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生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)一、糖類(lèi)的性質(zhì)實(shí)驗(yàn)二、可溶性蛋白質(zhì)含量的測(cè)定三、粗脂肪的提取和定量測(cè)定四、維生素C含量測(cè)定五、氨基酸的分離與鑒定——濾紙層析法六、蛋白質(zhì)的性質(zhì)實(shí)驗(yàn)課程任務(wù)對(duì)理論知識(shí)的鞏固和應(yīng)用,培養(yǎng)理論聯(lián)系實(shí)際的意識(shí),培養(yǎng)用基礎(chǔ)知識(shí)分析問(wèn)題、解決問(wèn)題的能力復(fù)習(xí)鞏固實(shí)驗(yàn)基本技能,學(xué)習(xí)新的實(shí)驗(yàn)方法和操作技能,學(xué)習(xí)儀器設(shè)備的使用培養(yǎng)進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn)應(yīng)具備的基本素質(zhì):誠(chéng)實(shí)、科學(xué)、嚴(yán)謹(jǐn)、探索創(chuàng)新精神、能吃苦耐勞等。紀(jì)律每批次人員、分組固定,上課準(zhǔn)時(shí)點(diǎn)名,遲到5min以上者拒絕進(jìn)入教室實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不得高聲閑談嬉笑,必須保持安靜的實(shí)驗(yàn)環(huán)境。愛(ài)護(hù)儀器,不浪費(fèi)藥品,節(jié)約水電,遵守實(shí)驗(yàn)室的安全措施。濾紙、火柴棒、碎玻璃等固體廢棄物切勿丟入水池內(nèi),有毒有害試劑應(yīng)統(tǒng)一回收入廢液桶。儀器或?qū)嶒?yàn)器材如有損壞,應(yīng)自行登記,并立即向指導(dǎo)老師報(bào)告。
保持實(shí)驗(yàn)室的整齊清潔,個(gè)人所帶與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的東西,不得亂放在實(shí)驗(yàn)桌上。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)一切物品,未經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)老師批準(zhǔn)嚴(yán)禁帶出室外,借物必須辦理登記手續(xù)。
每次實(shí)驗(yàn)后各小組清洗干凈實(shí)驗(yàn)器材、打掃本組實(shí)驗(yàn)臺(tái)桌、提交實(shí)驗(yàn)記錄,老師驗(yàn)收合格后方可離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室;每次留下一個(gè)大組負(fù)責(zé)當(dāng)天實(shí)驗(yàn)室的地面衛(wèi)生和公用儀器設(shè)備整理復(fù)位,以及一些其它服務(wù)性工作。最后離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室時(shí),應(yīng)檢查水、電、門(mén)窗等是否關(guān)好。實(shí)驗(yàn)課上禁止播放音樂(lè)、禁止玩游戲。實(shí)驗(yàn)室禁止飲食和吸煙。實(shí)驗(yàn)記錄實(shí)驗(yàn)課前應(yīng)認(rèn)真預(yù)習(xí),將實(shí)驗(yàn)名稱(chēng)、目的和要求、原理、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、操作方法和步驟簡(jiǎn)單扼要地寫(xiě)在記錄本上
實(shí)驗(yàn)中觀(guān)察到的現(xiàn)象,結(jié)果和數(shù)據(jù)應(yīng)及時(shí)如實(shí)地記在記錄本上。絕對(duì)不可以用單片紙做記錄或草稿。原始記錄必須準(zhǔn)確、簡(jiǎn)練詳盡、清楚。從實(shí)驗(yàn)開(kāi)始就應(yīng)養(yǎng)成這種良好的習(xí)慣。記錄時(shí)應(yīng)做到正確記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果,切勿夾雜主觀(guān)因素,并根據(jù)儀器的精確度準(zhǔn)確記錄有效數(shù)字。重復(fù)觀(guān)測(cè)時(shí)即使數(shù)據(jù)完全相同也應(yīng)如實(shí)記錄下來(lái)
實(shí)驗(yàn)中使用儀器的類(lèi)型,編號(hào)以及試劑的規(guī)格、化學(xué)式、分子量準(zhǔn)確的濃度等,都應(yīng)記錄清楚,以便總結(jié)實(shí)驗(yàn)時(shí),進(jìn)行核對(duì)和作為查找失敗原因的參考依據(jù)
實(shí)驗(yàn)報(bào)告的格式實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,應(yīng)及時(shí)整理和總結(jié)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)報(bào)告,報(bào)告的形式可參照下列方式:
實(shí)驗(yàn)時(shí)間
實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱(chēng)實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)一、目的和要求:
二、原理:三、實(shí)驗(yàn)材料及預(yù)處理四、試劑及配制五、實(shí)驗(yàn)儀器:
六、操作步驟:七、實(shí)驗(yàn)結(jié)果(數(shù)據(jù)記錄及處理):八、討論:報(bào)告書(shū)寫(xiě)總體說(shuō)明在實(shí)驗(yàn)報(bào)告中,目的和要求、原理以及操作步驟部分應(yīng)簡(jiǎn)單扼要的敘述。但是,對(duì)于實(shí)驗(yàn)條件(試劑配制及儀器)和操作的關(guān)鍵環(huán)節(jié)必須寫(xiě)清楚。實(shí)驗(yàn)結(jié)果部分:應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)的要求將一定實(shí)驗(yàn)條件下獲得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果和數(shù)據(jù)進(jìn)行整理、歸納,分析和對(duì)比,并盡量總結(jié)成各種圖表,如原始數(shù)據(jù)及其處理的表格,標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)圖以及比較實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照實(shí)驗(yàn)結(jié)果的圖表等。另外,還針對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行必要的說(shuō)明和分析。討論部分:可以包括關(guān)于實(shí)驗(yàn)方法(或操作技術(shù))的一些問(wèn)題、實(shí)驗(yàn)的正常結(jié)果和異?,F(xiàn)象以及思考題進(jìn)行探討,對(duì)于實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的認(rèn)識(shí)、體會(huì)和建議,對(duì)實(shí)驗(yàn)課的改進(jìn)意見(jiàn)等??己朔绞綄?shí)驗(yàn)操作占35%,實(shí)驗(yàn)報(bào)告占60%,考勤占5%操作分主要根據(jù)預(yù)習(xí)記錄和實(shí)驗(yàn)過(guò)程記錄,結(jié)合課堂表現(xiàn)評(píng)分Molish(紫環(huán))反應(yīng)原理糖在濃無(wú)機(jī)酸作用下脫水生成糠醛及糠醛衍生物,后者與α-萘酚生成紫紅色物質(zhì)。該反應(yīng)不是糖類(lèi)的特異性反應(yīng)(丙酮、甲酸、乳酸、草酸和葡萄糖醛酸)對(duì)葡萄糖的檢出極限可達(dá)0.001%,對(duì)蔗糖的檢出極限可達(dá)0.0001%。10Molish反應(yīng)操作方法在試管中加入1mL樣品水溶液,滴入4滴10%的α-萘酚乙醇溶液,混合均勻后將試管傾斜約45度,沿管壁慢慢加入1mL濃硫酸(勿搖動(dòng))。此時(shí)樣品在上層,硫酸在下層、若在兩層交界處出現(xiàn)紫色的環(huán),表明樣品中含有糖類(lèi)化合物。Seliwanoff(謝里瓦諾夫)反應(yīng)(間苯二酚反應(yīng))酮糖脫水生成羥甲基糠醛,后者與間苯二酚作用生成紅色物質(zhì)醛糖在同樣條件下反應(yīng)緩慢,只有在糖濃度較高或煮沸時(shí)間較長(zhǎng)時(shí)才呈微弱的陽(yáng)性反應(yīng)Seliwanoff反應(yīng)Seliwanoff反應(yīng)操作要點(diǎn)注意試劑添加量:糖溶液0.5ml,塞氏試劑1-2ml混勻,同時(shí)放入沸水浴注意觀(guān)察各管顏色變化的時(shí)間及顏色的變化過(guò)程,并做好記錄
塞氏試劑:溶解50mg間苯二酚(resorcinol)于100mL鹽酸(鹽酸:水=1:2v/v)中
Seliwanoff反應(yīng)操作方法在試管中加入5滴2%
(1滴5%)的樣品溶液,再加人10滴(1mL)間苯二酚鹽酸試劑,在沸水浴中加熱,記錄溶液轉(zhuǎn)變?yōu)榧t色所需要的時(shí)間。若溶液在1~2分鐘內(nèi)變?yōu)榧t色,說(shuō)明樣品為酮糖。否則為醛糖。還原糖的鑒定原理糖類(lèi)分子中的還原性基團(tuán)在堿性條件下將Cu2+還原成Cu+,生成Cu2O沉淀。沉淀顏色與沉淀顆粒大小有關(guān),沉淀顆粒大小與反應(yīng)速度有關(guān):速度慢顆粒大顏色偏紅,速度快顆粒小顏色偏黃。反應(yīng)速度取決于糖的濃度和還原性的強(qiáng)弱還原糖的鑒定操作方法取Fehling試劑A,B兩種溶液各1.0mL在試管中混勻,再加入4滴1%的樣品溶液,在沸水浴中加熱2~3分鐘,若有紅色或黃綠色沉淀生成,表明樣品為還原性糖。Fehling試劑A,B:試劑A:稱(chēng)取3.5g五水合硫酸銅溶于100mL蒸餾水中。
試劑B:稱(chēng)取17g五結(jié)晶水酒石酸鉀鈉溶于20mL熱水中,然后加入20mL含5gNaOH水溶液,稀釋到100mLBenedic試劑:400mL水中加85g檸檬酸鈉和50g無(wú)水碳酸鈉;②50mL加熱的水中加入8.5g無(wú)水硫酸銅。制成CuSO4溶液;③把CuSO
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