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文檔簡介
1、實驗3-1 紅外線co2氣體分析儀(cb-1101)法測定植物光合速率,一、實驗目的,理解植物光合速度測定的方法 掌握紅外線co2分析儀測定植物光合速率的原理 了解紅外線co2分析儀的操作方法,本實驗利用co2的變化來測定。,二、實驗原理,許多由異原子組成的氣體分子對紅外線都有特異的吸收帶。co2的紅外吸收帶有四處,其吸收峰分別在2.69m、2.77m、4.26m和14.99m處,其中只有4.26m的吸收帶不與h2o的吸收帶重疊,紅外儀內設置僅讓4.26m紅外光通過的濾光片,當該波長的紅外光經過含有co2的氣體時,能量就因co2的吸收而降低,降低的多少與co2的濃度有關,并服從朗伯-比爾定律。
2、分別供給紅外儀含與不含co2的氣體,紅外儀的檢測器便可通過檢測紅外光能量的變化而輸出反映co2濃度的電訊號。,采用開放式氣路系統(tǒng):該系統(tǒng)用雙氣室irga,以氣泵為動力,將流經同化室前的空氣(參比氣)泵入一個氣室,流經同化室后的空氣(樣本氣)泵入另一個氣室(分析氣室),最后將氣體排空,由儀器指示參比氣和樣本氣的co2濃度差,根據(jù)流量、同化室中葉片的面積,求出葉片的光合速率。,排氣,植物材料:小白菜或者甘藍型油菜 儀器:cb-1101紅外線co2氣體分析儀,三、材料與主要儀器,cb-1101,cb-1101操作面板及氣路圖,四、實驗步驟,1、儀器組裝及調零:,打開電源預熱5 min打開氣泵開關用堿
3、石灰管分別連接面板上的“out”和“in”。利用co2調零調試儀器。 2、樣品測定:將葉片正確放入葉室,并封閉葉室。 打開開路開關按下初測按鈕待數(shù)值穩(wěn)定后按下測終按鈕待數(shù)值穩(wěn)定后按下完成按鈕記錄測定結果【需要記錄起始co2濃度c1、測定完成后co2濃度c2,葉面溫度t,氣體流速v】,五、原始記錄,v, c1, c2, s ,t v為氣體流速,單位 l/min; c1,c2為測定啟始和反應完成后的co2濃度,單位 l/l;s為光合測定的葉面積,單位為m2,本實驗固定為6.510-4 m2 ;p為氣壓,單位 bar;t為同化室葉片表面溫度,單位。,s,六、結果計算,pn-凈光合速率(單位為molm
4、-2s-1),七、分析討論,1、測定時為何需要從高空采氣? 2、計算的結果為凈光合速率,為什么? 3、本方法是否可以用于測定植物的呼吸速率,如果要測定呼吸速率操作過程中應注意什么? 4、如果要測定植物的實際光合速率,應如何操作? 5、結合自已的植物光合速率結果進行分析討論。,實驗3-2 葉綠素含量的測定,一、實驗目的 二、實驗原理 1、吸光度具有加和性:混和溶液在某一波長下的吸光度為各組分在該波長下吸光度之和。不同組分在某波長下具有不同的吸光系數(shù)。,2、葉綠素在紅光區(qū)具有最大吸收峰,但在不同溶劑下有不同的最大吸收峰波長 在95%乙醇中,葉綠素a和葉綠素b的最大吸收峰的波長分別為665 nm和6
5、49nm,兩者的濃度可根據(jù)以下方程組計算求得: ca=13.95a6656.88a649 cb=24.96a6497.32a665,三、實驗材料與儀器,實驗材料:小白菜葉片或油菜葉片 主要儀器:分光光度計,四、實驗步驟,稱取葉片0.050.1g,剪碎或撕碎后放入10ml刻度試管中,加入56ml 95%乙醇,置80水浴鍋中,至組織完全變白,取出冷卻。用95%乙醇定容至10ml,搖勻。以95%乙醇為空白,在波長665nm、649nm下測定吸光度。,五、原始數(shù)據(jù)記錄,a665, a649, w, v,六、結果計算,ca (mg/l) = 13.95a665 6.88a649 cb (mg/l) = 24.96a649 7.32a665 葉綠素總濃度(mg/l) = ca + cb 葉綠素的比值 = ca
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