1、神經(jīng)生長因子及受體對乳腺癌作用機(jī)制的研究進(jìn)展【摘要】乳腺癌是嚴(yán)重威脅女性身體安康的疾病之一，發(fā)病率逐年上升。神經(jīng)生長因子nervegrthfatr,NGF及受體NGFreeptr,NGFR在乳腺癌中高表達(dá)，促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞增殖和抗細(xì)胞凋亡作用,降低NGF或應(yīng)用抑制劑阻斷NGF作用處徑將為乳腺癌治療開拓新的途徑?！娟P(guān)鍵詞】乳腺腫瘤神經(jīng)生長因子受體，神經(jīng)生長因子1NGF的發(fā)現(xiàn)1952年Levi-ntalini首次發(fā)現(xiàn)NGF，并通過研究證實(shí)神經(jīng)營養(yǎng)因子neurtrphifatr,NTFs是一類由神經(jīng)元、神經(jīng)支配靶組織或膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生的能促進(jìn)中樞和外周神經(jīng)分化、生長和存活的活性多肽,在神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育和正常

2、的生理功能維持中發(fā)揮重要的作用。隨著更多更新的神經(jīng)營養(yǎng)因子的不斷發(fā)現(xiàn)，提醒出一個(gè)嶄新的家族神經(jīng)生長因子族。目前神經(jīng)生長因子族成員有NGF、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子brainderivedneurtrphifatr,BDNF、神經(jīng)營養(yǎng)因子-3NT-3、神經(jīng)營養(yǎng)因子-4NT-4和神經(jīng)營養(yǎng)因子-6NT-62，而NGF是發(fā)現(xiàn)最早、研究最多的。1973年Angeletti分析并得出NGF的氨基酸序列，1983年Stt和Ulrih先后克隆出小鼠和人NGF的DNA序列3。NGF的基因定位于1P21-22.1，屬神經(jīng)系統(tǒng)、下頜下腺分泌最多。2NGF和NGFR的構(gòu)造與功能2.1NGF和NGFR的構(gòu)造特點(diǎn)NGF是一種含

3、有、和3種亞基的多聚體,表示為2、2,亞基是3種亞基中唯一具有NGF的所有生物學(xué)活性的亞基,由2條含有188個(gè)氨基酸殘基的一樣肽鏈組成。NGFR有2種，分別為相對分子質(zhì)量140103的高親和力受體TrkA和相對分子質(zhì)量為75103的低親和力受體p75。兩者都是型跨膜蛋白，TrkA具有內(nèi)在酪氨酸激酶活性,是NGF的功能性受體，能以高親和力與NGF結(jié)合,結(jié)合后的解離速率緩慢T1/2約為30in。1991年KlEin等3發(fā)現(xiàn)TrkA是TrkA原癌基因編碼的產(chǎn)物,可以抑制某些腫瘤細(xì)胞的有絲分裂。p75是包括TNF受體及T淋巴細(xì)胞特異抗原X40在內(nèi)的細(xì)胞外表蛋白超家族成員之一，是NGF的輔助性受體，構(gòu)造

4、組成及氨基酸序列分析結(jié)果提示，p75不含有細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)構(gòu)造的糖蛋白，與NGF的親和力較低，與NGF結(jié)合后的解離速度快T1/2約為10s，但可以增強(qiáng)NGF與TrkA的結(jié)合力，調(diào)節(jié)TrkA的信號傳導(dǎo)，并與細(xì)胞程序死亡相關(guān)4-6。2.2NGF和NGFR的功能2.2.1在神經(jīng)系統(tǒng)中的表達(dá)NGF是一種由其效應(yīng)神經(jīng)元支配的靶細(xì)胞合成和分泌的多肽生長因子，其效應(yīng)細(xì)胞可分3大類：1神經(jīng)嵴來源的組織細(xì)胞；2中樞神經(jīng)元；3非神經(jīng)元細(xì)胞。NGF對神經(jīng)系統(tǒng)的生物學(xué)效應(yīng)通過與受體TrkA結(jié)合，激活促分裂原活化蛋白激酶APK級聯(lián)效應(yīng)發(fā)揮作用。NGF對調(diào)整神經(jīng)細(xì)胞的死亡和分化既有積極作用又有消極作用7。2.2.2在非神經(jīng)

5、系統(tǒng)中的表達(dá)NGF及NGFR較多分布于神經(jīng)系統(tǒng)，也廣泛存在于上皮、間葉及淋巴造血組織等非神經(jīng)組織，并亦具有調(diào)節(jié)作用。Thsn等8應(yīng)用免疫組織化學(xué)證實(shí)NGFR可以在來自3個(gè)胚層的組織和細(xì)胞中表達(dá)。hesa等9證明在正常組織中，淋巴濾泡內(nèi)的樹突狀細(xì)胞、肌上皮細(xì)胞、血管外膜、口腔黏膜的基底層細(xì)胞和毛囊均表達(dá)NGFR。NGF除了具有神經(jīng)營養(yǎng)功能外，還具有其他生物活性。相關(guān)報(bào)道發(fā)現(xiàn)，NGF能調(diào)節(jié)單核細(xì)胞基因表達(dá)，對黑色素細(xì)胞有趨化作用；也刺激嗜鉻細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及角化細(xì)胞的增殖10。研究說明，NGF能作為強(qiáng)烈的絲裂原促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的分裂，其對腫瘤細(xì)胞的增生發(fā)揮促進(jìn)或抑制作用主要決定于腫瘤細(xì)胞的類型。對乳腺癌

6、、前列腺癌、胰腺癌、嗜鉻細(xì)胞瘤和惡性黑色素瘤等多為促進(jìn)增殖，對食管癌、垂體泌乳腺瘤那么是抑制增殖11。2.2.3在乳腺癌組織中的表達(dá)乳腺癌細(xì)胞各株F-7,T47-D,BT-20,DA-B-231都能分泌NGF，表達(dá)NGFR。正常乳腺上皮細(xì)胞nralbreastepithelialells,NBE不能分泌NGF，但卻能表達(dá)NGFR。但NGF只能與乳腺癌細(xì)胞上的NGFR結(jié)合，發(fā)揮促進(jìn)細(xì)胞的有絲分裂和抗凋亡生物學(xué)效應(yīng)，而對NBE那么沒有此作用12，目前機(jī)制尚不清楚。Desaps等13用RT-PR檢測363例原發(fā)性乳腺癌組織中的NGFR，結(jié)果顯示，TrkA和p75在所有患者腫瘤組織中均表達(dá)；呈正相關(guān),

7、且分別與預(yù)后、分級及腫瘤類型相關(guān)。該研究同時(shí)證實(shí)NGFRRNA在乳腺癌細(xì)胞的表達(dá)與該基因表達(dá)的蛋白質(zhì)的聯(lián)絡(luò)親密。3NGF和NGFR促進(jìn)乳腺癌的作用機(jī)制3.1促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞增殖和抗凋亡的信號傳導(dǎo)通路NGF對細(xì)胞的作用主要通過高親和力受體介導(dǎo),與TrkA結(jié)合后，TrkA自我催化酪氨酸殘基磷酸化，增強(qiáng)自身的酪氨酸激酶活性，這是NGF發(fā)揮生物效應(yīng)的始動(dòng)階段?；罨蟮腡rkA將信號通過ras原癌基因編碼蛋白p21ras向細(xì)胞內(nèi)傳送，隨后RAS/APK信號通路被激活，影響基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯，調(diào)控細(xì)胞生長。NGF與TrkA結(jié)合引發(fā)了信號傳導(dǎo)的瀑布式級聯(lián)反響，促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞增殖。NGF與p75結(jié)合參與介導(dǎo)細(xì)胞凋

8、亡，p75介導(dǎo)的信號傳遞至少有應(yīng)激激酶JunN-terinalkinase，JNK和NF-B兩條途徑，一方面通過JNK基因激活程序性細(xì)胞死亡，另一方面通過激活核因子NF-B延長細(xì)胞的生存期,使之與傳導(dǎo)凋亡信號相平衡。NGF通過調(diào)節(jié)增殖和凋亡之間的平衡而影響腫瘤生長13。Desaps等12對表達(dá)兩種類型NGFR的F-7、T47-D、BT-20和DA-B-231等乳腺癌細(xì)胞株進(jìn)展研究，發(fā)現(xiàn)NGF對乳腺癌細(xì)胞的促分裂作用需要TrkA的酪氨酸激酶活性,通過APK的級聯(lián)效應(yīng)，與p75無關(guān)；反之，NGF的抗凋亡作用需要p75及核轉(zhuǎn)錄因子NF-B的激活，但不需要TrkA，也不需要APK激酶鏈。NF-B抑制劑

9、SN50轉(zhuǎn)染細(xì)胞可以減少NGF的抗凋亡作用。這些資料說明NGF通過兩個(gè)不同的信號途徑刺激人類乳腺癌細(xì)胞增殖和存活,也肯定了p75和NF-B對乳腺癌生存通路激活作用。Desaps等12將100ng/LNGF參加受到2誘導(dǎo)凋亡的乳腺癌細(xì)胞培養(yǎng)基中，結(jié)果顯示乳腺癌細(xì)胞數(shù)目增加，而使受2誘導(dǎo)的凋亡細(xì)胞也獲得復(fù)蘇。目前抑制傳導(dǎo)通路的方法已經(jīng)開場進(jìn)展某些疾病的實(shí)驗(yàn)性治療，例如通過三苯氧胺抑制誘導(dǎo)的乳腺癌細(xì)胞株F-7的增殖15，利用電針刺療法和中草藥下調(diào)大鼠卵巢中NGF的表達(dá)治療多囊卵巢16-17。3.2通過自分泌環(huán)促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞生長目前認(rèn)為正常乳腺上皮細(xì)胞不分泌NGF，NGF由乳腺癌細(xì)胞產(chǎn)生和并過量表達(dá)，

10、其與乳腺癌細(xì)胞膜外表受體結(jié)合后，通過一系列級聯(lián)反響、信號傳導(dǎo)，刺激細(xì)胞增殖和抑制細(xì)胞凋亡，從而促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞生成更多的NGF，形成一個(gè)惡性自分泌環(huán)AutrineLp18。有研究說明類似的自分泌環(huán)也存在于記憶性B淋巴細(xì)胞和前列腺細(xì)胞中19。3.3結(jié)合生長因子受體促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞生長乳腺癌的生長和進(jìn)展受多因子調(diào)控，TrkA與p185HER2共同作用是激活乳腺癌細(xì)胞生長的重要途徑。HER2也稱為-erB2或HER2/neu,屬于EGFR家庭成員，位于染色體17q，編碼185103具有跨膜酪氨酸激酶活性的生長因子受體。該基因在腫瘤中過度表達(dá)，正常組織中表達(dá)程度非常低。Slan等20對189名乳腺癌患者進(jìn)

11、展研究后，首次報(bào)告了原癌基因HEFR2的擴(kuò)增，并指出由于該基因多拷貝的性質(zhì)而導(dǎo)致腫瘤易復(fù)發(fā)和臨床預(yù)后較差。p185HER2是HER家族中一個(gè)激酶受體，NGF誘導(dǎo)酪氨酸磷酸化和刺激p185HER激酶活性，而TrkA磷酸化抑制劑不能影響這一激活作用。應(yīng)用抗p185HER2抗體轉(zhuǎn)染乳腺癌細(xì)胞，可以使p185HER2在乳腺癌中的表達(dá)下調(diào)，減低NGF誘導(dǎo)APK激活作用和乳腺癌細(xì)胞增殖。在乳腺癌細(xì)胞表達(dá)低度TrkA時(shí),NGF通過與其過表達(dá)受體如p185HER2結(jié)合，產(chǎn)生促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞生長的生物信號21。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.3.4影響細(xì)胞周期促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞生長G0期細(xì)胞處于脫離細(xì)胞周期暫時(shí)停頓分裂的一個(gè)階

12、段，DNA合成與細(xì)胞分裂的潛力仍然存在，受到增殖信號刺激時(shí)可以合成DNA，進(jìn)展細(xì)胞分裂。細(xì)胞周期的長短主要取決于G0期。NGF可以誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞從G0期進(jìn)入細(xì)胞循環(huán)，縮短細(xì)胞周期時(shí)間，促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞增殖,但詳細(xì)機(jī)制尚不清楚。4結(jié)語NGF通過與乳腺癌細(xì)胞膜上兩個(gè)不同的受體結(jié)合，激活兩種不同的途徑，并通過自分泌及結(jié)合生長因子受體等方式對人類乳腺癌細(xì)胞發(fā)揮促進(jìn)增殖和抗凋亡作用。研究NGF對乳腺癌的作用機(jī)制，為乳腺癌的治療提供了新的思路。【參考文獻(xiàn)】1GirgiRssiP,aillniL,antelliniP,etal.Breastanerdiagnstiethds:sreen-detetedandl

13、inialases.AnItaliansurveyfensexperienesJ.Turi,2022,935:452-460.2ehlerF,KesslerJA.GrthfatrregulatinfneuraldevelpentJ.DevNeursi,1994,163,4:180-182.3陳昌杰,何蘊(yùn)韶.神經(jīng)生長因子家族J.蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2000,253:231-231.4BlasGutierrezJJserespIJ,ZzayaAlvarezEetal.Trk:anepreditivearkerinbreastanerJ.anerInvest,2022,256:405-410.5E,La

14、gade,PageAetal.NervegrthfatrreeptrTrkAsignalinginbreastanerellsinvlvesKu70tpreventapptsisJ.lellPrteis.2022,611:1842-1854.6elaedI,PatelH,Brdie,etal.AtivatinfVavandRasthrnghthenervegrthfatrandBellreeptrsbydifferentkinasesJ.ellIunl,1999;1912:83-89.7PierttiA,GreA.ngenirearrangeentsftheNTRK1/NGFreeptrJ.a

15、nerLett,2022,2321:90-98.8ThsnT,RettigJ,hesaPG,etal.ExpressinfhuannervegrthfatrreeptrellsderievedfrallthreegerlayersJ.ExpellRes,1988,1742:533-5399hesaPG,RettigJ,ThsnT,etal.IunhistheiaanalysisfnervegrthfatrreeptrexpressininnralandalignanthuantissuesJ.Histheythe,1988,364383-389.10apsX,unzY,SelanAetal.N

16、ervegrthfatranditshigh-affinityreeptrtrkApartiipateinthentrlfvasularendthelialgrthfatrexpressininepithelialvariananerJ.Gynelnl.2022,1041:168-175.11hiarnzaA,LazarviiP,LepereurL,et.al.TaxifeninhibitsnervegrthfatrinduedprliferatinfthehuanbeastaneruselllineF-7J.anerRes,2001,617:3002-3008.12DesapsS,Lebnr

17、hisX,Deleheddeetal.NervegrthfatrisitgenifranerusbutntnralhuanbreastepithelialellsJ.Bilhe,1998;27327:16659-16662.13DesapsS,PalskiV,RenllinFetal.ExpressinfnervegrthfatrreeptrsandthEirprgnstivalueinhuanbreastanerJ.anerRes,2001;6111:4337-4340.14NaderiA,TeshendrffAE,BEIgelJ,etal.BEX2isverexpressedinasubs

18、etfpriarybreastanersandediatesnervegrthfatr/nulearfatr-kappaBinhibitinfapptsisinbreastanerelllinesJ.anerRes,2022,6714:6725-6736.15hiarnzaA,LazarviiP,LepereurL,etal.TaxifeninhibitsnervegrthfatrinduedprliferatinfthehuanbeastaneruselllineF-7J.anerRes,2001,617:3002-3008.16Stener-VitrinE,LundebergT,ajanderS,etal.Sterid-idinduedplyystivariesinrats:effetfeletr-aupunturennentratinsfendthelin-1andnervegrthfatrNGF,andexpressinfNGFRNAinthevaries,theentralnervussysteJ.ReprdBilEndrinl,2022,228:361-369.17LeeJ,PakS,LeeSH,etal.theeffetfherbalediinennervegrthfatrinestradilvalerate-induedply