中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB5009.7—2016

食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)

食品中還原糖的測定

2016-08-31發(fā)布2016-09-20實施

中華人民共和國

國家衛(wèi)生和計劃生育委員會

發(fā)布

GB5009.7—2016

Ⅰ

前言

本標(biāo)準(zhǔn)代替GB/T5009.7—2008《食品中還原糖的測定》、GB/T5513—2008《糧油檢驗糧食中還

原糖和非還原糖測定》還原糖部分、NY/T1751—2009《甜菜還原糖的測定》。

本標(biāo)準(zhǔn)與GB/T5009.

7—2008相比,主要修改如下:

———標(biāo)準(zhǔn)名稱修改為“食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中還原糖的測定”;

———將GB/T5009.7—2008與GB/T5513—2008還原糖部分進行了同類合并。

GB5009.7—2016

1

食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)

食品中還原糖的測定

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中還原糖含量的測定方法。

本標(biāo)準(zhǔn)第一法、第二法適用于食品中還原糖含量的測定。

本標(biāo)準(zhǔn)第三法適用于小麥粉中還原糖含量的測定。

本標(biāo)準(zhǔn)第四法適用于甜菜塊根中還原糖含量的測定。

第一法直接滴定法

2原理

試樣經(jīng)除去蛋白質(zhì)后,以亞甲藍作指示劑,在加熱條件下滴定標(biāo)定過的堿性酒石酸銅溶液(已用還

原糖標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定),根據(jù)樣品液消耗體積計算還原糖含量。

3試劑和材料

除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T6682規(guī)定的三級水。

3.1試劑

3.1.1鹽酸(HCl)。

3.1.2硫酸銅(CuSO4·5H2O)。

3.1.3亞甲藍(C16H18ClN3S·3H2O)。

3.1.4酒石酸鉀鈉(C4H4O6KNa·4H2O)。

3.1.5氫氧化鈉(NaOH)。

3.1.6乙酸鋅[Zn(CH3COO)2·2H2O]。

3.1.7冰乙酸(C2H4O2)。

3.1.8亞鐵氰化鉀[K4Fe(CN)6·3H2O]。

3.2試劑配制

3.2.1鹽酸溶液(1+1,體積比):量取鹽酸50mL,加水50mL混勻。

3.2.2堿性酒石酸銅甲液:稱取硫酸銅15g和亞甲藍0.05g,溶于水中,并稀釋至1000mL。

3.2.3堿性酒石酸銅乙液:稱取酒石酸鉀鈉50g和氫氧化鈉75g,溶解于水中,再加入亞鐵氰化鉀

4g,完全溶解后,用水定容至1000mL

,貯存于橡膠塞玻璃瓶中。

3.2.4乙酸鋅溶液:稱取乙酸鋅21.9g,加冰乙酸3mL,加水溶解并定容于100mL。

3.2.5亞鐵氰化鉀溶液(106g/L):稱取亞鐵氰化鉀10.6g,加水溶解并定容至100mL。

3.2.6氫氧化鈉溶液(40g/L):稱取氫氧化鈉4g,加水溶解后,放冷,并定容至100mL。

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2

3.3標(biāo)準(zhǔn)品

3.3.1葡萄糖(C6H12O6)

CAS:50-99-7,純度≥99%。

3.3.2果糖(C6H12O6)

CAS:57-48-7,純度≥99%。

3.3.3乳糖(含水)(C6H12O6·H2O)

CAS:5989-81-1,純度≥99%。

3.3.4蔗糖(C12H22O11)

CAS:57-50-1,純度≥99%。

3.4標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

3.4.1葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.0mg/mL):準(zhǔn)確稱取經(jīng)過98℃~100℃烘箱中干燥2h后的葡萄糖1g,加

水溶解后加入鹽酸溶液5mL,并用水定容至1000mL。此溶液每毫升相當(dāng)于1.

0mg葡萄糖。

3.4.2果糖標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.0mg/mL):準(zhǔn)確稱取經(jīng)過98℃~100℃干燥2h的果糖1g,加水溶解后加入

鹽酸溶液5mL,并用水定容至1000mL。此溶液每毫升相當(dāng)于1.0mg果糖。

3.4.3乳糖標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.0mg/mL):準(zhǔn)確稱取經(jīng)過94℃~98℃干燥2h的乳糖(含水)1g,加水溶解后

加入鹽酸溶液5mL,并用水定容至1000mL。此溶液每毫升相當(dāng)于1.

0mg乳糖(含水)。

3.4.4轉(zhuǎn)化糖標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.0mg/mL):準(zhǔn)確稱取1.0526g蔗糖,用100mL水溶解,置具塞錐形瓶中,

加鹽酸溶液5mL,在68℃~70℃水浴中加熱15min,放置至室溫,轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中并加水

定容至1000mL,每毫升標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)于1.

0mg轉(zhuǎn)化糖。

4儀器和設(shè)備

4.1天平:感量為0.1mg。

4.2水浴鍋。

4.3可調(diào)溫電爐。

4.4酸式滴定管:25mL。

5分析步驟

5.1試樣制備

5.1.1含淀粉的食品:稱取粉碎或混勻后的試樣10g~20g(精確至0.001g),置250mL容量瓶中,加

水200mL,在45℃水浴中加熱1h,并時時振搖,冷卻后加水至刻度,混勻,靜置,沉淀。吸取200.

0mL

上清液置于另一250mL容量瓶中,緩慢加入乙酸鋅溶液5mL和亞鐵氰化鉀溶液5mL,加水至刻度,

混勻,靜置30min,用干燥濾紙過濾,棄去初濾液,取后續(xù)濾液備用。

5.1.2酒精飲料:稱取混勻后的試樣100g(精確至0.01g),置于蒸發(fā)皿中,用氫氧化鈉溶液中和至中

性,在水浴上蒸發(fā)至原體積的1/4后,移入250mL容量瓶中,緩慢加入乙酸鋅溶液5mL和亞鐵氰化鉀

溶液5mL,加水至刻度,混勻,靜置30min,用干燥濾紙過濾,棄去初濾液,取后續(xù)濾液備用。

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3

5.1.3碳酸飲料:稱取混勻后的試樣100g(精確至0.01g)于蒸發(fā)皿中,在水浴上微熱攪拌除去二氧化

碳后,移入250mL容量瓶中,用水洗滌蒸發(fā)皿,洗液并入容量瓶,加水至刻度,混勻后備用。

5.1.4其他食品:稱取粉碎后的固體試樣2.5g~5g(精確至0.001g)或混勻后的液體試樣5g~25g

(精確至0.

001g),置250mL容量瓶中,加50mL水,緩慢加入乙酸鋅溶液5mL

和亞鐵氰化鉀溶液

5mL,加水至刻度,混勻,靜置30min,用干燥濾紙過濾,棄去初濾液,取后續(xù)濾液備用。

5.2堿性酒石酸銅溶液的標(biāo)定

吸取堿性酒石酸銅甲液5.

0mL和堿性酒石酸銅乙液5.0mL,于150mL錐形瓶中,加水10mL,

加入玻璃珠2粒~4粒,從滴定管中加葡萄糖(3.

4.1)[或其他還原糖標(biāo)準(zhǔn)溶液(3.4.2,或3.4.3,或3.4.4)]

約9mL,控制在2min中內(nèi)加熱至沸,趁熱以每2秒1滴的速度繼續(xù)滴加葡萄糖[或其他還原糖標(biāo)準(zhǔn)溶

液(

3.4.2,或3.4.3,或3.4.4)],直至溶液藍色剛好褪去為終點,記錄消耗葡萄糖(或其他還原糖標(biāo)準(zhǔn)溶

液)的總體積,同時平行操作3份,取其平均值,計算每10mL(堿性酒石酸甲、乙液各5mL)堿性酒石酸

銅溶液相當(dāng)于葡萄糖(或其他還原糖)的質(zhì)量(

mg

)。

注:也可以按上述方法標(biāo)定4mL~20mL堿性酒石酸銅溶液(甲、乙液各半)來適應(yīng)試樣中還原糖的濃度變化。

5.3試樣溶液預(yù)測

吸取堿性酒石酸銅甲液5.

0mL和堿性酒石酸銅乙液5.0mL于150mL錐形瓶中,加水10mL,加

入玻璃珠2粒~4粒,控制在2min內(nèi)加熱至沸,保持沸騰以先快后慢的速度,從滴定管中滴加試樣溶

液,并保持沸騰狀態(tài),待溶液顏色變淺時,以1滴/2s的速度滴定,直至溶液藍色剛好褪去為終點,記錄

樣品溶液消耗體積。

注:當(dāng)樣液中還原糖濃度過高時,應(yīng)適當(dāng)稀釋后再進行正式測定,使每次滴定消耗樣液的體積控制在與標(biāo)定堿性酒

石酸銅溶液時所消耗的還原糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積相近,約10mL左右,結(jié)果按式(1)計算;當(dāng)濃度過低時則采取直

接加入10mL樣品液,免去加水10mL,再用還原糖標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至終點,記錄消耗的體積與標(biāo)定時消耗的還

原糖標(biāo)準(zhǔn)溶液體積之差相當(dāng)于10mL樣液中所含還原糖的量,結(jié)果按式(2)計算。

5.4試樣溶液測定

吸取堿性酒石酸銅甲液5.

0mL和堿性酒石酸銅乙液5.0mL,置于150mL錐形瓶中,加水10mL,加

入玻璃珠2粒~4粒,從滴定管滴加比預(yù)測體積少1mL的試樣溶液至錐形瓶中,控制在2min內(nèi)加熱

至沸,保持沸騰繼續(xù)以1滴/2s的速度滴定,直至藍色剛好褪去為終點,記錄樣液消耗體積,同法平行操

作三份,得出平均消耗體積(

V)。

6分析結(jié)果的表述

試樣中還原糖的含量(以某種還原糖計)按式(

1)計算:

X=

m1

m×F×V/250×1000×100

…………(1)

式中:

X

———試樣中還原糖的含量(以某種還原糖計),單位為克每百克(

g

/100g);

m1

———堿性酒石酸銅溶液(甲、乙液各半)相當(dāng)于某種還原糖的質(zhì)量,單位為毫克(

mg

);

m

———試樣質(zhì)量,單位為克(

g);

F

———系數(shù),對5.

1.1、5.1.3、5.1.4為1;5.1.2為0.80;

V

———測定時平均消耗試樣溶液體積,單位為毫升(mL);

250

———定容體積,單位毫升(mL);

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1000———換算系數(shù)。

當(dāng)濃度過低時,試樣中還原糖的含量(以某種還原糖計)按式(

2)計算:

X=

m2

m×F×10/250×1000×100

…………(2)

式中:

X

———試樣中還原糖的含量(以某種還原糖計),單位為克每百克(

g

/100g);

m2

———標(biāo)定時體積與加入樣品后消耗的還原糖標(biāo)準(zhǔn)溶液體積之差相當(dāng)于某種還原糖的質(zhì)量,

單位為毫克(

mg

);

m

———試樣質(zhì)量,單位為克(

g);

F

———系數(shù),對5.

1.1、5.1.3、5.1.4為1;5.1.2為0.80;

10

———樣液體積,單位毫升(mL);

250

———定容體積,單位毫升(mL);

1000———換算系數(shù)。

還原糖含量≥10g/100g時,計算結(jié)果保留三位有效數(shù)字;還原糖含量<10g/100g時,計算結(jié)果

保留兩位有效數(shù)字。

7精密度

在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的5%。

8其他

當(dāng)稱樣量為5g時,定量限為0.

25g

/100g。

第二法高錳酸鉀滴定法

9原理

試樣經(jīng)除去蛋白質(zhì)后,其中還原糖把銅鹽還原為氧化亞銅,加硫酸鐵后,氧化亞銅被氧化為銅鹽,經(jīng)

高錳酸鉀溶液滴定氧化作用后生成的亞鐵鹽,根據(jù)高錳酸鉀消耗量,計算氧化亞銅含量,再查表得還原

糖量。

10試劑和材料

除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T6682規(guī)定的三級水。

10.1試劑

10.1.1鹽酸(HCl)。

10.1.2氫氧化鈉(NaOH)。

10.1.3硫酸銅(CuSO4·5H2O)。

10.1.4硫酸(H2SO4)。

10.1.5硫酸鐵[Fe2(SO4)3]。

10.1.6酒石酸鉀鈉(C4H4O6KNa·4H2O)。

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5

10.2試劑配制

10.2.1鹽酸溶液(3mol

/L):量取鹽酸30mL,加水稀釋至120mL。

10.2.2堿性酒石酸銅甲液:稱取硫酸銅34.639g,加適量水溶解,加硫酸0.5mL,再加水稀釋至500mL,

用精制石棉過濾。

10.2.3堿性酒石酸銅乙液:稱取酒石酸鉀鈉173g與氫氧化鈉50g,加適量水溶解,并稀釋至500mL,

用精制石棉過濾,貯存于橡膠塞玻璃瓶內(nèi)。

10.2.4氫氧化鈉溶液(40g/L):稱取氫氧化鈉4g,加水溶解并稀釋至100mL。

10.2.5硫酸鐵溶液(50g/L):稱取硫酸鐵50g,加水200mL溶解后,慢慢加入硫酸100mL,冷后加水

稀釋至1000mL。

10.2.6精制石棉:取石棉先用鹽酸溶液浸泡2d~3d,用水洗凈,再加氫氧化鈉溶液浸泡2d~3d,傾

去溶液,再用熱堿性酒石酸銅乙液浸泡數(shù)小時,用水洗凈。再以鹽酸溶液浸泡數(shù)小時,以水洗至不呈酸

性。然后加水振搖,使成細微的漿狀軟纖維,用水浸泡并貯存于玻璃瓶中,即可作填充古氏坩堝用。

10.3標(biāo)準(zhǔn)品

高錳酸鉀(KMnO4),

CAS:7722-64-7,優(yōu)級純或以上等級。

10.4標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液[

c(1/5KMnO4)=0.1000mol

/L]:按GB/T601配制與標(biāo)定。

11儀器和設(shè)備

11.1天平:感量為0.1mg。

11.2水浴鍋。

11.3可調(diào)溫電爐。

11.4酸式滴定管:25mL。

11.525mL古氏坩堝或G4垂融坩堝。

11.6真空泵。

12分析步驟

12.1試樣處理

12.1.1含淀粉的食品:稱取粉碎或混勻后的試樣10g~20g(精確至0.001g),置250mL容量瓶中,加

水200mL,在45℃水浴中加熱1h,并時時振搖。冷卻后加水至刻度,混勻,靜置。吸取200.

0mL上清

液置另一250mL容量瓶中,加堿性酒石酸銅甲液10mL及氫氧化鈉溶液4mL,加水至刻度,混勻。

靜置30min,用干燥濾紙過濾,棄去初濾液,取后續(xù)濾液備用。

12.1.2酒精飲料:稱取100g(精確至0.01g)混勻后的試樣,置于蒸發(fā)皿中,用氫氧化鈉溶液中和至中

性,在水浴上蒸發(fā)至原體積的1/4后,移入250mL容量瓶中。加水50mL,混勻。加堿性酒石酸銅甲

液10mL及氫氧化鈉溶液4mL,加水至刻度,混勻。靜置30min,用干燥濾紙過濾,棄去初濾液,取后

續(xù)濾液備用。

12.1.3碳酸飲料:稱取100g(精確至0.001g)混勻后的試樣,試樣置于蒸發(fā)皿中,在水浴上除去二氧

化碳后,移入250mL容量瓶中,并用水洗滌蒸發(fā)皿,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混勻后,備用。

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6

12.1.4其他食品:稱取粉碎后的固體試樣2.5g~5.g(精確至0.001g)或混勻后的液體試樣25g~

50g(精確至0.

001g),置250mL容量瓶中,加水50mL,搖勻后加堿性酒石酸銅甲液10mL

及氫氧化

鈉溶液4mL,加水至刻度,混勻。靜置30min,用干燥濾紙過濾,棄去初濾液,取后續(xù)濾液備用。

12.2試樣溶液的測定

吸取處理后的試樣溶液50.

0mL,于500mL燒杯內(nèi),加入堿性酒石酸銅甲液25mL及堿性酒石酸

銅乙液25mL,于燒杯上蓋一表面皿,加熱,控制在4min內(nèi)沸騰,再精確煮沸2min,趁熱用鋪好精制

石棉的古氏坩堝(或G4垂融坩堝)抽濾,并用60℃熱水洗滌燒杯及沉淀,至洗液不呈堿性為止。將古

氏坩堝(或G4垂融坩堝)放回原500mL燒杯中,加硫酸鐵溶液25mL、水25mL,用玻棒攪拌使氧化亞

銅完全溶解,以高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至微紅色為終點。

同時吸取水50mL,加入與測定試樣時相同量的堿性酒石酸銅甲液、乙液、硫酸鐵溶液及水,按同一

方法做空白試驗。

13分析結(jié)果的表述

試樣中還原糖質(zhì)量相當(dāng)于氧化亞銅的質(zhì)量,按式(

3)計算:

X0=V-V0()×c×71.54

…………(3)

式中:

X0———試樣中還原糖質(zhì)量相當(dāng)于氧化亞銅的質(zhì)量,單位為毫克(

mg

);

V

———測定用試樣液消耗高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,單位為毫升(mL);

V0

———試劑空白消耗高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,單位為毫升(mL);

c

———高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的實際濃度,單位為摩爾每升(mol/L);

71.54———1mL高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液[c(1/5)KMnO4]=1.000mol

/L)相當(dāng)于氧化亞銅的質(zhì)量,單位

為毫克(

mg

)。

根據(jù)式中計算所得氧化亞銅質(zhì)量,查表A.

1,再計算試樣中還原糖含量,按式(4)計算:

X=

m3

m4×V/250×1000×100

…………(4)

式中:

X

———試樣中還原糖的含量,單位為克每百克(

g

/100g);

m3

———X0查附錄A之表1得還原糖質(zhì)量,單位為毫克(

mg

);

m4

———試樣質(zhì)量或體積,單位為克或毫升(

g或mL);

V

———測定用試樣溶液的體積,單位為毫升(mL);

250———試樣處理后的總體積,單位為毫升(mL)。

還原糖含量≥10g/100g時,計算結(jié)果保留三位有效數(shù)字;還原糖含量<10g/100g時,計算結(jié)果

保留兩位有效數(shù)字。

14精密度

在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。

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15其他

當(dāng)稱樣量為5g時,定量限為0.

5g

/100g。

第三法鐵氰化鉀法

16原理

還原糖在堿性溶液中將鐵氰化鉀還原為亞鐵氰化鉀,還原糖本身被氧化為相應(yīng)的糖酸。過量的鐵

氰化鉀在乙酸的存在下,與碘化鉀作用下析出碘,析出的碘以硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定。通過計算氧化

還原糖時所用的鐵氰化鉀的量,查表A.

2得試樣中還原糖的含量。

17試劑

除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T6682規(guī)定的三級水。

17.1試劑

17.1.195%乙醇。

17.1.2冰乙酸(NaOH)。

17.1.3無水乙酸鈉(NaOH)。

17.1.4硫酸(H2SO4)。

17.1.5鎢酸鈉(Na2WO4·2H2O)。

17.1.6鐵氰化鉀[KFe(CN)6]。

17.1.7碳酸鈉(Na2CO3)。

17.1.8氯化鉀(KCl)。

17.1.9硫酸鋅(ZnSO4)。

17.1.10碘化鉀(KI)。

17.1.11氫氧化鈉(NaOH)。

17.1.12可溶性淀粉。

17.2試劑配制

17.2.1乙酸緩沖液:將冰乙酸3.0mL、無水乙酸鈉6.8g和濃硫酸4.5mL混合溶解,然后稀釋至

1000mL。

17.2.2鎢酸鈉溶液(12.0%):將鎢酸鈉12.0g溶于100mL水中。

17.2.3堿性鐵氰化鉀溶液(0.1mol

/L):將鐵氰化鉀32.

9g與碳酸鈉44.

0g溶于1000mL

水中。

17.2.4乙酸鹽溶液:將氯化鉀70.0g和硫酸鋅40.0g溶于750mL水中,然后緩慢加入200mL冰乙

酸,再用水稀釋至1000mL,混勻。

17.2.5碘化鉀溶液(10%):稱取碘化鉀10.0g溶于100mL水中,再加一滴飽和氫氧化鈉溶液。

17.2.6淀粉溶液(1%):稱取可溶性淀粉1.0g,用少量水潤濕調(diào)和后,緩慢倒入100mL沸水中,繼續(xù)

煮沸直至溶液透明。

17.2.7硫代硫酸鈉溶液(0.1mol

/L):按GB/T601配制與標(biāo)定。

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8

18儀器和設(shè)備

18.1分析天平:分度值0.0001g。

18.2振蕩器。

18.3試管:直徑1.8cm~2.0cm,高約18cm。

18.4水浴鍋。

18.5電爐:2000W。

18.6微量滴定管:5mL或10mL。

19分析步驟

19.1試樣制備

稱取試樣5g(精確至0.

001g)于100mL磨口錐形瓶中。傾斜錐形瓶以便所有試樣粉末集中于一

側(cè),用5mL95%乙醇浸濕全部試樣,再加入50mL乙酸緩沖液,振蕩搖勻后立即加入2mL12.

0%鎢酸

鈉溶液,在振蕩器上混合振搖5min。將混合液過濾,棄去最初幾滴濾液,收集濾液于干凈錐形瓶中,此

濾液即為樣品測定液。同時做空白實驗。

19.2試樣溶液的測定

19.2.1氧化:精確吸取樣品液5mL于試管中,再精確加入5mL堿性鐵氰化鉀溶液,混合后立即將試

管浸入劇烈沸騰的水浴中,并確保試管內(nèi)液面低于沸水液面下3cm~4cm,加熱20min后取出,立即

用冷水迅速冷卻。

19.2.2滴定:將試管內(nèi)容物傾入100mL錐形瓶中,用25mL乙酸鹽溶液蕩洗試管一并傾入錐形瓶

中,加5mL10%碘化鉀溶液,混勻后,立即用0.

1mol

/L硫代硫酸鈉溶液滴定至淡黃色,再加1mL淀

粉溶液,繼續(xù)滴定直至溶液藍色消失,記下消耗硫代硫酸鈉溶液體積(

V1)。

19.2.3空白試驗:吸取空白液5mL,代替樣品液按19.2.1和19.2.2操作,記下消耗的硫代硫酸鈉溶液

體積(

V0)。

20分析結(jié)果表述

根據(jù)氧化樣品液中還原糖所需0.

1mol

/L鐵氰化鉀溶液的體積查表A.

1,即可查得試樣中還原糖

(以麥芽糖計算)的質(zhì)量分數(shù)。鐵氰化鉀溶液體積(

V3)按式(5)計算:

V3=

V0-V1()×c

0.1

…………(5)

式中:

V3———氧化樣品液中還原糖所需0.1mol

/L鐵氰化鉀溶液的體積,單位為毫升(mL);

V0———滴定空白液消耗0.1mol

/L硫代硫酸鈉溶液的體積,單位為毫升(mL);

V1———滴定樣品液消耗0.1mol

/L硫代硫酸鈉溶液的體積,單位為毫升(mL);

c———硫代硫酸鈉溶液實際濃度,單位為摩爾每升(mol

/L)。

計算結(jié)果保留小數(shù)點后兩位。

0.1mol

/L鐵氰化鉀體積與還原糖含量對照可查表A.

2。

注:還原糖含量以麥芽糖計算。

GB5009.7—2016

9

21精密度

在重復(fù)性條件下,獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。

第四法奧氏試劑滴定法

22原理

在沸騰條件下,還原糖與過量奧氏試劑反應(yīng)生成相當(dāng)量的Cu

2O沉淀,冷卻后加入鹽酸使溶液呈酸

性,并使Cu

2O沉淀溶解。然后加入過量碘溶液進行氧化,用硫代硫酸鈉溶液滴定過量的碘,其反應(yīng)式

如下:

C6H12O6+2C4H2O6KNaCu+2H2O

→C6H12O7+2C

4H4O6KNa+CuO↓

葡萄糖或果糖絡(luò)合物葡萄糖酸酒石酸鉀鈉氧化亞銅

Cu2O↓+2HCl

→2CuCl+H2O

2CuCl+2KI+I2

→2CuI2+2KCl

I2過剩的()+2Na2S2O3

→Na2S4O6+2NaI

硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液空白試驗滴定量減去其樣品試驗滴定量得到一個差值,由此差值便可計算出

還原糖的量。

23試劑和材料

除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T6682規(guī)定的三級水。

23.1試劑

23.1.1鹽酸(HCl)。

23.1.2硫酸銅(CuSO4·5H2O)。

23.1.3酒石酸鉀鈉(C4H4O6KNa·4H2O)。

23.1.4無水碳酸鈉(Na2CO3)。

23.1.5冰乙酸(C2H4O2)。

23.1.6磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O)。

23.1.7碘化鉀(KI)。

23.1.8乙酸鋅[Zn(CH3COO)2·2H2O]。

23.1.9亞鐵氰化鉀[K4Fe(CN)6·3H2O]。

23.1.10可溶性淀粉。

23.1.11粉狀碳酸鈣(CaCO3)。

23.2試劑配制

23.2.1鹽酸溶液(6mol

/L):吸取鹽酸50.

0mL,加入已裝入30mL水的燒杯中,慢慢加水稀釋至

100mL。

23.2.2鹽酸溶液(1mol

/L):吸取鹽酸84.

0mL,加入已裝入200mL水的燒杯中,慢慢加水稀釋至

1000mL。

GB5009.7—2016

10

23.2.3奧氏試劑:分別稱取硫酸銅5.0g、酒石酸鉀鈉300g,無水碳酸鈉10.0g、磷酸氫二鈉50.0g,稀

釋至1000mL,用細孔砂芯玻璃漏斗或硅藻土或活性炭過濾,貯于棕色試劑瓶中。

23.2.4碘化鉀溶液(250g/L):稱取碘化鉀25.0g,溶于水,移入100mL容量瓶中,用水稀釋至刻度,

搖勻。

23.2.5乙酸鋅溶液:稱取乙酸鋅21.9g,加冰乙酸3mL,加水溶解并定容于100mL。

23.2.6亞鐵氰化鉀溶液(106g/L):稱取亞鐵氰化鉀10.6g,加水溶解并定容至100mL。

23.2.7淀粉指示劑(5g/L):稱取可溶性淀粉0.50g,加冷水10mL調(diào)勻,攪拌下注入90mL沸水中,

再微沸2min,冷卻。溶液于使用前制備。

23.3標(biāo)準(zhǔn)品

23.3.1硫代硫酸鈉(Na2S2O3),CAS:7772-98-7,優(yōu)級純或以上等級。

23.3.2碘(I2),CAS:7553-56-2,12190-71-5,優(yōu)級純或以上等級。

23.3.3碘化鉀(KI),CAS:7681-11-0,優(yōu)級純或以上等級。

23.4標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

23.4.1硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定儲備液[c(Na2S2O3)=0.1mol

/L]:按GB/T601配制與標(biāo)定。也可使用

商品化的產(chǎn)品。

23.4.2硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液[c(Na2S2O3)=0.0323mol

/L]:精確吸取硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定儲備

液(

23.4.1)32.30mL,移入100mL容量瓶中,用水稀釋至刻度。校正系數(shù)按式(6)計算

K=

c

0.0323

…………(6)

式中:

c———硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度,單位為摩爾每升(mol

/L)。

23.4.3碘溶液標(biāo)準(zhǔn)滴定儲備液[c(I2)=0.1mol

/L]:按GB/T601配置與標(biāo)定。也可使用商品化的

產(chǎn)品。

23.4.4碘標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液:[c(I2)=0.01615mol

/L]。精確吸取碘溶液標(biāo)準(zhǔn)滴定儲備液(

23.4.3)16.15mL,

移入100mL容量瓶中,用水稀釋至刻度。

24儀器和設(shè)備

24.1天平:感量為0.1mg。

24.2水浴鍋。

24.3可調(diào)溫電爐或性能相當(dāng)?shù)募訜崞骶摺?/p>

24.4酸式滴定管:25mL。

25分析步驟

25.1試樣溶液的制備

25.1.1將備檢樣品清洗干凈。取100g(精確至0.01g)樣品,放入高速搗碎機中,用移液管移入100mL

的水,以不低于12000r/min的轉(zhuǎn)速將其搗成1∶1的勻漿。

25.1.2稱取勻漿樣品25g(精確至0.001g),于500mL具塞錐形瓶中(含有機酸較多的試樣加粉狀碳

酸鈣0.

5g~2.

0g

調(diào)至中性),加水調(diào)整體積約為200mL。置80℃±2℃水浴保溫30min,其間搖動數(shù)

次,取出加入乙酸鋅溶液5mL和亞鐵氰化鉀溶液5mL,冷卻至室溫后,轉(zhuǎn)入250mL容量瓶,用水定

GB5009.7—2016

11

容至刻度。搖勻,過濾,澄清試樣溶液備用。

25.2Cu2O沉淀生成

吸取試樣溶液20.

00mL(若樣品還原糖含量較高時,可適當(dāng)減少取樣體積,并補加水至20mL,使

試樣溶液中還原糖的量不超過20mg),加入250mL錐形瓶中。然后加入奧氏試劑50.

00mL,充分混

合,用小漏斗蓋上,在電爐上加熱,控制在3min中內(nèi)加熱至沸,并繼續(xù)準(zhǔn)確煮沸5.

0min,將錐形瓶靜置

于冷水中冷卻至室溫。

25.3碘氧化反應(yīng)

取出錐形瓶,加入冰乙酸1.

0mL,在不斷搖動下,準(zhǔn)確加入碘標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液5.00mL~30.00mL,

其數(shù)量以確保碘溶液過量為準(zhǔn),用量筒沿錐形瓶壁快速加入鹽酸15mL,立即蓋上小燒杯,放置約

2min,不時搖動溶液。

25.4滴定過量碘

用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定過量的碘,滴定至溶液呈黃綠色出現(xiàn)時,加入淀粉指示劑2mL,繼

續(xù)滴定溶液至藍色褪盡為止,記錄消耗的硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積(

V4)。

25.5空白試驗

按上述步驟進行空白試驗(

V3),除了不加試樣溶液外,操作步驟和應(yīng)用的試劑均與測定時相同。

26分析結(jié)果表述

試樣品的還原糖按式(

7)計算。

X=K×(V3-V4)×

0.001

m×V5/250×100

…………(7)

式中:

X

———試樣中還原糖的含量,單位為克每百克(

g

/100g);

K

———硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液[

c(Na2S2O3)=0.0323mol

/L]校正系數(shù);

V3

———空白試驗滴定消耗的硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積,單位為毫升(mL);

V4

———試樣溶液消耗的硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積,單位為毫升(mL);

V5

———所取試樣溶液的體積,單位為毫升(mL);

m

———試樣的質(zhì)量,單位為克(

g);

250———試樣浸提稀釋后的總體積,單位為毫升(mL)。

計算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。

27精密度

在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的5%。

28其他

當(dāng)稱樣量為5g時,定量限為0.

25g

/100g。

GB5009.7—2016

12

附錄A

A.1相當(dāng)于氧化亞銅質(zhì)量的葡萄糖、果糖、乳糖、轉(zhuǎn)化糖質(zhì)量表

相當(dāng)于氧化亞銅質(zhì)量的葡萄糖、果糖、乳糖、轉(zhuǎn)化糖質(zhì)量表見表A.

1。

表A.

1相當(dāng)于氧化亞銅質(zhì)量的葡萄糖、果糖、乳糖、轉(zhuǎn)化糖質(zhì)量表

單位為毫克

氧化亞銅葡萄糖果糖

乳糖

(含水)

轉(zhuǎn)化糖氧化亞銅葡萄糖果糖

乳糖

(含水)

轉(zhuǎn)化糖

11.34.65.17.75.2

12.45.15.68.55.7

13.55.66.19.36.2

14.66.06.710.06.7

15.86.57.210.87.2

16.97.07.711.57.7

18.07.58.312.38.2

19.18.08.813.18.7

20.38.59.313.89.2

21.48.99.914.69.7

22.59.410.415.410.2

23.69.910.916.110.7

24.810.411.516.911.2

25.910.912.017.711.7

27.011.412.518.412.3

28.111.913.119.212.8

29.312.313.619.913.3

30.412.814.220.713.8

31.513.314.721.514.3

32.613.815.222.214.8

33.814.315.823.015.3

34.914.816.323.815.8

36.015.316.824.516.3

37.215.717.425.316.8

38.316.217.926.117.3

39.416.718.426.817.8

40.517.219.027.618.3

41.717.719.528.418.9

42.818.220.129.119.4

43.918.720.629.919.9

45.019.221.130.620.4

46.219.721.731.420.9

47.320.122.232.221.4

48.420.622.832.921.9

49.521.123.333.722.4

50.721.623.834.522.9

51.822.124.435.223.5

52.922.624.936.024.0

54.023.125.436.824.5

55.223.626.037.525.0

56.324.126.538.325.5

57.424.627.139.126.0

58.525.127.639.826.5

59.725.628.240.627.0

60.826.128.741.427.6

61.926.529.242.128.1

63.027.029.842.928.6

64.227.530.343.729.1

65.328.030.944.429.6

66.428.531.445.230.1

67.629.031.946.030.6

68.729.532.546.731.2

GB5009.7—2016

13

表A.

1(續(xù))

單位為毫克

氧化亞銅葡萄糖果糖

乳糖

(含水)

轉(zhuǎn)化糖氧化亞銅葡萄糖果糖

乳糖

(含水)

轉(zhuǎn)化糖

69.830.033.047.531.7

70.930.533.648.332.2

72.131.034.149.032.7

73.231.534.749.833.2

74.332.035.250.633.7

75.432.535.851.334.3

76.633.036.352.134.8

77.733.536.852.935.3

78.834.037.453.635.8

79.934.537.954.436.3

81.135.038.555.236.8

82.235.539.055.937.4

83.336.039.656.737.9

84.436.540.157.538.4

85.637.040.758.238.9

86.737.541.259.039.4

87.838.041.759.840.0

88.938.542.360.540.5

90.139.042.861.341.0

91.239.543.462.141.5

92.340.043.962.842.0

93.440.544.563.642.6

94.641.045.064.443.1

95.741.545.665.143.6

96.842.046.165.944.1

97.942.546.766.744.7

99.143.047.267.445.2

100.243.547.868.245.7

101.344.048.369.046.2

102.544.548.969.746.7

103.645.049.470.547.3

104.745.550.071.347.8

105.846.050.572.148.3

107.046.551.172.848.8

108.147.051.673.649.4

109.247.552.274.449.9

110.348.052.775.150.4

111.548.553.375.950.9

112.649.053.876.751.5

113.749.554.477.452.0

114.850.054.978.252.5

116.050.655.579.053.0

117.151.156.079.753.6

118.251.656.680.554.1

119.352.157.181.354.6

120.552.657.782.155.2

121.653.158.282.855.7

122.753.658.883.656.2

123.854.159.384.456.7

125.054.659.985.157.3

126.155.160.485.957.8

127.255.661.086.758.3

128.356.161.687.458.9

129.556.762.188.259.4

130.657.262.789.059.9

131.757.763.289.860.4

132.858.263.890.561.0

134.058.764.391.361.5

135.159.264.992.162.0

136.259.765.492.862.6

137.460.266.093.663.1

138.560.766.594.463.6

139.661.367.195.264.2

140.761.867.795.964.7

141.962.368.296.765.2

143.062.868.897.565.8

GB5009.7—2016

14

表A.

1(續(xù))

單位為毫克

氧化亞銅葡萄糖果糖

乳糖

(含水)

轉(zhuǎn)化糖氧化亞銅葡萄糖果糖

乳糖

(含水)

轉(zhuǎn)化糖

144.163.369.398.266.3

145.263.869.999.066.8

146.464.370.499.867.4

147.564.971.0100.667.9

148.665.471.6101.368.4

149.765.972.1102.169.0

150.966.472.7102.969.5

152.066.973.2103.670.0

153.167.473.8104.470.6

154.268.074.3105.271.1

155.468.574.9106.071.6

156.569.075.5106.772.2

157.669.576.0107.572.7

158.770.076.6108.373.2

159.970.577.1109.073.8

161.071.177.7109.874.3

162.171.678.3110.674.9

163.272.178.8111.475.4

164.472.679.4112.175.9

165.573.180.0112.976.5

166.673.780.5113.777.0

167.874.281.1114.477.6

168.974.781.6115.278.1

170.075.282.2116.078.6

171.175.782.8116.879.2

172.376.383.3117.579.7

173.476.883.9118.380.3

174.577.384.4119.180.8

175.677.885.0119.981.3

176.878.385.6120.681.9

177.978.986.1121.482.4

179.079.486.7122.283.0

180.179.987.3122.983.5

181.380.487.8123.784.0

182.481.088.4124.584.6

183.581.589.0125.385.1

184.582.089.5126.085.7

185.882.590.1126.886.2

186.983.190.6127.686.8

188.083.691.2128.487.3

189.184.191.8129.187.8

190.384.692.3129.988.4

191.485.292.9130.788.9

192.585.793.5131.589.5

193.686.294.0132.290.0

194.886.794.6133.090.6

195.987.395.2133.891.1

197.087.895.7134.691.7

198.188.396.3135.392.2

199.388.996.9136.192.8

200.489.497.4136.993.3

201.589.998.0137.793.8

202.790.498.6138.494.4

203.891.099.2139.294.9

204.991.599.7140.095.5

206.092.0100.3140.896.0

207.292.6100.9141.596.6

208.393.1101.4142.397.1

209.493.6102.0143.197.7

210.594.2102.6143.998.2

211.794.7103.1144.698.8

212.895.2103.7145.499.3

213.995.7104.3146.299.9

215.096.3104.8147.0100.4

216.296.8105.4147.7101.0

217.397.3106.0148.5101.5

GB5009.7—2016

15

表A.

1(續(xù))

單位為毫克

氧化亞銅葡萄糖果糖

乳糖

(含水)

轉(zhuǎn)化糖氧化亞銅葡萄糖果糖

乳糖

(含水)

轉(zhuǎn)化糖

218.497.9106.6149.3102.1

219.598.4107.1150.1102.6

220.798.9107.7150.8103.2

221.899.5108.3151.6103.7

222.9100.0108.8152.4104.3

224.0100.5109.4153.2104.8

225.2101.1110.0153.9105.4

226.3101.6110.6154.7106.0

227.4102.2111.1155.5106.5

228.5102.7111.7156.3107.1

229.7103.2112.3157.0107.6

230.8103.8112.9157.8108.2

231.9104.3113.4158.6108.7

233.1104.8114.0159.4109.3

234.2105.4114.6160.2109.8

235.3105.9115.2160.9110.4

236.4106.5115.7161.7110.9

237.6107.0116.3162.5111.5

238.7107.5116.9163.3112.1

239.8108.1117.5164.0112.6

240.9108.6118.0164.8113.2

242.1109.2118.6165.6113.7

243.1109.7119.2166.4114.3

244.3110.2119.8167.1114.9

245.4110.8120.3167.9115.4

246.6111.3120.9168.7116.0

247.7111.9121.5169.5116.5

248.8112.4122.1170.3117.1

249.9112.9122.6171.0117.6

251.1113.5123.2171.8118.2

252.2114.0123.8172.6118.8

253.3114.6124.4173.4119.3

254.4115.1125.0174.2119.9

255.6115.7125.5174.9120.4

256.7116.2126.1175.7121.0

257.8116.7126.7176.5121.6

258.9117.3127.3177.3122.1

260.1117.8127.9178.1122.7

261.2118.4128.4178.8123.3

262.3118.9129.0179.6123.8

263.4119.5129.6180.4124.4

264.6120.0130.2181.2124.9

265.7120.6130.8181.9125.5

266.8121.1131.3182.7126.1

268.0121.7131.9183.5126.6

269.1122.2132.5184.3127.2

270.2122.7133.1185.1127.8

271.3123.3133.7185.8128.3

272.5123.8134.2186.6128.9

273.6124.4134.8187.4129.5

274.7124.9135.4188.2130.0

275.8125.5136.0189.0130.6

277.0126.0136.6189.7131.2

278.1126.6137.2190.5131.7

279.2127.1137.7191.3132.3

280.3127.7138.3192.1132.9

281.5128.2138.9192.9133.4

282.6128.8139.5193.6134.0

283.7129.3140.1194.4134.6

284.8129.9140.7195.2135.1

286.0130.4141.3196.0135.7

287.1131.0141.8196.8136.3

288.2131.6142.4197.5136.8

289.3132.1143.0198.3137.4

290.5132.7143.6199.1138.0

291.6133.2144.2199.9138.6

GB5009.7—2016

16

表A.

1(續(xù))

單位為毫克

氧化亞銅葡萄糖果糖

乳糖

(含水)

轉(zhuǎn)化糖氧化亞銅葡萄糖果糖

乳糖

(含水)

轉(zhuǎn)化糖

292.7133.8144.8200.7139.1

293.8134.3145.4201.4139.7

295.0134.9145.9202.2140.3

296.1135.4146.5203.0140.8

297.2136.0147.1203.8141.4

298.3136.5147.7204.6142.0

299.5137.1148.3205.3142.6

300.6137.7148.9206.1143.1

301.7138.2149.5206.9143.7

302.9138.8150.1207.7144.3

304.0139.3150.6208.5144.8

305.1139.9151.2209.2145.4

306.2140.4151.8210.0146.0

307.4141.0152.4210.8146.6

308.5141.6153.0211.6147.1

309.6142.1153.6212.4147.7

310.7142.7154.2213.2148.3

311.9143.2154.8214.0148.9

313.0143.8155.4214.7149.4

314.1144.4156.0215.5150.0

315.2144.9156.5216.3150.6

316.4145.5157.1217.1151.2

317.5146.0157.7217.9151.8

318.6146.6158.3218.7152.3

319.7147.2158.9219.4152.9

320.9147.7159.5220.2153.5

322.0148.3160.1221.0154.1

323.1148.8160.7221.8154.6

324.2149.4161.3222.6155.2

325.4150.0161.9223.3155.8

326.5150.5162.5224.1156.4

327.6151.1163.1224.9157.0

328.7151.7163.7225.7157.5

329.9152.2164.3226.5158.1

331.0152.8164.9227.3158.7

332.1153.4165.4228.0159.3

333.3153.9166.0228.8159.9

334.4154.5166.6229.6160.5

335.5155.1167.2230.4161.0

336.6155.6167.8231.2161.6

337.8156.2168.4232.0162.2

338.9156.8169.0232.7162.8

340.0157.3169.6233.5163.4

341.1157.9170.2234.3164.0

342.3158.5170.8235.1164.5

343.4159.0171.4235.9165.1

344.5159.6172.0236.7165.7

345.6160.2172.6237.4166.3

346.8160.7173.2238.2166.9

347.9161.3173.8239.0167.5

349.0161.9174.4239.8168.0

350.1162.5175.0240.6168.6

351.3163.0175.6241.4169.2

352.4163.6176.2242.2169.8

353.5164.2176.8243.0170.4

354.6164.7177.4243.7171.0

355.8165.3178.0244.5171.6

356.9165.9178.6245.3172.2

358.0166.5179.2246.1172.8

359.1167.0179.8246.9173.3

360.3167.6180.4247.7173.9

361.4168.2181.0248.5174.5

362.5168.8181.6249.2175.1

363.6169.3182.2250.0175.7

364.8169.9182.8250.8176.3

365.9170.5183.4251.6176.9

GB5009.7—2016

17

表A.

1(續(xù))

單位為毫克

氧化亞銅葡萄糖果糖

乳糖

(含水)

轉(zhuǎn)化糖氧化亞銅葡萄糖果糖

乳糖

(含水)

轉(zhuǎn)化糖

367.0171.1184.0252.4177.5

368.2171.6184.6253.2178.1

369.3172.2185.2253.9178.7

370.4172.8185.8254.7179.2

371.5173.4186.4255.5179.8

372.7173.9187.0256.3180.4

373.8174.5187.6257.1181.0

374.9175.1188.2257.9181.6

376.0175.7188.8258.7182.2

377.2176.3189.4259.4182.8

378.3176.8190.1260.2183.4

379.4177.4190.7261.0184.0

380.5178.0191.3261.8184.6

381.7178.6191.9262.6185.2

382.8179.2192.5263.4185.8

383.9179.7193.1264.2186.4

385.0180.3193.7265.0187.0

386.2180.9194.3265.8187.6

387.3181.5194.9266.6188.2

388.4182.1195.5267.4188.8

389.5182.7196.1268.1189.4

390.7183.2196.7268.9190.0

391.8183.8197.3269.7190.6

392.9184.4197.9270.5191.2

394.0185.0198.5271.3191.8

395.2185.6199.2272.1192.4

396.3186.2199.8272.9193.0

397.4186.8200.4273.7193.6

398.5187.3201.0274.4194.2

399.7187.9201.6275.2194.8

400.8188.5202.2276.0195.4

401.9189.1202.8276.8196.0

403.1189.7203.4277.6196.6

404.2190.3204.0278.4197.2

405.3190.9204.7279.2197.8

406.4191.5205.3280.0198.4

407.6192.0205.9280.8199.0

408.7192.6206.5281.6199.6

409.8193.2207.1282.4200.2

410.9193.8207.7283.2200.8

412.1194.4208.3284.0201.4

413.2195.0209.0284.8202.0

414.3195.6209.6285.6202.6

415.4196.2210.2286.3203.2

416.6196.8210.8287.1203.8

417.7197.4211.4287.9204.4

418.8198.0212.0288.7205.0

419.9198.5212.6289.5205.7

421.1199.1213.3290.3206.3

422.2199.7213.9291.1206.9

423.3200.3214.5291.9207.5

424.4200.9215.1292.7208.1

425.6201.5215.7293.5208.7

426.7202.1216.3294.3209.3

427.8202.7217.0295.0209.9

428.9203.3217.6295.8210.5

GB5009.7—2016

18

表A.

1(續(xù))

單位為毫克

氧化亞銅葡萄糖果糖

乳糖

(含水)

轉(zhuǎn)化糖氧化亞銅葡萄糖果糖

乳糖

(含水)

轉(zhuǎn)化糖

430.1203.9218.2296.6211.1

431.2204.5218.8297.4211.8

432.3205.1219.5298.2212.4

433.5205.1220.1299.0213.0

434.6206.3220.7299.8213.6