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ANA檢測及臨床應用西寧市第一人民醫(yī)院檢驗科:喬占福抗核抗體的定義傳統(tǒng)定義:針對細胞核成分自身抗體的總稱。廣義定義:針對細胞內(nèi)所有抗原成分的自身抗體總稱。對ANA的理解不再局限于核成分,而是抗核酸和抗核蛋白抗體的總稱。ANA的把抗原分布:細胞核、細胞漿、細胞骨架、細胞分裂周期蛋白等。ENA:抗可提取核抗原,包括SSA,SSB,Scl-70,Jo-1,Sm,RNP/Sm六種靶抗原??购丝贵w的檢測方法間接熒光免疫法具有完整的抗原譜(細胞核和細胞漿)檢測ANA的金標準,具有很高的特異性跟敏感性基質(zhì)組合:HEp-2細胞+組織切片免疫印跡法先將混合性抗原做凝膠電泳,分離開不同的區(qū)帶,然后把區(qū)帶轉(zhuǎn)印到硝酸纖維膜上,加入待檢血清,最后用相應的酶標抗體使相應的抗原帶顯色酶聯(lián)免疫法抗核抗體熒光模型及分類ANA細胞漿細胞核核均質(zhì):核膜型:斑點型:著絲點型核仁型:胞漿顆粒型:胞漿纖維型:分裂期細胞型:
dsDNA、組蛋白和核小體Gp210核糖核蛋白:Sm、nRNP、SSA、SSBCENP-BSel-70、RNA多聚酶等線粒體、Jo-1、核糖體等波形蛋白紡錘體、中間體、中心粒等核均質(zhì)型間期細胞呈均勻熒光分裂期細胞濃縮染色體熒光增強靶抗原:ds-DNA、核小體、組蛋白核膜型Hep-2:間期細胞呈現(xiàn)均勻的熒光核周增強、分裂期細胞濃縮染色體陰性肝片:干細胞呈特征性環(huán)狀熒光靶抗原:gp210斑點型間期細胞呈粗(細)顆粒樣熒光,核仁陰性,分裂期細胞濃縮染色體陰性,染色體周圍呈顆粒樣熒光靶抗原:nRNP、Sm粗顆粒細顆粒核仁型間期細胞核仁陽性、分裂期細胞濃縮染色體陰性靶抗原:Sel-70、RNA多聚酶ds-DNA的檢測核鞭毛體動基體以綠蠅短膜蟲為基質(zhì),其動基體有豐富的天然ds-DNA,一般多以核和動基體同時陽性出現(xiàn),可在鏡下綠色熒光的大小點
IFANA作為總抗體篩查實驗,應該結(jié)合抗體確認試驗為臨床診斷起到更好的指導作用,必要時還應提供抗體效價??购丝贵w的應用抗U1-rRNP抗體:高滴度的抗U1-rRNP抗體是混合性結(jié)締組織病(MCTD,夏普綜合征)的標志,陽性率95-100%,抗體滴度與疾病活動性相關(guān)。在30-40%的系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者中也可檢出抗U1-rRNP抗體,但幾乎總伴有抗Sm抗體??筍m抗體:系統(tǒng)性紅斑狼瘡的特異性抗體,與抗dsDNA抗體一起,是系統(tǒng)性紅斑狼瘡的診斷性指標,但陽性率為30%左右??筍S-A抗體:與各類自身免疫性疾病相關(guān),最常見于干燥綜合征(40-80%)、也見于系統(tǒng)性紅斑狼瘡(30-40%)和原發(fā)性膽汁性肝硬化(20%)中,偶見于慢性活動性肝炎。此外,在100%的新生兒紅斑狼瘡中抗SS-A抗體陽性。該抗體可經(jīng)胎盤傳給胎兒引起炎癥反應和新生兒先天性心臟傳導阻滯??筍S-B抗體:幾乎僅見于干燥綜合征(40-80%)和系統(tǒng)性紅斑狼瘡(10-20%)的女性患者中,男女比例為1:29。在干燥綜合征中抗SS-A抗體和抗SS-B抗體常同時出現(xiàn)??筍cl-70抗體:見于25-75%的進行性系統(tǒng)性硬化癥(彌散型)患者中,因?qū)嶒灧椒ê图膊』顒有远悾⊿cl=硬化癥)。在局限型硬化癥中不出現(xiàn)。抗PM-Scl抗體:常見于多肌炎與硬化癥的重疊綜合征中,50%的該抗體陽性患者為肌炎與硬化癥的重疊綜合征,抗PM-Scl抗體也可見于單獨的多肌炎患者中,陽性率為8%,在彌散型硬化癥中的陽性率為2-5%??笿o-1抗體:見于多肌炎,陽性率為25-35%。常與合并肺間質(zhì)纖維化相關(guān)??怪z點抗體:與局限型進行性系統(tǒng)性硬化癥(CREST綜合征:鈣質(zhì)沉著、Raynaud,s病、食管功能障礙、指硬皮病、遠端血管擴張)有關(guān),陽性率為70-90%。在原發(fā)性膽汁性肝硬化患者中也可檢測到該抗體(陽性率10-30%)。還可出現(xiàn)于雷諾氏綜合征中??筆CNA抗體:PCNA為增殖細胞核抗原,其表達與細胞周期有關(guān)??筆CNA抗體為系統(tǒng)性紅斑狼瘡的特異性抗體,但陽性率僅為3%。有文獻報道,抗PCNA抗體可能與系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者發(fā)展為彌散性增殖性腎小球腎炎有關(guān)。抗dsDNA抗體:對系統(tǒng)性紅斑狼瘡具有很高的特異性。除抗Sm抗體外,抗dsDNA抗體也可作為該病的一個血清學標志,陽性率為40-90%,并且抗dsDNA抗體滴度與疾病的活動度相關(guān),可用于療效監(jiān)控。抗核小體抗體:在系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清中的陽性率為50-95%,特異性幾乎為100%。核小體是細胞染色體的功能亞單位,由DNA和組蛋白以特殊的方式組成??购诵◇w抗體比抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體更早出現(xiàn)于系統(tǒng)性紅斑狼瘡的早期,在系統(tǒng)性紅斑狼瘡的誘導和致病中有重要作用。臨床資料顯示,有15-19%的抗dsDNA抗體陰性的SLE患者中抗核小體抗體陽性。因此聯(lián)合檢測抗dsDNA及抗核小體抗體可提高SLE血清學檢出率??菇M蛋白抗體:抗一種或幾種組蛋白抗體或抗H2A-H2B復合物抗體在藥物(普魯卡因胺、肼酞嗪以及其它藥物)誘導的紅斑狼瘡中比較常見(陽性率為95%)。另外,在30-70%的系統(tǒng)性紅斑狼瘡和15-50%的類風濕性關(guān)節(jié)炎患者中也可檢出抗組蛋白抗體??购颂求wP蛋白抗體:是系統(tǒng)性紅斑狼瘡的特異性標志,陽性率為5-15%。普遍認為ARPA的滴度與SLE的活動性相關(guān),還與SLE合并中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀、腎臟或肝臟受累相關(guān)??筂2抗體:高滴度的抗線粒體2型抗體是原發(fā)性膽汁性肝硬化的標志,陽性率為85-95%,另外,在其它慢性肝臟疾?。?0%)和進行性系統(tǒng)性硬化癥(7-25%)中也可檢出抗M2抗體,但滴度較低??筊o-52抗體:SS-A抗原是一種小核糖核蛋白,由一個RNA
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