1、色譜柱故障排除,色譜柱的組成,主要部件：柱管、柱頭、篩板 故障特征 1. 色譜峰形不好 2. 柱壓高,避免問題的,使用預(yù)柱保護(hù)分析柱（硅膠在極性流動相/離子性流動相中有一定的溶解度） 大多數(shù)反相色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2 - 8.0 避免流動相組成及極性的劇烈變化 流動相使用前必須經(jīng)脫氣和過濾處理 如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相，應(yīng)在實(shí)驗(yàn)完畢將柱子沖洗干凈，并保存在乙腈中 壓力升高是需要更換預(yù)柱的信號,色譜柱,反相色譜柱(如反相色譜填料C8,C18等)的再生： 用以下溶劑至少各30mL沖洗色譜柱 100%甲醇100%乙腈 75%乙腈+25%異丙醇 100%異丙醇 100%二氯甲烷 100

2、%己烷 若使用己烷 或二氯甲烷沖洗色譜柱，則在重新使用反相流動相前，必須用異丙醇沖洗色譜柱！,色譜柱的再生,正相色譜柱(如Si, NH2, CN, DIOL基色譜填料)的再生： 用以下溶劑至少各50mL沖洗色譜柱 50%甲醇+50%三氯甲烷 100%乙酸乙酯,色譜柱,色譜柱柱壓問題,當(dāng)色譜柱連接到泵 將柱子反向沖洗； 和進(jìn)樣器時，壓力 柱頭濾網(wǎng)堵塞 更換濾網(wǎng)； 特別高 更換色譜柱 柱頭填料變臟 將柱子反向沖洗； 取下濾網(wǎng)，挖去柱頭變臟的填料， 填入新的填料； 更換色譜柱 當(dāng)柱子連接到檢測 器時,壓力很高 柱子和檢測器之間的管道堵塞 更換管子 停泵,可能原因 解決辦法,噪音高或基線漂移,解決問題

3、,可能原因 柱子沒有平衡好 雜質(zhì)組分從色譜柱中緩慢流出 雜質(zhì)在柱子中的富集 檢測器或色譜柱的溫度差異 系統(tǒng)有氣泡 檢測器氘燈需更換 電壓不穩(wěn)造成干擾,解決辦法 繼續(xù)沖洗色譜柱至平衡 利用強(qiáng)極性的溶劑沖洗色譜柱 沖洗色譜柱；改進(jìn)和提高樣品的預(yù)處理； 使用液相色譜純的溶劑 使用色譜柱恒溫箱 流動相脫氣；使用反壓調(diào)節(jié)器 更換氘燈（氘燈使用壽命一般為1000小時） 使用穩(wěn)壓電源；檢查供電系統(tǒng),出現(xiàn)肩峰或 前延峰,解決問題,可能原因 預(yù)柱被污染或選用了不合適的預(yù)柱 柱頭“塌陷”造成死體積或是 柱子內(nèi)部有短流出現(xiàn) 溶解樣品的溶劑選擇錯誤 干擾物質(zhì)的存在；樣品中的雜質(zhì) 色譜柱過載 柱外效應(yīng)的影響,解決辦法

4、更換預(yù)柱 更換色譜柱 用流動相溶解樣品 改進(jìn)樣品預(yù)處理；用測試的混合物 檢驗(yàn)色譜柱；使用色譜純?nèi)軇?將樣品稀釋 檢查連接色譜柱入口端的管道,峰形展寬,解決問題,解決辦法 更換色譜柱或預(yù)柱 減少進(jìn)樣體積；稀釋樣品 用流動相溶解樣品 使用濃度稍高的緩沖溶液或者 換用其它的緩沖溶液 檢查是否有漏；使用小的檢測池 提高色譜柱溫度 檢查柱外死體積 使用較小粒徑填料的色譜柱； 更換色譜柱,可能原因 色譜柱或預(yù)柱被污染或不合適 色譜柱“過載”或進(jìn)樣體積過大 溶解樣品的溶劑選用不當(dāng) 緩沖溶液的濃度太稀 色譜柱和檢測器之間有漏； 檢測器的檢測池過大 色譜柱溫度太低； 流動相的黏度太高 柱外死體積太大 色譜柱柱效

5、下降,出現(xiàn)脫尾峰,解決問題,解決辦法 減少樣品體積； 增大色譜柱內(nèi)徑； 使用高容量的固定相 改進(jìn)樣品預(yù)處理； 調(diào)節(jié)流動相的組成； 使用測試樣品混合物檢查色譜柱； 使用色譜純?nèi)軇?使用流動相改性劑（如三乙胺）； 提高緩沖溶液或鹽溶液的濃度（離子對色譜） 降低流動相的pH值； 使用堿性去活的色譜柱 更換濾網(wǎng)；使用柱前過濾系統(tǒng)； 將樣品過濾 檢查管路連接 更換色譜柱； 使用性質(zhì)較溫和的分離條件,可能原因 色譜柱過載 干擾峰；雜質(zhì) 硅膠表面未完全鍵合的硅羥基的影響 色譜柱的濾網(wǎng)堵塞 柱外效應(yīng)的影響； 死體積 色譜柱有“塌陷”、短流或斷流,保留時間變長,解決問題,可能原因 流速降低 硅膠表面有活性點(diǎn) 鍵合相流失 流動相的組成有變化 溫度降低,解決辦法 檢查系統(tǒng)是否有漏； 更換泵的密封圈； 排凈氣泡； 使用流動相改性劑（如加入三乙胺）； 使用堿性去活的色譜柱 保持流動相pH值在2-7.5 范圍內(nèi) 檢查泵；檢查濾網(wǎng)； 防止流動相的揮發(fā)或降解 使用色譜柱恒溫箱,保留時間縮短,解決問題,可能原因 流速升高 色譜柱過載 鍵合相流失 流動相組成發(fā)生變化 溫度升高 色譜柱老化,解決