輸血前檢查中的

不規(guī)則抗體篩選輸血前檢查中的

不規(guī)則抗體篩選各位來自輸血行業(yè)的朋友:你們好!現(xiàn)向諸位介紹本人在血型血清學臨床實踐工作中的一點體會,供大家參考，歡迎討論指正

各位來自輸血行業(yè)的朋友:你們好!

不規(guī)則抗體的篩選不規(guī)則抗體產(chǎn)生原因：輸血、妊娠對受血者的血清或血漿進行抗體篩查是非常必要的，因為有臨床意義的抗體會導致溶血性輸血反應，破壞輸入的不配合的紅細胞或縮短其壽命，或引起新生兒溶血病。

不規(guī)則抗體的篩選不規(guī)則抗體產(chǎn)生原因：輸血、妊娠不規(guī)則抗體的篩選重要性

抗體篩選的重要性可以在配血前早期發(fā)現(xiàn)和確認具有臨床意義的意外抗體，獲得充足的時間來選擇缺少相應抗原的相配合的血，避免一些可能的情況造成病情延誤

。不規(guī)則抗體的篩選重要性抗體篩選的重要性可以在配

待檢血液樣本要求樣本管上要明確標注能確認被檢者身份的信息。如姓名、住院號等?？刹捎肊DTA抗凝、肝素抗凝以及不抗凝血樣。

EDTA能螯合鈣并阻止補體激活，避免補體附著在篩選紅細胞上引起非特異性反應。

建議不要使用血清分離管：因為管中有凝膠，很難獲得不被凝膠污染的自身紅細胞。溶血的標本不能使用，因為可能掩蓋抗體引起的溶血。自身細胞、篩選細胞使用前最好洗滌待檢血液樣本要求樣本管上要明確標注能確認被檢者身份的信息。病歷信息

臨床診斷妊娠史輸血史近期使用的藥物種族病歷信息抗體篩選的試劑抗體篩選紅細胞抗人球蛋白試劑增強介質(zhì)的添加LissPEG4000酶凝聚胺抗體篩選的試劑抗體篩選紅細胞抗體篩選用的紅細胞

抗體篩選用的紅細胞：雙人份細胞和三人份細胞組。其Rh血型為：CCDee、ccDEE、和ccdee.必須具備全部Rh因子，還應該含有其他常見抗原：M,N,S,s,,Lea,Leb,k,Fya,Fyb,Jka,和Jkb

抗原，還必須具有Dia

抗原?？贵w篩選用的紅細胞抗體篩選用的紅細胞：雙人份兩細胞和三細胞的篩選紅細胞示意圖

RhKellDuffyKiddLewisPMNLutheranXgCellDCcEeKkFyaFybJkaJkbLeaLebP1MNSsLuaLubXgaR1R1++oo++++o++o+o++++o++R2R2+o++oo++++o+o++o++++o

RhKellDuffyKiddLewisPMNLutheranXgCellDCcEeKkFyaFybJkaJkbLeaLebP1MNSsLuaLubXgaR1R1++oo++++o++o+o++++o++R2R2+o++oo++++o+o++o++++orroo+o+o++++o+o+o++++o+兩細胞和三細胞的篩選紅細胞示意圖篩選紅細胞試劑紅細胞是保存在保存液中，一旦用生理鹽水或

Liss液洗滌后則應該在２４小時內(nèi)使用，否則會因污染、抗原（Lewis系統(tǒng)抗原）丟失導致試驗錯誤。篩選紅細胞試劑紅細胞是保存在保存液中，一旦用生理鹽水或L

抗人球蛋白試劑抗人球蛋白分類：單特異性的抗-IgG，抗C3d，多特異性的抗IgG+C3d?？?IgG、抗IgG+C3d的多特異性抗球蛋白試劑都可用于抗體檢測?？笽gG+C3d可增加一些補體依賴稀有抗體的檢出，如Kidd血型系統(tǒng)的一些抗體;與單純的抗IgG相比，抗IgG+C3d與這些需要補體參與反應的抗體可產(chǎn)生更強的反應。

多特異性抗球蛋白試劑的缺點是容易產(chǎn)生假陽性反應。

使用抗IgG可以避免補體引起的非特異反應，但降低了補體依賴抗體的檢測靈敏度?？谷饲虻鞍自噭┛谷饲虻鞍追诸悾簡翁禺愋缘目箍贵w篩選技術（1）技術要求：盡可能多的檢測出有臨床意義的抗體。

(靈敏度高）盡可能少的檢測出無臨床意義的抗體。（特異性好）盡可能快的完成抗體檢測。

（簡單、快速、易操作）抗體篩選技術（1）技術要求：抗體篩選技術（2）選擇的技術不僅要能檢查出不配合的IgM抗體，還必須能檢查出盡可能多的不配合的IgG抗體。最大限度的減少抗體的漏檢。

每種方法都有自己的特點，適應于不同范圍及情況。到目前為止，還沒有任何單一的技術方法可以檢測出所有的血型抗體?？贵w篩選技術（2）選擇的技術不僅要能檢查出不配合的IgM抗體抗體篩選技術（3）在進行抗體篩選時，不能只選用IAT方法，必須同時選用立即離心技術和其他技術。立即離心法是間接抗人球法無法替代的。

抗體篩選技術（3）在進行抗體篩選時，不能只選用IAT方法，必抗體篩選技術（鹽水試驗）立即離心鹽水試驗技術：可以用于檢測IgM性質(zhì)的鹽水反應活性抗體。此方法缺點是檢查出無臨床意義的抗體，如冷凝集素抗－Ｉ及抗－ＩＨ等；且漏檢IgG性質(zhì)的抗體。發(fā)現(xiàn)和確認緡錢現(xiàn)象發(fā)現(xiàn)冷特異性抗體（如抗-Lea)發(fā)現(xiàn)冷自身抗體抗體篩選技術（鹽水試驗）立即離心鹽水試驗技術：可以用于檢測I抗體篩選技術

（經(jīng)典間接抗人球蛋白試驗）

程序：2滴血清、1滴2-5%的紅細胞，37℃孵育45-60分鐘，生理鹽水洗滌3遍后傾倒上清液，控干，加2滴抗人球蛋白試劑，離心后判讀結果。用抗體致敏的紅細胞檢測試驗結果的正確性。優(yōu)點：特異性好。缺點：靈敏度比Liss-IAT、PEG-IAT、凝膠卡差，耗時長?？贵w篩選技術

（經(jīng)典間接抗人球蛋白試驗）程序：2滴血清、1抗體篩選技術

（LISS-間接抗人球蛋白試驗）原理：1、Liss液可以降低紅細胞周圍的離子云，促進

抗體致敏紅細胞。2、降低反應體系中的離子強度，使抗體易于

接近抗原，縮短紅細胞致敏時間優(yōu)點：1、縮短孵育時間

2、使用抗-IgG，可以減少假陽性反應。缺點：1、易出現(xiàn)假陽性反應2、方法的靈敏度要弱于PEG-IAT法程序：2滴血清、1滴2-5%的紅細胞，加2-4滴LISS液后混勻，37℃孵育15分鐘，離心觀察細胞的凝集情況，用生理鹽水洗滌3遍后傾倒上清液，控干，加2滴抗人球蛋白試劑，離心后判讀結果?？贵w篩選技術

（LISS-間接抗人球蛋白試驗）原理：1、Li抗體篩選技術

（PEG-間接抗人球蛋白試驗）原理：1、破壞紅細胞水膜層，使抗原抗體容易結合

2、固定水分子，使反應體系中抗體濃度相對提高（

空間排斥效應）優(yōu)點：1、大幅提高IAT的反應強度和靈敏度

2、特異性好，假陽性反應低于凝聚胺方法。缺點：1、促進自身抗體的檢出

2、不能觀測37孵育后結果3、對于高蛋白血清或血漿，會出現(xiàn)蛋白析出。程序：2滴血清、1滴2-5%的紅細胞，加4滴PEG溶液后混勻，37℃孵育15分鐘，生理鹽水洗滌3遍后傾倒上清液，控干，加2滴抗人球蛋白試劑，離心后判讀結果?？贵w篩選技術

（PEG-間接抗人球蛋白試驗）原理：1、破壞紅抗體篩選技術（酶試驗）原理：蛋白水解酶可破壞紅細胞表面的帶負電荷的唾液酸基團，使紅細胞表面負電荷減少，降低了紅細胞之間的排斥力，縮短了相鄰紅細胞之間的距離，使IgG抗體凝集紅細胞。程序：2滴血清、1滴2-4%紅細胞，加入2滴酶，37℃孵育15分鐘，離心看結果。優(yōu)缺點：酶試驗（菠蘿酶或木瓜酶）：用于輸血前檢查中的抗體篩查，因為酶方法會破壞一些紅細胞抗原，如Ｍ，Ｎ，Ｓ，F(xiàn)ya和Fyb,但酶技術可以增強Rh及Kell系統(tǒng)的抗體檢測。主要用于MNSs系統(tǒng)的抗體檢測。酶可以引起假的陽性和陰性反應。酶試驗可以發(fā)現(xiàn)唯酶介質(zhì)反應性抗體（如唯酶抗E）抗體篩選技術（酶試驗）原理：蛋白水解酶可破壞紅細胞表面

抗體篩選技術（凝膠卡試驗）

試驗原理代替試管，血清與細胞在一個微型管內(nèi)反應每個柱中含有約25-30ul的葡聚糖凝膠。凝膠中還包含有抗人球蛋白成分在離心時，在樣品槽中的RBC在離心力作用下進入凝膠管中。血清與游離的血清蛋白因缺乏足夠的重力留在樣品槽中。實驗操作步驟用含有抗人球蛋白的凝膠微管樣品槽中加入25ul的血清/血漿和50ul懸浮在LISS液中的0.8-1％的RBC37℃中孵育15分鐘，用專用凝膠卡離心機在設定條件下離心

判讀抗體篩選技術（凝膠卡試驗）試驗原理實驗操作步驟減少了試驗人員接觸樣本的頻率，減少接觸感染的機會需要的樣本少在試驗的重復性方面有著極強的一致性，無需細胞洗滌步驟以及對技術的依賴性降低。提供了一個明確的較易判讀的穩(wěn)定的結果，且結果可以保留較長時間供多人判讀，還可以拍照永久保存。靈敏度更高。孵育時間短。15分鐘。凝膠卡試驗的優(yōu)點減少了試驗人員接觸樣本的頻率，減少接觸感染的機會凝膠卡試驗的凝膠卡試驗的缺點要精確調(diào)節(jié)紅細胞濃度至0.8-1％，這較為麻煩。將試劑瓶中的細胞加入試管要比加入如此小的凝膠孔中要容易的多。

緡錢狀凝集與不完全的小血塊樣本也可造成假陽性?？梢詸z出大量臨床無意義的抗體。凝膠卡試驗的缺點要精確調(diào)節(jié)紅細胞濃度至0.8-1％，這較為麻自身對照試驗必要性自身對照：即使用病人自己的血清和自己紅細胞進行抗體檢測。有助于確定抗體篩選陽性結果是同種抗體還是自身抗體、或是緡錢引起。自身對照試驗必要性自身對照：即使用病人自己的血清和自

抗體篩選一般程序患者血清或血漿＋篩選細胞患者血清或血漿＋自身細胞用試管法室溫鹽水離心檢測IgM抗體用抗人球法（試管法、卡）、聚凝胺法、酶法檢測IgG抗體抗體篩選一般程序患者血清或血漿＋篩選細胞抗體篩選結果的分析（1）

在分析抗體篩選結果時，應綜合運用以下資料：受檢血清與每個篩選細胞的反應結果受檢血清與自身細胞的反應結果檢查比較不同反應相的結果，如鹽水介質(zhì)、抗人球蛋白試驗、酶試驗等在試驗中紅細胞與血清孵育后是否溶血陽性反應的強度，有無劑量效應抗體篩選結果的分析（1）在分析抗體篩選結果時，應綜合運抗體篩選結果分析（2）篩選細胞自身細胞解釋+0+0++同種抗體自身抗體自身抗體自身抗體+同種抗體抗體篩選結果分析（2）篩選細胞自身細胞解釋+0同種抗體患者的血漿與篩選細胞在不同的介質(zhì)中反應，若：抗體篩選陰性，只能說明患者血清中沒有針對篩選細胞所具有抗原的抗體，不能排除有抗低頻抗原抗體存在的可能?？贵w篩選陽性，說明患者血清中有意外抗體，可進一步進行抗體鑒定，以確定抗體的特異性。抗體篩選結果分析（3）患者的血漿與篩選細胞在不同的介質(zhì)中反應，若：抗體篩選結果分析自身對照陽性的解釋存在自身抗體，如自身免疫性溶血性貧血患者。輸血反應：如果患者對近期輸入的紅細胞產(chǎn)生同種抗體，其體內(nèi)獻血者的紅細胞被抗體致敏，使自身對照陽性，很容易誤認為是自身抗體。因此了解患者近期輸血史和有無輸血反應十分重要自身對照陽性的解釋存在自身抗體，如自身免疫性溶血性貧血患者。抗體篩選結果的解釋（1）

自身對照陰性患者血清與篩選細胞室溫鹽水和抗人球蛋白試驗均陰性，說明抗體篩選陰性。患者血清與篩選細胞室溫鹽水介質(zhì)凝集，說明有IgM性質(zhì)的同種抗體?；颊哐迮c篩選細胞室溫鹽水介質(zhì)不凝集，抗人球蛋白試驗陽性，說明有IgG性質(zhì)的同種抗體?；颊哐迮c篩選細胞室溫鹽水介質(zhì)凝集，用DTT或2－Me處理血清后，抗人球蛋白試驗陰性，說明只有IgM抗體，沒有IgG性質(zhì)的同種抗體；抗人球蛋白試驗陽性，說明既有IgM抗體還有IgG性質(zhì)的同種抗體?？贵w篩選結果的解釋（1）自身對照陰性抗體篩選結果的解釋（2）

自身對照陽性患者血清與篩選細胞室溫鹽水和抗人球蛋白試驗均陰性，說明抗體篩選陰性?；颊哐迮c篩選細胞室溫鹽水介質(zhì)凝集，說明有IgM性質(zhì)的自身抗體或/和同種抗體?；颊哐迮c篩選細胞室溫鹽水介質(zhì)不凝集，抗人球蛋白試驗陽性，說明有IgG性質(zhì)的自身抗體或/和同種抗體?；颊哐迮c篩選細胞室溫鹽水介質(zhì)凝集，用DTT或2－Me處理血清后，抗人球蛋白試驗陰性，說明沒有IgG性質(zhì)的自身或/和同種抗體；抗人球蛋白試驗陽性，說明還有IgG性質(zhì)的自身或/和同種抗體?？贵w篩選結果的解釋（2）自身對照陽性譜細胞反應結果的判斷對照篩選細胞表，通過陰性排除法可初步看出可能有哪些抗體，再通過譜細胞做抗體鑒定，來確定抗體的特異性譜細胞反應結果的判斷對照篩選細胞表，通過陰性排除法可初步看出微柱凝膠法抗體篩選程序（1）確定待檢樣本符合要求，確定化驗單的檢驗項目包含抗體篩選項目。病歷記錄要包含既往的抗體篩選結果。準備實驗材料：將待用試劑平衡至室溫用Liss液將篩選細胞調(diào)節(jié)到0.8-1%濃度準備好抗IgG微柱凝膠卡，并標記三個微管，分別為1、2、3號。微柱凝膠法抗體篩選程序（1）確定待檢樣本符合要求，確定化驗單微柱凝膠法抗體篩選程序（2）去除已作標記的微管上口的封口膜。按照下表向樣品槽中加入試劑：輕扣凝膠卡，檢查樣品槽中試劑量及液面，保證三管樣品槽中液面均勻且處于同一水平面位置。微管號篩選紅細胞量患者血漿量1一號篩選細胞50微升25微升2二號篩選細胞50微升25微升3三號篩選細胞50微升25微升微柱凝膠法抗體篩選程序（2）去除已作標記的微管上口的封口膜。微柱凝膠法抗體篩選程序（3）置抗IgG凝膠卡于37±1℃孵育箱中孵育15分鐘。取出凝膠卡，用凝膠卡專用離心機離心：將卡放入離心機轉(zhuǎn)子上的卡槽中，注意要保持轉(zhuǎn)子的平衡?？凵想x心機蓋板。啟動運行按鈕。檢查倒計時時間及離心轉(zhuǎn)速符合試驗要求。離心機運轉(zhuǎn)停止且蓋板自動打開后取出凝膠卡。微柱凝膠法抗體篩選程序（3）置抗IgG凝膠卡于37±1℃微柱凝膠法抗體篩選程序（4）結果判定將檢測結果與既往記錄比較。對于抗體篩選陽性的樣本進行抗體鑒定?？笽gG卡結果解釋記錄微管中均無溶血、凝集未檢測出不規(guī)則抗體陰性微管中有任一管出現(xiàn)溶血或凝集存在不規(guī)則抗體陽性微柱凝膠法抗體篩選程序（4）結果判定抗IgG卡結果解釋記錄微抗體鑒定

抗體鑒定：在病人血清不規(guī)則抗體檢查為陽性時，且時間允許的情況下，在交叉配血之前，可以進行簡單的抗體鑒定試驗，確定抗體的特異性，會有助于選擇無對應抗原的相合血。如抗－cE抗體在人群中的相合率為30%?？贵w鑒定抗體鑒定：在病人血清不規(guī)則抗抗體鑒定的一般程序不規(guī)則抗體篩選陽性譜細胞鑒定：室溫鹽水法結果IAT結果必要時添加酶處理譜細胞鑒定得出抗體特異性初步結果被檢者紅細胞上所推測的抗體對應抗原檢測吸收放散試驗進行確認抗體鑒定的一般程序不規(guī)則抗體篩選陽性謝謝！謝謝！

輸血前檢查中的

不規(guī)則抗體篩選輸血前檢查中的

不規(guī)則抗體篩選各位來自輸血行業(yè)的朋友:你們好!現(xiàn)向諸位介紹本人在血型血清學臨床實踐工作中的一點體會,供大家參考，歡迎討論指正

各位來自輸血行業(yè)的朋友:你們好!

不規(guī)則抗體的篩選不規(guī)則抗體產(chǎn)生原因：輸血、妊娠對受血者的血清或血漿進行抗體篩查是非常必要的，因為有臨床意義的抗體會導致溶血性輸血反應，破壞輸入的不配合的紅細胞或縮短其壽命，或引起新生兒溶血病。

不規(guī)則抗體的篩選不規(guī)則抗體產(chǎn)生原因：輸血、妊娠不規(guī)則抗體的篩選重要性

抗體篩選的重要性可以在配血前早期發(fā)現(xiàn)和確認具有臨床意義的意外抗體，獲得充足的時間來選擇缺少相應抗原的相配合的血，避免一些可能的情況造成病情延誤

。不規(guī)則抗體的篩選重要性抗體篩選的重要性可以在配

待檢血液樣本要求樣本管上要明確標注能確認被檢者身份的信息。如姓名、住院號等?？刹捎肊DTA抗凝、肝素抗凝以及不抗凝血樣。

EDTA能螯合鈣并阻止補體激活，避免補體附著在篩選紅細胞上引起非特異性反應。

建議不要使用血清分離管：因為管中有凝膠，很難獲得不被凝膠污染的自身紅細胞。溶血的標本不能使用，因為可能掩蓋抗體引起的溶血。自身細胞、篩選細胞使用前最好洗滌待檢血液樣本要求樣本管上要明確標注能確認被檢者身份的信息。病歷信息

臨床診斷妊娠史輸血史近期使用的藥物種族病歷信息抗體篩選的試劑抗體篩選紅細胞抗人球蛋白試劑增強介質(zhì)的添加LissPEG4000酶凝聚胺抗體篩選的試劑抗體篩選紅細胞抗體篩選用的紅細胞

抗體篩選用的紅細胞：雙人份細胞和三人份細胞組。其Rh血型為：CCDee、ccDEE、和ccdee.必須具備全部Rh因子，還應該含有其他常見抗原：M,N,S,s,,Lea,Leb,k,Fya,Fyb,Jka,和Jkb

抗原，還必須具有Dia

抗原?？贵w篩選用的紅細胞抗體篩選用的紅細胞：雙人份兩細胞和三細胞的篩選紅細胞示意圖

RhKellDuffyKiddLewisPMNLutheranXgCellDCcEeKkFyaFybJkaJkbLeaLebP1MNSsLuaLubXgaR1R1++oo++++o++o+o++++o++R2R2+o++oo++++o+o++o++++o

RhKellDuffyKiddLewisPMNLutheranXgCellDCcEeKkFyaFybJkaJkbLeaLebP1MNSsLuaLubXgaR1R1++oo++++o++o+o++++o++R2R2+o++oo++++o+o++o++++orroo+o+o++++o+o+o++++o+兩細胞和三細胞的篩選紅細胞示意圖篩選紅細胞試劑紅細胞是保存在保存液中，一旦用生理鹽水或

Liss液洗滌后則應該在２４小時內(nèi)使用，否則會因污染、抗原（Lewis系統(tǒng)抗原）丟失導致試驗錯誤。篩選紅細胞試劑紅細胞是保存在保存液中，一旦用生理鹽水或L

抗人球蛋白試劑抗人球蛋白分類：單特異性的抗-IgG，抗C3d，多特異性的抗IgG+C3d?？?IgG、抗IgG+C3d的多特異性抗球蛋白試劑都可用于抗體檢測。抗IgG+C3d可增加一些補體依賴稀有抗體的檢出，如Kidd血型系統(tǒng)的一些抗體;與單純的抗IgG相比，抗IgG+C3d與這些需要補體參與反應的抗體可產(chǎn)生更強的反應。

多特異性抗球蛋白試劑的缺點是容易產(chǎn)生假陽性反應。

使用抗IgG可以避免補體引起的非特異反應，但降低了補體依賴抗體的檢測靈敏度。抗人球蛋白試劑抗人球蛋白分類：單特異性的抗抗體篩選技術（1）技術要求：盡可能多的檢測出有臨床意義的抗體。

(靈敏度高）盡可能少的檢測出無臨床意義的抗體。（特異性好）盡可能快的完成抗體檢測。

（簡單、快速、易操作）抗體篩選技術（1）技術要求：抗體篩選技術（2）選擇的技術不僅要能檢查出不配合的IgM抗體，還必須能檢查出盡可能多的不配合的IgG抗體。最大限度的減少抗體的漏檢。

每種方法都有自己的特點，適應于不同范圍及情況。到目前為止，還沒有任何單一的技術方法可以檢測出所有的血型抗體?？贵w篩選技術（2）選擇的技術不僅要能檢查出不配合的IgM抗體抗體篩選技術（3）在進行抗體篩選時，不能只選用IAT方法，必須同時選用立即離心技術和其他技術。立即離心法是間接抗人球法無法替代的。

抗體篩選技術（3）在進行抗體篩選時，不能只選用IAT方法，必抗體篩選技術（鹽水試驗）立即離心鹽水試驗技術：可以用于檢測IgM性質(zhì)的鹽水反應活性抗體。此方法缺點是檢查出無臨床意義的抗體，如冷凝集素抗－Ｉ及抗－ＩＨ等；且漏檢IgG性質(zhì)的抗體。發(fā)現(xiàn)和確認緡錢現(xiàn)象發(fā)現(xiàn)冷特異性抗體（如抗-Lea)發(fā)現(xiàn)冷自身抗體抗體篩選技術（鹽水試驗）立即離心鹽水試驗技術：可以用于檢測I抗體篩選技術

（經(jīng)典間接抗人球蛋白試驗）

程序：2滴血清、1滴2-5%的紅細胞，37℃孵育45-60分鐘，生理鹽水洗滌3遍后傾倒上清液，控干，加2滴抗人球蛋白試劑，離心后判讀結果。用抗體致敏的紅細胞檢測試驗結果的正確性。優(yōu)點：特異性好。缺點：靈敏度比Liss-IAT、PEG-IAT、凝膠卡差，耗時長。抗體篩選技術

（經(jīng)典間接抗人球蛋白試驗）程序：2滴血清、1抗體篩選技術

（LISS-間接抗人球蛋白試驗）原理：1、Liss液可以降低紅細胞周圍的離子云，促進

抗體致敏紅細胞。2、降低反應體系中的離子強度，使抗體易于

接近抗原，縮短紅細胞致敏時間優(yōu)點：1、縮短孵育時間

2、使用抗-IgG，可以減少假陽性反應。缺點：1、易出現(xiàn)假陽性反應2、方法的靈敏度要弱于PEG-IAT法程序：2滴血清、1滴2-5%的紅細胞，加2-4滴LISS液后混勻，37℃孵育15分鐘，離心觀察細胞的凝集情況，用生理鹽水洗滌3遍后傾倒上清液，控干，加2滴抗人球蛋白試劑，離心后判讀結果?？贵w篩選技術

（LISS-間接抗人球蛋白試驗）原理：1、Li抗體篩選技術

（PEG-間接抗人球蛋白試驗）原理：1、破壞紅細胞水膜層，使抗原抗體容易結合

2、固定水分子，使反應體系中抗體濃度相對提高（

空間排斥效應）優(yōu)點：1、大幅提高IAT的反應強度和靈敏度

2、特異性好，假陽性反應低于凝聚胺方法。缺點：1、促進自身抗體的檢出

2、不能觀測37孵育后結果3、對于高蛋白血清或血漿，會出現(xiàn)蛋白析出。程序：2滴血清、1滴2-5%的紅細胞，加4滴PEG溶液后混勻，37℃孵育15分鐘，生理鹽水洗滌3遍后傾倒上清液，控干，加2滴抗人球蛋白試劑，離心后判讀結果?？贵w篩選技術

（PEG-間接抗人球蛋白試驗）原理：1、破壞紅抗體篩選技術（酶試驗）原理：蛋白水解酶可破壞紅細胞表面的帶負電荷的唾液酸基團，使紅細胞表面負電荷減少，降低了紅細胞之間的排斥力，縮短了相鄰紅細胞之間的距離，使IgG抗體凝集紅細胞。程序：2滴血清、1滴2-4%紅細胞，加入2滴酶，37℃孵育15分鐘，離心看結果。優(yōu)缺點：酶試驗（菠蘿酶或木瓜酶）：用于輸血前檢查中的抗體篩查，因為酶方法會破壞一些紅細胞抗原，如Ｍ，Ｎ，Ｓ，F(xiàn)ya和Fyb,但酶技術可以增強Rh及Kell系統(tǒng)的抗體檢測。主要用于MNSs系統(tǒng)的抗體檢測。酶可以引起假的陽性和陰性反應。酶試驗可以發(fā)現(xiàn)唯酶介質(zhì)反應性抗體（如唯酶抗E）抗體篩選技術（酶試驗）原理：蛋白水解酶可破壞紅細胞表面

抗體篩選技術（凝膠卡試驗）

試驗原理代替試管，血清與細胞在一個微型管內(nèi)反應每個柱中含有約25-30ul的葡聚糖凝膠。凝膠中還包含有抗人球蛋白成分在離心時，在樣品槽中的RBC在離心力作用下進入凝膠管中。血清與游離的血清蛋白因缺乏足夠的重力留在樣品槽中。實驗操作步驟用含有抗人球蛋白的凝膠微管樣品槽中加入25ul的血清/血漿和50ul懸浮在LISS液中的0.8-1％的RBC37℃中孵育15分鐘，用專用凝膠卡離心機在設定條件下離心

判讀抗體篩選技術（凝膠卡試驗）試驗原理實驗操作步驟減少了試驗人員接觸樣本的頻率，減少接觸感染的機會需要的樣本少在試驗的重復性方面有著極強的一致性，無需細胞洗滌步驟以及對技術的依賴性降低。提供了一個明確的較易判讀的穩(wěn)定的結果，且結果可以保留較長時間供多人判讀，還可以拍照永久保存。靈敏度更高。孵育時間短。15分鐘。凝膠卡試驗的優(yōu)點減少了試驗人員接觸樣本的頻率，減少接觸感染的機會凝膠卡試驗的凝膠卡試驗的缺點要精確調(diào)節(jié)紅細胞濃度至0.8-1％，這較為麻煩。將試劑瓶中的細胞加入試管要比加入如此小的凝膠孔中要容易的多。

緡錢狀凝集與不完全的小血塊樣本也可造成假陽性?？梢詸z出大量臨床無意義的抗體。凝膠卡試驗的缺點要精確調(diào)節(jié)紅細胞濃度至0.8-1％，這較為麻自身對照試驗必要性自身對照：即使用病人自己的血清和自己紅細胞進行抗體檢測。有助于確定抗體篩選陽性結果是同種抗體還是自身抗體、或是緡錢引起。自身對照試驗必要性自身對照：即使用病人自己的血清和自

抗體篩選一般程序患者血清或血漿＋篩選細胞患者血清或血漿＋自身細胞用試管法室溫鹽水離心檢測IgM抗體用抗人球法（試管法、卡）、聚凝胺法、酶法檢測IgG抗體抗體篩選一般程序患者血清或血漿＋篩選細胞抗體篩選結果的分析（1）

在分析抗體篩選結果時，應綜合運用以下資料：受檢血清與每個篩選細胞的反應結果受檢血清與自身細胞的反應結果檢查比較不同反應相的結果，如鹽水介質(zhì)、抗人球蛋白試驗、酶試驗等在試驗中紅細胞與血清孵育后是否溶血陽性反應的強度，有無劑量效應抗體篩選結果的分析（1）在分析抗體篩選結果時，應綜合運抗體篩選結果分析（2）篩選細胞自身細胞解釋+0+0++同種抗體自身抗體自身抗體自身抗體+同種抗體抗體篩選結果分析（2）篩選細胞自身細胞解釋+0同種抗體患者的血漿與篩選細胞在不同的介質(zhì)中反應，若：抗體篩選陰性，只能說明患者血清中沒有針對篩選細胞所具有抗原的抗體，不能排除有抗低頻抗原抗體存在的可能。抗體篩選陽性，說明患者血清中有意外抗體，可進一步進行抗體鑒定，以確定抗體的特異性?？贵w篩選結果分析（3）患者的血漿與篩選細胞在不同的介質(zhì)中反應，若：抗體篩選結果分析自身對照陽性的解釋存在自身抗體，如自身免疫性溶血性貧血患者。輸血反應：如果患者對近期輸入的紅細胞產(chǎn)生同種抗體，其體內(nèi)獻血者的紅細胞被抗體致敏，使自身對照陽性，很容易誤認為是自身抗體。因此了解患者近期輸血史和有無輸血反應十分重要自身對照陽性的解釋存在自身抗體，如自身免疫性溶血性貧血患者?？贵w篩選結果的解釋（1）

自身對照陰性患者血清與篩選細胞室溫鹽水和抗人球蛋白試驗均陰性，說明抗體篩選陰性?；颊哐迮c篩選細胞室溫鹽水介質(zhì)凝集，說明有IgM性質(zhì)的同種抗體?；颊哐迮c篩選細胞室溫鹽水介質(zhì)不凝集，抗人球蛋白試驗陽性，說明有IgG性質(zhì)的同種抗體。患者血清與篩選細胞室溫鹽水介質(zhì)凝集，用DTT或2－Me處理血清后，抗人球蛋白試驗陰性，說明只有IgM抗體，沒有IgG性質(zhì)的同種抗體；抗人球蛋白試驗陽性，說明既有IgM抗體還有IgG性