高級中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1遼寧省縣域重點(diǎn)高中2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期期中考試一、選擇題：本題共15小題，每小題2分，共30分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)符合題目要求。1.我國的釀酒技術(shù)歷史悠久，古人在實(shí)際生產(chǎn)中積累了很多經(jīng)驗(yàn)?！洱R民要術(shù)》記載：“世人云：米過酒甜，此乃不解法候。酒冷沸止，米有不消者，便是曲勢盡?！毕铝杏嘘P(guān)敘述不正確的是（）A.“米過酒甜”是因?yàn)槊字刑穷愇镔|(zhì)過量，發(fā)酵停止時(shí)仍未被完全消耗B.“酒冷沸止”說明微生物的代謝產(chǎn)熱和釋放CO2逐漸停止C.“曲勢盡”的原因可能是米酒中pH或酒精含量升高D.釀制米酒所用微生物的呼吸類型為兼性厭氧【答案】C〖祥解〗利用酵母菌發(fā)酵產(chǎn)生酒精的原理釀酒，利用其發(fā)酵產(chǎn)生二氧化碳的原理制作面包、饅頭；參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型?！驹斘觥緼、釀造米酒的原料富含糖類，米過酒甜是因?yàn)槊字杏刑穷愇镔|(zhì)未被完全消耗，A正確；B、由于微生物呼吸作用消耗糖類等有機(jī)物，會(huì)釋放能量，且釋放的能量絕大多數(shù)以熱能的形式散失，導(dǎo)致酒液溫度產(chǎn)生變化，“酒冷沸止”說明酵母菌的代謝產(chǎn)熱和釋放CO2逐漸停止，B正確；C、微生物無氧呼吸，會(huì)產(chǎn)生的CO2，導(dǎo)致液體pH降低，“曲勢盡”的原因可能是發(fā)酵過程pH降低或酒液中酒精含量升高使發(fā)酵停止，C錯(cuò)誤；D、釀制米酒所用的酒曲中主要微生物是酵母菌，酵母菌的呼吸類型為兼性厭氧型，D正確。故選C。2.生活中的許多食品來自于傳統(tǒng)發(fā)酵。下列說法錯(cuò)誤的是（）A.傳統(tǒng)泡菜是利用植物體表面天然的乳酸菌來進(jìn)行發(fā)酵的B.制作果醋時(shí)，如果糖源充足，醋酸菌可不利用酒精作為碳源C.腐乳味道鮮美主要是因?yàn)槎垢械牡鞍踪|(zhì)被分解成小分子的肽和氨基酸D.傳統(tǒng)發(fā)酵都是在單一菌種的作用下產(chǎn)生所需的發(fā)酵產(chǎn)物【答案】D〖祥解〗直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次發(fā)酵保存下來的面團(tuán)、鹵汁等發(fā)酵物中的微生物進(jìn)行發(fā)酵、制作食品的技術(shù)一般稱為傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)。參與腐乳制作的毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸。參與泡菜制作的乳酸菌在無氧條件下將葡萄糖分解成乳酸。酵母菌在有氧條件下進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖，在無氧條件下進(jìn)行酒精發(fā)酵。醋酸菌是好氧菌，當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)能將糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)則將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛，再將乙醛變?yōu)榇姿??！驹斘觥緼、傳統(tǒng)泡菜制作依賴蔬菜表面天然的乳酸菌進(jìn)行無氧發(fā)酵，乳酸菌為厭氧菌，A正確；B、在制作果醋時(shí)，醋酸菌在氧氣和糖源充足時(shí)，能將糖分解成醋酸；在缺少糖源時(shí)，醋酸菌也可以利用酒精生成醋酸，所以如果糖源充足，醋酸菌可以不利用酒精作為碳源，可以直接利用糖類，B正確；C、毛霉分泌的蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解為小分子肽和氨基酸，這是腐乳鮮美的主要原因，C正確；D、直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次發(fā)酵保存下來的面團(tuán)、鹵汁等發(fā)酵物中的微生物進(jìn)行發(fā)酵、制作食品的技術(shù)一般稱為傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)，所以傳統(tǒng)發(fā)酵多為自然菌種共同作用（如泡菜中除乳酸菌外可能有酵母菌等），并非單一菌種，D錯(cuò)誤。故選D。3.微生物的純培養(yǎng)包括配制培養(yǎng)基、滅菌、接種、分離和培養(yǎng)等步驟。下列關(guān)于酵母菌的純培養(yǎng)過程的敘述，正確的是（）A.葡萄糖是酵母菌可利用的唯一碳源B.培養(yǎng)基滅菌后需冷卻至50℃左右才能倒平板C.只能用平板劃線法進(jìn)行接種D.實(shí)驗(yàn)組和對照組的區(qū)別是培養(yǎng)基是否滅菌【答案】B〖祥解〗微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無菌操作，培養(yǎng)基及實(shí)驗(yàn)所用的器具需要進(jìn)行滅菌處理。篩選和分離微生物需要使用選擇培養(yǎng)基。接種微生物常用的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法?！驹斘觥緼、酵母菌屬于異養(yǎng)型生物，需有機(jī)碳源，但除葡萄糖外，其他碳源如果糖也可被利用，A錯(cuò)誤；B、由于溫度過高會(huì)燙手，溫度過低培養(yǎng)基又會(huì)凝固，所以倒平板操作應(yīng)待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)，B正確；C、純培養(yǎng)接種方法包括平板劃線法和稀釋涂布平板法，不是只能用平板劃線法進(jìn)行接種，C錯(cuò)誤；D、實(shí)驗(yàn)組與對照組的差異通常為是否接種特定菌種，而非培養(yǎng)基是否滅菌（純培養(yǎng)中培養(yǎng)基均需滅菌），D錯(cuò)誤。故選B。4.啤酒主要是以麥芽、水、啤酒花為原料，經(jīng)酵母菌發(fā)酵而來，具體生產(chǎn)流程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.啤酒發(fā)酵過程中，主發(fā)酵階段完成酵母菌的繁殖，后發(fā)酵階段完成代謝物的生成B.“精釀”啤酒發(fā)酵時(shí)間長，沒有進(jìn)行過濾和消毒處理，因此保質(zhì)期較短C.蒸煮階段產(chǎn)生風(fēng)味組分，終止酶的進(jìn)一步作用，并對糖漿滅菌D.為防止接種時(shí)酵母菌被殺死，應(yīng)在麥汁冷卻后再加入酵母菌進(jìn)行發(fā)酵【答案】A〖祥解〗發(fā)酵工程是指利用微生物的特定功能，通過現(xiàn)代工程技術(shù)，規(guī)?；a(chǎn)對人類有用的產(chǎn)品，主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身。發(fā)酵工程一般包括菌種的選育，擴(kuò)大培養(yǎng)，培養(yǎng)基的配制、滅菌，接種，發(fā)酵、產(chǎn)品的分離、提純等方面。【詳析】A、啤酒發(fā)酵過程中，大部分糖分解和代謝物的生成主要是在主發(fā)酵階段完成的，而不是后發(fā)酵階段。主發(fā)酵階段，酵母菌在有氧條件下大量繁殖，然后在無氧條件下將糖類轉(zhuǎn)化為酒精和二氧化碳等代謝物；后發(fā)酵階段主要是使啤酒的風(fēng)味成熟、澄清度提高等，A錯(cuò)誤；B、“精釀”啤酒發(fā)酵時(shí)間長，并且沒有進(jìn)行過濾和消毒處理，容易導(dǎo)致啤酒變質(zhì)，所以保質(zhì)期較短，B正確；C、在糖化罐里經(jīng)過糖化、淀粉分解，形成糖漿，然后將糖漿倒入蒸煮容器中，加入啤酒花，經(jīng)過蒸煮可產(chǎn)生風(fēng)味組分，終止酶的進(jìn)一步作用，并對糖漿滅菌，C正確；D、酵母菌在高溫下可能會(huì)被殺死，麥汁在蒸煮后溫度較高，直接接種酵母菌會(huì)導(dǎo)致酵母菌死亡，所以應(yīng)在麥汁冷卻后再加入酵母菌進(jìn)行發(fā)酵，D正確。故選A。5.谷氨酸棒狀桿菌生長的最適pH為7.0，可通過以下代謝途徑發(fā)酵生產(chǎn)L-谷氨酰胺。下列敘述正確的是（）A.提高圖示三種酶的活性均有利于提高L-谷氨酰胺的產(chǎn)量B.發(fā)酵初期控制pH為7.0，后期調(diào)為5.6，有利于提高L-谷氨酰胺產(chǎn)量C.發(fā)酵條件僅影響微生物代謝物的形成，不會(huì)影響微生物的繁殖D.發(fā)酵結(jié)束后，采用過濾、沉淀的方法將菌體分離和干燥即可獲得產(chǎn)品【答案】B〖祥解〗（1）發(fā)酵是利用微生物，在適宜的條件下，將原料經(jīng)過特定的代謝途徑轉(zhuǎn)化為人類所需要的產(chǎn)物的過程。發(fā)酵過程：菌種選育→菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)→培養(yǎng)基的配制→滅菌和接種→發(fā)酵條件的控制→分離和提純；（2）發(fā)酵工程生產(chǎn)的產(chǎn)品主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身；（3）產(chǎn)品不同，分離提純的方法一般不同：如果產(chǎn)品是菌體，可采用過濾，沉淀等方法將菌體從培養(yǎng)液中分離出來；如果產(chǎn)品是代謝產(chǎn)物，可用萃取、蒸餾、離子交換等方法進(jìn)行提??；（4）發(fā)酵過程中要嚴(yán)格控制溫度、pH、溶氧、通氣量與轉(zhuǎn)速等發(fā)酵條件；（5）發(fā)酵過程般來說都是在常溫常壓下進(jìn)行，條件溫和、反應(yīng)安全，原料簡單、污染小，反應(yīng)專一性強(qiáng)，因而可以得到較為專一的產(chǎn)物?！驹斘觥緼、由圖可知，提高谷氨酸脫氫酶和谷氨酰胺合成酶的活性有利于提高L-谷氨酰胺的產(chǎn)量，但谷氨酸合成酶會(huì)使L-谷氨酰胺再轉(zhuǎn)化為L-谷氨酸，反而可能降低L-谷氨酰胺的產(chǎn)量，A錯(cuò)誤；B、谷氨酸棒狀桿菌生長的最適pH為7.0，因此發(fā)酵初期控制pH為7.0，有利于增加谷氨酸棒狀桿菌的數(shù)量，谷氨酰胺合成酶的最適pH為5.6，谷氨酸合成酶的最適pH為7.0～8.0，后期pH調(diào)為5.6，有利于L-谷氨酸轉(zhuǎn)變成L-谷氨酰胺，不利于L-谷氨酰胺轉(zhuǎn)變成L-谷氨酸，進(jìn)而可以在后期提高L-谷氨酰胺產(chǎn)量，B正確；C、發(fā)酵過程中環(huán)境條件既會(huì)影響微生物代謝物的形成，也會(huì)影響微生物的生長、繁殖，C錯(cuò)誤；D、L-谷氨酰胺是細(xì)胞代謝物，采用過濾、沉淀的方法只能將菌體分離和干燥，不是獲得L-谷氨酰胺的方法，D錯(cuò)誤。故選B。6.分解尿素的細(xì)菌可以產(chǎn)生脲酶，將尿素分解為氨使pH升高，培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑后，氨可以使指示劑呈紅色。這類菌廣泛存在于土壤、廄肥及污水中，現(xiàn)要對它們進(jìn)行計(jì)數(shù)。下列相關(guān)說法正確的是（）A.將10g土壤加入100mL無菌水中可使土壤樣品稀釋10倍B.稀釋涂布平板法得到的菌數(shù)是活菌數(shù)和死菌數(shù)之和C.涂布時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿可使菌液在培養(yǎng)基表面涂布得更均勻D.加入酚紅指示劑后，菌落周圍會(huì)形成紅色透明圈【答案】C【詳析】（1）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，應(yīng)選擇30-300的菌落數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)。（2）間接計(jì)數(shù)法（活菌計(jì)數(shù)法）的原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)。（3）如果要分離土壤中能分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)選擇以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基；在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解為氨，PH增高，使指示劑變紅色?！枷榻狻紸、將10g土壤加入90mL無菌水中，無菌水中可使土壤樣品稀釋10倍，A錯(cuò)誤；B、稀釋涂布平板法僅計(jì)數(shù)活菌（因死菌無法形成菌落），而顯微鏡直接計(jì)數(shù)法才包含死菌和活菌的總數(shù)，B錯(cuò)誤；C、涂布時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿可使菌液均勻分布，避免局部濃度過高或過低，確保菌落分散，C正確；D、加入酚紅指示劑后，菌落周圍會(huì)因尿素被分解產(chǎn)生氨，使pH變大，從而在菌落周圍形成紅色，D錯(cuò)誤。故選C。7.科研人員利用大豆的根尖細(xì)胞（2n=40）和煙草（2n=24）的葉肉細(xì)胞培育新型植物。用紫外線照射煙草的原生質(zhì)體使其染色體斷裂，并將處理后的煙草原生質(zhì)體與大豆原生質(zhì)體進(jìn)行融合，獲得染色體數(shù)目為45條的雜種植株。下列敘述正確的是（）A.該實(shí)驗(yàn)中，原生質(zhì)體融合可用聚乙二醇或滅活病毒誘導(dǎo)B.為防止雜菌污染，融合后的原生質(zhì)體需置于無菌水中C.可通過比較融合后細(xì)胞的顏色初步篩選出雜種細(xì)胞D.紫外線照射后使煙草中染色體斷裂導(dǎo)致其染色體數(shù)目增加了13條【答案】C〖祥解〗植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：（1）概念：就是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)；（2）過程：①誘導(dǎo)融合的方法：物理法包括離心、振動(dòng)等；化學(xué)法一般是用聚乙二醇（PEG）作為誘導(dǎo)劑；②細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是新的細(xì)胞壁的生成；③植物體細(xì)胞雜交的終點(diǎn)是培育成雜種植株，而不是形成雜種細(xì)胞就結(jié)束；④雜種植株的特征：具備兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì)。（3）意義：克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙?！驹斘觥緼、聚乙二醇（PEG）是植物原生質(zhì)體融合的常用誘導(dǎo)劑，而滅活病毒僅用于動(dòng)物細(xì)胞融合，A錯(cuò)誤；B、無菌水為低滲環(huán)境，會(huì)導(dǎo)致原生質(zhì)體吸水漲破，故融合后的原生質(zhì)體需置于等滲培養(yǎng)基中，B錯(cuò)誤；C、煙草葉肉細(xì)胞含葉綠體（綠色），大豆根尖細(xì)胞顏色較淺，融合后的雜種細(xì)胞顏色與未融合細(xì)胞存在差異，可通過顏色差異初步篩選出雜種細(xì)胞，C正確；D、紫外線使煙草的原生質(zhì)體中染色體斷裂使得染色體數(shù)目減少，雜種植株染色體數(shù)為45條，推測大豆原生質(zhì)體貢獻(xiàn)40條，煙草原生體提供了5條（40+5=45），而非增加13條，D錯(cuò)誤；故選C。8.下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是（）A.外植體一定是高度分化的器官、組織或細(xì)胞B.對外植體無菌處理一定是消毒而不是滅菌C.從愈傷組織到分化成芽的過程一定要改變激素的種類D.從外植體到愈傷組織再到長出芽和根一定都需要光照【答案】B〖祥解〗植物組織培養(yǎng)過程是：離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。【詳析】A、外植體通常是離體的器官、組織或細(xì)胞，但并非一定是高度分化的。例如，莖尖分生組織細(xì)胞的分化程度較低，仍可作為外植體，A錯(cuò)誤；B、外植體為活體材料，需用化學(xué)消毒劑（如酒精、次氯酸鈉）進(jìn)行消毒處理，若采用滅菌（如高壓蒸汽滅菌）會(huì)殺死外植體細(xì)胞，B正確；C、愈傷組織分化為芽的過程主要依賴生長素和細(xì)胞分裂素的濃度比例調(diào)整，而非必須改變激素種類。例如，原培養(yǎng)基中若已含兩種激素，僅需調(diào)整比例即可誘導(dǎo)芽分化，C錯(cuò)誤；D、外植體脫分化為愈傷組織需避光條件，D錯(cuò)誤；故選B。9.科學(xué)家通過體外誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞獲得了iPS細(xì)胞，并用iPS細(xì)胞治療了小鼠的鐮狀細(xì)胞貧血，科學(xué)家普遍認(rèn)為iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.iPS細(xì)胞可由成纖維細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞等誘導(dǎo)生成B.利用iPS細(xì)胞治療的疾病只能是一些遺傳性疾病C.鐮狀細(xì)胞貧血小鼠使用iPS細(xì)胞治療后，其體內(nèi)仍然攜帶致病基因D.移植器官來源于病人自身iPS細(xì)胞時(shí)，患者不需要服用免疫抑制劑【答案】B〖祥解〗（1）iPS細(xì)胞是誘導(dǎo)多能干細(xì)胞，具有產(chǎn)生多種類型細(xì)胞的能力，其功能類似胚胎干細(xì)胞。（2）細(xì)胞分化實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)?！驹斘觥緼、iPS細(xì)胞可由多種體細(xì)胞（如成纖維細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞）通過導(dǎo)入特定基因誘導(dǎo)生成，A正確；B、iPS細(xì)胞可分化為多種細(xì)胞類型，不僅可用于治療遺傳病（如鐮狀細(xì)胞貧血），還可用于修復(fù)組織損傷或退行性疾?。ㄈ缗两鹕。?，B錯(cuò)誤；C、鐮狀細(xì)胞貧血是基因突變導(dǎo)致的，若僅通過iPS細(xì)胞分化的正常細(xì)胞替換病變細(xì)胞，未修正原始致病基因，則小鼠體內(nèi)仍攜帶該基因，C正確；D、自體iPS細(xì)胞分化的器官與患者遺傳物質(zhì)相同，移植后不會(huì)引發(fā)免疫排斥，無需免疫抑制劑，D正確；故選B。10.懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞增殖到一定程度后，分裂就會(huì)受阻。下列不是分裂受阻原因的是（）A.細(xì)胞密度過大 B.有害代謝物積累C.培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)缺乏 D.接觸抑制【答案】D〖祥解〗動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞往往貼附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞貼壁。懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)因細(xì)胞密度過大、有害代謝物積累和培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻。貼壁細(xì)胞在生長增殖時(shí)，除受上述因素的影響外，還會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，即當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞通常會(huì)停止分裂增殖。【詳析】A．細(xì)胞密度過大會(huì)導(dǎo)致營養(yǎng)和空間不足，抑制細(xì)胞分裂，A正確；B．有害代謝物積累會(huì)改變培養(yǎng)液環(huán)境，影響細(xì)胞正常代謝，B正確；C．培養(yǎng)液營養(yǎng)物質(zhì)缺乏直接限制細(xì)胞分裂所需的物質(zhì)和能量供應(yīng)，C正確；D．接觸抑制是貼壁生長細(xì)胞在鋪滿培養(yǎng)皿表面后停止分裂的現(xiàn)象，而懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞不貼壁生長，不會(huì)發(fā)生接觸抑制，D錯(cuò)誤。故選D。11.在哺乳動(dòng)物的受精過程和早期胚胎發(fā)育過程中，下列生理反應(yīng)發(fā)生的順序是（）①精子穿過透明帶，卵細(xì)胞膜與精子細(xì)胞膜融合②卵母細(xì)胞完成減數(shù)分裂Ⅱ③精子釋放多種酶④雌、雄原核相向移動(dòng)⑤透明帶及卵細(xì)胞膜發(fā)生一系列的反應(yīng)，阻止其他精子進(jìn)入⑥形成含有兩個(gè)染色體組的合子⑦卵裂產(chǎn)生的子細(xì)胞形成致密的細(xì)胞團(tuán)⑧完成胚胎的孵化⑨形成三個(gè)胚層⑩透明帶內(nèi)壁擴(kuò)展和排列的細(xì)胞構(gòu)成滋養(yǎng)層A.③①⑤②④⑥⑦⑩⑧⑨ B.①③②④⑥⑤⑦⑧⑨⑩C.②⑥④①⑤③⑦⑨⑧⑩ D.③⑤①②⑥④⑨⑧⑦⑩【答案】A【詳析】受精過程為：頂體反應(yīng)→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應(yīng)）→卵細(xì)胞膜反應(yīng)（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開始。〖祥解〗受精過程為：精子釋放酶（頂體反應(yīng)）→①精子穿過透明帶并與卵細(xì)胞膜融合→⑤透明帶及卵細(xì)胞膜反應(yīng)→②卵母細(xì)胞完成減數(shù)分裂Ⅱ→④雌雄原核移動(dòng)→⑥形成含有兩個(gè)染色體組的合子→⑦卵裂產(chǎn)生的子細(xì)胞形成致密的細(xì)胞團(tuán)（桑椹胚）→⑩滋養(yǎng)層形成（囊胚期）→⑧孵化→⑨原腸胚形成三個(gè)胚層。故選A。12.下列有關(guān)“DNA的粗提取與鑒定”“DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)，利用了DNA不溶于酒精而某些蛋白質(zhì)溶于酒精的化學(xué)性質(zhì)B.向電泳緩沖液配制的瓊脂糖溶液中加入的核酸染料能與DNA分子結(jié)合，便于在紫外燈下觀察C.PCR反應(yīng)體系中需加入耐高溫的DNA聚合酶，該酶在復(fù)性過程中起作用D.將提取到的絲狀物與二苯胺溶液充分混勻后，需要進(jìn)行沸水浴加熱溶液才能變?yōu)樗{(lán)色【答案】C〖祥解〗DNA不溶于酒精，而某些蛋白質(zhì)溶于酒精；鑒定DNA時(shí)，需要先將DNA溶解在NaCl溶液中，再與二苯胺溶液混合，并在水浴加熱條件下呈現(xiàn)藍(lán)色；耐高溫的DNA聚合酶在延伸環(huán)節(jié)時(shí)進(jìn)行子鏈的合成?！驹斘觥緼．DNA的粗提取利用的是DNA不溶于酒精而某些蛋白質(zhì)溶于酒精的性質(zhì)，初步分離DNA和蛋白質(zhì)，A正確；B．瓊脂糖溶液混合的核酸染料能與DNA分子結(jié)合，可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來，B正確；C．PCR的延伸階段需耐高溫的DNA聚合酶（如Taq酶）催化合成DNA鏈，在復(fù)性階段引物與模板結(jié)合時(shí)該酶未起作用，C錯(cuò)誤；D．DNA與二苯胺需沸水浴加熱后顯藍(lán)色，D正確；故選C。13.隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，生物技術(shù)在許多領(lǐng)域中得到了廣泛應(yīng)用。然而，由于生物技術(shù)的特殊性質(zhì)，倫理和安全問題也日益凸顯出來。下列相關(guān)說法錯(cuò)誤的是（）A.基因編輯技術(shù)可能導(dǎo)致設(shè)計(jì)完美嬰兒和優(yōu)生學(xué)的問題，要嚴(yán)防濫用B.人類克隆可能導(dǎo)致道德上的困擾，我國禁止生殖性克隆人C.轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)的推廣可能導(dǎo)致基因污染，要逐漸減少其應(yīng)用D.生物技術(shù)可能導(dǎo)致恐怖主義威脅，我國主張全面禁止和徹底銷毀生物武器【答案】C【詳析】轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）?！枷榻狻紸、基因編輯技術(shù)若被濫用，可能引發(fā)設(shè)計(jì)嬰兒等倫理問題，需嚴(yán)格監(jiān)管，A正確；B、我國明確禁止生殖性克隆人（因涉及倫理爭議），但允許治療性克隆研究，B正確；C、轉(zhuǎn)基因生物可能造成基因污染，但應(yīng)對策略是加強(qiáng)風(fēng)險(xiǎn)評估和管理，而非“逐漸減少應(yīng)用”，C錯(cuò)誤；D、生物武器威脅人類安全，我國一貫支持全面禁止生物武器，D正確；故選C。14.2024年“諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)”授予三位科學(xué)家，以表彰他們在“計(jì)算蛋白質(zhì)設(shè)計(jì)和結(jié)構(gòu)預(yù)測”方面的貢獻(xiàn)。他們開發(fā)的預(yù)測蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的AI工具AlphaFold可以通過輸入的氨基酸序列信息生成蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)模型，到目前為止，AlphaFold已經(jīng)預(yù)測了超過2億種蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)——即幾乎所有已知的已編碼蛋白質(zhì)。下列有關(guān)蛋白質(zhì)工程的說法，正確的是（）A.這種技術(shù)可以省去改造或合成相應(yīng)基因的步驟B.這種技術(shù)能用于改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)，但不能制造新的蛋白質(zhì)C.該技術(shù)有助于科學(xué)家探索通過功能設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，再逆向推導(dǎo)氨基酸序列D.AlphaFold在蛋白質(zhì)工程領(lǐng)域應(yīng)用中，難度最大的是設(shè)計(jì)推測某種蛋白質(zhì)的氨基酸序列【答案】C〖祥解〗蛋白質(zhì)工程的核心是通過基因改造或合成來設(shè)計(jì)新蛋白質(zhì)，其流程為：預(yù)期功能→設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)→推測氨基酸序列→合成基因→表達(dá)蛋白質(zhì)。AlphaFold的作用是根據(jù)氨基酸序列預(yù)測結(jié)構(gòu)，輔助科學(xué)家優(yōu)化設(shè)計(jì)?！驹斘觥緼、蛋白質(zhì)工程必須通過基因的改造或合成來實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)的改造，無法省去基因步驟，A錯(cuò)誤；B、蛋白質(zhì)工程不僅能改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)，還能制造自然界不存在的新蛋白質(zhì)，B錯(cuò)誤；C、AlphaFold可通過預(yù)測結(jié)構(gòu)幫助科學(xué)家驗(yàn)證不同序列是否符合目標(biāo)結(jié)構(gòu)，從而輔助從功能設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)再推導(dǎo)序列的流程，C正確；D、蛋白質(zhì)工程的最大難點(diǎn)是設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)并推測對應(yīng)序列，但AlphaFold已解決結(jié)構(gòu)預(yù)測問題，推測序列的難度相對降低，D錯(cuò)誤；故選C。15.某種繁殖能力很強(qiáng)的細(xì)菌中導(dǎo)入產(chǎn)脂肪酶的基因后，既可用于處理含油廢水，又可獲得單細(xì)胞蛋白，實(shí)現(xiàn)污染物資源化?，F(xiàn)培育成了A、B兩種菌株，培養(yǎng)過程中細(xì)胞密度和脂肪剩余比例如圖所示。下列說法錯(cuò)誤的是（）A.計(jì)數(shù)時(shí)，得到某一稀釋度下菌落數(shù)為30～300的平板后，至少要對3個(gè)平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù)B.選育菌種時(shí)，為避免雜菌污染，培養(yǎng)基中應(yīng)加入適量抗生素C.導(dǎo)入目的基因時(shí)，要使細(xì)菌處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)D.據(jù)圖可知，菌株B比菌株A有更高的利用價(jià)值【答案】B〖祥解〗間接計(jì)數(shù)法（活菌計(jì)數(shù)法）：①原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌．通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。②操作：a、設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性；b、為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。③計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)?！驹斘觥緼、在計(jì)數(shù)的實(shí)際操作中，通常選用一定稀釋范圍的樣液進(jìn)行培養(yǎng)，以保證獲得菌落數(shù)為30～300、適于計(jì)數(shù)的平板，為了避免偶然性，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更可信，至少要對3個(gè)平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù)，A正確；B、本實(shí)驗(yàn)利用的菌種是細(xì)菌，抗生素會(huì)殺滅細(xì)菌，B錯(cuò)誤；C、導(dǎo)入目的基因時(shí)，要使細(xì)菌處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，以使目的基因易于導(dǎo)入受體細(xì)胞，C正確；D、根據(jù)圖中曲線，相同培養(yǎng)時(shí)間，菌株B的細(xì)胞密度大于菌株A，說明菌株B增殖速度快，最大種群數(shù)量更大，利用營養(yǎng)物質(zhì)充分。而單細(xì)胞蛋白是微生物菌體，因此菌株B單細(xì)胞蛋白產(chǎn)量高。而且菌株B的脂肪剩余量小于菌株A，說明菌株B對脂肪的降解能力強(qiáng)于菌株A，故菌株B比菌株A有更高的利用價(jià)值，D正確。故選B。二、選擇題：本題共5小題，每小題3分，共15分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，有一項(xiàng)或多項(xiàng)符合題目要求。全部選對得3分，選對但選不全得1分，有選錯(cuò)得0分。16.黑曲霉多不耐高溫，發(fā)酵獲得檸檬酸的過程需大量冷卻水控制溫度，生產(chǎn)成本高?，F(xiàn)利用原生質(zhì)體融合技術(shù)獲得耐高溫的高產(chǎn)黑曲霉，過程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.人工誘變和基因工程選育高產(chǎn)黑曲霉菌均具有不定向的特點(diǎn)B.處理②③若為酶解法，與植物細(xì)胞獲得原生質(zhì)體所用酶不同C.只需考慮培養(yǎng)基中黃色圈的大小，就可判斷是否為高產(chǎn)菌株D.處理④只需升高溫度就能篩選出耐高溫的高產(chǎn)黑曲霉【答案】ACD〖祥解〗人工誘變是通過物理（如紫外線）、化學(xué)（如誘變劑）因素誘導(dǎo)基因突變，基因突變具有不定向性，所以人工誘變選育高產(chǎn)菌株方向不確定?；蚬こ屉m能定向改造生物性狀，但前提是精準(zhǔn)設(shè)計(jì)載體和導(dǎo)入目的基因，本質(zhì)是按人類需求定向操作?！驹斘觥緼、選育高產(chǎn)黑曲霉菌時(shí)，人工誘變具有不定向的特點(diǎn)，基因工程是定向的，A錯(cuò)誤；B、黑曲霉的細(xì)胞壁成分不是纖維素和果膠，用酶解法時(shí)，處理②③與植物細(xì)胞獲得原生質(zhì)體所用酶不同，B正確；C、是否是高產(chǎn)菌株應(yīng)考慮形成的黃色圈與菌落直徑大小的比值，C錯(cuò)誤；D、處理④升高溫度后還需要進(jìn)一步篩選才能得到既耐高溫又高產(chǎn)的黑曲霉，D錯(cuò)誤。故選ACD。17.程序性死亡受體-1簡稱PD-1，是一種在T細(xì)胞等免疫細(xì)胞表面表達(dá)的免疫抑制性受體，PD-L1和PD-L2是PD-1的兩種主要受體，當(dāng)PD-1與PD-L1或PD-L2結(jié)合時(shí)，T細(xì)胞的活性會(huì)被抑制。許多腫瘤細(xì)胞會(huì)表達(dá)PD-L1，通過PD-1/PD-L1信號通路抑制T細(xì)胞的活性，從而實(shí)現(xiàn)免疫逃逸。納武利尤單抗通過阻斷PD-1與腫瘤細(xì)胞上的PD-L1結(jié)合，增強(qiáng)免疫系統(tǒng)對腫瘤細(xì)胞的攻擊能力。下列說法正確的是（）A.制備納武利尤單抗時(shí)，通過特定的選擇培養(yǎng)基能篩選出產(chǎn)生所需單抗的雜交瘤細(xì)胞B.用96孔板培養(yǎng)和篩選雜交瘤細(xì)胞時(shí)，每一個(gè)孔中盡量只接種一個(gè)雜交瘤細(xì)胞C.將小鼠抗體上結(jié)合抗原的區(qū)域“嫁接”到人的抗體上屬于蛋白質(zhì)工程D.納武利尤單抗屬于一種抗體—藥物偶聯(lián)物，可以有效殺傷腫瘤細(xì)胞【答案】BC〖祥解〗單克隆抗體制備的基本步驟：對小鼠進(jìn)行免疫→提取B淋巴細(xì)胞→將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合→通過篩選、克隆化培養(yǎng)和擴(kuò)大化培養(yǎng)→最終注入小鼠體內(nèi)→從腹腔腹水中提取單克隆抗體。【詳析】A、制備納武利尤單抗時(shí)，通過特定的選擇培養(yǎng)基只能篩選出雜交瘤細(xì)胞，篩選產(chǎn)生所需單抗的雜交瘤細(xì)胞需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，A錯(cuò)誤；B、用96孔板培養(yǎng)和篩選雜交瘤細(xì)胞時(shí)，每一個(gè)孔中盡量只接種一個(gè)雜交瘤細(xì)胞，這樣增殖成的雜交瘤細(xì)胞屬于單克隆，B正確；C、將小鼠抗體上結(jié)合抗原的區(qū)域“嫁接”到人的抗體是根據(jù)人們對蛋白質(zhì)功能的特定需求對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造，屬于蛋白質(zhì)工程，C正確；D、抗體—藥物偶聯(lián)物是將細(xì)胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合，實(shí)現(xiàn)對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷，其中的單抗起導(dǎo)向作用，納武利尤單抗是通過阻斷PD-1與腫瘤細(xì)胞上的PD-L1結(jié)合，增強(qiáng)免疫系統(tǒng)對腫瘤細(xì)胞的攻擊能力，不是起導(dǎo)向作用，D錯(cuò)誤。故選BC。18.在胚胎移植前進(jìn)行性別鑒定、遺傳病篩查等，對于人工控制動(dòng)物性別、動(dòng)物繁育健康后代具有重要意義。下列與性別鑒定相關(guān)的敘述，正確的是（）A.對用胚胎分割技術(shù)分割后獲得的每一個(gè)胚胎均要進(jìn)行性別鑒定B.在胚胎發(fā)育至桑葚胚時(shí)尚不宜進(jìn)行性別鑒定C.利用核移植技術(shù)得到的胚胎不需要進(jìn)行性別鑒定D.囊胚階段進(jìn)行性別鑒定要在滋養(yǎng)層取樣【答案】BCD〖祥解〗囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來發(fā)育成胎兒的各種組織，滋養(yǎng)層發(fā)育成胎盤、胎膜。取滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析鑒定性別，不會(huì)影響胎兒的發(fā)育?！驹斘觥緼、胚胎分割技術(shù)分割一個(gè)胚胎后得到的不同胚胎所含性染色體相同，不需要每個(gè)胚胎都進(jìn)行性別鑒定，A錯(cuò)誤；B、桑葚胚時(shí)的胚胎細(xì)胞發(fā)育方向未確定，尚不宜進(jìn)行性別鑒定，B正確；C、核移植技術(shù)得到的胚胎的性別與核供體的性別相同，不需要進(jìn)行性別鑒定，C正確；D、囊胚階段進(jìn)行性別鑒定要在滋養(yǎng)層取樣，滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來發(fā)育成胎兒的各種組織，因此應(yīng)在胚胎發(fā)育到囊胚期后取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行性別鑒定，D正確。故選BCD。19.利用植物組織或細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)行藥用次生代謝物的生產(chǎn)可以采用不同的技術(shù)流程，如下圖所示。通過將發(fā)根農(nóng)桿菌中的Ri質(zhì)粒含有的T-DNA整合到紫草細(xì)胞的DNA上，形成的毛狀根能表現(xiàn)出合成紫草寧的能力，產(chǎn)物產(chǎn)量較正常植物及懸浮培養(yǎng)細(xì)胞的要高。下列說法正確的是（）A.將目標(biāo)產(chǎn)物合成途徑中的關(guān)鍵酶基因?qū)霊腋〖?xì)胞，可用花粉管通道法B.不同于植物組織培養(yǎng)，上圖過程中不需要更換培養(yǎng)基C.紫草寧不是紫草生長所必需的，具有抗菌、消炎和抗腫瘤等活性D.培養(yǎng)體系3中與紫草寧合成有關(guān)的基因在毛狀根中能進(jìn)行表達(dá)【答案】CD〖祥解〗（1）植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控制的條件下，將離體的植物器官、組織、細(xì)胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株；（2）植物組織培養(yǎng)的條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度、適時(shí)的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營養(yǎng)（無機(jī)、有機(jī)成分）和植物激素（生長素和細(xì)胞分裂素）。【詳析】A、花粉管通道法是指在授粉后向子房注射含目的基因的DNA溶液，利用植物在開花、受精過程中形成的花粉管通道，將外源DNA導(dǎo)入受精卵細(xì)胞，將目標(biāo)產(chǎn)物合成途徑中的關(guān)鍵酶基因?qū)霊腋〖?xì)胞，不可用花粉管通道法，A錯(cuò)誤；B、植物激素的濃度和比例等都會(huì)影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向，結(jié)合圖示分析，培養(yǎng)體系3需要先利用外植體誘導(dǎo)培養(yǎng)產(chǎn)生愈傷組織，再轉(zhuǎn)移到誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基上產(chǎn)生毛狀根，即題圖過程需要更換培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；C、紫草寧是次生代謝物，不是紫草生長所必需，提取的紫草寧具有抗菌、消炎和抗腫瘤等活性，C正確；D、通過將發(fā)根農(nóng)桿菌中的Ri質(zhì)粒含有的T-DNA整合到紫草細(xì)胞的DNA上，形成的毛狀根能表現(xiàn)出合成紫草寧的能力，說明培養(yǎng)體系3中與紫草寧合成有關(guān)的基因在毛狀根中能進(jìn)行表達(dá)，D正確。故選CD。20.熒光定量PCR可測量DNA的擴(kuò)增量，TaqMan探針法是最常見的方法。當(dāng)耐高溫的DNA聚合酶遇到與模板結(jié)合的探針時(shí)，其外切核酸酶活性會(huì)切斷探針，報(bào)告熒光基團(tuán)與淬滅熒光基團(tuán)分離，熒光染料發(fā)出熒光信號，如圖所示。每經(jīng)過一次PCR循環(huán)，熒光信號就會(huì)同步增長。循環(huán)閾值（Ct值）是熒光定量PCR用于衡量PCR擴(kuò)增過程中熒光信號達(dá)到設(shè)定閾值時(shí)的循環(huán)次數(shù)。下列說法錯(cuò)誤的是（）A.報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分別位于探針的5'端和3'端B.在PCR反應(yīng)體系中加入的引物數(shù)量是探針數(shù)量的2倍C.探針可以是與DNA中任一條鏈的部分堿基序列互補(bǔ)的一段DNAD.若用此方法檢測樣本中病毒數(shù)，Ct值越大，患者危險(xiǎn)性越高【答案】D〖祥解〗PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。原理：DNA復(fù)制?！驹斘觥緼、根據(jù)子鏈的延伸方向(5'端到3'端)可以判斷，報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分別位于探針的5′端和3'端，A正確；BC、DNA的復(fù)制是沿兩條鏈同時(shí)進(jìn)行的，PCR一次循環(huán)需要兩個(gè)引物，但只需要一個(gè)探針，故在PCR反應(yīng)體系中加入的引物數(shù)量是探針數(shù)量的2倍，探針可以是與DNA中任一條鏈的部分堿基序列互補(bǔ)的一段DNA，BC正確；D、Ct值與模板DNA的起始拷貝數(shù)成反比，若用此方法檢測樣本中病毒數(shù)，Ct值越大，樣本中病毒數(shù)就越少，患者危險(xiǎn)性越低，D錯(cuò)誤。故選D。三、非選擇題：本題共5小題，共55分。21.植物組織培養(yǎng)是一種基于植物細(xì)胞全能性理論的無性繁殖技術(shù)，廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、園藝和生物技術(shù)領(lǐng)域，以下是其主要應(yīng)用?；卮鹣铝袉栴}：（1）快速繁殖技術(shù)已被廣泛用于名貴蘭花的培育。與有性繁殖相比，利用快速繁殖技術(shù)培育蘭花，不僅可以高效、快速地實(shí)現(xiàn)名貴蘭花種苗的大量繁殖，還可以_______。長期進(jìn)行無性繁殖的蘭花，病毒在體內(nèi)逐年積累，就會(huì)導(dǎo)致品質(zhì)變差。取蘭花的_______進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，再生的植株就有可能不帶病毒，從而獲得脫毒苗。（2）植物組織培養(yǎng)技術(shù)常用于_____育種來培育作物的純合新品種。培育所用的外植體為_____，培育過程中，用秋水仙素進(jìn)行處理的時(shí)間在再分化之______（填“前”或“后”）。在植物組織培養(yǎng)過程中，由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于_______的狀態(tài)，因此它們?nèi)菀资艿脚囵B(yǎng)條件和誘變因素的影響而發(fā)生突變，可結(jié)合植物組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行突變體的利用。（3）紫杉醇是存在于紅豆杉屬植物體內(nèi)的一種次生代謝物，具有高抗癌活性，現(xiàn)在已被廣泛用于乳腺癌等癌癥的治療。愈傷組織在液體培養(yǎng)基中大量培養(yǎng)即可獲得紫杉醇，培養(yǎng)時(shí)要進(jìn)行振蕩，振蕩的兩個(gè)目的是_______、________?！敬鸢浮浚?）①.保持名貴蘭花的優(yōu)良性狀②.莖尖（或頂端分生組織）（2）①.單倍體②.花藥（或花粉）③.后④.不斷增殖（3）①.增加溶液中的氧氣②.使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸〖祥解〗植物組織培養(yǎng)是指將離體的植物器官、組織或細(xì)胞等，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)?！窘馕觥浚?）快速繁殖技術(shù)屬于無性繁殖，無性繁殖可以保持優(yōu)良品種（名貴蘭花）的遺傳特性?？茖W(xué)家發(fā)現(xiàn)植物頂端分生組織附近（如莖尖）的病毒極少，甚至無病毒，因此切取一定大小的莖尖進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，再生的植株就有可能不帶病毒，從而獲得脫毒苗。（2）單倍體育種時(shí)，外植體是花藥（或花粉），先通過花藥（或花粉）培養(yǎng)獲得單倍體植株，然后經(jīng)過誘導(dǎo)使染色體加倍，故用秋水仙素處理在再分化形成單倍體植株之后進(jìn)行。在植物組織培養(yǎng)過程中，由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷增殖狀態(tài)的細(xì)胞，每個(gè)細(xì)胞周期中都要進(jìn)行DNA復(fù)制，容易在某些誘變因素的作用下發(fā)生突變。（3）通過植物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)次生代謝物，一般在愈傷組織階段進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)，振蕩可以增加溶液中的氧氣，并使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸。22.銅綠假單胞菌是一種常見的專性需氧病原菌，最適生長溫度為25～30℃，廣泛存在于土壤、水體中。銅綠假單胞菌可致病，但在環(huán)境修復(fù)和生物處理中有著廣泛的應(yīng)用潛力?；卮鹣铝袉栴}：（1）銅綠假單胞菌具有3個(gè)生長特性：①菌落生長時(shí)會(huì)產(chǎn)生一種亮綠色物質(zhì)彌漫于整個(gè)培養(yǎng)基中。②在血液培養(yǎng)基上菌落周圍能形成透明的溶血環(huán)。③在4℃環(huán)境中不生長而在42℃環(huán)境中可以生長。若利用前兩個(gè)生長特性初步鑒別銅綠假單胞菌，培養(yǎng)溫度應(yīng)設(shè)置為________，若要利用特性③進(jìn)一步確定此菌，可將樣品接種于兩個(gè)普通培養(yǎng)基中，_______，一段時(shí)間后觀察菌落的生長情況。（2）銅綠假單胞菌進(jìn)行液體培養(yǎng)時(shí)，在培養(yǎng)液中呈混濁生長，并在培養(yǎng)液表面形成菌膜。請解釋形成這種菌膜的原因：________。（3）如圖是接種有銅綠假單胞菌的血平板：其中加入脫纖維羊血的主要目的是__________加入瓊脂的作用是_____，據(jù)圖用數(shù)字和箭頭寫出接種時(shí)的劃線順序：_______。（4）為有效控制感染的傳播，需要加強(qiáng)對接種室、醫(yī)務(wù)人員及所用器械等的消毒或滅菌。試從這三個(gè)方面分別舉出一種無菌操作的具體方法：___________。（5）銅綠假單胞菌能夠分解石油中的多種成分，包括烷烴和芳烴，現(xiàn)要從某污水中篩選銅綠假單胞菌對石油污染的水域進(jìn)行生物修復(fù)，篩選時(shí)要以_____為唯一碳源，培養(yǎng)基pH為_________性?！敬鸢浮浚?）①.25～30℃②.培養(yǎng)溫度分別設(shè)置為4℃和42℃（2）銅綠假單胞菌為專性需氧菌，培養(yǎng)液表面接觸空氣，菌的繁殖速度快（3）①.檢測在菌落周圍是否會(huì)出現(xiàn)透明溶血環(huán)，從而檢測菌落是否是銅綠假單胞菌菌落②.作為凝固劑（或形成固體培養(yǎng)基）③.1→3→2→4（4）接種室紫外線照射30分鐘、酒精擦拭雙手、接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌（合理即可）（5）①.石油②.中性或弱堿〖祥解〗從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株。篩選目的菌的培養(yǎng)基應(yīng)該是選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)基制作完成后進(jìn)行滅菌處理，所有操作應(yīng)該確保無菌操作；常用的固體培養(yǎng)基上的接種方法是稀釋涂布平板法和平板劃線法?！窘馕觥浚?）利用普通培養(yǎng)基和血平板鑒別此菌，培養(yǎng)溫度應(yīng)設(shè)置成最適溫度（25～30℃）。銅綠假單胞菌在4℃環(huán)境中不生長而在42℃環(huán)境中可以生長，在利用①②兩種生長特性對銅綠假單胞菌進(jìn)行鑒定的基礎(chǔ)上，利用在不同溫度下的生長特性對菌進(jìn)行進(jìn)一步鑒定，自變量為兩個(gè)不同的溫度4℃和42℃。（2）銅綠假單胞菌為專性需氧菌，在氧氣濃度高的地方繁殖速度快，培養(yǎng)液表面接觸空氣加快了菌的繁殖，故能在表面形成菌膜。（3）加入脫纖維羊血后形成紅色的血平板，如果有銅綠假單胞菌產(chǎn)生溶血，就會(huì)在血平板上形成溶血環(huán)。通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，經(jīng)數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離得到單菌落，據(jù)圖中細(xì)菌的生長狀況判斷，接種時(shí)的劃線順序?yàn)?→3→2→4。（4）紫外線能對接種室消毒，醫(yī)務(wù)人員的雙手用酒精擦拭可消毒，所用器械有的可用濕熱滅菌，有的可用干熱滅菌，還有的可用灼燒滅菌。小問5詳析】若要從某污水中篩選銅綠假單胞菌用于對石油污染的水域進(jìn)行生物修復(fù)，篩選時(shí)要以石油為唯一碳源，銅綠假單胞菌為細(xì)菌，在培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，一般需要將培養(yǎng)基pH調(diào)至中性或弱堿性。23.2019年7月21日，我國首例完全自主培育的克隆貓“大蒜”誕生。這次克隆貓的成功培育是世界為數(shù)不多的成功案例之一，標(biāo)志著我國在克隆領(lǐng)域又邁進(jìn)了一大步。如圖為克隆貓“大蒜”的培育過程，回答下列問題：（1）進(jìn)行過程①和③時(shí)，需要為培養(yǎng)細(xì)胞提供無菌、無毒的環(huán)境，其中保證無毒的具體操作是_______。培養(yǎng)時(shí)，為保證細(xì)胞正常生長所需的氣體環(huán)境，通常將培養(yǎng)的細(xì)胞或胚胎接種于_____中，并將它們置于CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。（2）核移植前，________（填“需要”或“不需要”）進(jìn)行精子獲能操作，原因是________。將采集到的卵母細(xì)胞培養(yǎng)至MⅡ期后進(jìn)行去核操作，這里的“去核”實(shí)質(zhì)上是去除_______復(fù)合物。蛋白酶合成抑制劑是在圖中過程______（填序號）中使用的方法，其作用是_______。（3）進(jìn)行過程④前，要用激素對代孕貓和供體貓做同期發(fā)情處理，目的是________。（4）胚胎經(jīng)受體孕育的后代，其遺傳特性與受體無關(guān)的原因是________。若要提高胚胎的利用率，可在胚胎移植前進(jìn)行_____?！敬鸢浮浚?）①.定期更換培養(yǎng)液②.培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶（2）①.不需要②.核移植屬于無性繁殖（或克?。?，不需要經(jīng)歷受精過程，不需要精子參與③.紡錘體—染色體④.③⑤.激活重構(gòu)胚，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程（3）使供、受體生殖器官的生理變化相同，為供體的胚胎移入受體提供相同的生理環(huán)境（4）①.供體胚胎與受體子宮建立的僅是生理和組織上的聯(lián)系，其遺傳物質(zhì)在孕育過程中不會(huì)受受體影響②.胚胎分割〖祥解〗胚胎工程是指對生殖細(xì)胞、受精卵或早期胚胎細(xì)胞進(jìn)行多種顯微操作和處理，然后將獲得的胚胎移植到雌性動(dòng)物體內(nèi)生產(chǎn)后代，以滿足人類的各種需求。胚胎工程技術(shù)包括體外受精、胚胎移植和胚胎分割等?！窘馕觥浚?）保證無毒的具體操作是定期更換培養(yǎng)液，這樣可以去除細(xì)胞代謝產(chǎn)生的有害產(chǎn)物，防止其積累對細(xì)胞造成毒害。培養(yǎng)時(shí)，通常將培養(yǎng)的細(xì)胞或胚胎接種于含有95%空氣和5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶中。（2）核移植前不需要進(jìn)行精子獲能操作，因?yàn)楹艘浦彩菍Ⅲw細(xì)胞核移入去核卵母細(xì)胞，屬于無性繁殖（或克隆），不涉及精子和卵子的受精過程，無需精子獲能。MⅡ期卵母細(xì)胞“去核”實(shí)質(zhì)上是去除紡錘體—染色體復(fù)合物，這樣能保證核移植后重構(gòu)細(xì)胞的遺傳物質(zhì)主要來自供體體細(xì)胞。蛋白酶合成抑制劑是在圖中過程③中使用的方法，其作用是激活重構(gòu)胚，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程，利于核移植后重構(gòu)細(xì)胞的發(fā)育啟動(dòng)。（3）據(jù)圖分析可知，過程①為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、過程②為核移植、過程③為早期胚胎培養(yǎng)、過程④為胚胎移植。胚胎移植前要用激素處理，讓代孕貓與供體貓進(jìn)行同期發(fā)情，使它們生殖器官的生理變化相同，為供體的胚胎移入受體提供相同的生理環(huán)境。（4）供體胚胎與受體子宮建立的僅是生理和組織上的聯(lián)系，其遺傳物質(zhì)在孕育過程中不會(huì)受受體影響。胚胎遺傳物質(zhì)主要來自供體細(xì)胞的細(xì)胞核和卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，與受體無遺傳物質(zhì)交換：克隆貓胚胎遺傳物質(zhì)，核基因來自供體體細(xì)胞（“大蒜”的體細(xì)胞核），質(zhì)基因來自去核前卵母細(xì)胞（卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)含少量DNA），受體只是提供胚胎發(fā)育的“場所”（子宮），不提供遺傳物質(zhì)給胚胎。針對提高胚胎利用率需求，胚胎分割是常用有效技術(shù)，基于早期胚胎細(xì)胞全能性，分割后各部分可獨(dú)立發(fā)育，實(shí)現(xiàn)“一胚多育”，從而提高胚胎利用率，增加后代數(shù)量。24.人的血清蛋白（HSA）具有重要的醫(yī)用價(jià)值，研究人員欲利用基因工程來大量生產(chǎn)HSA。圖1為HSA基因片段和人工構(gòu)建的大腸桿菌質(zhì)粒pBR322，其中Amp表示氨芐青霉素抗性基因，Neo表示新霉素抗性基因，箭頭表示切割形成末端完全不同的4種限制酶的切割位點(diǎn)。以基因工程技術(shù)獲取重組HSA（rHSA）的三條途徑如圖2所示。請回答下列問題：（1）據(jù)圖1分析，在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，選擇限制酶_________切割質(zhì)粒和目的基因，雙酶切法的兩個(gè)優(yōu)點(diǎn)是__________、________。（2）為了排除普通受體細(xì)胞（未導(dǎo)入質(zhì)粒）、空質(zhì)粒受體細(xì)胞（導(dǎo)入pBR322質(zhì)粒而非重組質(zhì)粒）的干擾，目的基因?qū)牒笠M(jìn)行篩選，若篩選用甲、乙兩種培養(yǎng)基，兩種培養(yǎng)基的差異為________，含重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞在培養(yǎng)基上的生長情況為________。（3）將農(nóng)桿菌與水稻圓葉片進(jìn)行________，旨在讓Ti質(zhì)粒的T-DNA進(jìn)入水稻受體細(xì)胞。三種方法中，為檢測目的基因的表達(dá)情況，均可提取受體細(xì)胞的蛋白質(zhì)，用_________進(jìn)行抗原—抗體雜交實(shí)驗(yàn)。（4）科學(xué)家培養(yǎng)出一種轉(zhuǎn)基因羊，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的血清蛋白并分泌到尿液中。其培育方法中將重組質(zhì)粒通過______法導(dǎo)入山羊的______細(xì)胞。與“乳腺生物反應(yīng)器”相比，“膀胱生物反應(yīng)器”不受_______限制，受體來源更廣泛。【答案】（1）①.EcoRI和PstI②.避免目的基因和質(zhì)粒的環(huán)化③.避免目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行反向連接（2）①.一組培養(yǎng)基中含有新霉素，另一組培養(yǎng)基中含有氨芐青霉素②.在含有新霉素的培養(yǎng)基上能生長，在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上不能生長（3）①.共培養(yǎng)②.抗人血清蛋白（HSA）的抗體（4）①.顯微注射②.受精卵③.性別和年齡〖祥解〗基因工程是一種DNA操作技術(shù)，需要借助限制酶、DNA連接酶和載體等工具才能進(jìn)行。它的基本操作程序包括：目的基因的篩選與獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞和目的基因的檢測與鑒定?！窘馕觥浚?）據(jù)圖1可知，BamHI會(huì)切割目的基因，TthⅢ1與其他兩種限制酶中的一種同時(shí)使用會(huì)切掉質(zhì)粒中的復(fù)制原點(diǎn)，而EcoRI和PstI這兩種酶能切割質(zhì)粒和目的基因，不會(huì)破壞復(fù)制原點(diǎn)，且能得到不同的黏性末端，可以避免目的基因和質(zhì)粒的環(huán)化，同時(shí)避免目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行反向連接，因此在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，選擇EcoRI和PstI作為切割質(zhì)粒和目的基因的限制酶。（2）分析圖1可知，PstI破壞了氨芐青霉素抗性基因（Ampr），構(gòu)建的重組質(zhì)粒無氨芐青霉素抗性基因，但具有新霉素抗性基因，兩組培養(yǎng)基中，一組培養(yǎng)基中有新霉素，另一組培養(yǎng)基中有氨芐青霉素，含重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞只能在含有新霉素的培養(yǎng)基上能生長，在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上不能生長。（3）將農(nóng)桿菌與水稻圓葉片進(jìn)行共培養(yǎng)，旨在讓Ti質(zhì)粒的T-DNA進(jìn)入水稻受體細(xì)胞。為檢測目的基因的表達(dá)情況，可提取受體細(xì)胞的蛋白質(zhì)，利用的原理是抗原—抗體特異性結(jié)合，所以用抗人血清蛋白（HSA）的抗體進(jìn)行抗原—抗體雜交實(shí)驗(yàn)來檢測人的血清蛋白（HSA）。（4）將重組質(zhì)粒通過顯微注射法導(dǎo)入動(dòng)物的受體細(xì)胞時(shí)，常選用受精卵作為受體細(xì)胞?！叭橄偕锓磻?yīng)器”只能從哺乳期雌性奶牛的乳汁中獲取產(chǎn)物，與“乳腺