遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)操作考核試題及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)_第1頁(yè)
遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)操作考核試題及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)_第2頁(yè)
遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)操作考核試題及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)_第3頁(yè)
遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)操作考核試題及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)_第4頁(yè)
遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)操作考核試題及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)_第5頁(yè)
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遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)操作考核及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)一:根尖有絲分裂制片和觀察步驟考核目標(biāo)及評(píng)分細(xì)則分值一實(shí)驗(yàn)?zāi)康?二實(shí)驗(yàn)原理5三實(shí)驗(yàn)材料洋蔥或大蒜根尖用具:眼科鑷子,刀片,廣口瓶,解剖針,蓋玻片,大培養(yǎng)皿,小培養(yǎng)皿,立式染缸,染色板,酒精燈,量筒100毫升、10毫升。所需藥品及配制:無(wú)水乙醇,二甲苯,醋酸洋紅。10四實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和步驟1.材料準(zhǔn)備:將洋蔥去皮后,放在盛滿水的燒杯中25℃2.預(yù)處理:用0.05-0.2%秋水仙素處理根尖,2-4h。3.固定:用Carnoy固定液(卡諾固定液,冰醋酸:95%酒精=1:3)固定2-24h,再放在95%、85%、75%酒精中各0.5h,最后在70%的酒精中保存2個(gè)月。一般是新固定的材料為好。保存在乙醇里的材料,在觀察前最好用Carnoy固定液再固定1-2h。4.水解:將固定材料加一滴離析液(95%乙醇:濃鹽酸=1:1)離析10min,然后用水反復(fù)沖洗,材料為白色,用針易壓碎。(10)5.染色:在載片上滴一滴醋酸洋紅染色15min左右,待根尖為暗紅色時(shí),將染色后的根尖放在一清潔的載片上,去除根冠和伸長(zhǎng)區(qū),再加少量染液染色。(10)6.分色:在染好的根尖上加一滴45%的醋酸分色,使細(xì)胞質(zhì)變淺,染色體清晰。(10)7.壓片:以雙層吸水紙覆在蓋片上,左手按住按住蓋片,右手拇指用力壓片;或用一個(gè)雙面刀片插到載片和蓋片之間的一角,然后用解剖針柄輕敲蓋片,然后將刀片撤出,再用針柄種敲蓋片,細(xì)胞很容易散開(kāi)(注:用力適當(dāng)、均勻,防止蓋片破壞、滑動(dòng))。然后在酒精燈上過(guò)3-4次。加蓋片附以吸水紙壓片。(10)8.鏡檢和烤片:先用低倍鏡顯微鏡下檢查有絲分裂四個(gè)時(shí)期典型特征的細(xì)胞,再轉(zhuǎn)到高倍鏡進(jìn)行觀察。(10)若染色過(guò)深,片子不請(qǐng),可以烤片。方法是讓片子在火焰上過(guò)幾次,以蓋片上的水氣剛消失為止,不可沸騰。烤片時(shí)應(yīng)將片子不斷在手背上試溫,以不燙手為宜,反復(fù)鏡檢。50五實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.通過(guò)實(shí)驗(yàn)觀察繪制植物有絲分裂各個(gè)時(shí)期的分裂圖象。20六實(shí)驗(yàn)后整理:儀器、試劑放回原處、關(guān)電、加蓋;垃圾入桶;值日生打掃衛(wèi)生。10

實(shí)驗(yàn)2植物細(xì)胞減數(shù)分裂步驟考核目標(biāo)及評(píng)分細(xì)則分值一實(shí)驗(yàn)?zāi)康?二實(shí)驗(yàn)原理5三實(shí)驗(yàn)材料蠶豆(Vicia.faba,2n=12)花藥、玉米(Zeamays,2n=20)花藥、小麥(Triticumspp.2n=42)花藥、大蔥(Alliumfistulosum2n=16)花藥、番茄(LycopersicumescuSentum2n=24)花藥。器具顯微鏡、鑷子、解剖針、載玻片、蓋玻片、大培養(yǎng)皿、酒精燈、吸水紙。藥品無(wú)水乙醇、醋酸洋紅染液、石蠟、二甲苯、固定液(甲醇:冰醋酸:3:1)、加拿大樹(shù)膠、正丁醇或叔丁醇。10四實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和步驟1.取材在一朵花的減數(shù)分裂的全過(guò)程中能觀察染色體的時(shí)間是很短的,一般在終變期,中期I,后期I。因此,選取剛現(xiàn)蕾的花序是觀察花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂的關(guān)鍵步驟,要注意花蕾的形態(tài)和大小,適時(shí)選材。(1)玉米北方的玉米5月份取材,時(shí)間以上午8:30為好,夏玉米一般在7月份取材,以上午7:00一8:00為好,在玉米雌穗未抽出前的7—10天手摸植株上部(喇叭口下部)有松軟感覺(jué),表明雄花序即將抽出。用刀在頂葉近喇叭口處縱向劃一刀,切口長(zhǎng)10一15cm,剝出雄花序,頂端花藥長(zhǎng)3—5mm,花藥尚未變黃時(shí)取材。(2)蠶豆:從現(xiàn)蕾開(kāi)始,上午10:00—11:00可選取2—3mm大小的花莆或一小段花序。蠶豆開(kāi)花的次序是由下而上,由外而內(nèi)。(3)小麥:在植株開(kāi)始挑旗,旗葉與下一葉片的葉耳間距約為3一4Cm,花藥長(zhǎng)度大致在1.5—2.0mm,黃綠色時(shí)取材最好。如花藥為綠色時(shí)取材則為時(shí)過(guò)早,花藥為黃色,則已過(guò)時(shí)。上午7:00一8:00為取材最佳時(shí)間。(4)大蔥:在北方地里越冬的大蔥,第二年春季3—4月長(zhǎng)出花序,待花序長(zhǎng)出,顏色呈綠色,花蕾長(zhǎng)度在3~4mm,花藥長(zhǎng)度為1—1.1mm時(shí)取材。上午9:00一10:00最佳。(5)番茄:5—9月均可取材,時(shí)間以上午8:30—9:30為好,花蕾以3—4mm為宜(番茄花期持續(xù)時(shí)間長(zhǎng),可隨時(shí)取材)。(10)2.固定通常制作幼小花藥壓片時(shí),可不經(jīng)固定,直接放在醋酸洋紅染液中,同時(shí)進(jìn)行固定和染色,但是先經(jīng)固定的材料容易著色、分色及便于保存。固定時(shí)將采集的材料置于卡諾氏固定液12—24小時(shí),若不及時(shí)制片,可將固定后的材料用70%的乙醇沖洗直至聞不到醋酸味為止,后放入70%乙醇中存于4℃冰箱內(nèi),可隨時(shí)取用。(10)3.染色制片用蒸餾水將從固定液或從70%酒精保存液中取出的花蕾?zèng)_洗數(shù)遍,然后剝開(kāi)花雷,放在載玻片上,用解剖針及虹膜刀將花藥橫切成3—4段(或縱切),加一滴醋酸洋紅染液于材料上,用解剖針輕壓花藥使花粉母細(xì)胞從切口出來(lái),靜止染色5—10分鐘,除去花藥壁。加上蓋玻片使染液剛好布滿載玻片與蓋玻片之間成一薄層(不可過(guò)多,過(guò)多花粉母細(xì)胞會(huì)逸出蓋玻片邊緣),加上蓋玻片后,在酒精燈上輕微加熱,以利于進(jìn)一步著色和染色體的分散。在蓋玻片上覆以吸水紙用拇指適當(dāng)加壓.把周?chē)娜疽何?勿使蓋片移動(dòng)),若細(xì)胞質(zhì)染色過(guò)深,可在蓋玻片的一邊滴加45%的醋酸,在另一邊用吸水紙吸,讓醋酸從蓋玻片下流過(guò),減輕細(xì)胞質(zhì)的著色程度。(10)4.鏡檢在顯微鏡下查找花粉母細(xì)胞,二分體、四分體,花粉粒以及各個(gè)時(shí)期的細(xì)胞。5.永久片的制作較好的臨時(shí)壓片,可制成永久玻片標(biāo)本。(20)(1)將已制好的玻片浸入副盛有95%乙醇和45G醋酸各半的培養(yǎng)皿中,有蓋玻片的一面朝下,載玻片的一端架在玻片棒上使其傾斜,蓋玻片脫落后立即把蓋玻片和載玻片轉(zhuǎn)入盛有95%乙醇的培養(yǎng)皿中3—5分鐘,轉(zhuǎn)入盛有95%乙醇和叔丁醇各半的培養(yǎng)皿中3—5分鐘,最后純叔丁醇中3一5分鐘進(jìn)行脫水、透明,脫水后用溶于叔丁醇的加拿大樹(shù)膠封片。(2)由于正丁醇價(jià)格較便宜,因此也可用正丁醇代替叔丁醇。操作過(guò)程是將制好的臨時(shí)玻片以同樣的方法浸入盛有95%乙醇和45X醋酸各半的培養(yǎng)皿中5一6分鐘,并滴加幾滴正丁醇,依次再移入95%乙醇中1一2分鐘;95%乙醇和正丁醇各半的培養(yǎng)皿中2—5分鐘;純正丁醇1—2分鐘,最后吸去多余的正丁醇,用溶于正丁醇的加拿大樹(shù)膠封片。50五實(shí)驗(yàn)結(jié)果繪制觀察到的植物細(xì)胞減數(shù)分裂不同時(shí)期的典型細(xì)胞(示染色體動(dòng)態(tài)特征)。20六實(shí)驗(yàn)后整理:儀器、試劑放回原處、關(guān)電、加蓋;垃圾入桶;值日生打掃衛(wèi)生。10

實(shí)驗(yàn)3人類(lèi)染色體組型分析步驟考核目標(biāo)及評(píng)分細(xì)則分值一實(shí)驗(yàn)?zāi)康?二實(shí)驗(yàn)原理5三實(shí)驗(yàn)材料男性細(xì)胞染色體照片,眼科剪刀,測(cè)量工具,膠水等。10四實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和步驟1.剪貼:用眼科剪刀,沿染色體邊緣將每一條染色體剪下來(lái),存放在小培養(yǎng)皿內(nèi)。(5)2.配對(duì):首先目測(cè)配對(duì),根據(jù)染色體長(zhǎng)短和形態(tài)特征,進(jìn)行同源染色體配對(duì)。(10)3.排列:按一定順序?qū)⒁粋€(gè)細(xì)胞內(nèi)的染色體進(jìn)行排隊(duì)、編號(hào)。排列方式有多種,一般從大到小排列,如玉米、草棉核型;相同長(zhǎng)度的染色體,按短臂長(zhǎng)度排列,短臂長(zhǎng)的在前;有特殊標(biāo)記的染色體(如隨體)可特殊排列,如栽培大麥核型;性染色體單獨(dú)另排或放在最后。也可將形態(tài)相同的染色體歸為一組,分成若干組,按組排列,如山羊草屬植物染色體核型;異源多倍體要根據(jù)不同染色體組排列,如普通小麥核型要按A、B、D三個(gè)染色體組排列。(10)4.測(cè)量:利用測(cè)量工具,測(cè)量染色體的如下數(shù)據(jù):(10)(1)絕對(duì)長(zhǎng)度=照片長(zhǎng)度/放大倍數(shù)(2)每對(duì)染色體短臂絕對(duì)長(zhǎng)度;(3)每對(duì)染色體長(zhǎng)臂絕對(duì)長(zhǎng)度;(4)染色體短臂總長(zhǎng)度;(5)染色體長(zhǎng)臂總長(zhǎng)度;(6)相對(duì)長(zhǎng)度;a、每對(duì)同源染色體短臂相對(duì)長(zhǎng)度=染色體短臂絕對(duì)長(zhǎng)度/染色體短臂總長(zhǎng)度b、每對(duì)同源染色體長(zhǎng)臂相對(duì)長(zhǎng)度=染色體長(zhǎng)臂絕對(duì)長(zhǎng)度/染色體長(zhǎng)臂總長(zhǎng)度c、每對(duì)同源染色體相對(duì)長(zhǎng)度=每對(duì)同源染色體絕對(duì)長(zhǎng)度/染色體總長(zhǎng)度(7)臂比:臂比=染色體長(zhǎng)臂/染色體短臂(8)臂指數(shù):著絲點(diǎn)指數(shù)=短臂長(zhǎng)/染色體全長(zhǎng)將上列數(shù)字填入下表序號(hào)相對(duì)長(zhǎng)度(%)長(zhǎng)臂+短臂=全長(zhǎng)臂比(長(zhǎng)/短)類(lèi)型5.校正:根據(jù)測(cè)量數(shù)據(jù)校正目測(cè)同源染色體配對(duì)和染色體排列順序是否正確,再進(jìn)行重新排列。(5)6.分類(lèi):依據(jù)臂比,將染色體分類(lèi)。(5)染色體分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)染色體類(lèi)型臂比(長(zhǎng)臂/短臂)(1).正中部著絲點(diǎn)類(lèi)型(M)1.0(2).中部著絲點(diǎn)類(lèi)型(m)1.01-1.7(3).近中部著絲點(diǎn)類(lèi)型(Sm)1.71-3.0(4).近端著絲點(diǎn)類(lèi)型(St)3.01-7.0(5).端著絲點(diǎn)類(lèi)型(t)7.01-(6).頂端著絲點(diǎn)類(lèi)型(T)7.公式:根據(jù)染色體類(lèi)型,可以將一種生物的染色體核型書(shū)寫(xiě)成一定公式。如:芍藥核型為:K(2n)=2X=10=6m+2Sm+2St(SAT)。(5)K代表基本核型,SAT代表具隨體染色體,寫(xiě)在括號(hào)內(nèi),符號(hào)前的數(shù)字代表該類(lèi)染色體數(shù)目。50五實(shí)驗(yàn)結(jié)果做出核型,寫(xiě)出核型公式;繪制模式圖20六實(shí)驗(yàn)后整理:儀器、試劑放回原處、關(guān)電、加蓋;垃圾入桶;值日生打掃衛(wèi)生。10

實(shí)驗(yàn)4人類(lèi)X染色質(zhì)(巴氏小體)的制備與觀察步驟考核目標(biāo)及評(píng)分細(xì)則分值一實(shí)驗(yàn)?zāi)康?二實(shí)驗(yàn)原理5三實(shí)驗(yàn)材料生物材料:人體口腔頰部上皮細(xì)胞,人體發(fā)根毛囊細(xì)胞。器材:顯微鏡,解剖針,牙簽,眼科鑷,載玻片,蓋玻片,濾紙條。試劑:1%硫瑾水溶液,1mol/LHCl,蒸餾水,45%醋酸。10四實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和步驟觀察人口腔頰部上皮細(xì)胞巴氏小體…(30)取材用滅菌的牙簽輕刮口腔頰部上皮,涂片,晾干。加1mol/L的鹽酸水解10-15分鐘。輕輕水洗,晾干。硫瑾染色10-20分鐘,洗凈,晾干。顯微鏡觀察。巴氏小體應(yīng)靠近核膜邊緣,染色較深。觀察發(fā)根毛囊細(xì)胞巴氏小體…(20)拔取帶毛囊頭發(fā)一段,45%冰醋酸解離5分鐘。剝?nèi)∶遥蜩旧?0分鐘,洗凈。壓片(壓片前可先用解剖針敲片,使細(xì)胞分散),鏡檢。毛囊細(xì)胞密度比口腔上皮細(xì)胞標(biāo)本較低,但較為集中。實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)果圖示圖1人體人口腔上皮頰部上皮細(xì)胞(女性細(xì)胞,圓圈中示巴氏小體,10×40)50五實(shí)驗(yàn)結(jié)果細(xì)胞核計(jì)數(shù)個(gè),共發(fā)現(xiàn)含X染色質(zhì)細(xì)胞核個(gè)?X染色質(zhì)出現(xiàn)頻率為%,較標(biāo)準(zhǔn)數(shù)值偏?分析偏差的原因。20六實(shí)驗(yàn)后整理:儀器、試劑放回原處、關(guān)電、加蓋;垃圾入桶;值日生打掃衛(wèi)生。10

實(shí)驗(yàn)5果蠅的形態(tài)和生活史步驟考核目標(biāo)及評(píng)分細(xì)則分值一實(shí)驗(yàn)?zāi)康?二實(shí)驗(yàn)原理5三實(shí)驗(yàn)材料野生型果蠅(雌、雄)及常見(jiàn)的幾種突變型果蠅;雌雄果蠅裝片;果蠅卵、蛹裝片。1.器具:顯微鏡、雙筒解剖鏡、放大鏡、小鑷子、麻醉瓶、麻醉皿、培養(yǎng)瓶、白磁磚(15cm×15cm)、毛筆、酒精、石棉網(wǎng)、黑紙、膠水、牛皮紙。2.藥品:乙醚、乙醇、瓊脂、玉米粉、白糖、酵母、丙酸、香蕉等。10四實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和步驟1.果蠅生活史的觀察果蠅為完全變態(tài),生活史包括卵、幼蟲(chóng)、蛹、成蟲(chóng)四個(gè)時(shí)期,各時(shí)期持續(xù)時(shí)間的長(zhǎng)短隨溫度的高低而不同,在20℃條件下從卵到成蟲(chóng)約為8天,蛹期為6天左右,整個(gè)生活史15天即可完成,若25C條件下,從卵到幼蟲(chóng)約5天,蛹期4.2天左右,整個(gè)生活史約10天。20—25C是果蠅生?;畹倪m宜溫度,溫度過(guò)高(30℃以上),會(huì)引起果蠅不孕或死亡,溫度過(guò)低(10℃條件下),生活史可長(zhǎng)達(dá)57天,又會(huì)使果蠅生活力降低果蠅一般培養(yǎng)在恒溫箱內(nèi).盛夏時(shí)要注意降溫。雌性成體一般能生活4周,雄性成體壽命較短,一對(duì)親蠅能產(chǎn)生幾百個(gè)后代?!?0)(1)卵:羽化后的雌蠅一般在12小時(shí)后開(kāi)始交配,交配后兩天開(kāi)始產(chǎn)卵,當(dāng)卵經(jīng)過(guò)子宮時(shí),精子可由卵前端的錐形突出部的小孔或卵孔進(jìn)入其中,雖然有很多精子進(jìn)入卵.但一般情況下只有一個(gè)精子與卵發(fā)生受精作用。其它多余的精子被雌體貯藏起來(lái)(所以雜交實(shí)驗(yàn)時(shí)必須選取處女蠅,受精卵被排出體外發(fā)育或胚胎早期就在子宮內(nèi)進(jìn)行。用解剖針將附有卵的培養(yǎng)基取少許涂于載玻片上,或用解剖針輕壓雌果蠅腹部后部把卵擠在載玻片上,用低倍鏡觀察。果蠅的卵約0.5mm長(zhǎng),橢圓形,腹面稍扁平,在背面的前端伸出一對(duì)觸絲,它的作用是使卵附在培養(yǎng)基表面而利于發(fā)育。(2)幼蟲(chóng):卵孵化成幼蟲(chóng)后要經(jīng)過(guò)兩次蛻皮才能從一齡幼蟲(chóng)發(fā)育成為三齡幼蟲(chóng)。三齡幼蟲(chóng)體長(zhǎng)約5mm,頭部稍尖,位于頭部的口器為肉眼可見(jiàn)一小黑點(diǎn),口器后面有一對(duì)透明的唾液腺,通過(guò)體壁可見(jiàn)到一對(duì)生殖腺位于身體后半部的上方兩側(cè),精巢較大,為一明顯的黑色斑點(diǎn),卵巢較小。(3)蛹:幼蟲(chóng)生活7—8天準(zhǔn)備化蛹,化蛹之前從培養(yǎng)基中爬出,附著在干燥的瓶壁或插在培養(yǎng)基的濾紙上逐漸形成一個(gè)梭形的蛹,在蛹前部有兩個(gè)呼吸孔,后部有尾芽,起初蛹?xì)ゎ伾S柔軟,經(jīng)3—4天后變成深褐色,以示要羽化了。(4)成蟲(chóng):幼蟲(chóng)在蛹?xì)?nèi)完成成蟲(chóng)體型和器官的分化,最后從蛹?xì)で岸伺莱?。剛從蛹?xì)だ镉鸹龅墓?,蟲(chóng)體較長(zhǎng)大,翅還沒(méi)有展開(kāi),體表也未完全幾丁質(zhì)化,呈半透明乳白色,不久蠅體變?yōu)榇侄虣E圓形,雙翅伸展,體色加深,如野生型果蠅由開(kāi)始的淺灰色轉(zhuǎn)為灰褐色。果蠅成蟲(chóng)分頭、胸、腹蘭部分。頭部有一對(duì)大的復(fù)眼、三個(gè)單眼和一對(duì)觸角;胸部有三對(duì)足、一對(duì)翅和一對(duì)平衡棒;腹部背面有黑色環(huán)紋,腹面有腹片,外生殖器在腹部末端,全身有許多體毛和剛毛。2.果蠅雌雄性鑒別利用果蠅做雜交實(shí)驗(yàn)時(shí),必須準(zhǔn)確地識(shí)別性別,雌雄成蠅的區(qū)別有計(jì)多方面,可用放大鏡,顯微鏡(低倍)、雙筒解剖鏡或直接從外形上加以辨認(rèn)?!?0)表5.1雌雄果蠅的主要區(qū)別雌蠅雄蠅體型較大腹部末端稍尖腹部背面有五條黑色環(huán)紋無(wú)性梳腹部腹面有6個(gè)腹片外生殖器外觀簡(jiǎn)單體型較小腹部末端稍圓腹部背面有三條黑色環(huán)紋有性梳腹部腹面有4個(gè)腹片外生殖器外觀復(fù)雜,在低倍鏡下可看到生殖孤、肛上板、陰基。3.果蠅幾種突變類(lèi)型的觀察果蠅的突變性狀一般情況下用肉眼觀察或用放大鏡在培養(yǎng)瓶外觀察或在解剖鏡下觀察。主要有以下穩(wěn)定而明顯的特征:表5.2果蠅常見(jiàn)突變性狀特征突變性狀名稱基因符性狀特征所在染色體白眼W復(fù)眼白色X棒眼B復(fù)眼橫條形X檀黑體E體呈烏木色,黑亮ⅢR黑體B體呈深色ⅡL黃身Y體吳淺橙黃色X殘翅Vg翅退休,部分殘留不能飛ⅡR焦剛毛Sn剛毛卷曲如燒焦?fàn)頧小翅m翅較短X4.果蠅的麻醉對(duì)于成蠅和果蠅突變性狀的觀察以及果蠅的雜交實(shí)驗(yàn)分析,都必須先將果蠅麻醉使其處于靜止?fàn)顟B(tài)后方可進(jìn)行。在一軟木塞上釘一圖釘,在圖釘上纏上脫脂棉,將此軟木塞蓋在一200ml的廣口瓶上,即做成了麻醉瓶。再用一培養(yǎng)皿,在皿的底部粘上一條濾紙即做成麻醉用的麻醉皿。麻醉時(shí),首先將培養(yǎng)瓶倒置,讓果蠅向瓶底部運(yùn)動(dòng),然后打開(kāi)麻醉瓶和培養(yǎng)瓶塞,迅速將培養(yǎng)瓶和麻醉瓶口相接(麻醉瓶在下,培養(yǎng)瓶在上),左手緊握兩。瓶接口稍傾斜,然后輕拍培養(yǎng)瓶瓶壁使果蠅落入麻醉瓶?jī)?nèi),迅速蓋好兩個(gè)瓶塞,或者在培養(yǎng)瓶與麻醉瓶對(duì)口相接后翻轉(zhuǎn)位置,使培養(yǎng)瓶在下,麻醉瓶在上,用黑紙遮住培養(yǎng)瓶,果蠅因趨光向麻醉瓶運(yùn)動(dòng),達(dá)到一定數(shù)量后分別蓋好兩個(gè)瓶塞。把乙醚滴在麻醉瓶軟木塞上的脫脂棉上,蓋上塞子,倒置麻醉瓶。一分鐘后果蠅即處于昏迷狀態(tài),將其傾倒在用酒精擦過(guò)的白磁磚上,用毛筆輕輕撥動(dòng)進(jìn)行觀察。當(dāng)在白磁磚上的果蠅即將蘇醒時(shí),可在麻醉皿的濾紙上滴加乙醚,扣在白磁磚上進(jìn)行第二次麻醉,麻醉的程度隨實(shí)驗(yàn)需要而定。麻醉后果蠅翅外展與身體呈45℃角時(shí),表示已麻醉過(guò)度,不能復(fù)蘇。把不需要的果蠅倒入盛有酒精的瓶中?!?0)60五實(shí)驗(yàn)結(jié)果:繪果蠅的生活史圖。10六實(shí)驗(yàn)后整理:儀器、試劑放回原處、關(guān)電、加蓋;垃圾入桶;值日生打掃衛(wèi)生。10

實(shí)驗(yàn)6果蠅唾腺染色體標(biāo)本的制備與觀察步驟考核目標(biāo)及評(píng)分細(xì)則分值一實(shí)驗(yàn)?zāi)康?二實(shí)驗(yàn)原理5三實(shí)驗(yàn)材料果蠅三齡幼蟲(chóng);0.8%生理鹽水;0.2mol/LHCl;蒸餾水;苯酚品紅10四實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和步驟1、三齡幼蟲(chóng)的飼養(yǎng):剝?nèi)⊥僖合僭谳d玻片上滴一滴生理鹽水,取三齡幼蟲(chóng)放在其中。左手用解剖針或小鑷子壓住幼蟲(chóng)后端1/3處,右手的解剖針按住頭部黑色口器向外拉,將頭部從身體拉開(kāi),唾腺隨之而出,丟棄雜質(zhì)?!?0分)2、解離和染色:取解剖好的唾腺于載片上,加1-2滴蒸餾水,使之成為低滲溶液,處理8-10分鐘,再經(jīng)1mol/LHCl解離1-2min后,只需要用解剖針輕輕撥動(dòng),脂肪等雜質(zhì)便會(huì)和唾液腺自動(dòng)分離。輕輕吸去酸液,用堿性品紅染色10分鐘(或醋酸洋紅染色15分鐘或龍膽紫染色1分鐘)左右?!?0分)3、抹片及觀察:…(20分)幼蟲(chóng)培養(yǎng)的注意事項(xiàng):培養(yǎng)基要較稀且富含營(yíng)養(yǎng);追加酵母;幼蟲(chóng)密度要小;低溫培養(yǎng)位置:在幼蟲(chóng)體前約1/3處。形狀:形如一對(duì)香蕉,上小下大。一邊常附著帶狀的不透明的脂肪。顏色:半透明如玻璃,略帶白色,比周?chē)慕M織都透明。注意事項(xiàng):一定要加生理鹽水,否則唾腺易干;水不可過(guò)多,否則幼蟲(chóng)易漂起來(lái)并且活躍,影響剝離;剝離時(shí)要去干凈脂肪;染色時(shí)間不可過(guò)長(zhǎng),否則背景著色;壓片前先輕敲,使之分散,壓片時(shí)朝一個(gè)方向揉片。60五實(shí)驗(yàn)結(jié)果1、繪制你所觀察到的果蠅唾腺染色體。2、剝離果蠅唾液腺時(shí)應(yīng)該注意的問(wèn)題?10六實(shí)驗(yàn)后整理:儀器、試劑放回原處、關(guān)電、加蓋;垃圾入桶;值日生打掃衛(wèi)生。10

實(shí)驗(yàn)7果蠅單因子雜交實(shí)驗(yàn)步驟考核目標(biāo)及評(píng)分細(xì)則分值一實(shí)驗(yàn)?zāi)康?二實(shí)驗(yàn)原理5三實(shí)驗(yàn)材料新鮮大蒜葉10四實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和步驟1、采集新鮮的山茶花葉,置于?70℃冰箱冷凍幾個(gè)小時(shí)。2、吸水紙吸干葉子表面的水分,去主脈,撕成小片,加少量液氮,在研缽中研磨成粉末。3、將研磨好的材料轉(zhuǎn)入1.5ml離心管中,加入65℃預(yù)熱的2%CTAB1000μl和β-巰基乙醇20μl,輕輕顛倒混勻,65℃水浴30min,期間搖勻2-3次。4、室溫下靜置10min,10000r/m離心5min。5、取上清液于另一1.5ml離心管中,加入等體積的氯仿/異戊醇(24:1),輕輕顛倒混勻,12000r/m離心10min。重復(fù)此步操作1次。6、取上清液于另一1.5ml離心管中,加入上清液體積2/3的?20℃預(yù)冷異丙醇,輕輕混勻,直至出現(xiàn)絮狀物。?20℃靜置10min后,10000r/m離心5min。7、棄去上清液,加入500μl的75%乙醇,清洗DNA,小心棄去上清液。再加入500μl的75%乙醇,重復(fù)操作1次。8、再加入500μl無(wú)水乙醇,清洗DNA,棄去上清液,倒置干燥DNA。9、加入50μlTE液和2μlRNase,37℃水浴30min。4℃保存?zhèn)溆?0五實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察電泳的結(jié)果,分析DNA提取的純度的完整性。電泳圖照相。25六實(shí)驗(yàn)后整理:儀器、試劑放回原處、關(guān)電、加蓋;垃圾入桶;值日生打掃衛(wèi)生。5

實(shí)驗(yàn)8植物多倍體的誘發(fā)與鑒定步驟考核目標(biāo)及評(píng)分細(xì)則分值一實(shí)驗(yàn)?zāi)康?二實(shí)驗(yàn)原理5三實(shí)驗(yàn)材料材料:洋蔥(Alliumcepa2n=16)、小麥(2n=42)、大麥(Hordeumspp.2n=14)、大蒜(Alliumsativum2n=16)、西瓜(Citrullusvulgaris2n=22)、玉米(Zeamays2n=20)、蠶豆(Viciafaba2n=12)等的種子、鱗莖。器具顯微鏡、剪刀、鑷子,小培養(yǎng)皿,培養(yǎng)皿、載玻片、蓋玻片、吸水紙、培養(yǎng)箱、鑷子、小指管,紗布、脫脂棉、酒精燈、測(cè)微尺。藥品秋水仙索(0.1%和0.025%)、HCl(1mol/L)、硝酸銀(O.1%一0.2%)、碘化鉀(1%)、固定液、醋酸洋紅或卡寶品紅染色液。10四實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和步驟1.洋蔥根尖和蠶豆根尖的制備:把洋蔥的鱗莖洗凈,用刀片將鱗莖上的老根剪去,置于盛滿水的廣口瓶上,待新長(zhǎng)出的不定根長(zhǎng)約1.5~2mm左右時(shí),移到盛有0.25~0.4%秋水仙素溶液中,培養(yǎng)幾日后,在處理液中培養(yǎng)的根尖明顯比對(duì)照根尖肥大,此時(shí)便可用解剖剪將根尖取下,用甲醛:冰醋酸(3:1)固定液固定24h。圖8-1洋蔥根尖的制備圖8-2制備好的根尖植物根尖的制備:選取蠶豆種子放在燒杯中,清水浸泡過(guò)夜,使種子吸水脹大后倒出,再用清水洗幾次,用多層紗布包好種子,放進(jìn)20~25℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。待蠶豆的主根長(zhǎng)到3cm左右,側(cè)根長(zhǎng)到1~1.5cm時(shí),將蠶豆取出。用清水洗凈,放在0.25~0.4%秋水仙素溶液中,于25℃處理約3~4天,可見(jiàn)根尖膨大,將根尖剪下固定?!?.解離:棄去固定液,用清水漂洗2-3次。用1摩爾鹽酸在60℃分別處理8min和10min。棄去鹽酸,漂洗根尖2-3次,徹底洗凈鹽酸?!?.染色壓片:解剖針壓散根尖組織,用卡寶品紅染色20min后蓋上蓋玻片,用橡皮擦在蓋玻片上輕輕壓一下,使細(xì)胞均勻散開(kāi)成一單細(xì)胞薄層,用吸水紙吸去溢出的染液,即可放在顯微鏡下觀察,也可加熱加速染色?!?0分)4.鏡檢,觀察并鑒別4n細(xì)胞:蠶豆染色體2n=12;洋蔥染色體2n=16,照相?!?0分)50五實(shí)驗(yàn)結(jié)果繪制所觀察的4n細(xì)胞。20六實(shí)驗(yàn)后整理:儀器、試劑放回原處、關(guān)電、加蓋;垃圾入桶;值日生打掃衛(wèi)生。10

實(shí)驗(yàn)9人類(lèi)常見(jiàn)幾種生理特征的遺傳調(diào)查步驟考核目標(biāo)及評(píng)分細(xì)則分值一實(shí)驗(yàn)?zāi)康?二實(shí)驗(yàn)原理5三實(shí)驗(yàn)材料器材:試管、試管架、滴管;顯微鏡、雙凹玻片或普通載玻片、采血針、青霉素小瓶、膠布、記號(hào)筆、牙簽或小玻棒、棉球、小鏡子試劑:PTC溶液的配制:取PTC粉末0.65g,加蒸餾水500ml搖勻,在室溫下放置1~2天即完全溶解成原液。原液的PTC濃度約為1/750。PTC嘗味使用液配制:將PTC原液編為1號(hào)液,將1號(hào)液用蒸餾水稀釋1倍編為2號(hào)液,將2號(hào)液再稀釋一倍為3號(hào)液以此類(lèi)推,直至配成14號(hào)PTC溶液,14號(hào)液濃度為1/6000000,將配好的14種不同濃度PTC溶液分別置于消毒好的瓶?jī)?nèi)。0.1%的苯甲酸鈉A型(抗B)和B型(抗A)標(biāo)準(zhǔn)血清、70%酒精、0.9%生理鹽水。5四實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和步驟(一)幾種生理特征的遺傳…(20分)1、卷舌性狀的調(diào)查在人群中,有的人能卷舌(tonguerolling),即舌的兩側(cè)能在口腔中向上卷成筒狀,稱為卷舌者(tongueroller),對(duì)照鏡子或者請(qǐng)同學(xué)觀察自己是否有卷舌能力。有的人舌尖部分不用上頜牙齒的幫助能向后翻轉(zhuǎn),即為翻舌。這種性狀在人群中出現(xiàn)頻率不高,根據(jù)國(guó)外的統(tǒng)計(jì)只有1/1000弱。舌的活動(dòng)在人群中可見(jiàn)3種類(lèi)型:①舌能卷而不能翻。②舌能卷又能翻。③舌不能卷又不能翻。舌不能卷而能翻則從未見(jiàn)過(guò)。2.眼臉性狀的調(diào)查人群中的眼瞼(eyelid)可分為單重瞼(俗稱單眼皮,又叫上瞼贅皮)和雙重瞼(俗稱雙眼皮)兩種性狀。一些人認(rèn)為雙眼皮受常染色體顯性基因控制,單眼皮為隱性性狀。但目前仍存在爭(zhēng)議,有待進(jìn)一步研究。3.耳垂性狀的調(diào)查耳朵可明顯區(qū)分為有耳垂(freeearlobe,即耳垂下懸,與頭連接處向上凹陷)和無(wú)耳垂(attachedearlobe,即耳輪一直向下延續(xù)到頭部,),觀察并區(qū)分兩種性狀。4.前額發(fā)際調(diào)查有的人前額發(fā)際(hairlineoftheforehead)基本屬于平線,而有的人前額正中發(fā)際向下延伸呈峰形,即明顯向前突出,形成“V”字形,稱美人尖。5.發(fā)式和發(fā)旋的調(diào)查人類(lèi)的發(fā)式有卷發(fā)和直發(fā)之分。東方人多為直發(fā)。每個(gè)人頭頂稍后方的中線處有一螺紋,稱發(fā)旋。發(fā)旋的螺紋方向受遺傳控制,有的人呈順時(shí)針?lè)较颍械某誓鏁r(shí)針?lè)较?。記錄自己的發(fā)式、發(fā)旋個(gè)數(shù)和螺旋方向。6.拇指關(guān)節(jié)外展的調(diào)查人群中有的人拇指的最后一節(jié)能彎向撓側(cè),這一性狀的純合隱性個(gè)體的拇指關(guān)節(jié)可向后卷曲60度,不能彎曲為顯性。觀察自己是否有此性狀。7.食指與無(wú)名指長(zhǎng)短比較食指與無(wú)名指之間的長(zhǎng)短關(guān)系表現(xiàn)為伴性遺傳,控制基因位于X染色體上。表型有兩種:食指短于無(wú)名指,食指長(zhǎng)于無(wú)名指。檢查的方法是在白紙上畫(huà)一橫線,手掌向下放于紙上,使中指指尖方向與橫線垂直,無(wú)名指指尖與橫線相齊,看此時(shí)食指指尖是在橫線的上方還是下方。(二)幾種生理特征的遺傳…(20分)1、苯硫脲嘗味試驗(yàn)苯硫脲(phenylthiocarbamide,PTC)是一種白色結(jié)晶狀藥物,由于其含有N-C=S基團(tuán)而有苦澀味,但對(duì)人無(wú)毒副作用。不同種族、民族和個(gè)體之間,對(duì)該物質(zhì)的嘗味能力不同,人體對(duì)苯硫脲的嘗味能力是由一對(duì)等位基因(Tt)所控制的性狀,T對(duì)t為不完全顯性。正常嘗味者能?chē)L出濃度小于1/750000PTC溶液的苦味,為純合嘗味者,基因型為T(mén)T;而Tt基因型的個(gè)體(雜合子)嘗味能力稍低,只能?chē)L出濃度為1/40000~1/500000的PTC溶液的苦澀味,這種個(gè)體為PTC雜合嘗味者。當(dāng)PTC濃度大于1/24000才能?chē)L出其苦味的人,稱為PTC味盲,基因型為tt;有的味盲個(gè)體甚至對(duì)PTC結(jié)晶也嘗不出苦味來(lái)。因此,人類(lèi)對(duì)PTC嘗味能力屬于不完全顯性遺傳(半顯性遺傳)。而且已知純合體味盲(tt)者容易患結(jié)節(jié)性甲狀腺腫,因此可以把PTC的嘗味能力,作為一種輔助性診斷指標(biāo)。我國(guó)漢族人群中,PTC味盲約占10%。操作程序eq\o\ac(○,1).讓受試者坐在椅子上,仰頭張嘴。首先用滴管滴5~10滴14號(hào)液于舌根部,讓受試者徐徐下咽品味,并用蒸餾水作對(duì)照試驗(yàn)。eq\o\ac(○,2).詢問(wèn)受試者能否鑒別此兩種溶液的味道,若不能鑒別或不能斷定,則依次用13號(hào)、12號(hào)……溶液重復(fù)試驗(yàn)(應(yīng)注意與蒸餾水交替測(cè)試),直到明確鑒別出PTC的苦味為止。eq\o\ac(○,3).tt基因型的閾值范圍為1~6號(hào)液,Tt基因型的閾值范圍為7~10號(hào)液,TT基因型的閾值范圍為11~14號(hào)液。為簡(jiǎn)化操作程序,也可只用6、7、10、11和13號(hào)5種溶液進(jìn)行測(cè)試,嘗不出6號(hào)苦味者為tt基因型,嘗出7號(hào)和10號(hào)液的苦味者為T(mén)t基因型,嘗出11號(hào)者為T(mén)T基因型。eq\o\ac(○,4).統(tǒng)計(jì)所測(cè)人員的測(cè)試結(jié)果,按Hardy-Weinberg定律計(jì)算出所測(cè)人群中的PTC嘗味基因的基因型頻率和基因頻率。(3)注意事項(xiàng)PTC嘗味試驗(yàn)所用滴管在滴液體時(shí),注意不要接觸受試者的口腔。2、對(duì)苯甲酸鈉的味覺(jué)感受能力苯甲酸鈉是另一種人群味覺(jué)感受不同的物質(zhì)。有人感覺(jué)有味,有人感覺(jué)其無(wú)味。以0.1%的苯甲酸鈉,用PTC檢測(cè)的同樣方法的測(cè)知全班同學(xué)的味覺(jué)感受結(jié)果(酸、甜、苦、咸、無(wú)味)。(三)、人類(lèi)ABO血型檢測(cè)方法…(10分)血型是人體的遺傳性狀,人類(lèi)ABO血型是紅細(xì)胞血型系統(tǒng)中的一種。它受一組復(fù)等位基因(IA、IB、i)控制。人類(lèi)的紅細(xì)胞表面有A和B兩種抗原,血清中有抗B(β)和抗A(α)兩種天然抗體,依抗原和抗體存在的情況,可將人類(lèi)的血型分為A、B、AB和O四種血型。由于A抗原只能和抗

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