1.與糖尿病相關(guān)生化檢測(cè)指標(biāo)有哪些？它們的臨床意義有何不同？2.簡(jiǎn)述目前糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)3.簡(jiǎn)述OGTT4.黃疸的形成機(jī)制有哪些5.反映腎小球?yàn)V過(guò)功能的試驗(yàn)有哪些6.簡(jiǎn)述臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)的進(jìn)展及發(fā)展趨勢(shì)：7.根據(jù)米-曼式方程計(jì)算，當(dāng)[s]=3Km時(shí)，其反應(yīng)速度V為多大7.簡(jiǎn)述正常血漿中的酶動(dòng)態(tài)特點(diǎn)及影響酶濃度的因素8.簡(jiǎn)述病理性血漿中酶濃度異常的機(jī)制9.簡(jiǎn)述酶濃度的測(cè)定方法10.簡(jiǎn)述酶偶聯(lián)反應(yīng)法的原理:11.簡(jiǎn)述臨床同工酶的分析方法:12.簡(jiǎn)述體液中酶濃度測(cè)定的主要影響因素及控制13.臨床酶學(xué)測(cè)定之前，標(biāo)本的采集、處理與貯存有何注意點(diǎn)?14.簡(jiǎn)述自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行臨床酶學(xué)測(cè)定時(shí)系數(shù)K值的計(jì)算與應(yīng)用15.簡(jiǎn)述ALT測(cè)定及其臨床意義:16.

AAT的臨床意義有17.簡(jiǎn)述CK及其同工酶測(cè)定的臨床意義18.試述血清ACP活性測(cè)定的臨床意義19.試述血清淀粉酶測(cè)定有何臨床意義20.簡(jiǎn)述血漿蛋白質(zhì)的功能血漿總蛋白的濃度增高：21.試述測(cè)定血清銅藍(lán)蛋白的方法及參考值和臨床意義22.簡(jiǎn)述低清蛋白血癥的臨床意義23.簡(jiǎn)述轉(zhuǎn)鐵蛋白的臨床意義24.簡(jiǎn)述新生兒PKU的診斷方法25.簡(jiǎn)述臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)的進(jìn)展及發(fā)展趨勢(shì)26.簡(jiǎn)述血漿脂蛋白測(cè)定方法的種類。27.簡(jiǎn)述血糖的來(lái)源與去路28.簡(jiǎn)要評(píng)價(jià)血糖酶法測(cè)定的主要特點(diǎn)29.簡(jiǎn)述C-肽測(cè)定的主要用途：30.簡(jiǎn)述超速離心法與電泳法分離血漿脂蛋白的相應(yīng)關(guān)系31.簡(jiǎn)述LDL-R、VLDL-R、SR的特點(diǎn)32.說(shuō)明LDL受體途徑對(duì)細(xì)胞內(nèi)膽固醇的調(diào)節(jié)機(jī)理33.何謂CETP？有何生理作用？34.簡(jiǎn)述GPO-PAP法測(cè)定TG的基本原理，并說(shuō)明如何在實(shí)驗(yàn)中去除FG的影響35.試以AMI為例，論述哪些血清酶及其同工酶可用于其診斷，他們的診斷價(jià)值及臨床意義如何？36.急性時(shí)相反應(yīng)(APR)蛋白的定義，分類及臨床應(yīng)用。37.血清清蛋白測(cè)定(BCG法)BCG試劑成份分析，實(shí)驗(yàn)條件控制。38.Michaelis--Mentenequation，Km值在酶學(xué)測(cè)定中的應(yīng)用。39方法學(xué)討論：①標(biāo)準(zhǔn)比較法Cu=×Cs②用摩爾吸光系數(shù)表示酶活性IU/L=×各有何特點(diǎn)和注意事項(xiàng)？40.方法學(xué)討論：以ALT(連續(xù)監(jiān)測(cè)法)，TG測(cè)定(GPO-PAP法)為例，探討雙試劑法的意義。41.同功在臨床診斷上的應(yīng)用。42.方法學(xué)討論：酶活性測(cè)定與酶質(zhì)量測(cè)定探討。43.糖尿病1、2分型，檢測(cè)44.糖尿病并發(fā)癥45.血糖測(cè)定(GOD-POD終點(diǎn)法)不同廠家的試劑盒的反應(yīng)時(shí)間各不相同(10,15,20min)能否統(tǒng)一為15min？理論依據(jù)。46.血液糖化蛋白檢測(cè)的項(xiàng)目和意義。47.WHO，1970高脂蛋白血癥分型要點(diǎn)。48.高脂血癥與動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系。49.HDL抗動(dòng)脈粥樣硬化功能探討。50.Apolipoprotein檢測(cè)的臨床意義。51.DHLC抗動(dòng)脈粥樣硬化的功能

名詞解釋：1.急性時(shí)相反應(yīng)蛋白（acutephaseractionprotein,APRP）：在急性炎癥性疾病如手術(shù)、創(chuàng)傷、心肌梗死、感染、腫瘤等，AAT、AAG、Hp、CRP以及α1-抗糜蛋白酶、血紅素結(jié)合蛋白、C3、C4、纖維蛋白原等，這些血漿蛋白濃度顯著升高；而血漿PA、ALB、TRF則出現(xiàn)相應(yīng)的低下。這些血漿蛋白質(zhì)統(tǒng)稱為2..同工酶（isoenzyme）

同一種屬中由不同基因或等位基因所編碼的多肽鏈單體、純聚體或雜化體，具有相同的催化功能，但其分子組成、空間構(gòu)象、理化性質(zhì)、生物學(xué)性質(zhì)以及器官分布和細(xì)胞內(nèi)定位不同的一類酶。

3.亞型（isoform）

即指基因在編碼過(guò)程中由于翻譯后修飾的差異所形成的多種形式的一類酶，往往在基因編碼產(chǎn)物從細(xì)胞內(nèi)釋入血漿時(shí)因肽酶作用降解而形成。

4.載脂蛋白Apoprotein，指血漿脂蛋白中的蛋白質(zhì)部分，是由肝及小腸粘膜細(xì)胞合成的特異球蛋白。5.OGTT口服葡萄糖耐量試驗(yàn):是一種葡萄糖負(fù)荷試驗(yàn)，當(dāng)一次口服大量葡萄糖后，在其后2h內(nèi)4次測(cè)定血糖含量，用以了解機(jī)體對(duì)葡萄糖的調(diào)節(jié)能力的試驗(yàn)，稱之為OGTT6.glycatedhemoglobin（GHb）糖化血紅蛋白，在紅細(xì)胞生存期間，HbA與血中已糖（主要是葡萄糖）緩慢、連續(xù)的非酶促反應(yīng)產(chǎn)物，為HbA合成后化學(xué)修飾的結(jié)果酶（enzyme）：是一種由活細(xì)胞產(chǎn)生，具有高度專一性，高度催化活性的物質(zhì)，又稱為生物催化劑，主要是蛋白質(zhì)。7.巨酶（macroenzyme）：血漿中可出現(xiàn)相對(duì)分子質(zhì)量遠(yuǎn)大于該酶正常相對(duì)分子質(zhì)量的一些酶，稱為巨分子酶或酶的大分子形式，簡(jiǎn)稱巨酶。8.同工酶（isoenzyme）：同一種屬中由不同基因或等位基因所編碼的多肽鏈單體，純合體或雜合體，具有相同催化作用，但其分子構(gòu)成，空間構(gòu)象，理化性質(zhì)，生物學(xué)性質(zhì)，以及器官分布或細(xì)胞內(nèi)定位不同的一組酶稱為同工酶。前清蛋白（prealbumin，PA）：相對(duì)分子質(zhì)量55000，為肝臟細(xì)胞合成的糖蛋白，電泳時(shí)遷移在Alb之前，故稱為前清蛋白。9.α1-酸性糖蛋白（α1-acidglycoprotein，AAG）：由181個(gè)氨基酸殘基組成，相對(duì)分子質(zhì)量約40000，是血漿中含糖量最高，酸性最強(qiáng)的糖蛋白。10觸珠蛋白（haptoglobin，Hap）：也是一種急性時(shí)相蛋白和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。在乙酸纖維素膜電泳及瓊脂糖凝膠電泳中位于α2區(qū)帶。Hap是由α與β鏈形成的α2β2四聚體。11氨基酸代謝庫(kù)（metabolicpool）：食物蛋白質(zhì)經(jīng)過(guò)消化而被吸收的氨基酸與體內(nèi)組織蛋白質(zhì)降解產(chǎn)生的氨基酸混在一起，分布在體內(nèi)各處，參與代謝，稱為氨基酸代謝庫(kù)。12氨基酸血癥（amino-acidemia）：當(dāng)酶缺乏出現(xiàn)在代謝途徑的起點(diǎn)時(shí)，其作用的氨基酸將在血液環(huán)中增加，稱為氨基酸血癥。這種氨基酸如從尿中排出，則稱為氨基酸尿癥（amino-aciduria）。13高糖血癥（hyperglycemia）：是糖代謝紊亂導(dǎo)致血糖濃度高于參考范圍上限的異?，F(xiàn)象，主要表現(xiàn)為空腹血糖損傷，糖耐量減退和糖尿病。14糖尿?。╠iabetesmellitus，DM）：是一組由于胰島素分泌不足和或胰島素作用低下而引起的糖代謝紊亂性疾病，其特征是高血糖癥。15OGTT：是在口吸一定量葡萄糖后2h內(nèi)進(jìn)行系列血糖濃度測(cè)定，以評(píng)價(jià)不同個(gè)體的血糖調(diào)節(jié)功能的一種標(biāo)準(zhǔn)方法。16高脂蛋白血癥：指血漿中CM,VL,DL,LDL,HDL等脂蛋白有一種或幾種濃度過(guò)度升高的現(xiàn)象。17酶活性濃度：通過(guò)酶促反應(yīng)單位時(shí)間內(nèi)底物的減少量或產(chǎn)物的生成量來(lái)獲得的酶濃度。18定時(shí)法（fixedtimeassay）：通過(guò)酶作用一段時(shí)間后，加入強(qiáng)酸，強(qiáng)堿，蛋白沉淀劑等終止酶促反應(yīng)，測(cè)定這段時(shí)間底物的減少量或產(chǎn)物的生成量，來(lái)計(jì)算酶促反應(yīng)的平均速度的方法。19連續(xù)監(jiān)測(cè)法（continuousmonitoringassay）：是指每隔一段時(shí)間，連續(xù)多次測(cè)定酶反應(yīng)過(guò)程中某一反應(yīng)產(chǎn)物或底物量隨時(shí)間變化的數(shù)據(jù)，求出酶反應(yīng)初速度，以間接計(jì)算酶活性濃度的方法。20酶的亞型（isoform）：指基因在編碼過(guò)程中由于翻譯后修飾的差異而形成的多種形式的一類酶。21酶活性單位：在一定條件下，單位時(shí)間內(nèi)催化生成一定量的產(chǎn)物或消耗底物所需的酶量。在特定條件下，1min能轉(zhuǎn)化1umol底物的酶量。22摩爾吸光系數(shù)：指物質(zhì)對(duì)某波長(zhǎng)的光的吸收能力的量度。23急性時(shí)相反應(yīng)蛋白（APRP）：隨著機(jī)體出現(xiàn)急性炎癥或某些組織損傷時(shí)，血漿內(nèi)某些蛋白質(zhì)含量升高或降低，這些血漿蛋白稱急性時(shí)相反應(yīng)蛋白。24朗伯-比爾定律（lumbert定律）當(dāng)一適當(dāng)波長(zhǎng)的單色光通過(guò)一固定濃度的溶液時(shí)，其吸光度與光通過(guò)的液層厚度成正比。1.與糖尿病相關(guān)生化檢測(cè)指標(biāo)有哪些？它們的臨床意義有何不同？

與糖尿病相關(guān)的生化指標(biāo)很多，大致可分成以下幾類：

（1）與診斷有關(guān)：血糖，包括隨機(jī)血糖、空腹血糖等口服葡萄糖耐量試驗(yàn)、尿糖

（2）胰島素的依賴評(píng)價(jià)指標(biāo)：與Ⅰ型糖尿病相關(guān)的有：血酮體、尿酮體自身抗體：ICA、IAA、GAD等胰島素和C肽：下降程度大

（3）糖尿病的監(jiān)控指標(biāo)：短期監(jiān)控：血糖、尿糖長(zhǎng)期監(jiān)控：糖化血紅蛋白、果糖胺

等2.簡(jiǎn)述目前糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)：目前糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)是：①出現(xiàn)糖尿病典型癥狀加上隨機(jī)靜脈血漿葡萄糖濃度≥11.1mmol/L（200mg/dl）；（2）空腹靜脈血漿葡萄糖濃度≥7.0mmol/L(126mg/dl)；（3）OGTT中2h靜脈血漿葡萄糖濃度≥11.1mmol/L（200mg/dl）。以上三種方法都可單獨(dú)用于糖尿病的診斷，但任何一種陽(yáng)性結(jié)果都必須隨后用三種方法中的任意一種進(jìn)行復(fù)查才能正式確診。3.簡(jiǎn)述OGTT：早晨空腹取血（空腹8-14小時(shí)后），取血后于5分鐘內(nèi)服完溶于250-300ml水內(nèi)的無(wú)水葡萄糖75g從口服第一口時(shí)計(jì)時(shí)，于服糖后30min、1h、1.5h2h做系列血糖濃度測(cè)定，以評(píng)價(jià)不同個(gè)體的血糖調(diào)節(jié)功能的一種標(biāo)準(zhǔn)方法。OGTT在糖尿病的診斷上并非必需，因此不推薦臨床常規(guī)應(yīng)用。OGTT主要用于下列情況：①診斷妊娠期糖尿?。℅DM）；②診斷糖耐量減退（IGT）；③有無(wú)法解釋的腎病、神經(jīng)病變或視網(wǎng)膜病變，其隨機(jī)血糖＜7.8mmol/L，可用OGTT評(píng)價(jià)。在此時(shí)如有異常OGTT結(jié)果，不代表有肯定因果關(guān)系，還應(yīng)該排除其他疾??；④人群篩查，以獲取流行病學(xué)數(shù)據(jù)。4.黃疸的形成機(jī)制有哪些：（1）溶血性黃疸：溶血性黃疸是由于多種原因使紅細(xì)胞大量破壞，膽紅素生成加速，超過(guò)了肝臟的處理能力，因而引起高未結(jié)合膽紅素血癥。實(shí)驗(yàn)室檢查可發(fā)現(xiàn)血中未結(jié)合膽紅素明顯增加，結(jié)合膽紅素濃度也偶可有輕度增加，尿膽紅素陰性，尿膽素原增多等。（2）肝細(xì)胞性黃疸：由于肝細(xì)胞被破壞，血中未結(jié)合膽紅素的攝取、結(jié)合和排泄能力發(fā)生障礙，使血中未結(jié)合膽紅素增多；還可由于肝細(xì)胞腫脹，毛細(xì)膽管阻塞或毛細(xì)膽管與肝血竇直接相通，導(dǎo)致部分結(jié)合膽紅素反流入血，使血中結(jié)合膽紅素濃度升高，尿中膽紅素陽(yáng)性。腸道重吸收的膽素原經(jīng)受損的肝臟進(jìn)入體循環(huán)，從而尿膽素原排出增多。(3)阻塞性黃疸：各種原因引起的膽汁排泄受阻，膽小管和毛細(xì)膽管內(nèi)的壓力增大而破裂，導(dǎo)致結(jié)合膽紅素逆流入血，造成血液結(jié)合膽紅素升高，從腎臟排出體外，尿膽紅素陽(yáng)性；由于膽管阻塞，腸道膽素原生成減少，尿膽素原水平降低。5.反映腎小球?yàn)V過(guò)功能的試驗(yàn)有哪些:主要試驗(yàn)為：腎小球?yàn)V過(guò)率測(cè)定、血肌酐和尿素濃度測(cè)定、血清尿酸測(cè)定、血胱氨酸蛋白酶抑制劑C測(cè)定、氨甲酰血紅蛋白測(cè)定、中分子物質(zhì)測(cè)定和尿蛋白測(cè)定等。第一章6.簡(jiǎn)述臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)的進(jìn)展及發(fā)展趨勢(shì)：①分子診斷學(xué)迅速發(fā)展，代表了的發(fā)展方向②深入尋找高診斷特異性和靈敏性的新生物化學(xué)標(biāo)志，提高診斷性能③檢測(cè)技術(shù)和方法的更新完善，更加及時(shí)、準(zhǔn)確地提供檢驗(yàn)結(jié)果④全程質(zhì)量管理⑤以循證檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)為基礎(chǔ)，科學(xué)評(píng)價(jià)有關(guān)檢測(cè)項(xiàng)目的診斷性能，合理有效地開(kāi)展臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)。第二章診斷酶學(xué)7.根據(jù)米-曼式方程計(jì)算，當(dāng)[s]=3Km時(shí)，其反應(yīng)速度V為多大：V=Vm[s]/(Km+[s])=Vm*3Km/(Km+3Km)=3/4Vm=0.75Vm，即V/Vm=0.75。7.簡(jiǎn)述正常血漿中的酶動(dòng)態(tài)特點(diǎn)及影響酶濃度的因素：正常血漿中酶的動(dòng)態(tài)變化特點(diǎn)：①正常血漿酶根據(jù)酶的來(lái)源及其在血漿中發(fā)揮催化功能的情況，可將血漿酶分成血漿特異酶和非血漿特異酶兩大類，非血漿特異酶可進(jìn)一步分為外分泌酶、細(xì)胞內(nèi)酶和其他酶。②一般認(rèn)為，血液中酶的清除方式與其他血漿蛋白質(zhì)類似，但是具體清除途徑尚未完全明了。血漿酶主要在血管內(nèi)失活或分解，尿液則是小分子酶排出的途徑。影響酶濃度的因素包括影響正常血漿酶含量的自身因素和生物學(xué)因素，前者主要有細(xì)胞內(nèi)外酶濃度的差異、酶的相對(duì)分子量、酶的組織分布、酶在細(xì)胞內(nèi)的定位和存在形式、酶的半壽期等；后者主要是性別、年齡、食與藥物、運(yùn)動(dòng)、妊娠與分娩、體位改變、晝夜變化及家庭因素等。8.簡(jiǎn)述病理性血漿中酶濃度異常的機(jī)制:血漿酶的病理性變化主要包括酶合成異常、酶釋放增加、酶清除異常等。酶合成異常包括合成減少和合成增多。酶從病變（或損傷）細(xì)胞中釋放增加是疾病時(shí)大多數(shù)血清酶增高的主要機(jī)制。炎癥、缺血、壞死、創(chuàng)傷和腫瘤等是細(xì)胞釋放大分子酶蛋白的重要原因。此外，血液含抑制物、代謝紊亂、藥物、遺傳性酶缺陷等原因也可致酶活性下降。9.簡(jiǎn)述酶濃度的測(cè)定方法:酶濃度測(cè)定方法分為絕對(duì)定量法和相對(duì)定量法兩大類。絕對(duì)定量法是直接測(cè)定酶蛋白量或酶摩爾濃度。相對(duì)定量法是根據(jù)酶的催化活性或酶促反應(yīng)速度來(lái)間接測(cè)定酶濃度的方法。目前臨床上所用的方法多屬相對(duì)定量法。10.簡(jiǎn)述酶偶聯(lián)反應(yīng)法的原理:在酶活性測(cè)定時(shí)，如果底物或產(chǎn)物不能直接測(cè)定或難于準(zhǔn)確測(cè)定，可采用酶偶聯(lián)法測(cè)定，即在反應(yīng)體系中加入一個(gè)或幾個(gè)工具酶，將待測(cè)酶生成的某一產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為新的可直接測(cè)定的產(chǎn)物，當(dāng)加入酶的反應(yīng)速度與待測(cè)酶反應(yīng)速度達(dá)到平衡時(shí)，指示酶的反應(yīng)速度即代表待測(cè)酶的活性。11.簡(jiǎn)述臨床同工酶的分析方法:臨床同工酶的分析方法有電泳法、免疫分析法、色譜法、動(dòng)力學(xué)分析法、蛋白酶水解法。12.簡(jiǎn)述體液中酶濃度測(cè)定的主要影響因素及控制:體液中酶濃度測(cè)定時(shí)，要控制的主要影響因素包括標(biāo)本及標(biāo)本采集和處理因素、試劑及方法學(xué)因素、儀器及操作因素，以及最適測(cè)定條件選擇與條件的優(yōu)化。13.臨床酶學(xué)測(cè)定之前，標(biāo)本的采集、處理與貯存有何注意點(diǎn)?測(cè)定酶濃度的樣本來(lái)自不同的組織和器官，但以血清和血漿最為常用，特別是血清，既可避免抗凝劑的影響，又可防止抗凝時(shí)因振搖所致的溶血。臨床酶學(xué)測(cè)定之前，標(biāo)本的采集、處理與貯存應(yīng)注意：防止溶血、合理使用抗凝劑、適宜的溫度、減少副反應(yīng)干擾。此外，采集各種體液樣本的器皿質(zhì)地和潔凈度，采血部位，以及血清中過(guò)量的膽紅素、脂質(zhì)，樣品制備過(guò)程中的振搖等，均影響酶活性測(cè)定。14.簡(jiǎn)述自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行臨床酶學(xué)測(cè)定時(shí)系數(shù)K值的計(jì)算與應(yīng)用:用自動(dòng)生物化學(xué)分析儀測(cè)定酶活性，通常采用公式進(jìn)行計(jì)算。當(dāng)條件固定時(shí)，理論K值為常數(shù)。由于儀器等諸多因素的影響，在臨床實(shí)際工作中，均需用校準(zhǔn)物定期檢查和校正實(shí)際測(cè)定K值。15.簡(jiǎn)述ALT測(cè)定及其臨床意義:轉(zhuǎn)氨酶的測(cè)定方法有許多種，以往多用比色法如賴氏法（Reitman-Frankel）、金氏法（King）和改良穆氏法（Mohun），其中以賴氏法最常用，由于此法操作簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)，一些小型實(shí)驗(yàn)室仍在使用。目前，國(guó)內(nèi)外實(shí)驗(yàn)室多采用IFCC推薦的連續(xù)監(jiān)測(cè)方法對(duì)ALT進(jìn)行測(cè)定。ALT主要用于肝臟疾病的診斷。由于肝細(xì)胞中ALT濃度比血液高約7000倍，只要有1/1000肝細(xì)胞中的ALT進(jìn)入血液就足以使血中ALT升高1倍，故此酶是反映肝損傷的一個(gè)很靈敏指標(biāo)。但應(yīng)特別注意的是，重癥肝炎時(shí)由于大量肝細(xì)胞壞死，血中ALT可僅輕度增高，臨終時(shí)常明顯下降，但膽紅素卻進(jìn)行性升高，出現(xiàn)所謂“酶膽分離”現(xiàn)象，常是肝壞死的前兆。16.

AAT的臨床意義有：低血漿AAT可以發(fā)現(xiàn)于胎兒呼吸窘迫綜合癥。AAT缺陷常伴有早年出現(xiàn)的肺氣腫。當(dāng)M型AAT蛋白缺乏時(shí)，蛋白水解酶過(guò)度地作用于肺泡壁的彈性纖維而導(dǎo)致肺氣腫的發(fā)生。AAT的缺陷，特別是ZZ表現(xiàn)型可引起肝細(xì)胞的損害而致肝細(xì)胞硬化。17.簡(jiǎn)述CK及其同工酶測(cè)定的臨床意義:CK的測(cè)定方法有比色法、紫外分光光度法和熒光法等。由于以磷酸肌酸為底物的逆向反應(yīng)速度為正向反應(yīng)速度的6倍，所以采用逆向反應(yīng)進(jìn)行測(cè)定較為普及。如肌酸顯色法和酶偶聯(lián)法，其中后者最常用，為國(guó)內(nèi)外測(cè)定CK的參考方法。CK同工酶多用電泳和免疫抑制法測(cè)定，但兩法均會(huì)受溶血和巨CK的干擾，免疫抑制法還會(huì)受到CK-BB的干擾。因此現(xiàn)在推薦用免疫化學(xué)方法直接測(cè)定CK-MBmass，可不受溶血和巨CK的干擾。CK同工酶亞型（CK-MM亞型和CK-MB亞型）多用瓊脂糖凝膠高壓電泳和等電聚焦電泳等。CK及其同工酶和亞型是目前臨床上測(cè)定次數(shù)最多的酶，主要用于心肌、骨骼肌和腦疾患的診斷和鑒別診斷及預(yù)后判斷。18.試述血清ACP活性測(cè)定的臨床意義：ACP的測(cè)定多是利用磷酸苯二鈉法和磷酸對(duì)硝基酚法等在酸性條件下測(cè)定ACP。國(guó)外多推薦使用磷酸百里酚酞為底物的比色法，因?yàn)榍傲邢貯CP對(duì)此底物親合力高，測(cè)定結(jié)果基本能反映ACP含量高低。不同方法參考值也不同。此外還可通過(guò)用L-酒石酸這類抑制劑鑒別和估量PAP活性。由于ACP不穩(wěn)定，酶活性測(cè)定困難，目前已發(fā)展一些免疫學(xué)方法特異而靈敏地測(cè)定ACP特別是PAP?？侫CP升高可作為前列腺癌、骨疾病或網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)疾病的診斷指標(biāo)。19.試述血清淀粉酶測(cè)定有何臨床意義：臨床上測(cè)定血液AMY主要用于診斷急性胰腺炎，常在腹痛后2～3h開(kāi)始升高（也有延至12h后升高者），多在12～24h達(dá)峰值，2～5d恢復(fù)正常。峰值一般為4ULN～6ULN，最高可達(dá)40倍。此值愈高，急性胰腺炎的可能性就愈大，但高低和疾病預(yù)后關(guān)系不大，但若持續(xù)性升高達(dá)數(shù)周，常提示胰腺炎有反復(fù)，或有并發(fā)癥發(fā)生。尿AMY約于發(fā)病后12～24h開(kāi)始升高，下降也比血液AMY慢，因此在急性胰腺炎后期測(cè)定尿AMY更有價(jià)值。唾液腺疾病如腮腺炎患者血AMY也可升高，但臨床表現(xiàn)迥異，且主要為S-AMY升高，有別于胰腺炎以P-AMY升高為主。第三章血漿蛋白質(zhì)與含氮化合物20.簡(jiǎn)述血漿蛋白質(zhì)的功能：血漿蛋白質(zhì)具有多方面的功能，可概括為：①維持血漿膠體滲透壓，這是清蛋白的主要功能；②作為激素、維生素、脂類、代謝產(chǎn)物、離子、藥物等的載體；③作為pH緩沖系統(tǒng)的一部分；④營(yíng)養(yǎng)作用，修補(bǔ)組織蛋白；⑤抑制組織蛋白酶；⑥一些酶在血漿中起催化作用；⑦參與凝血與纖維蛋白溶解；⑧作為免疫球蛋白與補(bǔ)體等免疫分子，組成體液免疫防御系統(tǒng)。血漿總蛋白的濃度增高：

（1）血清中水分減少，使總蛋白濃度相對(duì)增高：見(jiàn)于急性失水引致血液濃縮（如嘔吐、腹瀉、高熱等）；又如休克時(shí)，毛細(xì)血管通透性的變化，血液發(fā)生濃縮。

（2）血清蛋白質(zhì)合成增加：主要是球蛋白增加，多見(jiàn)于骨髓瘤病人。

血漿總蛋白濃度降低：

⑴水、鹽滯留血液稀釋。

⑵攝入不足（營(yíng)養(yǎng)不良、吸收不良）。

⑶消耗性疾病（嚴(yán)重結(jié)核、惡性腫瘤）。

⑷合成障礙（肝功能受損）。

⑸丟失增高（嚴(yán)重?zé)齻?、失血、腎病綜合癥、蛋白漏出性胃腸炎）。

21.試述測(cè)定血清銅藍(lán)蛋白的方法及參考值和臨床意義：銅藍(lán)蛋白在血清中含量鉸低。一般采用免疫透射比濁法測(cè)定，參考值為0.21~0.53g/L。另外，還可采用醋酸纖維薄膜電泳法測(cè)定，其參考值為0.4g/L22.簡(jiǎn)述低清蛋白血癥的臨床意義：低清蛋白血癥既可由生理（如妊娠）或病理因素或引起，也可由于輸液造成血液稀釋時(shí)抽血的假象所致。導(dǎo)致低蛋白血癥的病理因素有：（1）清蛋白合成降低：①常見(jiàn)于急性或慢性肝臟疾病，但由于清蛋白的半壽期較長(zhǎng)，因此在部分急性肝病患者，其濃度降低可不明顯；②蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)不良或腸道吸收不良也可造成清蛋白合成不足。（2）清蛋白的分布異常：如門(mén)靜脈高壓時(shí)大量蛋白質(zhì)尤其是清蛋白從血管內(nèi)滲漏入腹腔。肝硬化導(dǎo)致門(mén)脈高壓時(shí)，由于肝臟合成減少和大量漏入腹水的雙重原因，使血漿清蛋白顯著下降。（3）清蛋白丟失：①腎病綜合征、慢性腎小球腎炎、糖尿病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等，清蛋白由尿中損失，有時(shí)每天尿中排出蛋白達(dá)5g以上，超過(guò)肝的代償能力；②腸道炎癥性疾病時(shí)，可因粘膜炎癥壞死等使胃腸道蛋白質(zhì)丟失，從而引起血漿清蛋白下降；③在燒傷及滲出性皮炎，可從皮膚喪失大量蛋白質(zhì)。（4）清蛋白分解代謝增加：由組織損傷（外科手術(shù)或創(chuàng)傷）或炎癥（感染性疾病）引起。（5）無(wú)清蛋白血癥：是一種罕見(jiàn)的遺傳疾病，屬先天性白蛋白合成缺陷，血漿清蛋白含量常低于1g/L。但可以沒(méi)有癥狀或體征，甚至可以沒(méi)有水腫，部分原因可能是血管中球蛋白含量代償性升高所致。23.簡(jiǎn)述轉(zhuǎn)鐵蛋白的臨床意義：（1）用于貧血的鑒別診斷。在缺鐵性的低血色素貧血中，TRF代償性合成增加，但因血漿鐵含量低，結(jié)合鐵的TRF少，所以鐵飽和度很低（參考范圍在30%～38%）。而再生障礙性貧血時(shí)，血漿中TRF正常或低下，由于紅細(xì)胞對(duì)鐵的利用障礙，使鐵飽和度增高。在鐵負(fù)荷過(guò)量時(shí)，TRF水平正常，而飽和度可超過(guò)50%，甚至達(dá)90%。（2）TRF是負(fù)性急時(shí)相反應(yīng)蛋白。在炎癥、腫瘤時(shí)常隨著清蛋白、前清蛋白同時(shí)下降。（3）作為營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)的一項(xiàng)指標(biāo)。在營(yíng)養(yǎng)不良及慢性肝臟疾病時(shí)下降，與清蛋白相比，體內(nèi)轉(zhuǎn)鐵蛋白總量較少、生物半壽期較短，故可及時(shí)地反映臟器蛋白的急劇變化。在高蛋白膳食治療時(shí)，血漿TRF濃度較快上升，是判斷療效的良好指標(biāo)。24.簡(jiǎn)述新生兒PKU的診斷方法：Guthrie試驗(yàn)、熒光光度法、苯丙氨酸脫氫酶法是目前國(guó)際上進(jìn)行新生兒PKU篩查的常用方法。Guthrie試驗(yàn)是由Guthrie建立的一種細(xì)菌抑制法，首先在PKU的篩查試驗(yàn)中用來(lái)測(cè)定人血清、尿液中苯丙氨酸。通過(guò)抑菌圈的大小來(lái)半定量樣本中的苯丙氨酸濃度。新生兒的篩查在歐美國(guó)家廣泛地進(jìn)行，因?yàn)橛?%以上的PKU病例并不是由于PAH缺乏所致，而是由于生物蝶呤合成所需的酶缺乏所致。評(píng)估應(yīng)包括尿中生物蝶呤和新蝶呤的測(cè)定和有時(shí)可能還要測(cè)定其血清含量。新生兒PKU的診斷試驗(yàn)通常包括用色譜法、熒光分光光度法和FeCl3法檢測(cè)尿中苯丙酮酸。用DNA分析技術(shù),如PCR-ASO探針?lè)ê蚉CR-RFLP連鎖分析法鑒定出導(dǎo)致PKU的點(diǎn)突變。（Guthrie試驗(yàn)：在PKU的篩查試驗(yàn)中用來(lái)測(cè)定人血清、尿液中苯丙氨酸。原理：瓊脂糖培養(yǎng)基中的噻吩丙氨酸可抑制枯草桿菌的生長(zhǎng)，而苯丙氨酸及其代謝產(chǎn)物苯丙酮酸等可抑制噻吩丙氨酸的此種作用。將浸有血液或尿液的濾紙片置于培養(yǎng)基表面上培養(yǎng)，通過(guò)抑菌圈的大小來(lái)半定量樣本中的苯丙氨酸濃度。）25.簡(jiǎn)述臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)的進(jìn)展及發(fā)展趨勢(shì)：①分子診斷學(xué)迅速發(fā)展，代表了的發(fā)展方向；②深入尋找高診斷特異性和靈敏性的新生物化學(xué)標(biāo)志，提高診斷性能；③檢測(cè)技術(shù)和方法的更新完善，更加及時(shí)、準(zhǔn)確地提供檢驗(yàn)結(jié)果；④全程質(zhì)量管理；⑤以循證檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)為基礎(chǔ)，科學(xué)評(píng)價(jià)有關(guān)檢測(cè)項(xiàng)目的診斷性能，合理有效地開(kāi)展臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)。26.簡(jiǎn)述血漿脂蛋白測(cè)定方法的種類。

主要有：

(1)超速離心分離純化法

目前廣泛應(yīng)用于脂蛋白、載脂蛋白代謝的研究中。通?？蓪⒀獫{脂蛋白分為CM、VLDL、LDL和HDL等四大類。

(2)電泳分離法

由于血漿脂蛋白表面電荷量大小不同，在電場(chǎng)中，其遷移速率也不同，從而將血漿脂蛋白分為乳糜微粒、臼脂蛋白、前口脂蛋白和a脂蛋白等四種。

(3)血漿靜置實(shí)驗(yàn)若出現(xiàn)奶油樣上層，即CM增加，若下層為混濁者即VLDL增加。如果LDL增加，血漿仍呈現(xiàn)透明狀態(tài)。這一試驗(yàn)是粗略判斷血中脂蛋白是否異常增加的簡(jiǎn)易方法。健康人，該實(shí)驗(yàn)陰性(無(wú)奶油樣上層)。

第四章糖代謝紊亂27.簡(jiǎn)述血糖的來(lái)源與去路：根據(jù)機(jī)體所處的不同狀態(tài)，血糖主要有三個(gè)來(lái)源：①食物中糖類的消化吸收，這是機(jī)體進(jìn)餐時(shí)血糖的主要來(lái)源，也是體內(nèi)血糖的根本來(lái)源；②肝糖原的分解，這是空腹時(shí)血糖的直接來(lái)源，也是維持血糖恒定的重要機(jī)制；③肝臟的糖異生，在長(zhǎng)期禁食、肝糖原耗盡的情況下，糖異生也參與維持血糖濃度的恒定。葡萄糖的代謝過(guò)程根據(jù)機(jī)體的需要而定，主要代謝去路有：①有氧氧化，產(chǎn)生ATP并生成CO2和H2O，這是血糖的主要代謝去路；②合成糖原；③轉(zhuǎn)換為非糖物質(zhì)；④轉(zhuǎn)換為其他糖類衍生物；⑤生成尿糖，指病理狀態(tài)下，血糖濃度高于腎糖閾時(shí)，可從尿排出。28.簡(jiǎn)要評(píng)價(jià)血糖酶法測(cè)定的主要特點(diǎn)：目前血糖測(cè)定主要采用酶法，包括①已糖激酶法，該法準(zhǔn)確度和精密度高，特異性高于葡萄糖氧化酶法，適用于自動(dòng)化分析，為葡萄糖測(cè)定的參考方法；②葡萄糖氧化酶-過(guò)氧化物酶法，該法準(zhǔn)確度和精密度都能達(dá)到臨床要求，并且操作簡(jiǎn)便，適用于常規(guī)檢驗(yàn)；③葡萄糖氧化酶-極譜分析法，該法是GOD-POD的改良方法，它以氧電極進(jìn)行極譜分析，直接測(cè)定葡萄糖氧化酶法第一步反應(yīng)消耗的氧來(lái)進(jìn)行定量，摒棄了特異性不高的第二步反應(yīng)。該法可用于血漿、血清、腦脊液及尿液標(biāo)本的測(cè)定，但由于血細(xì)胞會(huì)消耗氧氣，故不能用于全血標(biāo)本；④葡萄糖脫氫酶法，該法高度特異，不受各種抗凝劑和血漿中其他物質(zhì)的干擾，制作成固相酶，可用于連續(xù)流動(dòng)分析，也可用于離心沉淀物的分析。29.簡(jiǎn)述C-肽測(cè)定的主要用途：C-肽測(cè)定的主要用途包括：①最主要用于評(píng)估空腹低血糖。某些β細(xì)胞瘤病人，特別是有間歇性胰島素分泌過(guò)多時(shí)，檢測(cè)胰島素可正常但C-肽濃度都升高。當(dāng)?shù)脱鞘怯捎谝葝u素注射所致時(shí)，胰島素水平會(huì)很高而C-肽降低，這是因?yàn)镃-肽不存在于藥用胰島素中，并且外源性胰島素會(huì)抑制β細(xì)胞分泌功能。②評(píng)估胰島素分泌?；A(chǔ)或刺激性C-肽水平可用以評(píng)價(jià)患者胰島素分泌能力和分泌速度。如糖尿病患者在用胰高血糖素刺激后C-肽大于1.8ng/ml可能是2型糖尿病，而C-肽＜時(shí)可能是1型糖尿病。因此C-肽濃度對(duì)鑒別1型和2型糖尿病具有一定價(jià)值。③監(jiān)測(cè)胰腺手術(shù)效果。在全胰腺切除術(shù)后，檢測(cè)不到血清C-肽，而在成功的胰腺或胰島細(xì)胞移植后C-肽濃度應(yīng)增加。第五章血漿脂蛋白代謝紊亂30.簡(jiǎn)述超速離心法與電泳法分離血漿脂蛋白的相應(yīng)關(guān)系：超速離心法是根據(jù)各種脂蛋白在一定密度的介質(zhì)中進(jìn)行離心時(shí)，因漂浮速率不同而進(jìn)行分離的方法。該法可將血漿脂蛋白分為CM、VLDL、LDL、HDL等四大類。利用醋酸纖維素薄膜或瓊脂糖凝膠作支持物進(jìn)行電泳時(shí)，血漿脂蛋白可被分為乳糜微粒、β-脂蛋白、前β-脂蛋白和α-脂蛋白等四種。31.簡(jiǎn)述LDL-R、VLDL-R、SR的特點(diǎn)：LDL-R是由836個(gè)氨基酸殘基組成36面體結(jié)構(gòu)蛋白，分子量約115kD；廣泛分布于肝、動(dòng)脈壁平滑肌細(xì)胞、腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等；與含ApoB100的脂蛋白以高親和力結(jié)合；通過(guò)LDL受體途徑調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平。VLDL受體（VLDL-R）的結(jié)構(gòu)與LDL-R類似；對(duì)含ApoE的脂蛋白VLDL和VLDL殘粒有高親和性，對(duì)LDL則呈現(xiàn)低親和性；不受細(xì)胞內(nèi)膽固醇負(fù)反饋抑制；VLDL-R廣泛分布在代謝活躍的心肌、骨骼肌、脂肪組織等細(xì)胞，但在肝內(nèi)幾乎未發(fā)現(xiàn)。清道夫受體（SR）分為A類清道夫受體（SR-A）和B類清道夫受體（SR-B）；清道夫受體配體譜廣泛，對(duì)oxLDL、LDL、HDL以及VLDL都有較強(qiáng)的親和性，并參與脂類代謝。32.說(shuō)明LDL受體途徑對(duì)細(xì)胞內(nèi)膽固醇的調(diào)節(jié)機(jī)理：LDL或其他含ApoB100的脂蛋白如VLDL與LDL受體結(jié)合后，內(nèi)吞入細(xì)胞，經(jīng)溶酶體酶作用，膽固醇酯水解成游離膽固醇。若胞內(nèi)膽固醇濃度升高，可通過(guò)：①抑制HMGCoA還原酶，減少自身的膽固醇合成；②抑制LDL-R基因的表達(dá)，減少LDL-R的合成，從而減少LDL的攝取；③激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脂酰基CoA膽固醇?；D(zhuǎn)移酶（ACAT），使游離膽固醇在胞質(zhì)內(nèi)酯化成膽固醇酯貯存，從而控制細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量，使其處于正常動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)。33.何謂CETP？有何生理作用？CETP為膽固醇酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，是膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)中的關(guān)鍵蛋白質(zhì)。周?chē)M織細(xì)胞膜的游離膽固醇與HDL結(jié)合后，被LCAT酯化成膽固醇酯，移入HDL核心，通過(guò)CETP轉(zhuǎn)移給VLDL和LDL，再被肝臟LDL及VLDL受體攝入肝細(xì)胞。34.簡(jiǎn)述GPO-PAP法測(cè)定TG的基本原理，并說(shuō)明如何在實(shí)驗(yàn)中去除FG的影響：GPO-PAP法為臨床實(shí)驗(yàn)室測(cè)定血清TG的常規(guī)方法，反應(yīng)原理如下：血清中TG在LPL作用下，水解為甘油和FFA，甘油在ATP和甘油激酶（GK）的作用下，生成3-磷酸甘油，再經(jīng)磷酸甘油氧化酶（glycerophosphateoxidase，GPO）作用氧化生成磷酸二羥丙酮和過(guò)氧化氫（H2O2），H2O2與4-氨基安替比林（4-AAP）及4-氯酚在過(guò)氧化物酶（POD）作用下，生成紅色醌類化合物，其顯色程度與TG的濃度成正比。采用兩步雙試劑法去除FG的影響。將LPL和4-AAP組成試劑2，其余部分為試劑1。血清先加試劑1，37℃孵育后，因無(wú)LPL存在，TG不被水解，F(xiàn)G在GK和GPO的作用下反應(yīng)生成H2O2，但因不含4-AAP，不能完成顯色反應(yīng)，故可除去FG的干擾；再加入試劑2，即可測(cè)出TG水解生35.試以AMI為例，論述哪些血清酶及其同工酶可用于其診斷，他們的診斷價(jià)值及臨床意義如何？

1.（1）AST，AMI發(fā)病6～8h即升高，48～60h達(dá)到高峰，4～5d恢復(fù)正常。（2）CK，CK-MB同工酶測(cè)定比總CK具有更高的靈敏度和特異性，是曾經(jīng)公認(rèn)的診斷AMI最有價(jià)值的生化指標(biāo)。CK-MM亞型測(cè)定對(duì)早期AMI的檢出更為敏感，一般以CK-MM3/CK-MM1＞1.0作為診斷AMI的標(biāo)準(zhǔn)，但必須排除急性骨骼肌損傷。AMI發(fā)病2～4h

CK-MM3/CK-MM1即開(kāi)始升高，8～12h達(dá)峰值。CK-MB2亞型在AMI早期診斷和判斷有無(wú)再灌注上有很高的靈敏度和特異性。一般以CK-MB2＞1.9U/L或CK-MB2/CK-MB1＞1.5作為AMI的診斷標(biāo)準(zhǔn)。

（3）LD，AMI時(shí)，LD由于分子量較大，在常用心肌酶中升高最遲，通常在梗死8～18h升高，48～144h達(dá)峰值，但其半壽期較長(zhǎng)，增高持續(xù)時(shí)間可達(dá)5～10d，此時(shí)其它酶已恢復(fù)正常，在亞急性心肌梗死診斷上有一定價(jià)值。但其診斷AMI特異性差，肝炎、白血病、溶血性貧血及晚期惡性腫瘤等均可有不同程度升高。絕大多數(shù)的AMI患者血中LD同工酶都出現(xiàn)LD1/

LD2＞1，即所謂“反轉(zhuǎn)比率”（flipped

LD

ratio）現(xiàn)象，36.急性時(shí)相反應(yīng)(APR)蛋白的定義，分類及臨床應(yīng)用。1）急性時(shí)相反應(yīng)和急性時(shí)相反應(yīng)蛋白：在急性心梗、外傷、炎癥、手術(shù)、腫瘤時(shí)，血漿某些蛋白質(zhì)水平可有明顯增高或降低，這一現(xiàn)象被稱為急性時(shí)相反應(yīng)(APR)，這些蛋白質(zhì)被稱為急性時(shí)相反應(yīng)蛋白。2）急性時(shí)相反應(yīng)蛋白的種類：包括α1-抗胰蛋白酶、α1-酸性糖蛋白、結(jié)合珠蛋白、銅籃蛋白、C4、C3、纖維蛋白原、C-反應(yīng)蛋白等。其血漿濃度在炎癥、創(chuàng)傷、心肌梗死、感染、腫瘤等情況下明顯上升。另外有3種蛋白質(zhì)即前白蛋白、白蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白則相應(yīng)低下。3）急性時(shí)相反應(yīng)蛋白在急性時(shí)相反應(yīng)進(jìn)程中的變化特點(diǎn)及臨床意義：在機(jī)體處于急性時(shí)相反應(yīng)時(shí)，血漿蛋白相繼出現(xiàn)一系列特征性變化，這些變化與疾病進(jìn)程相關(guān)，因此可以此鑒別急性、亞急性、慢性病理狀態(tài)。在一定程度上急性時(shí)相反應(yīng)蛋白與病理?yè)p傷的程度和范圍也有一定的相關(guān)性。如急性心梗時(shí)，早期C-反應(yīng)蛋白、α1-抗胰蛋白酶、α1-酸性糖蛋白、結(jié)合珠蛋白升高很快，然后相繼在3周內(nèi)逐步降低至正常。組織損傷后24h血中結(jié)合珠蛋白和α1-抗胰蛋白酶開(kāi)始升高，同時(shí)可有血中纖維蛋白原水平上升，可使血栓形成的可能性升高。C-反應(yīng)蛋白是一種主要的急性反應(yīng)期的指示蛋白，其在組織損傷后6-8h就可上升，上升幅度可達(dá)正常值的20-500倍，在致病因素消除后C-反應(yīng)蛋白可很快恢復(fù)正常。因?yàn)镃-反應(yīng)蛋白在血中的半衰期<1天，因此其在抗生素治療時(shí)有一定的參考價(jià)值。37.血清清蛋白測(cè)定(BCG法)BCG試劑成份分析，實(shí)驗(yàn)條件控制。試劑:10mol/L溴甲酚綠儲(chǔ)存液(BCG儲(chǔ)存液)：稱取溴甲酚綠，溶于5mL1mol/LNaOH溶液中，加蒸餾水至250mL，置棕色瓶保存。琥珀酸緩沖儲(chǔ)存液(pH4.0)：稱取氫氧化鈉10g，琥珀酸56g，溶解于800mL蒸餾水中，用1mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH至±，加蒸餾水至1L，置4℃疊氮鈉儲(chǔ)存液：稱取疊氮鈉40g溶于1000mL蒸餾水中。聚氧乙烯月桂醚(Brij-35)溶液：稱取聚氧化乙烯月桂醚25g，加蒸餾水80mL，置60℃左右水浴使其溶液，然后加蒸餾水至100mLBCG試劑：于1L容量瓶中加蒸餾水400mL，琥珀酸緩沖儲(chǔ)存液100mL，用吸管準(zhǔn)確加入BCG試劑儲(chǔ)存液8mL，再加入疊氮鈉儲(chǔ)存液，最后用蒸餾水稀釋至刻度，配好的BCG試劑的pH應(yīng)為±。清蛋白標(biāo)準(zhǔn)液：市售。實(shí)驗(yàn)控制：1.BCG系一種pH指示劑，它受酸、堿影響較大，所用器材必須清潔，無(wú)酸、堿污染。2.BCG試劑的pH必須嚴(yán)格控制在pH4.15±0.05，pH升高可使染料空白增高，與清蛋白結(jié)合率下降。所以，控制反應(yīng)液的pH是本法測(cè)定的關(guān)鍵。3.BCG與蛋白質(zhì)結(jié)合的特異性較低。它不僅與清蛋白結(jié)合呈色，還與血清中其它蛋白質(zhì)呈色，其中以α1球蛋白、運(yùn)鐵蛋白（屬β球蛋白）、觸珠蛋白（屬α2球蛋白）最為明顯，BCG與不同蛋白質(zhì)的反應(yīng)速率不同，與清蛋白可立即發(fā)生反應(yīng)（快反應(yīng)），與其它蛋白質(zhì)反應(yīng)較慢（慢反應(yīng)）。38.Michaelis--Mentenequation，Km值在酶學(xué)測(cè)定中的應(yīng)用。Km是酶的一個(gè)特征性常數(shù)（其他如等電點(diǎn)），Km的大小只與酶的性質(zhì)有關(guān)反映酶對(duì)底物親和力的大小選擇酶的最適底物或天然底物計(jì)算不同底物濃度時(shí)的反應(yīng)程度鑒別酶的種類判斷可逆反應(yīng)的速率判斷酶偶聯(lián)反應(yīng)的限速反應(yīng)計(jì)算工具酶的用量39.方法學(xué)討論：①標(biāo)準(zhǔn)比較法Cu=×Cs②用摩爾吸光系數(shù)表示酶活性IU/L=×各有何特點(diǎn)和注意事項(xiàng)？40.方法學(xué)討論：以ALT(連續(xù)監(jiān)測(cè)法)，TG測(cè)定(GPO-PAP法)為例，探討雙試劑法的意義。41.同功酶在臨床診斷上的應(yīng)用。1.同功酶的檢測(cè)可提高酶學(xué)診斷的組織特異性。由于同功酶具有器官特異性，通過(guò)同功酶的檢測(cè)，可確定活性升高的部分來(lái)自何種組織，便能精確地反映出患病器官的損傷程度和基因表達(dá)的變化。例如，心肌型（H型）LDH同功酶在血清里活性增高，而丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性正常，肌酸激酶酶譜異常，這樣就可排除肝臟疾病，而肯定心肌病變。2.同功酶的檢測(cè)可顯著提高酶學(xué)診斷的敏感性,做到早期診斷.因?yàn)橥γ傅母淖兛沙霈F(xiàn)在酶的總活性改變之前,如急性心肌梗塞時(shí),血清中心肌型肌酸激酶同功酶(CK－MB)的升高早于肌酸激酶總活性的升高.同功酶還可以早期診斷嬰幼兒先天遺傳性酶錯(cuò)譯導(dǎo)致的矮小癡呆癥和先天性遺傳疾病,如乙酰膽堿酯酶活性下降對(duì)胎兒神經(jīng)管發(fā)育不全(無(wú)腦兒、腦發(fā)育不全、腦殘缺、侏儒癥)的診斷有特異性，妊娠三個(gè)月即可診斷。據(jù)我國(guó)有關(guān)部門(mén)統(tǒng)計(jì)，由以上原因引起的我國(guó)殘疾新生兒每年約80萬(wàn)，所以同功酶檢測(cè)技術(shù)在優(yōu)生優(yōu)育方面的應(yīng)用具有極其重要的社會(huì)意義。3.同功酶的檢測(cè)對(duì)某些疾病還有判斷預(yù)后價(jià)值。如肝臟病人血中出現(xiàn)線粒體型天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ASTm）活性增高，說(shuō)明肝細(xì)胞被破壞，提示病情已十分嚴(yán)重。隨著病情的好轉(zhuǎn)同功酶譜也會(huì)恢復(fù)正常。因此同功酶的檢測(cè)在術(shù)后，放、化療的療效判斷、復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移及預(yù)后判斷上均具有重要作用。4.特別是同功酶檢測(cè)在腫瘤的早期診斷和研究中具有重要作用。惡性腫瘤細(xì)胞的迅速增殖使許多酶活性發(fā)生變化，在腫瘤組織中酶在含量和結(jié)構(gòu)方面明顯不同于正常組織，常見(jiàn)成年型同功酶的降低或喪失，胎兒型同功酶出現(xiàn)或增高，或者出現(xiàn)酶變異體，如在原發(fā)性肝癌病人血清中出現(xiàn)胎兒腸型堿性磷酸酶同功酶，5’-核苷酸磷酸二酯酶同功酶時(shí)多一條俠帶，是肝癌的敏感指標(biāo)，檢出的陽(yáng)性率高于AFP，因此，同功酶的檢測(cè)在腫瘤的診斷與鑒別診斷中有重要作用。如果幾種酶聯(lián)合檢測(cè)，綜合判斷，能更好的提高診斷的特異性和敏感性，由于同功酶的變化可反映惡性腫瘤中發(fā)生的代謝變化和基因表達(dá)的變化，同功酶的檢測(cè)是研究腫瘤基因表達(dá)的良好指標(biāo)，同時(shí)也有助于腫瘤發(fā)病基理的研究?？傊γ傅臋z測(cè)在病變初期即可提供準(zhǔn)確信息，這對(duì)于疾病的早期診斷、早期治療非常有益，特別是對(duì)各器官癌癥的早期診斷、早期治療具有重要意義。42.方法學(xué)討論：酶活性測(cè)定與酶質(zhì)量測(cè)定探討。（1）按反應(yīng)時(shí)間分類法：20世紀(jì)50年代以前大都使用固定時(shí)間法。這種方法是以酶催化反應(yīng)的平均速度來(lái)計(jì)算酶的活性，現(xiàn)多已不用。50年代中期開(kāi)始采用連續(xù)監(jiān)測(cè)法。這種方法用自動(dòng)生化分析儀上完成，可以測(cè)酶反應(yīng)的初速度，其結(jié)果遠(yuǎn)比固定時(shí)間法準(zhǔn)確，在高濃度標(biāo)本尤為明顯，但本法也受到反應(yīng)時(shí)間，反應(yīng)溫度，試劑等的影響，應(yīng)加以注意。1）定時(shí)法：通過(guò)測(cè)定酶反應(yīng)開(kāi)始后某一時(shí)間段內(nèi)（t1到t2）產(chǎn)物或底物濃度的總變化量來(lái)求取酶反應(yīng)初速度的方法，稱為兩點(diǎn)法，其中t1往往取反應(yīng)開(kāi)始的時(shí)間。在酶反應(yīng)一定時(shí)間后，往往通過(guò)加入強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、蛋白沉淀劑等，使反應(yīng)完全停止，所以也叫中止反應(yīng)法。2）連續(xù)監(jiān)測(cè)法：又稱為動(dòng)力學(xué)法或速率法、連續(xù)反應(yīng)法。在酶反應(yīng)過(guò)程中，用儀器監(jiān)測(cè)某一反應(yīng)產(chǎn)物或底物濃度隨時(shí)間的變化所發(fā)生的改變，通過(guò)計(jì)算求出酶反應(yīng)初速度。3）平衡法：通過(guò)測(cè)定酶反應(yīng)開(kāi)始至反應(yīng)達(dá)到平衡時(shí)產(chǎn)物或底物濃度總變化量來(lái)求出酶活力的方法，又叫終點(diǎn)法。（2）按監(jiān)測(cè)方法分類法：可分為①分光光度法；②旋光法；③熒光法；④電化學(xué)方法；⑤化學(xué)反應(yīng)法；⑥核素測(cè)定法；⑦量熱法。隨著免疫技術(shù)的發(fā)展，出現(xiàn)了利用酶的抗原性，通過(guò)抗原、抗體反應(yīng)來(lái)直接測(cè)定酶的質(zhì)量，直接用質(zhì)量單位ng／ml、μg／L來(lái)表示酶含量的高低。免疫學(xué)方法與測(cè)定活性方法相比，其優(yōu)點(diǎn)是靈敏度和特異性高，不受體液中其他物質(zhì)的影響，特別是抑制劑和激活劑的影響，當(dāng)血液中有酶抑制劑存在，或因基因缺陷，合成了無(wú)活性的酶蛋白時(shí)，可以測(cè)出滅活的酶蛋白量，有利于疾病診斷和科學(xué)研究。如肌酸激酶同酶MB（CKMB）質(zhì)量測(cè)定較活性測(cè)定對(duì)疾病的診斷價(jià)值高。43.糖尿病1、2分型，檢測(cè)1.糖尿病診斷（1）空腹血漿葡萄糖（FPG）：FPG<6.0mmol／L（110mg／dl）為正常，≥6.0～<7.0mmol／L（≥110～<126mg／dl）為空腹血糖受損（IFG），≥7.0mmol／L（126mg／dl）為糖尿病，需另一天再次證實(shí)。（2）OGTT中2小時(shí)血漿葡萄糖（2hPG）：2hPG<7.8mmol／L（140mg／dl）為正常，≥7.8～<11.1mmol／L（≥140～<200mg／dl）為IGT，≥11.1mmol／L（200mg／dl）為糖尿病，需另一天再次證實(shí)。（3）糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)：糖尿病癥狀+隨機(jī)血糖≥11.1mmol／L（200mg／dl），或FPG≥7.0mmol／L（126mg／dl），或0GTT中2hPG≥11.1mmol／L（200mg／dl）。癥狀不典型者，需另一天再次證實(shí)，不主張做第三次OGTT.2.糖尿病分型：糖尿病分為四種類型，即1型糖尿病、2型糖尿病、其他特殊類型和妊娠糖尿病。（1）1型糖尿?。夯颊哂幸葝uβ細(xì)胞破壞，引起胰島素絕對(duì)缺乏，有酮癥酸中毒傾向?？砂l(fā)生于任何年齡，但多見(jiàn)于青少年。起病急。代謝紊亂癥狀明顯，患者需注射胰島素以維持生命。包括免疫介導(dǎo)和特發(fā)性兩種亞型。免疫介導(dǎo)糖尿病常有一種或多種自身抗體存在，例如胰島細(xì)胞抗體（ICA）、胰島素自身抗體（IAA）和谷氨酸脫羧酶65（GAD65）抗體等。（2）2型糖尿病：患者大部分超重或肥胖，也可發(fā)生于任何年齡，但多見(jiàn)于成年人。以胰島素抵抗為主伴胰島素分泌不足，或胰島素分泌不足為主伴或不伴胰島素抵抗?；坚t(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理者在疾病初期大多不需要胰島素治療。通常無(wú)酮癥酸中毒傾向，但在感染等應(yīng)激情況下，也可誘發(fā)酮癥酸中毒。2型糖尿病的遺傳易感性較1型糖尿病強(qiáng)烈。由于高血糖發(fā)展緩慢，許多患者早期因無(wú)典型癥狀，未能引起足夠注意，多年未就診、未發(fā)現(xiàn)糖尿病，發(fā)現(xiàn)糖尿病時(shí)已有大血管和微血管病變發(fā)生。44.糖尿病并發(fā)癥糖尿病并發(fā)癥是一種常見(jiàn)的慢性并發(fā)癥，是由糖尿病病變轉(zhuǎn)變而來(lái)，后果相當(dāng)嚴(yán)重。足病（足部壞疽、截肢）、腎?。I功能衰竭、尿毒癥）、眼?。：磺?、失明）、腦?。X血管病變）、心臟病、皮膚病、性病等是糖尿病最常見(jiàn)的并發(fā)癥，是導(dǎo)致糖尿病患者死亡的主要因素。癥狀：糖尿病并發(fā)癥一般不是急性病癥，而是長(zhǎng)期病變的結(jié)果。糖尿病患者在日常生活中出現(xiàn)以下情況，可以提示發(fā)生了糖尿病并發(fā)癥：1．口渴、咽干：提示血糖升高、血粘度增大。有些人由于口渴中樞不敏感，盡管血糖增高，但無(wú)口渴癥狀。2．疲乏無(wú)力：機(jī)體細(xì)胞內(nèi)代謝產(chǎn)物堆積，故有嚴(yán)重疲乏無(wú)力。3．血壓上升：血糖上升，則血容量增多，出現(xiàn)血壓高。4．周身發(fā)脹：提示血糖降低過(guò)快，造成細(xì)胞內(nèi)水腫。5．腹脹便秘：可能是胃腸平滑肌無(wú)力、自主神經(jīng)受損、雙胍類藥物服用過(guò)多。6．頭痛頭暈：兩種情況易發(fā)生頭痛頭暈：血壓高和低血糖。7．皮膚脫屑：皮膚干燥、脫屑、奇癢，提示有皮膚癥狀。8．雙足麻木：雙足刺痛，繼之麻木，似襪套樣知覺(jué)缺失，提示有糖尿病末梢神經(jīng)炎發(fā)生。9．皮膚變色：雙足蒼白、發(fā)涼、不久變?yōu)榘底?、顯示足部缺血。嚴(yán)重足部缺血是足部發(fā)生肢端壞疽的信號(hào)10．視物不清：出現(xiàn)近視物體不清，而視物件尚好，提示眼調(diào)節(jié)功能降低，可能出現(xiàn)輕度白內(nèi)障。45.血糖測(cè)定(GOD-POD終點(diǎn)法)不同廠家的試劑盒的反應(yīng)時(shí)間各不相同(10,15,20min)能否統(tǒng)一為15min？理論依據(jù)。46.血液糖化蛋白檢測(cè)的項(xiàng)目和意義。項(xiàng)目：意義：1是糖尿病患者血糖總體控制情況的指標(biāo)

2有助于糖尿病慢性并發(fā)癥的認(rèn)識(shí)

3指導(dǎo)對(duì)血糖的調(diào)整

4對(duì)判斷糖尿病的不同階段有一定的意義

5區(qū)別應(yīng)激性血糖增高和妊娠糖尿病(GDM)中的檢測(cè)意義

47.WHO，1970高脂蛋白血癥分型要點(diǎn)。Ⅰ：高乳糜血癥：有乳糜微粒,VLDL正常Ⅱa：高β脂蛋白血癥：LDL異常升高，VLDL正常，Ⅱb：高β脂蛋白血癥：LDL常升高，VLDL升高，含膽固醇高，Ⅲ：異常β脂蛋白血癥：%26#09;VLDL，LDL異常。Ⅳ：高前-β脂蛋白血癥：VLDL升高,LDL正常,無(wú)乳糜微粒Ⅴ：高前-β脂蛋白血癥及高乳糜血癥：VLDL升高,有乳糜微粒48.高脂血癥與動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系。粥樣動(dòng)脈硬化病灶內(nèi)的乳粥樣物質(zhì)，化學(xué)分析證明其中有大量脂質(zhì)，主要是膽固醇和膽固醇醋，也含有磷脂和甘油三醋。這些脂質(zhì)主要來(lái)自于血漿，尤其是與低密度脂蛋白（LDL）關(guān)系密切。病灶內(nèi)的LDL是血漿中的LDL透過(guò)動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞層浸潤(rùn)到內(nèi)膜。有人做過(guò)這樣的實(shí)驗(yàn)，用’勺標(biāo)記LDL的蛋白質(zhì)部分后，將它注人動(dòng)物靜脈，發(fā)現(xiàn)標(biāo)記的脂蛋白從管腔‘內(nèi)的血液浸人主動(dòng)脈壁內(nèi)，并主要集中在內(nèi)膜。血漿中LDL過(guò)多，并浸人動(dòng)脈壁，動(dòng)脈壁就可能發(fā)生LDL的堆積。如前所說(shuō)，LDL內(nèi)含膽固醇最多（約占50%)，蛋白質(zhì)及磷脂相對(duì)較少，故分子結(jié)構(gòu)較不穩(wěn)定，易于分解。血中膽固醇增高時(shí)，蛋白質(zhì)及磷脂相對(duì)較少，更不穩(wěn)定，當(dāng)LDL浸人動(dòng)脈管壁后，蛋白質(zhì)及磷脂的不足常易使大量的膽固醇及膽固醇醋沉積在動(dòng)脈內(nèi)膜，引起粥樣動(dòng)脈硬化斑塊的形成，導(dǎo)致動(dòng)脈管腔的狹窄，甚至閉塞。血漿中致粥樣動(dòng)脈硬化的脂蛋白，特別是LDL等超過(guò)正常水平稱為高脂血癥。49HDL抗動(dòng)脈粥樣硬化功能探討。（1）、HDL具有抗氧化作用，能很好保護(hù)冠心病危險(xiǎn)因子之一的LDL不受氧化，減輕或阻止LDL對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的破壞；（2）、由于HDL體積小，能穿透動(dòng)脈內(nèi)膜，將沉積在里面的膽固醇等