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實(shí)驗(yàn)二細(xì)菌的分離接種及理化因素的影響實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆张囵B(yǎng)基制備的基本過程熟悉常用培養(yǎng)基的原理、種類及其用途掌握細(xì)菌的分離接種方法皮膚表面的細(xì)菌發(fā)布及消毒前后對(duì)比紫外線對(duì)細(xì)菌的影響藥物對(duì)細(xì)菌的影響實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1、制備普通瓊脂平板2、細(xì)菌在平板上的接種方法及生長(zhǎng)表現(xiàn)3、細(xì)菌在液體中的接種方法(肉湯)及生長(zhǎng)表現(xiàn)4、細(xì)菌在半固體中的接種方法及生長(zhǎng)表現(xiàn)5、皮膚表面的細(xì)菌分布及消毒前后對(duì)比6、紫外線對(duì)細(xì)菌的影響7、藥物對(duì)細(xì)菌的影響(藥敏實(shí)驗(yàn))細(xì)菌在平板上的接種方法及生長(zhǎng)表現(xiàn)四區(qū)劃線法:分別接種大腸埃希菌和枯草桿菌,37度培養(yǎng)24小時(shí),觀察光滑型菌落和粗燥型菌落的不同點(diǎn)。細(xì)菌在液體中的接種方法(肉湯)及生長(zhǎng)表現(xiàn)
分別將大腸埃希菌,枯草桿菌,炭疽桿菌接種至肉湯管中,37度培養(yǎng)24小時(shí),觀察三種不同的生長(zhǎng)表現(xiàn):混濁生長(zhǎng)、表面生長(zhǎng)、沉淀生長(zhǎng)。細(xì)菌在半固體中的接種方法及生長(zhǎng)表現(xiàn)在半固體中分別接種大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌,37度培養(yǎng)24小時(shí),觀察有動(dòng)力的菌和無動(dòng)力的菌的不同表現(xiàn)。紫外線對(duì)細(xì)菌的影響將大腸埃希菌密集接種于普通平板上,將平板蓋一半打開,置于紫外燈下30分鐘,合上蓋,放入37度培養(yǎng)24小時(shí),觀察紫外燈直接照射和隔著平板蓋照射的區(qū)別。藥物對(duì)細(xì)菌的影響(藥敏實(shí)驗(yàn))紙片擴(kuò)散法(K-B法)原理:含有定量抗菌藥物的紙片貼在已接種測(cè)試菌的瓊脂平板上,紙片中所含的藥物吸取瓊脂中的水分溶解,不斷向紙片周圍區(qū)域擴(kuò)散,形成遞減的梯度濃度。在紙片周圍抑菌濃度范圍內(nèi)的細(xì)菌生長(zhǎng)被抑制,形成透明的抑菌圈。抑菌圈大小反映測(cè)試菌對(duì)測(cè)定藥物的敏感程度。結(jié)果觀察中的注意事項(xiàng):1、準(zhǔn)確量取抑菌圈直徑,若抑菌圈為橢圓形,量其最長(zhǎng)徑和最短徑,取其平均值。2、若出現(xiàn)雙層抑菌圈,一般藥物測(cè)量?jī)?nèi)圈,而磺胺類藥物則量其外圈。3、若抑菌圈內(nèi)有散在菌落出現(xiàn),排除污染菌的存在和其他影響因素,若無污染菌等,需重做。結(jié)果觀察:
結(jié)果解釋:用毫米尺量取抑菌圈直徑,參照書上的標(biāo)準(zhǔn)判讀結(jié)果。按敏感(S)、中介(I)、耐藥(R)報(bào)告。例如:抗菌藥物丁胺卡那霉素(AMK),每
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