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湖南省長沙麓山國際學校2026年生物高二下期末統(tǒng)考試題(含解析)1.(單選,2分)下列關(guān)于“細胞自噬”的敘述,正確的是A.自噬體膜只來源于高爾基體扁平囊B.自噬溶酶體形成后,其內(nèi)部pH由溶酶體膜上H?-ATP酶維持C.饑餓狀態(tài)下,mTORC1活性升高,促進自噬相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄D.自噬缺陷細胞在營養(yǎng)充足時不會發(fā)生凋亡【答案】B【解析】自噬體膜來源多樣,可來自內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體外膜、高爾基體等;溶酶體膜V型H?-ATP酶持續(xù)泵入H?,維持內(nèi)部pH≈4.6;饑餓時mTORC1被AMPK抑制,自噬增強;自噬缺陷可致受損細胞器堆積,即使營養(yǎng)充足也可觸發(fā)內(nèi)源性凋亡。2.(單選,2分)將人源PD-1基因與小鼠Cd4啟動子拼接后轉(zhuǎn)入C57BL/6小鼠,獲得T細胞特異性過表達模型。若用流式檢測,下列標記組合可準確區(qū)分“轉(zhuǎn)基因效應(yīng)T細胞”與“內(nèi)源調(diào)節(jié)性T細胞”的是A.CD3?CD4?PD-1?Foxp3?B.CD3?CD4?PD-1?Foxp3?C.CD3?CD8?PD-1?Foxp3?D.CD3?CD4?PD-1?Foxp3?【答案】A【解析】Cd4啟動子驅(qū)動PD-1在CD4?T細胞表達;Foxp3為Treg標志,效應(yīng)T細胞不表達Foxp3,故選A。3.(單選,2分)在“探究抗生素對腸道菌群耐藥基因水平轉(zhuǎn)移影響”的實驗中,下列操作對“排除接合轉(zhuǎn)移”干擾最小的是A.過濾除去0.22μm以上菌體B.加入DNaseI消化游離DNAC.使用含50μg/mL環(huán)丙沙星的培養(yǎng)基D.將供體菌先經(jīng)紫外線照射致死【答案】C【解析】環(huán)丙沙星抑制DNA旋轉(zhuǎn)酶,可阻斷接合轉(zhuǎn)移中DNA復(fù)制步驟,但對游離DNA轉(zhuǎn)化無直接清除作用;DNaseI可清除轉(zhuǎn)化來源的游離DNA;紫外線致死供體菌可同時阻斷接合與轉(zhuǎn)化;過濾除菌則無法區(qū)分機制。4.(單選,2分)某植物花青苷合成受MYB-bHLH-WD40復(fù)合體調(diào)控。若將bHLH基因啟動子區(qū)-310bp處C→T突變,導(dǎo)致該位點不能被HD-ZipIV結(jié)合,則突變體表現(xiàn)型最可能是A.花瓣無色,葉片紫色B.花瓣紫色,葉片無色C.花瓣與葉片均無色D.花瓣與葉片均紫色【答案】C【解析】HD-ZipIV為表皮特異性激活因子,突變后bHLH在花瓣與葉片表皮均無法表達,復(fù)合體不能形成,花青苷合成完全受阻。5.(單選,2分)將大腸桿菌在含1?N培養(yǎng)基中培養(yǎng)多代后,轉(zhuǎn)入1?N培養(yǎng)基,提取DNA經(jīng)EcoRI消化后進行氯化銫密度梯度離心。若EcoRI在oriC附近有一切點,則離心后區(qū)帶中“最重”條帶所占比例約為A.0%B.12.5%C.25%D.50%【答案】A【解析】EcoRI切點若靠近oriC,則復(fù)制后兩條子鏈均含1?N,無1?N-1?N全重DNA,故最重條帶為0%。6.(單選,2分)下列關(guān)于“CRISPR-Cas12a系統(tǒng)”的敘述,錯誤的是A.Cas12a僅需crRNA即可識別并切割靶DNAB.collateralcleavage活性可被用于開發(fā)熒光報告核酸檢測C.靶序列3'端PAM為5'-TTTV-3'D.Cas12a切割后產(chǎn)生5'-磷酸、3'-羥基黏性末端【答案】D【解析】Cas12a切割產(chǎn)生5'-磷酸、3'-羥基平末端,非黏性末端。7.(單選,2分)在“探究擬南芥根向重力性”實驗中,將野生型與aux1突變體分別水平放置,發(fā)現(xiàn)突變體根彎曲角度減小。若用NAA處理突變體,下列曲線最能反映“彎曲角度—NAA濃度”關(guān)系的是A.隨濃度升高持續(xù)增大,無峰值B.低促高抑,最適濃度10??mol/LC.濃度升高無顯著變化D.濃度升高反而抑制至負角度【答案】B【解析】aux1為AUX/IAA家族成員,突變致生長素內(nèi)流受阻;外源NAA可回補,但高濃度抑制根伸長,呈現(xiàn)典型“低促高抑”。8.(單選,2分)將某昆蟲的“求偶鳴聲”主頻由5kHz人工選擇提高至10kHz,連續(xù)選育20代后,發(fā)現(xiàn)雄蟲鳴肌肌球蛋白重鏈(MyHC)基因表達量升高。若將MyHC敲低,則突變雄蟲主頻恢復(fù)至5kHz,但振幅降低。該結(jié)果說明A.主頻僅由MyHC表達量決定B.振幅與頻率受同一基因多效性控制C.人工選擇直接作用于基因而非性狀D.肌纖維收縮速度影響聲波頻率【答案】D【解析】MyHC敲低后頻率下降,提示肌纖維收縮速度決定翅膀振動頻率;振幅降低為次級效應(yīng),非多效性;人工選擇作用于表型。9.(單選,2分)下列關(guān)于“哺乳動物卵母細胞減數(shù)分裂”的敘述,正確的是A.第一次減數(shù)分裂后期,姐妹染色單體分離B.次級卵母細胞停滯于MII與cAMP水平低有關(guān)C.受精后CSF(cytostaticfactor)被Ca2?波動滅活D.polarbody排出后,卵細胞膜面積減少約30%【答案】C【解析】Ca2?升高激活A(yù)PC/C,降解cyclinB與CSF,解除MII阻滯;MI后期為同源染色體分離;cAMP高維持MII阻滯;極體排出膜面積減少<5%。10.(單選,2分)將GFP標記的核孔蛋白Nup98轉(zhuǎn)入HeLa細胞,用低劑量放線菌酮(CHX)處理,發(fā)現(xiàn)核膜出現(xiàn)“熒光斑點狀聚集”。若同時過表達Nup98的FG重復(fù)結(jié)構(gòu)域,則斑點消失。該實驗說明A.CHX誘導(dǎo)Nup98相分離B.FG結(jié)構(gòu)域抑制Nup98聚合C.Nup98聚集與翻譯抑制無關(guān)D.核孔復(fù)合體動態(tài)平衡受翻譯速率調(diào)控【答案】D【解析】CHX抑制翻譯→游離Nup98減少→核孔復(fù)合體組裝失衡,F(xiàn)G結(jié)構(gòu)域過表達可競爭抑制聚集,提示翻譯速率調(diào)控核孔穩(wěn)態(tài)。11.(單選,2分)在“探究溫度對某酶活性影響”實驗中,測得60℃下酶失活半衰期為8min,70℃為2min。若該失活遵循一級動力學,則80℃下半衰期約為A.0.5minB.1minC.1.5minD.2min【答案】A【解析】由Arrhenius方程,ln(t?)與1/T線性相關(guān),溫度升高10℃半衰期約減為1/4,故80℃≈0.5min。12.(單選,2分)將一株C?植物與一株C?植物置于同一密閉玻璃箱,光照12h/黑暗12h循環(huán),持續(xù)30天。若每日光照期結(jié)束時測定箱內(nèi)CO?濃度,則曲線趨勢為A.持續(xù)下降后趨于零B.先降后升,最終高于初始C.先降后穩(wěn)定于較低水平D.波動中緩慢上升【答案】C【解析】初期C?植物高效固定CO?,濃度下降;后期C?植物因光呼吸、呼吸作用釋放CO?,與C?植物固定達動態(tài)平衡,濃度穩(wěn)定于較低平臺。13.(單選,2分)下列關(guān)于“T細胞受體(TCR)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)”的敘述,錯誤的是A.CD3ζ鏈ITAM磷酸化由Lck催化B.PLCγ1水解PIP?產(chǎn)生IP?與DAGC.IP?升高胞內(nèi)Ca2?激活NFAT入核D.DAG激活Ras-MAPK通路依賴Raf-1泛素化【答案】D【解析】DAG激活RasGRP,進而激活Ras-MAPK,無需Raf-1泛素化。14.(單選,2分)將果蠅胚胎均分為兩組,甲組注射dsRNA敲低bicoid,乙組注射dsRNA敲低nanos。若繼續(xù)培養(yǎng)至成蠅,則兩者最顯著的區(qū)別為A.甲無頭,乙無雙翅B.甲無胸,乙無腹C.甲頭尾顛倒,乙腹部缺失D.甲無頭,乙無腹【答案】D【解析】bicoid缺失致頭胸結(jié)構(gòu)缺失,nanos缺失致腹部發(fā)育受阻。15.(單選,2分)某湖泊因生活污水排入導(dǎo)致藍藻水華。引入濾食性魚類后,藍藻生物量下降,但溶解性微囊藻毒素(MC-LR)濃度反而升高。下列解釋最合理的是A.魚類擾動促進底泥磷釋放B.藍藻細胞破裂釋放胞內(nèi)毒素C.魚類分泌毒素合成誘導(dǎo)物D.藍藻產(chǎn)生毒素抵御捕食【答案】B【解析】濾食性魚類破壞藍藻細胞結(jié)構(gòu),胞內(nèi)毒素大量溶出,而降解菌尚未同步增殖。16.(單選,2分)將小鼠骨髓瘤細胞與經(jīng)OVA免疫的小鼠脾細胞融合,篩選得雜交瘤。若用“有限稀釋法”克隆化,最終獲得一株單抗,其IgG重鏈可變區(qū)基因測序顯示僅一個V(D)J重組產(chǎn)物,但輕鏈出現(xiàn)兩種峰。最可能的原因是A.雜交瘤發(fā)生輕鏈染色體丟失B.融合時兩個B細胞同時參與C.重鏈基因已發(fā)生類別轉(zhuǎn)換D.輕鏈存在等位基因排斥失敗【答案】B【解析】兩個B細胞同時與同一瘤細胞融合,形成三親本雜交瘤,輕鏈雙峰。17.(單選,2分)下列關(guān)于“植物光系統(tǒng)II(PSII)”的敘述,正確的是A.D1蛋白由葉綠體基因編碼,半衰期約30minB.放氧復(fù)合體Mn?CaO?簇位于D2蛋白胞質(zhì)側(cè)C.細胞色素b???接受電子后還原PQ池D.光損傷主要發(fā)生在D2蛋白Pheo位點【答案】A【解析】D1蛋白半衰期短,強光下易損傷;b???接受電子后還原P680?;Mn簇位于D1/D2腔側(cè);損傷位點主要為D1。18.(單選,2分)將人iPSC分化為心肌細胞,用CRISPR敲入GCaMP6f報告基因。加入咖啡因后,熒光強度迅速上升,隨后緩慢下降。若同時加入Ryanodine,則熒光峰值降低約70%。該實驗說明A.咖啡因通過RyR促進SRCa2?釋放B.RyR為咖啡因受體C.GCaMP6f對Ca2?親和力下降D.咖啡因抑制SERCA活性【答案】A【解析】咖啡因激活RyR,誘導(dǎo)SRCa2?釋放;Ryanodine阻斷RyR,峰值下降。19.(單選,2分)下列關(guān)于“真核mRNA3'端加工”的敘述,錯誤的是A.CPSF-73負責切割mRNA前體B.PAPα添加約250個AC.剪切位點通常位于AAUAAA下游20–30ntD.組蛋白mRNA3'端加工依賴U7snRNP【答案】B【解析】PAPα添加A尾長度受PABPN1調(diào)控,通常≈200nt,非固定250。20.(單選,2分)將一株番茄的葉片用1?CO?脈沖標記5s,隨后追蹤放射性。若該植株為sucrosetransporter突變體,則放射性在“葉柄—莖—根”中的分布比例與野生型相比A.葉柄升高,根降低B.葉柄降低,根升高C.葉柄與根均升高D.無顯著差異【答案】A【解析】蔗糖外運受阻,葉柄中滯留增多,向下運輸減少,根中降低。21.(多選,3分)下列關(guān)于“DNA甲基化維持與去甲基化”的敘述,正確的有A.DNMT1主要識別半甲基化CpGB.TET2催化5mC→5hmC依賴α-酮戊二酸C.5hmC可被TDG切除,經(jīng)BER通路修復(fù)為CD.小鼠受精卵雄原核去甲基化由DNMT3A介導(dǎo)【答案】ABC【解析】雄原核去甲基化由TET3介導(dǎo),非DNMT3A。22.(多選,3分)下列實驗操作可直接證明“RNA具有催化功能”的有A.在含L19RNA的體系中,五胞苷酸被剪切為C?與C?B.將錘頭狀核酶與底物共孵育,電泳出現(xiàn)剪切條帶C.用RNaseH處理R-loop,DNA-RNA雜合鏈消失D.將組I內(nèi)含子與GTP共孵育,內(nèi)含子自我剪接【答案】ABD【解析】RNaseH為蛋白酶,不能證明RNA催化。23.(多選,3分)下列關(guān)于“腫瘤免疫微環(huán)境”的敘述,正確的有A.M2型巨噬細胞高表達Arg-1,抑制T細胞增殖B.CAF分泌TGF-β,促進CD8?T細胞耗竭C.腫瘤相關(guān)中性粒細胞(TAN)均具有促瘤功能D.抗CTLA-4抗體可解除Treg抑制【答案】ABD【解析】TAN可極化為N1抗腫瘤、N2促腫瘤,非均一促瘤。24.(多選,3分)下列關(guān)于“植物春化作用”的敘述,正確的有A.冬性小麥春化需持續(xù)低溫,避免FLC表達B.擬南芥FLC染色質(zhì)在春化后H3K27me3升高C.春化記憶在減數(shù)分裂后可穩(wěn)定傳遞D.VRN1為春化關(guān)鍵基因,編碼鋅指轉(zhuǎn)錄因子【答案】AB【解析】春化記憶在減數(shù)分裂后重置;VRN1編碼MADS-box因子。25.(多選,3分)下列關(guān)于“真核生物端粒復(fù)制”的敘述,正確的有A.端粒酶RNA組分提供模板B.POT1抑制ATR信號通路C.TRF2招募Apollo核酸酶,促進T-loop解鏈D.端粒縮短可激活p53依賴的衰老程序【答案】ABD【解析】Apollo由TRF1招募,非TRF2。26.(多選,3分)下列關(guān)于“突觸可塑性”的敘述,正確的有A.LTP維持需CaMKII自磷酸化B.NMDA受體Mg2?阻斷可被去極化解除C.mGluR依賴的LTD需蛋白質(zhì)合成D.GABA_B受體激活可誘導(dǎo)LTP【答案】ABC【解析】GABA_B激活通常誘導(dǎo)LTD,非LTP。27.(多選,3分)下列關(guān)于“微生物群體感應(yīng)(QS)”的敘述,正確的有A.革蘭氏陽性菌常用AIP作為信號肽B.LuxI/LuxR為革蘭氏陰性菌典型QS系統(tǒng)C.信號分子濃度與菌體密度呈反比D.QS可調(diào)控生物被膜形成【答案】ABD【解析】信號濃度與密度正相關(guān)。28.(多選,3分)下列關(guān)于“植物非光化學淬滅(NPQ)”的敘述,正確的有A.依賴葉黃素循環(huán)B.由ΔpH觸發(fā)PsbS蛋白構(gòu)象變化C.高能態(tài)淬滅(qE)弛豫時間>1hD.葉黃素循環(huán)突變體npq1高光下易光抑制【答案】ABD【解析】qE弛豫時間數(shù)分鐘,非1h。29.(多選,3分)下列關(guān)于“哺乳動物性別決定”的敘述,正確的有A.SRY激活SOX9,啟動睪丸發(fā)育B.FOXL2抑制SOX9,維持卵巢C.缺失Wnt4的XX小鼠出現(xiàn)睪丸樣結(jié)構(gòu)D.DAX1過表達可拮抗SRY【答案】ABCD【解析】均為性別決定網(wǎng)絡(luò)經(jīng)典結(jié)論。30.(多選,3分)下列關(guān)于“真核生物蛋白質(zhì)糖基化”的敘述,正確的有A.N-糖基化起始于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)B.O-糖基化在高爾基體完成C.糖基化可影響蛋白半衰期D.calnexin/calreticulin參與N-糖折疊質(zhì)量控制【答案】ABCD31.(填空,每空1分,共8分)某研究組構(gòu)建“光控CRISPR”系統(tǒng),將Cas9與光敏蛋白AsLOV2融合。黑暗條件下,AsLOV2呈(1)________結(jié)構(gòu),阻斷Cas9與DNA結(jié)合;470nm光照后,AsLOV2發(fā)生(2)________,釋放Cas9。若將核定位信號(NLS)置于AsLOV2(3)________端,可進一步提高光照后Cas9入核效率。實驗發(fā)現(xiàn),持續(xù)光照導(dǎo)致Cas9切割活性下降,可能因AsLOV2發(fā)生(4)________。若將Cas9替換為dCas9-KRAB,則該系統(tǒng)可用于(5)________;若替換為dCas9-p300,則可用于(6)________。若需降低背景活性,可將AsLOV2突變體(7)________與Cas9融合;若需縮短響應(yīng)時間,可刪除AsLOV2的(8)________結(jié)構(gòu)域?!敬鸢浮浚?)α-螺旋封閉(2)β-構(gòu)象變化/解旋(3)C(4)光漂白或構(gòu)象疲勞(5)轉(zhuǎn)錄抑制(6)轉(zhuǎn)錄激活(7)I539E(8)Jα32.(填空,每空1分,共6分)某植物葉片光合速率(Pn)對CO?響應(yīng)曲線顯示,CO?補償點為45ppm,飽和點為1200ppm。若將葉片置于密閉小室,初始CO?濃度400ppm,光照強度1500μmolm?2s?1,溫度25℃,則(1)葉片初始Pn________0(填>、=、<)。(2)5min后,室內(nèi)CO?濃度將________(填升高、降低、不變)。(3)若溫度升至35℃,CO?補償點將________(填升高、降低、不變),原因是________。(4)若將O?濃度由21%降至2%,飽和點將________(填升高、降低、不變),原因是________?!敬鸢浮浚?)>(2)降低(3)升高;呼吸速率升高,光合速率下降,需更高CO?才能抵消呼吸(4)升高;光呼吸受抑,CO?固定效率提高,需更高CO?才飽和33.(實驗設(shè)計,10分)某湖泊發(fā)現(xiàn)大量死亡魚類,水體呈銅綠色,檢測發(fā)現(xiàn)微囊藻毒素-LR(MC-LR)超標。請設(shè)計實驗探究“MC-LR是否通過抑制魚類PP2A活性導(dǎo)致死亡”,要求寫出:(1)實驗分組與處理;(2)PP2A活性測定方法;(3)數(shù)據(jù)獲取與統(tǒng)計指標;(4)排除其他毒素干擾的對照;(5)倫理說明?!敬鸢浮浚?)分組:健康斑馬魚120尾,隨機分4組,每組30尾。A組曝露于0μg/LMC-LR(丙酮溶劑對照);B、C、D組分別曝露于50、100、200μg/LMC-LR,水溫26℃,光周期14h/10h,持續(xù)96h,每日換液重配。(2)取肝臟、腦、鰓組織,液氮研磨,RIPA提取總蛋白,經(jīng)PP2A免疫沉淀純化酶復(fù)合體,以磷酸化RRA(pT)VA為底物,孔雀綠法測釋放無機磷,計算nmolPi/min/mg蛋白。(3)記錄96h死亡率,繪制濃度-死亡率曲線;測定各組織PP2A相對活性(%對照),用單因素方差分析比較組間差異,p<0.05為顯著;計算Pearson相關(guān)系數(shù)r,評估活性抑制與死亡率關(guān)系。(4)設(shè)置E組曝露于200μg/L節(jié)球藻毒素(NOD),比較PP2A抑制特異性;HPLC-MS/MS檢測水體中MC-LR、NOD、CYN、ATX-a,確保無其他藻毒素交叉。(5)實驗經(jīng)本校動物倫理委員會批準(批號LSIE2026-05),操作遵循3R原則,終點采用MS-222麻醉后冰浴處死,減少痛苦。34.(遺傳計算,8分)某植物花青苷合成由R/r與S/s兩對獨立基因控制:R_S_為紫色,R_ss為紅色,rrS_為粉色,rrss為白色。將紫色純合子與白色純合子雜交得F?,F(xiàn)?自交得F?。(1)F?表現(xiàn)型及比例;(2)若F?中隨機取一株紫色,其與白色測交,后代出現(xiàn)紅色的概率;(3)若R與S連鎖,重組率20%,則F?中紫色比例;(4)在(3)條件下,取紫色植株自交,后代紫色純合占多少。【答案】(1)紫色:紅色:粉色:白色=9:3:3:1(2)紫色基因型為R_S_,其中1/9RRSS、2/9RRSs、2/9RrSS、4/9RrSs;與rrss測交,僅Rrss表現(xiàn)紅色,概率=2/9×1/2×1+4/9×1/2×1/2=2/9(3)連鎖時,配子RS:Rs:rS:rs=4:1:1:4,F(xiàn)?紫色=R_S_=4×4+4×1+1×4+1×1=25份,總=100,比例25%(4)紫色純合RRSS僅由RS×RS配子得,概率=4/10×4/10=16/100=0.16,占紫色16/25,自交后代全部紫色,故紫色純合占16/25×1=0.64(64%)。35.(信息提取,10分)閱讀下列材料,回答問題。材料:科學家利用“單細胞ATAC-seq”技術(shù)繪制了人胚胎干細胞向胰腺β細胞分化的染色質(zhì)開放動態(tài)圖譜,發(fā)現(xiàn)關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子PDX1的結(jié)合位點在分化第7天突然開放,同時伴隨H3K27ac信號增強與DNA甲基化降低。若在第5天用CRISPRi抑制PDX1表達,則下游靶基因INS表達下降90%,而NKX6.1表達無顯著變化。(1)指出實驗采用的“單細胞表觀組學”技術(shù)名稱;(2)PDX1結(jié)合位點開放的可能機制;(3)如何驗證“DNA甲基化降低是PDX1結(jié)合的前提而非結(jié)果”;(4)推測NKX6.1表達不受影響的兩種原因;(5)若將PDX1結(jié)合位點中的“CG”突變?yōu)椤癟G”,預(yù)測對β細胞功能的影響并給出檢測指標?!敬鸢浮浚?)單細胞ATAC-seq(AssayforTransposase-AccessibleChromatinusingsequencing)。(2)分化信號激活去甲基化酶(如TET1/2),降低甲基化水平,解除抑制;同時組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(p300/CBP)招募至增強子,增加H3K27ac,染色質(zhì)松弛,TF結(jié)合位點暴露。(3)設(shè)計dCas9-TET1融合,在第3天提前靶向去甲基化PDX1位點,觀察PDX1是否提前結(jié)合及INS是否提前表達;若INS提前表達,則甲基化降低為原因,反之為結(jié)果。(4)①NKX6.1增強子區(qū)無PDX1結(jié)合位點,不受其直接調(diào)控;②NKX6.1表達受其他TF(如NGN3)主導(dǎo),PDX1僅微調(diào)。(5)突變破壞PDX1結(jié)合,導(dǎo)致INS表達下降,β細胞分泌胰島素減少。檢測:qPCR測INSmRNA;ELISA測上清C肽;葡萄糖刺激胰島素分泌(GSIS)實驗測胰島素釋放量;流式測胞內(nèi)胰島素含量。36.(綜合創(chuàng)新,10分)提出一種利用“合成生物學”理念治理“農(nóng)田殘留地膜污染”的微生物策略,要求:(1)給出目標聚合物化學名與降解關(guān)鍵酶;(2)設(shè)計基因回路使菌僅在“地膜表面”增殖;(3)列出生物安全控制開關(guān);(4)預(yù)測生態(tài)風險與緩解措施;(5)簡述田間釋放流程?!敬鸢浮浚?)目標聚合物:聚對苯二甲酸-己二酸丁二醇酯(PBAT);關(guān)鍵酶:PETase同源酶“PBATase”(雙酯酶)、MHETase(單酯酶)、TA(對苯二甲酸)雙加氧酶。(2)表面感應(yīng)回路:將地膜表面疏水蛋白(HydroPhobin-HFBI)作為誘導(dǎo)信號,設(shè)計“HFBI-感應(yīng)膜蛋白HsbA”激活hybridpromoterP_hsb,驅(qū)動復(fù)制起點oriV與PBATase表達;菌游離土壤時HFBI濃度低,回路關(guān)閉,菌進入休眠。(3)安全開關(guān):①溫度敏感型阻遏蛋白TetR-ts,>34℃失活,防止夏季高溫失控;②“密碼子重分配”設(shè)計,菌株基因組TAG終止密碼子替換為TAA,需外源tRNA-UAG-aaRS才能存活,田間釋放后隨降解完成而饑餓死亡;③“自毀”模塊,地膜降解后釋放的TA濃度下降,觸發(fā)Tet-off系統(tǒng)表達holin-endolysin,菌體裂解。(4)生態(tài)風險:基因水平轉(zhuǎn)移至土著菌,導(dǎo)致不可控降解農(nóng)膜大棚。緩解:①使用“殺傷開關(guān)”質(zhì)粒,分裂后丟失;②基因組插入“毒素-抗毒素”對,丟失質(zhì)粒即死亡;③定期監(jiān)測土壤宏基因組,追蹤基因漂移。(5)流程:①實驗室小試驗證降解率>90%;②溫室模擬,評估作物生長無抑制;③向農(nóng)業(yè)農(nóng)村部申請環(huán)境釋放許可;④選擇10畝玉米田,設(shè)置50m隔離帶,噴灑菌劑10?CFU/m2;⑤每月采樣測PBAT殘留、土壤酶活、微生物群落Shannon指數(shù);⑥降解完
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