中性粒細胞堿性磷酸酶染色液(卬)簡介：堿性磷酸酶(Alkalinephosphatase,簡稱ALP或AKP)為一類磷酸酯酶，廣泛分布于哺乳動物組織內(nèi)，其活性所需最適pH9.2~9.8。此酶主要存在于物質(zhì)交換活躍之處(細胞膜)，如腸上皮和腎近曲小管的刷狀緣、附睪上皮之靜纖毛、肝的毛細膽管膜以及微動脈和毛細血管動脈部之內(nèi)皮，還見于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基復(fù)合體、吞飲小泡、腸上皮之溶酶體、中性粒細胞之中性顆粒以及平滑肌之細胞膜。Leagene中性粒細胞堿性磷酸酶染色液(NAP)不是采用金屬沉淀法來顯示堿性磷酸酶活性，而是采用偶氮偶聯(lián)法(又稱同時偶聯(lián)法)，其原理是在pH9.2~9.8的堿性條件下，細胞內(nèi)堿性磷酸酶可使AB-BI磷酸鹽水解，釋放出磷酸與萘酚，后者與偶聯(lián)重氮鹽生成有色產(chǎn)物，定位于細胞質(zhì)中。該染液專門用于血液或骨髓細胞涂片的中性粒細胞的堿性磷酸酶染色，堿性磷酸酶活性部位呈藍色，位于胞槳，結(jié)果較金屬鹽沉淀法可靠。組成：名稱編號DE00034x2mlDE00034x10mlStorage試劑(A):NAP固定液2ml10mlRT避光試劑(B):B1:AS-BI染色液1ml5ml-20OC避光NAP孵育液B2:FBB染色液1ml5ml4°C避光臨用刖，B1:B2混合，即為NAP孵育液，即配即用。試劑(C):核固紅染色液2ml10mlRT避光試劑(D):甲基綠染色液2ml10mlRT避光使用說明書1份自備材料：1、 載玻片2、 4%多聚甲醛3、 顯微鏡操作步驟(僅供參考):(一)、涂片1、 制備新鮮血液或骨髓細胞涂片，NAP固定液固定，充分水洗。2、 滴加配制好的NAP孵育液，孵育，水洗。3、 滴加核固紅染色液或甲基綠染色液復(fù)染。水洗、晾干、鏡檢。

（二）貼壁培養(yǎng)細胞1、 取6孔板或其他容器培養(yǎng)的細胞，棄液，PBS清洗干凈。2、 加入NAP固定液固定或多聚甲醛固定，PBS清洗。3、 滴加配制好的NAP孵育液，放入濕盒中，避光孵育，PBS清洗。4、 入核固紅染色液或甲基綠染色液復(fù)染。PBS清洗、鏡檢。染色結(jié)果：NAP陽性顆粒藍色riYi細胞核紅色（核固紅）或綠色（甲基綠）結(jié)果判斷：一般以積分報告結(jié)果，根據(jù)100個中性粒細胞陽性顆粒進行0~4+計分。細胞分值染色特點0無顆粒1稍有顆粒2中等程度顆粒3多數(shù)顆粒4充滿顆粒臨床意義：1、 類白血病反應(yīng)積分明顯增高，未經(jīng)治療的慢性粒細胞白血病積分明顯減低。2、 急性細菌性感染積分明顯增高，病毒性感染積分多正?；驕p低。3、 再生障礙性貧血積分常增高，PNH、MDS積分常減低。注意*項：1、 血液或骨髓細胞涂片應(yīng)新鮮，薄厚適宜，及時固定，否則會影響酶的活性。2、 培養(yǎng)細胞染色操作過程中，清洗、染色等步驟都應(yīng)輕微，以免損傷或丟失細胞。3、 NAP孵育液易失效或降低陽性強度，即配即用，不宜久置。4、 復(fù)染時，核固紅染色液或甲基綠染