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文檔簡介

2023/9/171臨床常用免疫學檢查臨床常用免疫學檢查2023/9/17臨床常用免疫學檢查2臨床常用免疫學檢查免疫功能檢查*血清免疫球蛋白檢測*血清補體檢測*細胞免疫檢測病毒肝炎血清標志物檢查感染免疫檢查

細菌感染免疫檢測病毒感染免疫檢測其它(寄生蟲感染、性病等)腫瘤標志物檢查

蛋白質類腫瘤標志物糖脂類腫瘤標志物酶類腫瘤標志物2023/9/17臨床常用免疫學檢查3臨床常用免疫學檢查自身抗體檢查*抗核抗體檢測*類風濕因子測定*抗心磷脂抗體測定*抗中性粒細胞胞漿抗體測定抗某種組織/細胞的抗體檢測

移植免疫檢查細胞因子檢查*IL-2、6、8、10*TNFIFN

2023/9/17臨床常用免疫學檢查4免疫功能檢查*血清免疫球蛋白檢測

*血清補體檢測*細胞免疫檢測2023/9/17臨床常用免疫學檢查5體液免疫檢查

(一)免疫球蛋白

(Immunoglobulin,Ig)

免疫球蛋白指具有活性的抗體活性和抗體樣結構的球蛋白,由漿細胞產生,存在于體液,血液,外分泌液和一些細胞膜上。2023/9/17臨床常用免疫學檢查6免疫球蛋白

用超速離心、免疫電泳方法可將免疫球蛋白分為五類:

IgG最多、占70%~80%抗體活性

IgA血清型和分泌型兩種

IgM是有效的凝聚和溶解細胞的因子

IgD功能尚不完全清楚

IgE與變態(tài)反應有關2023/9/17臨床常用免疫學檢查7免疫球蛋白

2023/9/17臨床常用免疫學檢查8

2023/9/17臨床常用免疫學檢查9正常值:

單向免疫擴散法—IgG7.0~16.6g/LIgA0.7~3.5g/LIgM0.5~2.6g/L

ELISA法—IgE0.1~0.9mg/L2023/9/17臨床常用免疫學檢查10

多克隆增高:IgGIgAIgM均增高單克隆增高:僅某一種Ig增高而其他種不增高

2023/9/17臨床常用免疫學檢查11臨床意義

增高:多克隆性增高—慢性感染、慢性肝病、自身免疫性疾病單克隆性增高—免疫增殖性疾病

2023/9/17臨床常用免疫學檢查12臨床意義

減低:

先天性—先天性無(低)丙種球蛋白血癥、重鏈病、輕鏈病

后天性—腎病綜合征、病毒感染、免疫抑制劑應用

2023/9/17臨床常用免疫學檢查13IgG亞類測定(單向免疫擴散或ELISA)

IgG160%~70%臨床意義

IgG214%~20%

IgG亞類缺陷:兒童中以IgG2缺陷

IgG34%~8%

常見,成人以IgG1和IgG3缺陷常見。

IgG42%~6%

IgG亞類缺陷患者常表現(xiàn)為反復感染如呼吸道感染、腹瀉、中耳炎、鼻竇炎等。

IgG亞類異常增高主要見于變態(tài)反應疾病。2023/9/17臨床常用免疫學檢查14IgE測定

IgE為親細胞抗體,在Ⅰ型變態(tài)反應性疾病的發(fā)病中起重要作用。臨床意義增高Ⅰ型變態(tài)反應性疾病,如支氣管哮喘、過敏性鼻炎、特應性皮炎、蕁麻疹等;非過敏性疾病如寄生蟲病、肝炎、SLE、類風濕關節(jié)炎及多發(fā)性骨髓瘤(IgE型)等。

2023/9/17臨床常用免疫學檢查15M蛋白(Monocolonalprotein):

M蛋白是一種單克隆B淋巴細胞(漿細胞)異常增殖時產生的免疫球蛋白分子或其片段(如輕鏈、重鏈等),它們與正常免疫球蛋白相同結構和電泳遷移速度,但不具有抗體活性。臨床意義多發(fā)性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)

巨球蛋白血癥(Waldenstrom癥)重鏈病、輕鏈病、半分子病其它:惡性淋巴瘤(lymphoma)、良性M蛋白血癥2023/9/17臨床常用免疫學檢查16免疫功能檢查*血清免疫球蛋白檢測*血清補體檢測

*細胞免疫檢測2023/9/17臨床常用免疫學檢查17(二)血清補體(complement,C)

參與滅活病原體的免疫反應也可破壞自身組織或自身細胞造成免疫損傷2023/9/17臨床常用免疫學檢查18

2023/9/17臨床常用免疫學檢查19

總補體溶血活性檢測(totalhemolyticcomplementactivity,CH50)

正常值:50~100ku/L

臨床意義:減低—腎小球腎炎、自身免疫性疾病(如系統(tǒng)性紅斑狼瘡Systemiclupuserythematosis,SLE)、感染性心內膜炎(subacuteinfecitiveendocarditis,SBE)、肝病等

增高—急性炎癥、組織損傷、腫瘤等2023/9/17臨床常用免疫學檢查20補體C3檢測:

C3在補體系統(tǒng)各成分中含量最多,是傳統(tǒng)途徑和旁路途徑被激活的關鍵物質正常值:0.8~1.5g/L補體C4檢測:

C4代表補體傳統(tǒng)活化途徑,在補體活化、促進吞噬、防止免疫復合物沉著和中和病毒等方面發(fā)揮作用正常值:0.2~0.6g/L2023/9/17臨床常用免疫學檢查21臨床意義:參見CH50減低和增高的臨床意義

C3增高在急性炎性反應更敏感

C4對判斷免疫復合物形成時補體消耗性減低更有意義2023/9/17臨床常用免疫學檢查22免疫功能檢查*血清免疫球蛋白檢測*血清補體檢測*細胞免疫檢測2023/9/17臨床常用免疫學檢查23細胞免疫檢測T細胞免疫檢測B細胞免疫檢測自然殺傷細胞檢測中性粒細胞吞噬、殺菌功能檢測2023/9/17臨床常用免疫學檢查24

T細胞分化抗原測定

(免疫熒光法)

CD3—總T細胞正常值:

61%~85%

CD4—T輔助細胞(TH)正常值:

28%~58%

CD8—T抑制細胞(TS)正常值:

19%~48%

CD4/CD81.66±0.33

(>1)2023/9/17臨床常用免疫學檢查25流式細胞儀檢測T細胞亞群2023/9/17臨床常用免疫學檢查26臨床意義:CD3

降低—自身免疫性疾?。⊿LE、類風濕關節(jié)炎)

CD4/CD8增高—自身免疫性疾病(如SLE、類風濕關節(jié)炎、多發(fā)性硬化癥等)及器官移植后排異反應

CD4/CD8減低—見于艾滋病、惡性腫瘤、傳染性單核細胞增多癥、巨細胞病毒感染、血吸蟲病等。

CD3CD4CD8均增高—T細胞型淋巴細胞惡性疾病2023/9/17臨床常用免疫學檢查27

B細胞分化抗原測定:

應用CD19、CD20、CD21、CD22

和CD40等單克隆抗體標記單個核細胞—B細胞,通過免疫熒光或流式細胞術進行檢測。

CD19

為全部B細胞共有的表面標志,B細胞活化后不消失,是最重要的B細胞標記分子。

CD22為成熟B細胞的表面標志。

參考值:CD1911.74±3.73%

2023/9/17臨床常用免疫學檢查28臨床意義升高—B細胞型急性淋巴細胞性白血病、慢性淋巴細胞白血病、Burkitt淋巴瘤等

減低—無丙種球蛋白血癥、長期免疫抑制劑應用后2023/9/17臨床常用免疫學檢查29

自然殺傷細胞免疫檢測它不依賴抗體和補體即能殺傷靶細胞自然殺傷細胞(NK)介導天然免疫應答,自然殺傷細胞(NK)活性可作為判斷機體抗腫瘤和抗病毒感染的指標之一

2023/9/17臨床常用免疫學檢查30

參考值:

NK細胞活性(自然殺傷)47.6%~76.8%

臨床意義:

升高:常見于病毒感染早期,Down綜合癥,器官移植后,使用免疫增強劑(如干擾素)治療后。

減低:常見于惡性腫瘤,重癥聯(lián)合免疫缺陷病,AIDS和免疫抑制劑使用者等。2023/9/17臨床常用免疫學檢查31中性粒細胞吞噬、殺菌功能檢測硝基四氮唑藍還原試驗(NBT)

參考值:陽性細胞75%~95%

臨床意義:NBT↑--細菌感染

1.有助于鑒別細菌感染/病毒感染

NBT不高--病毒感染

2.

NBT↓為白細胞吞噬功能缺陷,見于先天性慢性肉牙腫、中性粒細胞異常缺陷綜合癥、先天性丙種球蛋白缺乏癥等,及長期使用免疫抑制劑時。2023/9/17臨床常用免疫學檢查32自身免疫檢測

*類風濕因子測定、*抗核抗體檢測、*組織和細胞抗體檢測

2023/9/17臨床常用免疫學檢查33自身抗體檢查類風濕因子(rheumatoidfactor,RF)

RF是變性IgG刺激機體產生的一種自身抗體,主要存在于類風濕關節(jié)炎患者的血清和關節(jié)液內。

RF可分為IgM型、IgG型、IgA型等,用膠乳凝集法測出的主要是IgM型,用ELISA法可進一步檢出其它型2023/9/17臨床常用免疫學檢查34RF-IgGRF-IgARF-IgM2023/9/17臨床常用免疫學檢查35參考值:

陰性<30U/L臨床意義:

類風濕關節(jié)炎(陽性率70%)其它自身免疫性疾病(SLE、干燥綜合癥等)可陽性

慢性活動性肝炎、某些感染性疾?。▊魅拘詥魏思毎龆喟Y、結核病感染性心內膜炎等)也可出現(xiàn)陽性2023/9/17臨床常用免疫學檢查36(二)抗核抗體檢測

1.抗核抗體(antinuclearantibody,ANA)

抗核抗體是一種泛指抗各種細胞核成分的自身抗體的總稱(ANAS),這種抗體無器官和種族的特異性2023/9/17臨床常用免疫學檢查37

免疫熒光法

以鼠肝細胞核或人喉癌細胞(Hep-2細胞)作抗原時該抗體(1抗)可與之結合,再加入熒光標記抗人IgG(2抗)后可產生黃綠色熒光2023/9/17臨床常用免疫學檢查38血清抗體熒光素標記的抗免疫球蛋白細胞核細胞漿載片間接免疫熒光檢測的原理2023/9/17臨床常用免疫學檢查39

根據(jù)細胞核著染熒光的圖像可分為:

均質型DNP核蛋白邊緣型DNA

顆粒型ENA

核仁型RNA

2023/9/17臨床常用免疫學檢查40抗核抗體:彌散型2023/9/17臨床常用免疫學檢查41抗核抗體:周邊型2023/9/17臨床常用免疫學檢查42抗核抗體:斑點型2023/9/17臨床常用免疫學檢查43抗核抗體:核仁型2023/9/17臨床常用免疫學檢查44

參考值:

免疫熒光法為陰性血清滴度>1:40為陽性

2023/9/17臨床常用免疫學檢查45

臨床意義:

ANA陽性最多見于未治療的SLE,陽性率達80%—100%(活動期幾乎100%陽性)

ANA陽性是結締組織病的標志,如:混合性結締組織?。╩ixedconnectivetissuedisease,MCTD)100%陽性

系統(tǒng)性硬化?。╯ystemicsclerosis,SSc)85%—95%陽性、多發(fā)性肌炎(polymyositis,PM)30%—50%陽性,

此外,類風濕性關節(jié)炎(rheumatoidarthritis,RA)、干燥綜合癥(SjogrenSyndrom,SS)等可出現(xiàn)陽性

其它疾病,如原發(fā)性膽汁性肝硬化、慢性肝病、慢性感染、腫瘤等也可出現(xiàn)陽性2023/9/17臨床常用免疫學檢查462.抗脫氧核糖核酸抗體(anti-DNAantibody,抗DNA)

其中抗雙鏈DNA(doublestranded-DNA,ds-DNA)抗體的靶抗原是細胞核中的DNA雙螺旋結構,它的檢測有臨床的重要性

正常結果:陰性

臨床意義:抗ds-DNA抗體陽性見于活動期SLE,陽性率70%—90%,為SLE特異性抗體,特別在并發(fā)狼瘡性腎炎時起重要作用,其它風濕病中抗ds-DNA抗體也可陽性2023/9/17臨床常用免疫學檢查47

3.可提取性核抗原多肽抗體譜

ENA(extractableantinuclearantigen)由多種相對分子質量不同的多肽構成,利用免疫印跡試驗可對這些抗原的自身抗體進行檢測

2023/9/17臨床常用免疫學檢查48

抗體靶抗原意義方法SmRNA和核蛋白SLE標記抗體,陽性20~40%雙向免疫擴散U1RNP小核糖核蛋白MCTD陽性>90%;SLE﹑SS﹑SSc﹑PM/DMDID;EIASSA(Ro)小細胞質核糖核蛋白PSS40~95%;SCLE70~90%DID;EIASSB(La)小細胞核核糖核蛋白SS高度特異性DID;EIArRNP60S核糖體大亞基SLE高度特異性抗體,陽性10~40%。與腦病有關。EIAScl-70拓撲異構酶1SSc特異性抗體,預后不良。EIAJo-1tRNA合成酶PM/DM標記抗體20~30%DID,IB

ENA多肽7項是目前臨床最多應用于風濕病檢查的項目

2023/9/17臨床常用免疫學檢查49抗心磷脂抗體(anticardiolipinantibody,ACA)

抗磷脂抗體是一組針對各種帶負電荷磷脂的自身抗體,其中以ACA可作為代表。

正常參考:陰性ELISA法測定≥2.1為陽性

臨床意義:ACA陽性見于SLE、類風濕關節(jié)炎、干燥綜合癥等風濕病,抗磷脂綜合癥,以及腫瘤、感染等。2023/9/17臨床常用免疫學檢查50抗中性粒細胞胞漿抗體(ANCA)

(anti-neutrophilcytoplasmicantibody)

ANCA是存在于系統(tǒng)性血管炎患者血清中的一種自身抗體,可分為胞漿型(C-ANCA)和核周型(P-ANCA)2023/9/17

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