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鄰二氮菲分光光度法測(cè)定微量鐵一、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)確定實(shí)驗(yàn)條件的方法,掌握鄰二氮菲分光光度法測(cè)定微量鐵的方法原理;掌握721型分光光度計(jì)的使用方法,并了解此儀器的主要構(gòu)造。二、 實(shí)驗(yàn)原理本試驗(yàn)測(cè)定鐵含量的原理:根據(jù)朗伯一比耳定律:A=ebc。當(dāng)入射光波長(zhǎng)入及光程b一定時(shí),在一定濃度范圍內(nèi),有色物質(zhì)的吸光度A與該物質(zhì)的濃度c成正比。只要繪出以吸光度A為縱坐標(biāo),濃度c為橫坐標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)曲線,測(cè)出試液的吸光度,就可以由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得對(duì)應(yīng)的濃度值,測(cè)出鐵的含量。鄰二氮菲法簡(jiǎn)介:?鄰二氮菲為顯色劑,選擇測(cè)定微量鐵的適宜條件和測(cè)量條件,并用于水中鐵的測(cè)定。在pH=2?9的范圍內(nèi),鄰二氮菲與二價(jià)鐵生成穩(wěn)定的桔紅色配合物((Fe(phen)成穩(wěn)定的桔紅色配合物((Fe(phen)3)2+)。測(cè)定時(shí)控制溶液的酸度為pH-5較為適宜,用鄰二氮菲可測(cè)定試樣中鐵的總量。三、儀器試劑儀器:721型分光光度計(jì);1cm吸收池;10mL吸量管;50mL容量瓶(7個(gè))。試劑:20ug?mL-1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液;%鄰二氮菲水溶液;10%鹽酸羥胺溶液;1mol?L-1乙酸鈉溶液;1mol?L-1NaOH溶液。四、實(shí)驗(yàn)步驟1.吸收曲線的繪制容量瓶(50mL)20ug/mL鐵標(biāo)準(zhǔn)容量瓶(50mL)20ug/mL鐵標(biāo)準(zhǔn)5mL,10%鹽酸羥胺搖勻,mL%鄰二氮菲溶液mLN搖勻,mL%鄰二氮菲溶液mLNaAc溶液定容~以水參比在440?560nm間,每隔10nm測(cè)量一次吸光度以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制吸收曲線,選擇測(cè)量的適宜波長(zhǎng)。2.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作在6支50mL比色管中,分別加入、、、、、20ug/mL鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液,再加入10%鹽酸羥胺溶液,經(jīng)2min后,再各加入%鄰二氮菲溶液和mLNaAc溶液,以水稀釋至刻度,搖勻。在510nm處,以試劑空白為參比,測(cè)吸光度A。
未知液中鐵含量測(cè)定吸取5mL未知液代替標(biāo)準(zhǔn)液,其他步驟同上。測(cè)定并記錄吸光度。由繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線查出Fe2+離子濃度。五、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄與處理1.吸收曲線的繪制波長(zhǎng)(nm)吸光度A波長(zhǎng)(nm)吸光度A570500550490530470
520450510430根據(jù)上面數(shù)據(jù),作得標(biāo)準(zhǔn)曲線圖如下:由作圖可知,最大吸收波長(zhǎng)為510nm。2.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作試液編號(hào)標(biāo)準(zhǔn)溶液的量/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度/(ug/mL)總含鐵量/吸光度A10000240380412051606200根據(jù)以上數(shù)據(jù)繪制出Fe2+離子濃度吸光度曲線圖,如下濃度一一吸光度曲線1,2 1.D111y=0.2527X+0.0005 D.BOaD.80.609p.'TOC\o"1-5"\h\z0& 廣??□.404尸^?0.203 -0 0,5 1 1,5 2 2.5 3 35 4 45F點(diǎn)+離子濃度Cug/mL)未知液中鐵含量測(cè)定測(cè)得未知液A=由表得C(Fe2+)=Ug/mL。所以,未知液濃度C未知液二C(Fe2+)*50/5=ug/mL。小結(jié):通過實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知,最適宜波長(zhǎng)為入二510nm;最終由標(biāo)準(zhǔn)曲線得未知液鐵的含量為:Ug/mLo六、實(shí)驗(yàn)誤差分析實(shí)
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