組織學與胚胎學主講：趙培榮組織學與胚胎學主講：趙培榮1第一章緒論一、組織學與胚胎學的研究內(nèi)容與意義1、組織學定義是用顯微鏡研究正常人體的微細結(jié)構(gòu)及其與功能關(guān)系的科學。2、組織學研究內(nèi)容細胞——組織——器官——系統(tǒng)3、胚胎學定義是研究出生前的個體發(fā)生和生長規(guī)律及其發(fā)育機制的科學。4、胚胎學研究內(nèi)容受精——卵裂——胚泡——胚層——胎兒娩出第一章緒論一、組織學與胚胎學的研究內(nèi)容與意義25、意義組織學是基礎(chǔ)醫(yī)學的一門重要基礎(chǔ)學科，是臨床醫(yī)學的基礎(chǔ)。胚胎學是優(yōu)生優(yōu)育的理論基礎(chǔ)，對臨床診治起指導作用。5、意義3二、組織學與胚胎學的研究方法（一）一般光學顯微鏡技術(shù)光鏡分辨率0.2μm放大倍數(shù)幾百倍至千倍。生物制片技術(shù)1、石蠟組織切片；2、冰凍切片；3、火棉膠切片；4、磨片；5、涂片；6、鋪片；石蠟組織切片的過程：取材——固定——脫水——透明——浸蠟——包埋——切片——染色——封片。二、組織學與胚胎學的研究方法（一）一般光學顯微鏡技術(shù)4HE染色蘇木精（Hematoxylin）伊紅（Eosin）染色堿性染料將嗜堿性物質(zhì)（本身酸性）染成藍色酸性染料將嗜酸性物質(zhì)（本身堿性）染成紅色細胞核中的DNA、RNA細胞質(zhì)中的RNA細胞質(zhì)、膜性結(jié)構(gòu)（線粒體、溶酶體、滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)）HE染色蘇木精（Hemato5光鏡光鏡6HE圖片HE圖片7涂片涂片8組織學與胚胎學第一章緒論課件9（二）組織化學和細胞化學技術(shù)原理：是通過化學反應(yīng)或物理反應(yīng)的原理顯示組織細胞內(nèi)某種化學成分，并可進行定位、定性、半定量研究。如：PAS反應(yīng)（過碘酸—希夫反應(yīng)）多糖PA氧化醛Schiff試劑紫紅色沉淀（二）組織化學和細胞化學技術(shù)原理：是通過化學反應(yīng)或物理反應(yīng)的10PAS圖片PAS圖片11（三）免疫組織化學技術(shù)原理：是應(yīng)用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，檢測組織細胞內(nèi)多肽、蛋白質(zhì)或受體等大分子物質(zhì)的技術(shù)。直接法：用標記的抗體與細胞的相應(yīng)抗原特異性結(jié)合。間接法：標記二抗。靈敏度高于直接法。1.PAP法：其原理是一抗同抗原相結(jié)合，二抗既能同一抗相結(jié)合，又能同PAP復合物相結(jié)合，后者由過氧化物酶和抗過氧化物酶抗體組成，最后以DAB顯色。（三）免疫組織化學技術(shù)原理：是應(yīng)用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理12直接法和間接法圖直接法和間接法圖13PAP法PAP法142.ABC法：是用一抗同抗原結(jié)合，生物素化的二抗再與一抗結(jié)合，最后用親合素-生物素-過氧化物酶復合物處理，使復合物同生物素化的二抗結(jié)合，顯色部位即表明抗原存在的部位。該法比PAP法敏感20-40倍。2.ABC法：是用一抗同抗原結(jié)合，生物素化的二抗再與一抗結(jié)合15ABC法ABC法16（四）電子顯微鏡技術(shù)分辨率0.2nm，放大倍數(shù)幾千倍至幾百萬倍。1.透射電子顯微鏡技術(shù)觀察細胞內(nèi)部的結(jié)構(gòu)。2.掃描電子顯微鏡技術(shù)觀察細胞表面的結(jié)構(gòu)。（四）電子顯微鏡技術(shù)17電鏡電鏡18電鏡技術(shù)過程電鏡技術(shù)過程19電鏡圖片電鏡圖片20組織學與胚胎學第一章緒論課件21(2)掃描電鏡觀察組織C的表面立體結(jié)構(gòu)。掃描電鏡(2)掃描電鏡掃描電鏡22（五）冷凍蝕刻復型是用透射電鏡觀察組織或細胞斷裂面的金屬復制膜。組織經(jīng)甘油處理后快速冷凍（-190℃），高真空下用鋼刀將組織劈開，升溫至-100℃使組織升華，出現(xiàn)自然的凸凹面。先噴一層鉑膜，再噴一層碳膜，以加固鉑膜。用次氯酸等將組織腐蝕掉，清理復型，電鏡觀察。其凸凹結(jié)構(gòu)影像恰與實物相反。此法可以觀察細胞膜內(nèi)部兩層脂質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)。（五）冷凍蝕刻復型是用透射電鏡觀察組織或細胞斷裂面的金屬復制23冷凍蝕刻冷凍蝕刻24（六）細胞培養(yǎng)技術(shù)將人或動物的活細胞在體外適宜的環(huán)境中（如溫度、PH值、營養(yǎng)等）培養(yǎng)成活，可以進行細胞增殖、分化、代謝、吞噬及癌變機理等多方面的研究，獲得體內(nèi)實驗難以達到的目的。（六）細胞培養(yǎng)技術(shù)將人或動物的活細胞在體外適宜的環(huán)境中（如溫25倒置相差顯微鏡倒置相差顯微鏡26細胞培養(yǎng)圖片細胞培養(yǎng)圖片27組織學與胚胎學第一章緒論課件28三、學習組織學與胚胎學應(yīng)注意的幾個要點（一）理論聯(lián)系實際（二）平面與立體的關(guān)系（三）結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系三、學習組織學與胚胎學應(yīng)注意的幾個要點29組織學與胚胎學主講：趙培榮組織學與胚胎學主講：趙培榮30第一章緒論一、組織學與胚胎學的研究內(nèi)容與意義1、組織學定義是用顯微鏡研究正常人體的微細結(jié)構(gòu)及其與功能關(guān)系的科學。2、組織學研究內(nèi)容細胞——組織——器官——系統(tǒng)3、胚胎學定義是研究出生前的個體發(fā)生和生長規(guī)律及其發(fā)育機制的科學。4、胚胎學研究內(nèi)容受精——卵裂——胚泡——胚層——胎兒娩出第一章緒論一、組織學與胚胎學的研究內(nèi)容與意義315、意義組織學是基礎(chǔ)醫(yī)學的一門重要基礎(chǔ)學科，是臨床醫(yī)學的基礎(chǔ)。胚胎學是優(yōu)生優(yōu)育的理論基礎(chǔ)，對臨床診治起指導作用。5、意義32二、組織學與胚胎學的研究方法（一）一般光學顯微鏡技術(shù)光鏡分辨率0.2μm放大倍數(shù)幾百倍至千倍。生物制片技術(shù)1、石蠟組織切片；2、冰凍切片；3、火棉膠切片；4、磨片；5、涂片；6、鋪片；石蠟組織切片的過程：取材——固定——脫水——透明——浸蠟——包埋——切片——染色——封片。二、組織學與胚胎學的研究方法（一）一般光學顯微鏡技術(shù)33HE染色蘇木精（Hematoxylin）伊紅（Eosin）染色堿性染料將嗜堿性物質(zhì)（本身酸性）染成藍色酸性染料將嗜酸性物質(zhì)（本身堿性）染成紅色細胞核中的DNA、RNA細胞質(zhì)中的RNA細胞質(zhì)、膜性結(jié)構(gòu)（線粒體、溶酶體、滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)）HE染色蘇木精（Hemato34光鏡光鏡35HE圖片HE圖片36涂片涂片37組織學與胚胎學第一章緒論課件38（二）組織化學和細胞化學技術(shù)原理：是通過化學反應(yīng)或物理反應(yīng)的原理顯示組織細胞內(nèi)某種化學成分，并可進行定位、定性、半定量研究。如：PAS反應(yīng)（過碘酸—希夫反應(yīng)）多糖PA氧化醛Schiff試劑紫紅色沉淀（二）組織化學和細胞化學技術(shù)原理：是通過化學反應(yīng)或物理反應(yīng)的39PAS圖片PAS圖片40（三）免疫組織化學技術(shù)原理：是應(yīng)用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，檢測組織細胞內(nèi)多肽、蛋白質(zhì)或受體等大分子物質(zhì)的技術(shù)。直接法：用標記的抗體與細胞的相應(yīng)抗原特異性結(jié)合。間接法：標記二抗。靈敏度高于直接法。1.PAP法：其原理是一抗同抗原相結(jié)合，二抗既能同一抗相結(jié)合，又能同PAP復合物相結(jié)合，后者由過氧化物酶和抗過氧化物酶抗體組成，最后以DAB顯色。（三）免疫組織化學技術(shù)原理：是應(yīng)用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理41直接法和間接法圖直接法和間接法圖42PAP法PAP法432.ABC法：是用一抗同抗原結(jié)合，生物素化的二抗再與一抗結(jié)合，最后用親合素-生物素-過氧化物酶復合物處理，使復合物同生物素化的二抗結(jié)合，顯色部位即表明抗原存在的部位。該法比PAP法敏感20-40倍。2.ABC法：是用一抗同抗原結(jié)合，生物素化的二抗再與一抗結(jié)合44ABC法ABC法45（四）電子顯微鏡技術(shù)分辨率0.2nm，放大倍數(shù)幾千倍至幾百萬倍。1.透射電子顯微鏡技術(shù)觀察細胞內(nèi)部的結(jié)構(gòu)。2.掃描電子顯微鏡技術(shù)觀察細胞表面的結(jié)構(gòu)。（四）電子顯微鏡技術(shù)46電鏡電鏡47電鏡技術(shù)過程電鏡技術(shù)過程48電鏡圖片電鏡圖片49組織學與胚胎學第一章緒論課件50(2)掃描電鏡觀察組織C的表面立體結(jié)構(gòu)。掃描電鏡(2)掃描電鏡掃描電鏡51（五）冷凍蝕刻復型是用透射電鏡觀察組織或細胞斷裂面的金屬復制膜。組織經(jīng)甘油處理后快速冷凍（-190℃），高真空下用鋼刀將組織劈開，升溫至-100℃使組織升華，出現(xiàn)自然的凸凹面。先噴一層鉑膜，再噴一層碳膜，以加固鉑膜。用次氯酸等將組織腐蝕掉，清理復型，電鏡觀察。其凸凹結(jié)構(gòu)影像恰與實物相反。此法可以觀察細胞膜內(nèi)部兩層脂質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)。（五）冷凍蝕刻復型是用透射電鏡觀察組織或細胞斷裂面的金屬復制52冷凍蝕刻冷凍蝕刻53（六）細胞培養(yǎng)技術(shù)將人或動物的活細胞在體外適宜的環(huán)境中（如溫度、PH值、營養(yǎng)等）培養(yǎng)成活，可以進行細胞增殖、分化、代謝、吞噬及