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2017年執(zhí)業(yè)藥師考試《中藥學專業(yè)知識一》沖分知識點整理(四)(3)沉淀反應(yīng):利用藥材的某些化學成分能與某些試劑產(chǎn)生特殊的沉淀反應(yīng)來鑒別。如山豆根的70%乙醇提取液,蒸干,殘渣用1%鹽酸溶解,濾液加碘化汞鉀,生成明顯的淡黃色沉淀。赤芍用水提取,濾液加三氯化鐵,生成藍黑色沉淀。蘆薈水提液,加等量飽和溴水,生成黃色沉淀。(4)泡沫反應(yīng)和溶血指數(shù)的測定:利用皂苷的水溶液振搖后能產(chǎn)生持久性的泡沫和溶解紅細胞的性質(zhì),可測定含皂苷成分藥材的泡沫指數(shù)或溶血指數(shù)作為的泡沫和溶解紅細胞的性質(zhì),可測定含皂苷成分藥材的泡沫指數(shù)或溶血指數(shù)作為質(zhì)量指標。如《中國藥典》用泡沫反應(yīng)鑒別豬牙皂。(5)微量升華:是利用中藥中所含的某些化學成分,在一定溫度下能升華的性質(zhì),獲得升華物,在顯微鏡下觀察其結(jié)晶形狀、顏色及化學反應(yīng)作為鑒別特征。如大黃粉末升華物有黃色針狀(低溫時)、枝狀和羽狀(高溫時)結(jié)晶,在的性質(zhì),獲得升華物,在顯微鏡下觀察其結(jié)晶形狀、顏色及化學反應(yīng)作為鑒別特征。如大黃粉末升華物有黃色針狀(低溫時)、枝狀和羽狀(高溫時)結(jié)晶,在結(jié)晶上加堿液則呈紅色,可進一步確證其為蒽醌類成分。薄荷的升華物為無色針簇狀結(jié)晶(薄荷腦),加濃硫酸2薄荷的升華物為無色針簇狀結(jié)晶(薄荷腦),加濃硫酸2滴及香草醛結(jié)晶少1滴即變紫紅色。1滴即變紫紅色。牡丹皮、徐長卿根的升華物為長柱狀或針狀、羽狀結(jié)晶(丹皮酚)斑蝥的升華物(在30口□斑蝥的升華物(在30口□140℃□□□□□□□□□□□□□□□□□,加堿液溶解,再加酸又析出結(jié)晶。1味藥)中1味藥)中鑒別大黃;萬應(yīng)錠(9味藥)中鑒別胡黃連;牛黃解毒片(鑒別大黃;萬應(yīng)錠(9味藥)中鑒別胡黃連;牛黃解毒片(8味藥)中鑒別冰片等。(6)顯微化學反應(yīng):顯微化學反應(yīng)是將中藥粉末、切片或浸出液,置于載玻片上,滴加某些化學試劑使產(chǎn)生沉淀、結(jié)晶或特殊顏色,在顯微鏡下觀察進行
玻片上,滴加某些化學試劑使產(chǎn)生沉淀、結(jié)晶或特殊顏色,在顯微鏡下觀察進行鑒定的一種方法。如黃連滴加30%鑒定的一種方法。如黃連滴加30%硝酸,可見針狀小檗堿硝酸鹽結(jié)晶析出。紫蘇葉的某些表皮細胞中含有紫色素,表面制片觀察時,滴加10%鹽酸溶液立即顯紅色;或滴加5%氫氧化鉀溶液,即顯鮮綠色,然后變?yōu)辄S綠色。丁香切片滴加3%氫氧化鈉的氯化鈉飽和溶液,油室內(nèi)有針狀丁香酚鈉結(jié)晶□□□□□□□□□□□□2口3□,□□□,□□2%鹽酸苯肼1□,□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□0.5g,加水3口4ml及稀硫酸1滴,微熱數(shù)分鐘,取濾液于載玻片上,加碘化鉍鉀試液1滴,即發(fā)生混濁,放置后可見石榴紅色球形或方形結(jié)晶(檳榔堿)。顯微化學定位試驗:利用顯微和化學方法,確定中藥有效成分在中藥組織構(gòu)造中的部位,稱顯微化學定位試驗。如北柴胡橫切片加1滴無水乙醇-濃硫酸(1:1)液,在顯微鏡下觀察可見木栓層、栓內(nèi)層和皮層顯黃綠色至藍綠色,示其有效成分柴胡皂苷存在于以上部位。直立百部鮮塊根切片,滴加氯化金試液,于皮層細胞中有微黃色玫瑰花狀結(jié)晶(生物堿)。(7)熒光分析:利用中藥中所含的某些化學成分,在紫外光或自然光下能產(chǎn)生一定顏色的熒光性質(zhì)進行鑒別。①直接取中藥飲片、粉末或浸出物在紫外光燈下進行觀察。例如國產(chǎn)沉香與進口沉香的顯微特征比較近似,但在熒光顯微鏡下觀察,國產(chǎn)沉香粉末中部分顆粒顯海藍色,部分顯灰綠色熒光;進口沉香粉末的部分顆粒顯竹篁綠色,部分顯枯綠色熒光。含有傘形花內(nèi)酯成分的藥材,新鮮切片顯亮綠色熒光,如常山等。浙貝母粉末在紫外光燈下顯亮淡綠色熒光。秦皮的水浸出液在自然光下顯碧藍色熒光。②有些中藥本身不產(chǎn)生熒光,但用酸、堿或其他化學方法處理后,可使某些成分在紫外光燈下產(chǎn)生可見熒光。例如蘆薈水溶液與硼砂共熱,②有些中藥本身不產(chǎn)生熒光,但用酸、堿或其他化學方法處理后,可使某些成分在紫外光燈下產(chǎn)生可見熒光。例如蘆薈水溶液與硼砂共熱,所含蘆薈素即起0.5%醋酸鎂甲醇溶反應(yīng),顯黃綠色熒光。枳殼乙醇浸出液滴在濾紙上,干后噴0.5%醋酸鎂甲醇溶生熒光現(xiàn)象。③有些中藥表面附有地衣或真菌,也可能有熒光出現(xiàn)。因此熒光分析還可用③有些中藥表面附有地衣或真菌,也可能有熒光出現(xiàn)。因此熒光分析還可用于檢查某些中藥的變質(zhì)情況。④利用熒光顯微鏡觀察中藥化學成分存在的部位。如黃連含小檗堿成分,于檢查某些中藥的變質(zhì)情況。④利用熒光顯微鏡觀察中藥化學成分存在的部位。如黃連含小檗堿成分,斷面在紫外光燈下,顯金黃色熒光,木質(zhì)部尤為顯著,說明在木質(zhì)部小檗堿含量斷面在紫外光燈下,顯金黃色熒光,木質(zhì)部尤為顯著,說明在木質(zhì)部小檗堿含量較高。用熒光法鑒別,需將藥材(包括斷面、浸出物等)或經(jīng)酸、堿處理后,置紫外光燈下約10cm處觀察所產(chǎn)生的熒光現(xiàn)象。紫外光波長為365nm外光燈下約10cm處觀察所產(chǎn)生的熒光現(xiàn)象。紫外光波長為365nm,如用短波254口265nm時,應(yīng)加以說明,因兩者熒光現(xiàn)象不同。(8)光譜和色譜鑒別:常用的有紫外可見分光光度法、紅外分光光度法、薄層色譜法、高效液相色譜法、氣相色譜法等。(五)其他鑒定方法和技術(shù)隨著現(xiàn)代自然科學技術(shù)的發(fā)展,許多高新實驗技術(shù)和新學科理論不斷滲透到中藥鑒定領(lǐng)域,使中藥鑒定學成為多學科的匯集點,并向高速化、信息化、標準化方向邁進。除上述鑒定方法外,目前中藥鑒定的新技術(shù)和新方法簡介如下。.DNA分子遺傳標記技術(shù)比較物種間DNA分子的遺傳多樣性的差異來鑒別中藥的基原,確定其學名的方法就是DNA□□□□□□□□□《中國藥典》將聚合酶鏈反應(yīng)-限制性內(nèi)切酶長度多態(tài)性方法,用于川貝母、烏梢蛇、蘄蛇的鑒別。.中藥指紋圖譜鑒定技術(shù)中藥指紋圖譜系指中藥原料藥材、飲片、半成品、成品等經(jīng)適當處理后,采用一定的分析手段,得到的能夠標示其特征的共有峰的圖譜。中藥材指紋圖譜能客觀地揭示和反映中藥內(nèi)在質(zhì)量的整體性和特征性,用以評價中藥的真實性、有效性、穩(wěn)定性和一致性?!吨袊幍洹穼⒏咝б合嗵卣髦讣y圖譜用于羌活、沉香的鑒別。二、中藥的安全性檢測(一)內(nèi)源性有毒、有害物質(zhì)及檢測中藥中主要的內(nèi)源性有毒、有害特質(zhì)是指中藥本身所含的具有毒副作用的化學成分。這些化學成分大多為生物的次生代謝產(chǎn)物,如:□□□□□□□□□□,□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□青木香、馬兜鈴、天仙藤、朱砂蓮等藥材中?!酢酢酢酢酢酢酢酢酢酢酢酢酢?□□□□□□□□□□□□□□□□③有些成分具雙重作用,即在一定劑量內(nèi)能產(chǎn)生藥效,而配伍不當或服用過量時可產(chǎn)生不同程度的毒副作用,如烏頭堿、苦杏仁苷、士的寧、斑蝥素等,朱砂、雄黃、信石等藥材中所含的成分。目前對中藥中肝毒性成分吡咯里西啶生物堿、腎毒性成分馬兜鈴酸等常用的檢測方法是高效液相色譜法、高效毛細管電泳及其與質(zhì)譜聯(lián)用等技術(shù)?!吨袊幍洹穼Χ拘猿煞稚飰A等采用高效液相色譜法,如制川烏、制草烏、
《中國藥典》對毒性成分生物堿等采用高效液相色譜法,如制川烏、制草烏、附子中的雙酯型生物堿(以含新烏頭堿、次烏頭堿、烏頭堿的總量計)進行限量檢查;馬錢子中的士的寧,斑蝥中的斑蝥素等設(shè)定了含量范圍。使用高效液相色譜-□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□,□□了常規(guī)測定方法無法解決的問題。(二)外源性有害物質(zhì)及檢測.重金屬及有害元素重金屬是指在規(guī)定實驗條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯色的金屬雜質(zhì),如鉛、鎘、汞、銅等。測定重金屬總量用硫代乙酰胺或硫化鈉顯色反應(yīng)比色法,測定鉛、鎘、汞、銅重金屬元素采用原子吸收光譜法和電感耦合等離子體質(zhì)譜法?!吨袊幍洹芬?guī)定,甘草、黃芪、丹參、白芍、西洋參、金銀花、枸杞子、山楂、阿膠、□□□□□□□□5mg/kg,鎘不得過0.3mg/kg,汞不得過0.2mg/kg,銅不得過20mg/kg。砷鹽檢查:《中國藥典》采用古蔡氏法或二乙基硫代氨基甲酸銀法兩種方法□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□20mg/kg;□□□□□□□□10mg/kg;□□□□□□□□2mg/kg;□□□□□□□□2mg/kg?!酢酢酢酢酢跻?guī)定用原子吸收分光光度法和電感耦合等離子體質(zhì)譜法測定砷元素,并規(guī)定甘草、黃芪、丹參、西洋參、白芍、金銀花、枸杞子、山楂、阿膠、牡蠣等含砷不得過2mg/kg。.農(nóng)藥殘留量農(nóng)藥的種類很多,主要有有機氯、有機磷和擬除蟲菊酯類等。其中有機氯類農(nóng)藥的種類很多,主要有有機氯、有機磷和擬除蟲菊酯類等。其中有機氯類農(nóng)藥中滴滴涕(DDT)和六六六(BHC)是使用最久、數(shù)量最多的農(nóng)藥?!吨袊幍洹穼θ藚ⅰ⑽餮髤?、甘草和黃芪有機氯農(nóng)藥的殘留量進行了規(guī)定,六六六(BHC)不得超過0.2mg/kg;滴滴涕(DDT)不得超過0.2mg/kg;五氯硝基苯(PCNBM得超過0.1mg/kg;人參、西洋參還規(guī)定,六氯苯不得過0.1mg/kg;七氯不得過0.05mg/kg;艾氏劑不得過0.05mg/kg;氯丹不得過0.1mg/kg。有機磷農(nóng)藥常見的有敵敵畏、硫磷、樂果等?!吨袊幍洹凡捎脷庀嗌V法測定藥材及制劑中部分有機氯、有機磷和擬除蟲菊酯類的農(nóng)藥殘留量。3.黃曲霉毒素黃曲霉毒素為黃曲霉等的代謝產(chǎn)物,是強烈的致癌物質(zhì)。《中國藥典》規(guī)定用高效液相色譜法測定藥材、飲片及制劑中的黃曲霉毒素(以黃曲霉毒素B1、農(nóng)藥中滴滴涕(DDT)和六六六(BHC)是使用最久、數(shù)量最多的農(nóng)藥?!吨袊幍洹穼θ藚ⅰ⑽餮髤?、甘草和黃芪有機氯農(nóng)藥的殘留量進行了規(guī)定,六六六(BHC)不得超過0.2mg/kg;滴滴涕(DDT)不得超過0.2mg/kg;五氯硝基苯(PCNBM得超過0.1mg/kg;人參、西洋參還規(guī)定,六氯苯不得過0.1mg/kg;七氯不得過0.05mg/kg;艾氏劑不得過0.05mg/kg;氯丹不得過0.1mg/kg。有機磷農(nóng)藥常見的有敵敵畏、硫磷、樂果等?!吨袊幍洹凡捎脷庀嗌V法測定藥材及制劑中部分有機氯、有機磷和擬除蟲菊酯類的農(nóng)藥殘留量。3.黃曲霉毒素黃曲霉毒素為黃曲霉等的代謝產(chǎn)物,是強烈的致癌物質(zhì)?!吨袊幍洹芬?guī)定用高效液相色譜法測定藥材、飲片及制劑中的黃曲霉毒素(以黃曲霉毒素B1、B2、G1、和G2總量計)的限量。4.二氧化硫殘留量有的中藥材在加工或儲藏中常使用硫黃熏蒸以達到殺菌防腐、漂白藥材的目的。目前許多國家對藥品或食品中殘留的二氧化硫均作了嚴格的限量?!吨袊幍洹酚盟釅A滴定法、氣相色譜法、離子色譜法分別作為第一法、第二法、第三法測定經(jīng)硫黃熏蒸處理過的藥材或飲片中二氧化硫的殘留量。規(guī)定二氧化硫殘留量不得過400mg/kg的藥材有:山藥、天冬、天花粉、天麻、牛膝、白及、白術(shù)、白芍、黨參、粉葛等。三、中藥的質(zhì)量評價目前對中藥質(zhì)量優(yōu)劣的評價,除臨床療效的評價外,??赏ㄟ^中藥傳統(tǒng)的經(jīng)驗鑒別、中藥純度檢查及與藥效相關(guān)的化學成分的定性、定量分析來評價。以生物統(tǒng)計為工具,此外,中藥生物活性測定法是以藥物的生物效應(yīng)為基礎(chǔ),以生物統(tǒng)計為工具,運用特定的實驗設(shè)計,測定藥物有效性的一種方法,也能起到控制藥物質(zhì)量的作用。(一)傳統(tǒng)經(jīng)驗鑒別中藥的性狀因其物種、生物遺傳因素、產(chǎn)地、環(huán)境、栽培、采收加工、炮制等因素的影響而與其形狀、組織構(gòu)造、化學成分和臨床療效有著密切關(guān)系,中藥的性狀特征不僅成為中藥質(zhì)量的外觀標準,同時也是內(nèi)在質(zhì)量的客觀表征。中藥傳統(tǒng)經(jīng)驗鑒別對中藥質(zhì)量評價的核心是中藥的“形、色、氣、味”。自古認為東北的“關(guān)防風”以其“蚯蚓頭,質(zhì)松泡”為道地;茅蒼術(shù)以“斷面朱砂點多,香氣濃者為佳”,其朱砂點正是其油室中含有橙黃色或紅棕色分泌物而形成;紅花以色紅而鮮艷者為佳,現(xiàn)代研究證實,其紅色素正是其活血化瘀的療效物質(zhì);黃連、黃柏以其色黃、味極苦為佳,這是因為其所含藥效物質(zhì)生物堿類成分色黃、味苦,含量越高色越黃味越苦;玄參、生地黃均以斷面烏黑者為佳,這是與其有效成分環(huán)烯醚萜苷有關(guān)。很多以香氣濃者為佳的中藥材如傘形科的川芎、當歸、白芷,唇形科的薄荷、荊芥,樟科的肉桂,桃金娘科的丁香,姜科的豆蔻、砂仁,菊科的木香、川木香,蕓香科的陳皮、枳殼、香櫞以及樹脂類藥材蘇合香、安息香等,無不與其所含的藥效物質(zhì)為揮發(fā)油或游離芳香酸有關(guān)。甘草味甜而特殊是因其含藥效成分甘草甜素;以味極酸者為佳的烏梅與其含大量有機酸有關(guān);以味苦為佳的穿心蓮是因為其含苦味的二萜內(nèi)酯類成分如穿心蓮內(nèi)酯等;以味澀為佳的五倍子、兒茶是因其含大量的鞣質(zhì);而以辛辣味濃為佳
蓮內(nèi)酯等;以味澀為佳的五倍子、兒茶是因其含大量的鞣質(zhì);而以辛辣味濃為佳的干姜、生姜則因其所含姜酚類成分而呈特殊的姜辣味?!酢酢酢酢酢酢踔兴幍募兌扰c中藥質(zhì)量密切相關(guān),常影響中藥質(zhì)量的優(yōu)劣程度和臨床用藥劑量的準確性。《中國藥典》中與純度相關(guān)的檢查主要包括雜質(zhì)檢查、水分測定、干燥失重、灰分測定、色度檢查、酸敗度測定等,并已成為中藥質(zhì)量評價中的常規(guī)檢查項。.雜質(zhì)檢查雜質(zhì)是指藥材中混存的來源與規(guī)定相同,但其性狀或部位與規(guī)定不符;或來源與規(guī)定不同的有機質(zhì)或無機雜質(zhì),如砂石、泥土、塵土等。造成雜質(zhì)超標的原因:中藥常因采收、加工不規(guī)范,造成非藥用部位、泥塊、塵土及異物如雜草及有毒物質(zhì)或已破碎腐爛變質(zhì)的藥用部位混入藥材中;或在運輸與貯藏中混入無機、有機雜質(zhì);或因貯存養(yǎng)護不當造成中藥生蟲、霉變等變質(zhì)現(xiàn)象,變質(zhì)藥材也應(yīng)作雜質(zhì)處理;另外,人為地摻雜使假常造成雜質(zhì)超標。中藥中雜質(zhì)的混存,直接影響藥材的純度,這些雜質(zhì)的存在將直接影響中藥的質(zhì)量和使用藥劑量不準確,降低臨床療效,若是含有有毒雜質(zhì)還會危及患者生命安全,故對中藥中的雜質(zhì)必須加以限量檢查,如《中國藥典》規(guī)定廣藿香雜質(zhì)不得過2%,金錢草雜質(zhì)不得過8%等。.水分測定中藥中含有過量的水分,最容易造成中藥霉爛變質(zhì),使有效成分分解,且相對減少了實際用量而影響治療效果,因此,控制中藥中的水分含量對保證中藥質(zhì)量有密切關(guān)系。《中國藥典》對大多數(shù)藥材和飲片規(guī)定了水分的限量,如人參不得過12.0%,紅花不得過得過12.0%,紅花不得過13.0%,阿膠不得過15.0%等。水分測定法:《中國藥典》規(guī)定水分測定法有五種:第一法(費休氏法)包括容量滴定法和庫侖滴定法。第二法(烘干法)適用于不含和少含揮發(fā)性成分的藥品,如三七、廣棗等。第三法(減壓干燥法)適用于含揮發(fā)性成分的貴重藥品,水分測定法:《中國藥典》規(guī)定水分測定法有五種:第一法(費休氏法)包括容量滴定法和庫侖滴定法。第二法(烘干法)適用于不含和少含揮發(fā)性成分的藥品,如三七、廣棗等。第三法(減壓干燥法)適用于含揮發(fā)性成分的貴重藥品,如厚樸花、蜂膠等。第四法(甲苯法)適用于含揮發(fā)性成分的藥品,如肉桂、肉豆蔻、砂仁等。第五法(氣相色譜法),如辛夷。豆蔻、砂仁等。第五法(氣相色譜法),如辛夷。.灰分測定測定灰分的目的是限制中藥中無機雜質(zhì)如泥土、沙石的含量,以保證中藥的測定灰分的目的是限制中藥中無機雜質(zhì)如泥土、沙石的含量,以保證中藥的純度。灰分測定法:《中國藥典》規(guī)定的灰分測定法有兩種:總灰分測定法和酸不溶性灰分測定法。酸不溶性灰分是指總灰分中不溶于稀鹽酸的灰分。純度。灰分測定法:《中國藥典》規(guī)定的灰分測定法有兩種:總灰分測定法和酸不溶性灰分測定法。酸不溶性灰分是指總灰分中不溶于稀鹽酸的灰分。有些中藥如大黃,其組織中含有較多的草酸鈣結(jié)晶,僅測定總灰分不能反映有些中藥如大黃,其組織中含有較多的草酸鈣結(jié)晶,僅測定總灰分不能反映無機雜質(zhì)存在的客觀情況,若在總灰分中加入稀鹽酸,使其中來源于中藥本身的無機雜質(zhì)存在的客觀情況,若在總灰分中加入稀鹽酸,使其中來源于中藥本身的鈣鹽等溶解,而外來的泥土、沙石等主要是硅酸鹽,因不溶于稀鹽酸而作為酸不鈣鹽等溶解,而外
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