方法的選擇可以考慮以下幾方面：1.1 如已有同類產(chǎn)品上市，可以選擇境內(nèi)已批準(zhǔn)上市、臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的同類產(chǎn)品作為參比試劑，采用擬申報(bào)產(chǎn)品（以下稱考核試劑）與之進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)研究，證明

23、本品與已上市產(chǎn)品等效或優(yōu)于已上市產(chǎn)品。應(yīng)充分考慮已上市同類試劑的型別選擇、靶序列選擇、分析靈敏度等特性，確?？己嗽噭┡c申報(bào)試劑具有明確可比性。1.2 申請(qǐng)人亦可采用核酸序列測(cè)定方法作為此類試劑臨床試驗(yàn)研究的參比方法，驗(yàn)證考核試劑檢測(cè)結(jié)果與核酸序列測(cè)定（測(cè)序）結(jié)果之間的一致性情況。臨床試驗(yàn)報(bào)告中應(yīng)對(duì)選用的測(cè)序方法做詳細(xì)介紹。申請(qǐng)人應(yīng)提供以下關(guān)于測(cè)序部分的詳細(xì)試驗(yàn)資料，需有臨床試驗(yàn)單位簽章確認(rèn)：1.2.1 測(cè)序方法原理、測(cè)序儀型號(hào)、測(cè)序試劑及消耗品的相關(guān)信息。1.2.2 測(cè)序方法所用引物相關(guān)信息，如基因區(qū)段選擇，分子量、純度、功能性實(shí)驗(yàn)等資料。引物設(shè)計(jì)應(yīng)合理涵蓋考核試劑擴(kuò)增的靶核酸區(qū)段、位點(diǎn)、及所

24、有突變類型。1.2.3 對(duì)所選測(cè)序方法的分析性能進(jìn)行合理驗(yàn)證，尤其是最低檢測(cè)限的確認(rèn)，建議將所選測(cè)序方法與申報(bào)試劑的相關(guān)性能進(jìn)行適當(dāng)比對(duì)分析。1.2.4 測(cè)序方法應(yīng)建立合理的陽(yáng)性質(zhì)控品和陰性質(zhì)控品對(duì)臨床樣本的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行質(zhì)量控制。1.2.5 提交有代表性的樣本測(cè)序圖譜及結(jié)果分析資料。28乙型肝炎病毒基因分型檢測(cè)試劑技術(shù)審查指導(dǎo)原則4.臨床試驗(yàn)對(duì)象選擇4.1基因型方面的考慮HBV病毒為DNA病毒，其基因具有顯著的多樣性，不同的地區(qū)和民族，HBV流行的基因型不同。境內(nèi)流行的HBV基因型主要為B型、C型，部分地區(qū)存在少數(shù)D 型，以及重組型基因B/C型，B/D型，C/D型等。而且，HBV基因型具有一定

25、的地域差異，不同地區(qū)流行的HBV基因型也不盡相同。因此，在選擇HBV感染者病例時(shí)，首先應(yīng)根據(jù)HBV流行的情況，選擇能代表我國(guó)不同地區(qū)流行基因型的HBV感染者病例，以對(duì)試劑檢測(cè)我國(guó)流行的HBV病毒的能力進(jìn)行客觀科學(xué)的評(píng)價(jià)，選擇的基因型應(yīng)包括上述三種主要的基因型。4.2病例選擇及樣本類型應(yīng)涵蓋注冊(cè)申報(bào)試劑所聲稱的所有基因型，應(yīng)選擇部分干擾樣本（交叉反應(yīng)樣本），比較干擾組和病例組結(jié)果，以便對(duì)申報(bào)產(chǎn)品的臨床性能做出科學(xué)的分析。臨床試驗(yàn)所需樣本總例數(shù)不少于500例，其干擾組例數(shù)的選擇以不超過(guò)總臨床樣本數(shù)的10%為宜。對(duì)于B型及C型基因型臨床樣本，應(yīng)滿足每種基因型不少于200例臨床樣本；對(duì)于D型基因型及其

26、他基因型臨床樣本，建議每種不少于30例陽(yáng)性病例。每種基因型臨床樣本應(yīng)來(lái)源于乙型肝炎病毒核酸檢測(cè)陽(yáng)性的患者。如注冊(cè)申報(bào)試劑中包含其他基因型，應(yīng)結(jié)合這部分基因型在我國(guó)的流行病學(xué)特點(diǎn)，臨床應(yīng)用情況等綜合因素，對(duì)其臨床有效性進(jìn)行科學(xué)評(píng)估。在樣本選擇時(shí)，應(yīng)注重患者來(lái)源的不同地域性，不同病情進(jìn)展，不同藥物治療方案等。對(duì)于干擾組樣本的選擇，應(yīng)考慮到在檢測(cè)過(guò)程中容易產(chǎn)生干擾，可能造成假陽(yáng)性/假陰性的情況，以從臨床角度考察其分析特異性。29幾個(gè)具有代表性的指導(dǎo)原則淺析過(guò)敏原特異性IgE抗體檢測(cè)試劑技術(shù)審查指導(dǎo)原則（2015年第93號(hào)）67過(guò)敏原特異性IgE抗體檢測(cè)試劑技術(shù)審查指導(dǎo)原則適用范圍：本指導(dǎo)原則是對(duì)過(guò)敏

27、原特異性IgE抗體（Allergen-specific IgE）檢測(cè)試劑的一般要求，申請(qǐng)人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對(duì)注冊(cè)申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。如申請(qǐng)人認(rèn)為有必要增加本指導(dǎo)原則不包含的研究?jī)?nèi)容，可自行補(bǔ)充。1.研究方法對(duì)于該類試劑已有同類產(chǎn)品上市的，按照法規(guī)要求應(yīng)選擇境內(nèi)已批準(zhǔn)上市、臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的同類產(chǎn)品作為對(duì)比試劑，采用試驗(yàn)用體外診斷試劑（以下稱考核試劑）與之進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)研究，證明考核試劑與已上市產(chǎn)品等效。如無(wú)已上市同類產(chǎn)品的，應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品設(shè)計(jì)的具體用途進(jìn)行臨床試驗(yàn)。綜合臨床檢測(cè)結(jié)果、病例臨床資料、其

28、他檢測(cè)檢查結(jié)果（病史、皮膚試驗(yàn)、激發(fā)試驗(yàn)）、患者治療情況等多方面因素進(jìn)行綜合判斷以評(píng)價(jià)產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果是否準(zhǔn)確。2.病例選擇應(yīng)充分考慮地域性差異，由于過(guò)敏原檢測(cè)項(xiàng)目很多，包含各種食物、吸入性、注入性等過(guò)敏原，而且過(guò)敏癥狀的發(fā)生存在季節(jié)性，所以應(yīng)充分考慮各種過(guò)敏原的地域性差異、發(fā)病時(shí)間的不同、流行病學(xué)的差異選擇有代表性的單位進(jìn)行臨床試驗(yàn)，應(yīng)盡量選擇不同省分的臨床單位。31過(guò)敏原特異性IgE抗體檢測(cè)試劑技術(shù)審查指導(dǎo)原則3.樣本選擇對(duì)于組合過(guò)敏原檢測(cè)項(xiàng)目（套組，非混合），每一個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目應(yīng)分別進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，且應(yīng)滿足至少1000例的要求，對(duì)于每一個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目病例選擇中應(yīng)包括一定數(shù)量的交叉反應(yīng)樣本，以評(píng)價(jià)產(chǎn)品檢測(cè)的

29、特異性。對(duì)于每一過(guò)敏原檢測(cè)（報(bào)告）項(xiàng)目均應(yīng)提供大于3050例檢測(cè)結(jié)果與臨床診斷結(jié)果比對(duì)的臨床資料，應(yīng)隨機(jī)選擇病例，先選擇高度懷疑的臨床病例，再通過(guò)樣本檢測(cè)進(jìn)行比對(duì)，比對(duì)病例應(yīng)保證一定的陽(yáng)性率，并提供詳細(xì)的病例情況（包括病史、臨床診斷方法、各種檢測(cè)結(jié)果等），建議在變態(tài)反應(yīng)科、呼吸科、消化科等臨床專業(yè)科室進(jìn)行臨床試驗(yàn)。對(duì)于適用于對(duì)多個(gè)樣本類型進(jìn)行檢測(cè)的產(chǎn)品，如不同樣本類型之間具有可比性，應(yīng)至少完成一個(gè)樣本類型不少于1000例的臨床研究，同時(shí)再進(jìn)行不少于 200例同一患者不同樣本類型之間的比較研究。如樣本類型中包括指尖全血或靜脈全血等全血樣本，應(yīng)至少進(jìn)行300例同一患者全血樣本與血清或者血漿樣本的比

30、對(duì)臨床資料。5.結(jié)果差異樣本的驗(yàn)證對(duì)于兩種試劑的檢測(cè)結(jié)果有不一致（檢測(cè)結(jié)果差異較大）的樣本，應(yīng)采用臨床上公認(rèn)較好的第三種同類試劑進(jìn)行復(fù)核，同時(shí)結(jié)合患者的臨床病情、臨床資料對(duì)差異原因及可能結(jié)果進(jìn)行分析。對(duì)于半定量檢測(cè)產(chǎn)品，在檢測(cè)結(jié)果陰陽(yáng)性判定一致的情況下，如分級(jí)差異等于或大于2個(gè)級(jí)別，應(yīng)采用第三種方法進(jìn)行復(fù)核。32臨床試驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)要求體外診斷試劑臨床試驗(yàn)方案-內(nèi)容要求（一）臨床試驗(yàn)方案開(kāi)展體外診斷試劑臨床試驗(yàn)，申請(qǐng)人應(yīng)當(dāng)按照試驗(yàn)用體外診斷試劑的類別、風(fēng)險(xiǎn)、預(yù)期用途等特性，組織制定科學(xué)、合理的臨床試驗(yàn)方案。一般應(yīng)當(dāng)包括以下內(nèi)容：1. 一般信息（包括產(chǎn)品信息、臨床試驗(yàn)開(kāi)展的時(shí)間和人員等相關(guān)信息、申

31、請(qǐng)人相關(guān)信息等）；2. 臨床試驗(yàn)的背景資料；3. 試驗(yàn)?zāi)康模?. 試驗(yàn)設(shè)計(jì)；5. 評(píng)價(jià)方法；6. 統(tǒng)計(jì)方法；7. 對(duì)臨床試驗(yàn)方案修正的規(guī)定；8. 臨床試驗(yàn)涉及的倫理問(wèn)題和說(shuō)明、知情同意書(shū)文本（如有）；9. 數(shù)據(jù)處理與記錄保存;10. 其他需要說(shuō)明的內(nèi)容。體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則201434產(chǎn)品分析產(chǎn)品分析1、從分類上考慮（第一類,備案）2、是否進(jìn)入免臨床目錄3、醫(yī)療器械臨床評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則（同品種）2015.05.19（禁行）4、免于進(jìn)行臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑臨床評(píng)價(jià)資料基本要求（征求意見(jiàn)）2017,05，225、進(jìn)行臨床試驗(yàn) 常規(guī)臨床試驗(yàn) 補(bǔ)充臨床試驗(yàn)36產(chǎn)品分析工作原理檢測(cè)生物樣本

32、類型創(chuàng)新性原理血清首研性仿制血漿全血病理切片適用范圍檢測(cè)生物樣本水平分析產(chǎn)品適用范圍：說(shuō)明書(shū)選擇臨床適用范圍組織細(xì)胞核酸靶點(diǎn)37對(duì)比試劑的選擇對(duì)比試劑的選擇1新研制體外診斷試劑的臨床試驗(yàn)1.1 對(duì)于新研制體外診斷試劑而言，選擇適當(dāng)?shù)氖茉囌?，采用試?yàn)用體外診斷試劑與診斷該疾病的“金標(biāo)準(zhǔn)”進(jìn)行盲法同步比較。1.2 “金標(biāo)準(zhǔn)”的確定?！敖饦?biāo)準(zhǔn)”是指在現(xiàn)有條件下，公認(rèn)的、可靠的、權(quán)威的診斷方法。臨床上常用的“金標(biāo)準(zhǔn)”有組織病理學(xué)檢查、影像學(xué)檢查、病原體分離培養(yǎng)鑒定、長(zhǎng)期隨訪所得的結(jié)論及臨床常用的其他確認(rèn)方法等。2“已有同品種批準(zhǔn)上市”產(chǎn)品的臨床試驗(yàn)2.1 對(duì)比試劑的選擇。在采用已上市產(chǎn)品作為對(duì)比試劑的

33、前提下，選擇目前臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的產(chǎn)品。同時(shí)應(yīng)充分了解所選擇產(chǎn)品的技術(shù)信息，包括方法學(xué)、臨床預(yù)期用途、主要性能指標(biāo)、校準(zhǔn)品的溯源情況、推薦的陽(yáng)性判斷值或參考區(qū)間等，以便對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行科學(xué)的分析。體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則的通告201439對(duì)比試劑的選擇 工作原理與對(duì)照產(chǎn)品相同或近似業(yè)界公認(rèn)的手段或方法綜合性診斷方法 特別注意 以不同原理產(chǎn)品作對(duì)照，可能產(chǎn)生的診斷 適用范圍不一致。所獲批適應(yīng)癥與試驗(yàn)產(chǎn)品相同檢測(cè)生物樣本相同臨床效能與試驗(yàn)產(chǎn)品相似 線性范圍（工作曲線范圍） 參考值范圍 敏感性、特異性 準(zhǔn)確度、精密度 其它 證書(shū)在有效期范圍內(nèi) 產(chǎn)品可以獲得40對(duì)比試劑的選擇-異向偏倚同向偏

34、倚與異向偏倚試驗(yàn)試劑參比試劑診斷接受標(biāo)準(zhǔn)：靶值10%9%13%5%真實(shí)值 9%4%4%真實(shí)值同向偏倚異向偏倚41對(duì)比試劑的選擇-異向偏倚42對(duì)比試劑的選擇-異向偏倚43對(duì)比試劑的選擇2.1 對(duì)比試劑的選擇。在采用已上市產(chǎn)品作為對(duì)比試劑的前提下，選擇目前臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的產(chǎn)品。同時(shí)應(yīng)充分了解所選擇產(chǎn)品的技術(shù)信息，包括方法學(xué)、臨床預(yù)期用途、主要性能指標(biāo)、校準(zhǔn)品的溯源情況、推薦的陽(yáng)性判斷值或參考區(qū)間等，以便對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行科學(xué)的分析。體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則的通告201444受試者的選擇受試者的選擇1新研制體外診斷試劑的臨床試驗(yàn)1.3受試者的選擇。受試者應(yīng)包括兩組：一組是用“金標(biāo)準(zhǔn)”確定為

35、有某病的病例組，另一組是經(jīng)“金標(biāo)準(zhǔn)”確定或有臨床證據(jù)證實(shí)無(wú)該病的患者或正常人群，作為對(duì)照組。病例組應(yīng)包括該病種的不同病例，如癥狀典型和非典型的，病程早、中、晚期的，病情輕、中、重型的，不同性別、不同年齡層次的等，以便能反映該病的全部特征。對(duì)照組應(yīng)包括確定無(wú)該病的患者，及易與本病相混淆疾病的病例。體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則的通告201446受試者的選擇（二）應(yīng)考慮樣本中被測(cè)量的分布。樣本量及其分布應(yīng)符合統(tǒng)計(jì)學(xué)及具體產(chǎn)品相關(guān)指導(dǎo)原則的要求。定量測(cè)試的產(chǎn)品，樣本中待測(cè)物濃度原則上應(yīng)覆蓋考核系統(tǒng)檢測(cè)范圍且均勻分布，并應(yīng)包含醫(yī)學(xué)決定水平。落在參考區(qū)間以外的比例應(yīng)不低于試驗(yàn)總量的30。定性測(cè)試的產(chǎn)品

36、，應(yīng)該包含一定數(shù)量的陽(yáng)性、陰性和接近臨界值樣本，陽(yáng)性樣本比例應(yīng)不低于30%。如果檢測(cè)系統(tǒng)同時(shí)可給出諸如OD值、S/CO值等量化結(jié)果，應(yīng)一并給出，以驗(yàn)證其數(shù)據(jù)分布的合理性。半定量測(cè)試的產(chǎn)品，樣本在各分段區(qū)間的試驗(yàn)例數(shù)應(yīng)盡量均勻，且各分段區(qū)間內(nèi)試驗(yàn)例數(shù)不宜低于30例。如果陽(yáng)性樣本數(shù)達(dá)不到上述要求，應(yīng)有充分合理的理由，并應(yīng)由臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具解釋說(shuō)明情況。臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)各自的試驗(yàn)例數(shù)不宜低于100例。北京市第二類體外診斷試劑臨床試驗(yàn)指導(dǎo)原則 （征求意見(jiàn)稿） 201647常見(jiàn)體外診斷試劑分類常見(jiàn)診斷試劑的分類-定性產(chǎn)品數(shù)據(jù)特點(diǎn)： 診斷結(jié)果多為兩分類數(shù)據(jù)；如陰性和陽(yáng)性；正常和異常等；1207例膀胱癌診斷試劑

37、綜合診斷結(jié)果+-+-251（a）16（b）716（d）Fish診斷結(jié)果44 （c）49常見(jiàn)診斷試劑的分類-半定量產(chǎn)品數(shù)據(jù)特點(diǎn)： 1、診斷結(jié)果為多分類等級(jí)數(shù)據(jù)； 2、等級(jí)之間是有序序列； 3、數(shù)據(jù)間可能不呈等級(jí)遞增關(guān)系； 4、可能需要數(shù)據(jù)合并后轉(zhuǎn)化為兩分類數(shù)據(jù)（陰性、陽(yáng)性）363例過(guò)敏源診斷試劑對(duì)照試劑Neg + + +Neg 311 110121試驗(yàn)試劑+40014 26+0050+50常見(jiàn)診斷試劑的分類-定量產(chǎn)品數(shù)據(jù)特點(diǎn)： 1、診斷結(jié)果為連續(xù)性計(jì)量資料； 2、分布可能出現(xiàn)正態(tài)分布、偏態(tài)分布和二項(xiàng)式分布； 3、多為配對(duì)數(shù)據(jù),建議采用配對(duì)統(tǒng)計(jì)分析方法； 4、有時(shí)會(huì)有1個(gè)或2個(gè)定性拐點(diǎn)；210例血

38、鈉數(shù)據(jù)診斷結(jié)果試驗(yàn)組對(duì)照組 5、數(shù)據(jù)有可能通過(guò)其Cutoff值轉(zhuǎn)化為定性資料或等級(jí)資料。+-+112.7104124135.8149.8122.788.9126.7+-123.3120.5130.3129.697.9158.4141.2131.1148130.612094.951常見(jiàn)體外診斷試劑統(tǒng)計(jì)分析方法常見(jiàn)體外診斷數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法-數(shù)據(jù)的準(zhǔn)備線性范圍與檢測(cè)范圍測(cè)定上限線性范圍上限線性范圍下限測(cè)定下限檢出限53常見(jiàn)體外診斷數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法-數(shù)據(jù)的準(zhǔn)備數(shù)據(jù)準(zhǔn)備1、質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)的審核（每天、每批、每個(gè)試驗(yàn)）； 質(zhì)控合格數(shù)據(jù)的納入； 缺失或失控?cái)?shù)據(jù)剔除。2、數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)范圍的審核： 確定統(tǒng)計(jì)范圍：試驗(yàn)產(chǎn)品

39、和對(duì)照產(chǎn)品的真子集； 超過(guò)高限的處理（不應(yīng)匯報(bào)）：剔除； 強(qiáng)制拉至高限；轉(zhuǎn)為定性； 超過(guò)低限的處理（不應(yīng)匯報(bào)）： 剔除； 強(qiáng)制拉至低限； 強(qiáng)制歸零； 轉(zhuǎn)為定性；3、離群值分析（慎重）： 超出絕對(duì)/相對(duì)差值的4倍，判定為離群值； 離群值數(shù)2.5%4、鎖定數(shù)據(jù)。54常見(jiàn)體外診斷數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法-數(shù)據(jù)的準(zhǔn)備定量統(tǒng)計(jì)分析范圍示意圖TRRSR11001000STTS120試驗(yàn)組對(duì)照組 統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)集80-1000 120-1100 120-1000試驗(yàn)組對(duì)照組 統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)集試驗(yàn)組對(duì)照組 統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)集80-1200 120-1100 120-1100120-1000 95-1100 120-110055常見(jiàn)體外診

40、斷數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法-定性產(chǎn)品定性檢測(cè)產(chǎn)品 應(yīng)分析陽(yáng)性符合率、陰性符合率、總體符合率，以及相應(yīng)的95%可信區(qū)間。以交叉表的形式總結(jié)兩種試劑的定性檢測(cè)結(jié)果，對(duì)定性結(jié)果進(jìn)行四格表kappa（或卡方）檢驗(yàn)以驗(yàn)證兩種試劑定性結(jié)果的一致性。 對(duì)上述資料進(jìn)行Kappa一致性分析，Kappa系數(shù)0.75，為高度一致，認(rèn)為兩系統(tǒng)等效；Kappa系數(shù)0.4，認(rèn)為一致，但需進(jìn)一步進(jìn)行相關(guān)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析；Kappa系數(shù)0.4，則認(rèn)為兩系統(tǒng)不一致，兩系統(tǒng)不等效。 陽(yáng)性/陰性符合率及其95%可信區(qū)間應(yīng)滿足臨床要求，如達(dá)不到要求則需重新設(shè)計(jì)臨床方案。 對(duì)兩種系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)果明顯不一致的樣本，應(yīng)采用臨床診斷金標(biāo)準(zhǔn)方法或其他方法進(jìn)行確

41、認(rèn)試驗(yàn)，并結(jié)合患者的臨床病情對(duì)差異原因進(jìn)行分析。如果考核系統(tǒng)與參比系統(tǒng)的檢測(cè)結(jié)果顯示不一致樣本均是位于臨界值附近且例數(shù)很少，則對(duì)不一致原因作簡(jiǎn)要分析，不需進(jìn)行第三方復(fù)核。如果有必要選擇第三方試劑復(fù)核，建議先對(duì)一定數(shù)量的考核試劑和參比試劑檢測(cè)結(jié)果一致的樣本（包括陽(yáng)性和陰性結(jié)果）進(jìn)行檢測(cè)，以對(duì)第三方試劑選擇的合理性進(jìn)行評(píng)估。56常見(jiàn)體外診斷數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法-定性產(chǎn)品配對(duì)計(jì)數(shù)資料統(tǒng)計(jì)表集合1中心值精確Sig.(雙側(cè))McNemar 檢驗(yàn)有效案例中的N0.0034190.999血液病醫(yī)院敏感性: Se = a/(a+c)特異性：Sp = d/(b+d)準(zhǔn)確性(符合率)：e = （a+d）/（a+b+c

42、+d）95% 置信區(qū)間中心值漸進(jìn)sig.下限0.933上限Kappa系數(shù)計(jì)算公式如下：一致性度量Kappa0.9744191.0000.00血液病醫(yī)院有效案例中的NKappa=(P P )/ (1P ) 其中，PA為“實(shí)際一致率”，AeePe為“理論一致率”。項(xiàng)目結(jié)果結(jié)果的95%CI符合率 100.00%敏感性 100.00%特異性 100.00%96.92% to 100.00%54.07% to 100.00%96.76% to 100.00%計(jì)算方法如下：PA=(ad)/ (abcdPe=(ab) (ac)(cd) (bd)/ (abcd)257常見(jiàn)體外診斷數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法-半定量產(chǎn)品半

43、定量檢測(cè)產(chǎn)品 應(yīng)分別評(píng)價(jià)兩個(gè)系統(tǒng)各分段區(qū)間的一致性，并采用kappa檢驗(yàn)以及各分段區(qū)間試驗(yàn)數(shù)據(jù)的符合率進(jìn)行驗(yàn)證。Kappa值計(jì)算舉例如下： 陽(yáng)性/陰性符合率及其95%可信區(qū)間應(yīng)滿足臨床要求，如達(dá)不到要求則需重新設(shè)計(jì)臨床方案。58常見(jiàn)體外診斷數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法-半定量產(chǎn)品兩方法測(cè)定值一致性分析（1、2g表示不同區(qū)間）Kappa系數(shù)計(jì)算公式如下：Kappa=(P P )/ (1P ) 其中，PA為“實(shí)際一致率”，Pe為“Aee理論一致率”。計(jì)算方法如下：秩和檢驗(yàn)FAsMann-Whitney UWilcoxon WZ10.50016.5000.0001.000漸近顯著性(雙側(cè))59常見(jiàn)體外診斷數(shù)據(jù)統(tǒng)

44、計(jì)分析方法-定量產(chǎn)品定量檢測(cè)產(chǎn)品對(duì)于定量產(chǎn)品，應(yīng)至少進(jìn)行以下數(shù)據(jù)分析：1絕對(duì)偏倚圖:考核系統(tǒng)與參比系統(tǒng)每個(gè)樣本測(cè)定值之差與相應(yīng)兩系統(tǒng)測(cè)試均值作散點(diǎn)圖。觀察并分析各點(diǎn)的絕對(duì)偏倚分布情況。(差值-均值)2相對(duì)偏倚圖:考核系統(tǒng)與參比系統(tǒng)每個(gè)樣本測(cè)定值之比值與相應(yīng)兩系統(tǒng)測(cè)試均值作散點(diǎn)圖。觀察并分析各點(diǎn)的相對(duì)偏倚分布情況。（比值-均值）3. 回歸分析:考核系統(tǒng)每個(gè)樣本測(cè)定值與相對(duì)應(yīng)的參比系統(tǒng)測(cè)定值作散點(diǎn)圖（以考核系統(tǒng)作Y軸，參比系統(tǒng)作X軸）。目測(cè)數(shù)據(jù)分布的均勻性，對(duì)線性段作相關(guān)分析，原則上要求r0.975，不滿足時(shí)應(yīng)擴(kuò)大樣本量再評(píng)價(jià)，若仍然達(dá)不到此要求應(yīng)有充分合理的解釋，并參照EP9-A2的方法進(jìn)行相應(yīng)

45、“分部偏倚法”分析（通常將數(shù)據(jù)分成三組（低、中、高）進(jìn)行分析，每組應(yīng)含大約相同的數(shù)據(jù)。如果醫(yī)學(xué)決定水平與兩組分界值接近，可改變分組以避免在偏倚估計(jì)中的不連續(xù)性）。4醫(yī)學(xué)決定水平處的預(yù)期偏倚及其可信區(qū)間5結(jié)果判斷與解釋:將醫(yī)學(xué)決定水平預(yù)期偏倚的可信區(qū)間與允許誤差的限值相比較（建議參照1/2CLIA88、1/2室間質(zhì)評(píng)可接受范圍、1/2來(lái)源于生物變異的總允許誤差、衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)等相關(guān)要求設(shè)定允許誤差），如達(dá)到相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，判定兩檢測(cè)系統(tǒng)等效，如未達(dá)到該標(biāo)準(zhǔn)，兩檢測(cè)系統(tǒng)不等效，需進(jìn)一步臨床驗(yàn)證。60常見(jiàn)體外診斷數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法-定量產(chǎn)品61常見(jiàn)體外診斷數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法-定量產(chǎn)品兩中心系統(tǒng)比值-均值相對(duì)偏倚

46、圖（血清）兩中心匯總系統(tǒng)差值-均值絕對(duì)偏倚圖（血清）凸顯大數(shù)據(jù)凸顯小數(shù)據(jù)62常見(jiàn)體外診斷數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法-定量產(chǎn)品表2-1. 血清相關(guān)系數(shù)（r）及回歸系數(shù)（R2）中心rR2調(diào)整后 R 2.998.9931醫(yī)院2醫(yī)院匯總.999.996.998.998.993.995.995表2-2. 血清回歸的方差分析中心平方和831109.0382016.327833125.365412057.3633081.360415138.7231242482.7135850.133自由度1均方F顯著性回歸831109.038 45340.856 .00018.3301醫(yī)院2醫(yī)院匯總殘差總計(jì)回歸殘差總計(jì)回歸殘差總計(jì)1

47、10111199100412057.363 13238.853 .00031.1251 1242482.713 44813.315 .000211 27.7261248332.846 21263常見(jiàn)體外診斷數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法-定量產(chǎn)品表2-3. 血清回歸的線性擬合方程及其假設(shè)檢驗(yàn)y = 1.0447 + 0.9970 xParameter CoefficientStd. Error0.48030.00369595% CItP中心1中心2匯總InterceptSlope1.04470.9970.09400 to 1.99550.9896 to 1.0043 269.7998 0.00012.175

48、0.0315y = -2.2155 + 0.9844 xParameter CoefficientStd. Error0.47420.00388495% CItPInterceptSlope-2.21550.9844-3.1541 to -1.2770 -4.6723 0.00010.9768 to 0.9921 253.4441 0.0001y = -0.6825 + 0.9919 xParameter CoefficientStd. Error0.39850.0031695% CItPInterceptSlope-0.68250.9919-1.4673 to 0.1024 -1.71250

49、.9856 to 0.9981 313.8474 0.00010.08864常見(jiàn)診斷試劑的分類-定量診斷試劑-回歸分析擬合直線與散點(diǎn)圖殘差圖65常見(jiàn)診斷試劑的分類-定量診斷試劑-回歸分析普通的線性回歸的局限性： 普通的線性回歸是假設(shè)對(duì)照方法不存在偏倚（隨機(jī)誤差），而試驗(yàn)方法存在偏倚。即X軸無(wú)誤差，而Y軸存在誤差。 數(shù)據(jù)（殘差）呈正態(tài)分布66常見(jiàn)診斷試劑的分類-定量診斷試劑-回歸分析（Deming回歸）說(shuō)明： 可以給出臨床接受區(qū)間和曲線95%CI； 可以采用加權(quán)處理。 需要兩種診斷試劑檢測(cè)有恒定的SD或CV； 同時(shí)需要數(shù)據(jù)（殘差）符合正態(tài)分布；67常見(jiàn)診斷試劑的分類-定量診斷試劑-回歸分析（PB

50、回歸）說(shuō)明： Passing-Bablok回歸允許對(duì)照方法和試驗(yàn)方法均存在偏倚（隨機(jī)誤差）。 Passing-Bablok回歸允許檢測(cè)結(jié)果不是正態(tài)分布。6869常見(jiàn)診斷試劑的分類-定量診斷試劑-回歸分析（回歸怎么了？）比較凝血速率指標(biāo)CR和K值Sample size206-0.2176Correlation coefficient rSignificance levelP=0.001795% Confidence interval for r-0.3441 to -0.08341y = 7.9824 + -0.1922 xParameterInterceptSlopeCoefficient7.

51、9824Std.Error1.5996T-value4.9901-3.1848P0.00010.0017-0.19220.0603670常見(jiàn)診斷試劑的分類-定量診斷試劑-回歸分析（回歸怎么了？）K異常60正常14合計(jì)74計(jì)數(shù)總數(shù)的%計(jì)數(shù)異常正常29.10%26.80%13035.90%132CR總數(shù)的%計(jì)數(shù)1.00%6263.10%14464.10%206合計(jì)總數(shù)的%30.10%69.90%100.00%敏感性：（60/60+2）100%=96.00%特異性：（130/14+130）100%=90.00%一致率：（60+130/206）100%=92.00%一致性度量Kappa.825.042

52、11.945.00071常見(jiàn)體外診斷數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法-定量產(chǎn)品表3-1. 偏倚估計(jì)參數(shù)選擇醫(yī)學(xué)決定水平或CutOff值：表3-1. 偏倚估計(jì)參數(shù)選擇72醫(yī)學(xué)決定水平或CutOff值： 40允許誤差來(lái)源：允許誤差：產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)靶值9%允許誤差來(lái)源：允許誤差：Clia881/2靶值20%允許誤差值-6.48 6.48允許誤差值-4 4表3-2. 血清偏倚估計(jì)中心樣本量（n）允許誤差值實(shí)測(cè)誤差結(jié)果判定合格1醫(yī)院2醫(yī)院匯總112101213-6.48 6.48 -2.7072 -0.4688-6.48 6.48 -3.0793 -0.0967-6.48 6.48 -2.4885 0.6875合格合格72

53、常見(jiàn)體外診斷試劑統(tǒng)計(jì)分析方法-ROC分析ROC曲線指受試者工作特征曲線(receiveroperatingcharacteristiccurve),是反映敏感性和特異性連續(xù)變量的綜合指標(biāo),是用構(gòu)圖法揭示敏感性和特異性的相互關(guān)系，它通過(guò)將連續(xù)變量設(shè)定出多個(gè)不同的臨界值，從而計(jì)算出一系列敏感性和特異性，再以敏感性為縱坐標(biāo)、（1-特異性）為橫坐標(biāo)繪制成曲線，曲線下面積越大，診斷準(zhǔn)確性越高。在ROC曲線上，最靠近坐標(biāo)圖左上方的點(diǎn)為敏感性和特異性均較高的臨界值。1.ROC曲線能很容易地查出任意界限值時(shí)的對(duì)疾病的識(shí)別能力。2.選擇最佳的診斷界限值。ROC曲線越靠近左上角,試驗(yàn)的準(zhǔn)確性就越高。最靠近左上角的

54、ROC曲線的點(diǎn)是錯(cuò)誤最少的最好閾值，其假陽(yáng)性和假陰性的總數(shù)最少。3.兩種或兩種以上不同診斷試驗(yàn)對(duì)疾病識(shí)別能力的比較。在對(duì)同一種疾病的兩種或兩種以上診斷方法進(jìn)行比較時(shí)，可將各試驗(yàn)的ROC曲線繪制到同一坐標(biāo)中，以直觀地鑒別優(yōu)劣，靠近左上角的ROC曲線所代表的受試者工作最準(zhǔn)確。亦可通過(guò)分別計(jì)算各個(gè)試驗(yàn)的ROC曲線下的面積(AUC)進(jìn)行比較，哪一種試驗(yàn)的AUC最大，則哪一種試驗(yàn)的診斷價(jià)值最佳。73常見(jiàn)體外診斷試劑統(tǒng)計(jì)分析方法-ROC分析數(shù)據(jù)計(jì)算結(jié)果74常見(jiàn)體外診斷試劑統(tǒng)計(jì)分析方法-ROC分析75常見(jiàn)體外診斷試劑統(tǒng)計(jì)分析方法-Bland-Altman分析BlandAltman分析最初是由Bland JM和AltmanDG于1986年提出的。它的基本思想是計(jì)算出兩種測(cè)量結(jié)