1、,1.限制性核酸內(nèi)切酶,一種限制性內(nèi)切酶只能識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開（切割DNA分子）,來(lái)源：主要從原核細(xì)胞分離 作用：,作用結(jié)果：,EcoRI,重難點(diǎn)剖析:,基因工程的“專用工具”,形成平未端（SmaI）及黏性未端（EcoRI）,1)、種類： 2)、作用部位：,磷酸二酯鍵,DNA連接酶可把平未端或黏性末端之間的縫隙“縫合”起來(lái)，即相當(dāng)于把梯子兩邊的扶手的斷口連接起來(lái)，這樣一個(gè)重組DNA分子就形成了。,2.DNA連接酶“分子縫合針”,3.分子運(yùn)載車運(yùn)載體,（1） 作用：,將目的基因送入受體細(xì)胞,（2） 具備的條件：,a.

2、能自我復(fù)制.,b.具有一個(gè)或多個(gè)酶切位點(diǎn).,c.有標(biāo)記基因.,d.對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害.,質(zhì)粒、噬菌體、動(dòng)植物病毒,（3）種類：,質(zhì)粒細(xì)菌擬核DNA之外結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、能自主復(fù)制的很小的環(huán)狀DNA分子。,（一）目的基因的提取,目的基因：主要是指_ 。 獲取方法： 1、_中獲取目的基因 2、人工合成法：化學(xué)方法合成DNA片段（反轉(zhuǎn)錄法、直接合成法） 3、 PCR反應(yīng)擴(kuò)增DNA,基本操作步驟,從基因文庫(kù),編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因,原理：DNA復(fù)制 過(guò)程：加熱DNA解鏈 冷卻引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈 互補(bǔ)鏈合成 條件 ：耐高溫DNA聚合酶,（二）基因表達(dá)載體構(gòu)建,1、基因表達(dá)載體由_、_ _、_ 四部分組成。,目的基

3、因,啟動(dòng)子,標(biāo)記基因,終止子,2、啟動(dòng)子作用：,3、標(biāo)記基因的作用：,RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)，啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄的“開關(guān)”。,鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因 ，從普通細(xì)胞中篩選出含目的基因的受體細(xì)胞,（1）用一定的_切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切口，露出_。 （2）用_切斷目的基因，使其產(chǎn)生 _。,（3）將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的_處，再加入適量_，形成了一個(gè)重組DNA分子（重組質(zhì)粒）,限制酶,黏性末端,同一種限制酶,相同的黏性末端,切口,DNA連接酶,重組質(zhì)粒形成過(guò)程:,導(dǎo)入植物 細(xì)胞：,（三）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,導(dǎo)入動(dòng)物 細(xì)胞：,導(dǎo)入微生物細(xì)胞：,受體細(xì)胞 導(dǎo)入方法,體細(xì)胞 受精卵,受精卵,

4、顯微注射法,Ca2處理法,農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 基因槍法 花粉管通道法,將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞,原核生物繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少，故早期常作為受體細(xì)胞。,重組表達(dá)載體DNA 溶于緩沖液,導(dǎo)入,目的基因是否插入轉(zhuǎn)基 因生物染色體的DNA上,（四）目的基因的檢測(cè)與鑒定,目的基因是否表達(dá)：,目的基因是否轉(zhuǎn)錄：,個(gè)體水平鑒定,抗蟲性鑒定、抗病性鑒定、生物活性鑒定等（生理、性狀水平的檢測(cè)）,檢測(cè),轉(zhuǎn)基因生物,轉(zhuǎn)基因生物是指利用 技術(shù)導(dǎo)入 培育出的能夠?qū)⑿滦誀罘€(wěn)定地 給后代的基因工程生物。,基因工程,外源基因,遺傳,優(yōu)點(diǎn)：,打破了常規(guī)育種難以突破的 的改變了生物的遺傳性狀.,物種之間的界限(生殖隔離

5、),定向,1.抗蟲轉(zhuǎn)基因植物,（一）植物基因工程碩果累累:,2. 抗病轉(zhuǎn)基因生物,3.抗逆轉(zhuǎn)基因作物,基 因 工 程 的 應(yīng) 用,4.利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì),方法:,利用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物-動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器,（二）動(dòng)物基因工程前景廣闊:,用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作器官移植的供體 供體動(dòng)物： 存在的難題： 解決方法：,豬,免疫排斥,將供體基因組導(dǎo)入某種基因調(diào)節(jié)因子，以抑制抗原決定基因的表達(dá)，或設(shè)法除去抗原決定基因，再結(jié)合克隆技術(shù)，培育出沒有免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆豬器官。,（三）、基因工程藥品異軍突起:工程菌：用基因工程的方法，使外源基因得到高效率表達(dá)的菌類細(xì)胞株系。我國(guó)已生產(chǎn)的產(chǎn)品：,白細(xì)胞介素-2、

6、干擾素、乙肝疫苗等,（四）基因診斷與基因治療:,基因診斷：用放射性同位素等標(biāo)記的“DNA探針”檢測(cè)肝炎病毒等病毒感染及遺傳缺陷，不但準(zhǔn)確而且迅速。,基因治療：把健康的外源基因?qū)胗谢蛉毕莸募?xì)胞中，達(dá)到治療疾病的目的。,體外基因治療,體內(nèi)基因治療,基因治療的類型,比較：基因工程和蛋白質(zhì)工程,蛋白質(zhì)工程流程圖,從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā) 設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu) 推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列 找到相應(yīng)的脫氧核苷酸序列(即基因),板書：用干擾素例子，反推過(guò)程。 第4步后接著做什么？,專題二、細(xì)胞工程,1、概念:,植物細(xì)胞工程 動(dòng)物細(xì)胞工程 微生物工程,所采用技術(shù)的理論基礎(chǔ),植物細(xì)胞工程,通常采用的技術(shù)手段,植物組

7、織培養(yǎng),植物體細(xì)胞雜交,植物細(xì)胞的全能性,一、植物細(xì)胞工程,(離體的植物器官、組織或細(xì)胞),脫分化,再分化,培養(yǎng)條件：,離體、含有全部營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基、一定的溫度、空氣、無(wú)菌環(huán)境、適合的PH、適合的光照等,外植體,舉例：,花藥離體培養(yǎng)；基因工程培育的抗棉鈴蟲 的棉花植株；細(xì)胞工程中培育的“番茄-馬 鈴薯”雜種植株等。,1、植物組織培養(yǎng),擴(kuò)大培養(yǎng),融合細(xì)胞,雜種細(xì)胞,去壁的常用方法：,誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合方法：,融合成功的標(biāo)志,人工誘導(dǎo),篩選,2、植物體細(xì)胞雜交的過(guò)程,（1）植物繁殖的新途徑,1）微型繁殖（快速繁殖） 2）作物脫毒 3）神奇的人工種子,（2）作物新品種的培育,1）單倍體育種 2）突變

8、體的利用 3）轉(zhuǎn)基因植物的培育,（3）細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn),3、植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用,二、動(dòng)物細(xì)胞工程,植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段：,植物組織培養(yǎng)、 植物體細(xì)胞雜交等,強(qiáng)調(diào)：,是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),動(dòng)物細(xì)胞核移植,動(dòng)物細(xì)胞融合,單克隆抗體制備等,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),常用的技術(shù)手段：,動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官,胰蛋白酶,剪碎,單個(gè)細(xì)胞,加培養(yǎng)液,制成,細(xì)胞懸浮液,去掉組織間蛋白,10代細(xì)胞,50代細(xì)胞,無(wú)限傳代,部分細(xì)胞遺傳物質(zhì)改變,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不能最終培養(yǎng)成動(dòng)物體,隨細(xì)胞增多，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖,1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng):,植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較,均需適宜的外

9、界條件：PH,溫度,營(yíng)養(yǎng)及“無(wú)菌、無(wú)毒環(huán)境”等。,固體、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、蔗糖、植物激素,培養(yǎng)成植株,液體、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、葡萄糖、動(dòng)物血清,培育成細(xì)胞系或細(xì)胞株,1.生產(chǎn)蛋白質(zhì)制品（如病毒疫苗、干擾素、 單克隆抗體、動(dòng)物激素） 2.用于某些器官移植,1.試管苗的快速繁殖 2.無(wú)病毒植物的培育 3.生產(chǎn)藥物等 4.人工種子 5.轉(zhuǎn)基因植物的培育,物理法、化學(xué)法,滅活的仙臺(tái)病毒,2、動(dòng)物細(xì)胞融合,過(guò)程,制備單克隆抗體：,獲得雜種植株,用途,物理、化學(xué)方法（同左）,生物：滅活的病毒,物理（離心、振蕩、電刺激）,化學(xué)（PEG）,誘導(dǎo)方法,使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合,去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,細(xì)胞融合的方法,細(xì)胞

10、膜的流動(dòng)性,細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞全能性,原理,動(dòng)物細(xì)胞融合,植物體細(xì)胞雜交,比較項(xiàng)目,植物體細(xì)胞雜交、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較,主要用于制備單克隆抗體,細(xì)胞核移植,多莉羊的培育過(guò)程,3.核移植與克隆動(dòng)物：,動(dòng)物細(xì)胞核有全能性,特點(diǎn)：產(chǎn)量低、特異性差、純度低、反應(yīng)不夠靈敏,4、單克隆抗體,1、常規(guī)抗體制備：,一個(gè)B淋巴細(xì)胞：只分泌一種特異性抗體,2、單克隆抗體制備：,雜交瘤細(xì)胞,小鼠骨髓瘤細(xì)胞：能無(wú)限增殖,融合,抗原注入小鼠體內(nèi),已免疫的B淋巴細(xì)胞,骨髓瘤細(xì)胞,篩選出雜交瘤細(xì)胞,篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群,從培養(yǎng)液中提取,從小鼠腹水中提取,細(xì)胞融合,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),單克隆抗體的制備,(特定的選擇

11、培養(yǎng)基),主要用于疾病的診斷、治療和預(yù)防。 若在單抗上帶上抗癌藥物制成“生物導(dǎo)彈”，將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在部位，既消滅了癌細(xì)胞又不會(huì)傷害健康細(xì)胞。 特點(diǎn)：與常規(guī)抗體相比，具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、化學(xué)性質(zhì)單一的優(yōu)點(diǎn)。,單克隆抗體的應(yīng)用：,單克隆抗體是指：,雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的單一抗體,例(06江蘇)下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖。,（1）_技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。 （2）根據(jù)培養(yǎng)基的用途分類，圖中HAT培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。 （3）單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)越性是_。 （4）動(dòng)物細(xì)胞融合除了采用植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合常用的誘導(dǎo)劑外，還可以采用_。 （5）選出的雜交瘤細(xì)胞既具備骨髓

12、瘤細(xì)胞的_特點(diǎn)，又具備淋巴細(xì)胞的_特點(diǎn)。 （6）淋巴細(xì)胞是由動(dòng)物體_中的_細(xì)胞分化、發(fā)育而來(lái)。 （7）雜交瘤細(xì)胞從培養(yǎng)基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是_。,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),選擇,特異性強(qiáng),靈敏度高,滅活的病毒,在體外大量增殖,分泌特異性抗體,骨髓,造血干細(xì)胞,主動(dòng)運(yùn)輸,6、基因型為AaBb的水稻(具有24條染色體)的花粉通過(guò)無(wú)菌操作，接入試管后，在一定條件下形成試管苗的育種過(guò)程。 (1)愈傷組織是花粉細(xì)胞不斷分裂后的形成的不規(guī)則細(xì)胞團(tuán)，愈傷組織形成中，必須從培養(yǎng)基中獲得_。 (2)要促進(jìn)花粉細(xì)胞分裂生長(zhǎng)，培養(yǎng)基中應(yīng)有_和_ _兩類激素。 (3)愈傷組織分化是指愈傷組織形成芽和根，再由芽發(fā)育成葉

13、和莖。這一過(guò)程必須給予光照，其原因是_利用光照制造有機(jī)物，供試管苗生長(zhǎng)。 (4)試管苗的細(xì)胞核中含有_條脫氧核苷酸鏈。 (5)培養(yǎng)出的試管基因型有 。如果要獲得育種需要的植株，并能繁殖新品種，后面的育種步驟是_。,各種營(yíng)養(yǎng)(水、無(wú)機(jī)鹽、蔗糖等能量物質(zhì))和小分子有機(jī)物,生長(zhǎng)素 細(xì)胞分裂素,葉綠體,24,AB、Ab、ab、a,用一定濃度的秋水仙素處理組織培養(yǎng)獲得的幼苗,二中新校 張志鵬,1、胚胎工程的概念,操作的對(duì)象 早期胚胎或配子 技術(shù)手段 胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎分割、胚胎移植、體外受精等 最后結(jié)果 產(chǎn)生動(dòng)物個(gè)體，滿足人類需求,體內(nèi)受精 和 早期胚胎發(fā)育,一、精子的發(fā)生,1、場(chǎng)所：,2、時(shí)期：,3

14、、過(guò)程：,精子的發(fā)生是在睪丸的曲細(xì)精管內(nèi)完成的,從初情期開始直到生殖功能衰退,發(fā)生的過(guò)程大體可分為三個(gè)階段,曲細(xì)精管,第二階段：,精原細(xì)胞經(jīng)過(guò)數(shù)次有絲分裂,產(chǎn)生大量的精原細(xì)胞,其中一部分經(jīng)過(guò)染色體復(fù)制等活動(dòng),進(jìn)一步形成初級(jí)精母細(xì)胞。,每一個(gè)初級(jí)精母細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂形成四個(gè)含有單倍染色體的精子細(xì)胞。,第一階段：初級(jí)精母細(xì)胞的形成,第二階段：精子細(xì)胞的形成,第三階段 精子變形,_變?yōu)榫宇^部的主要部分； _發(fā)育為頭部的頂體； _演變?yōu)榫拥奈玻?_形成線粒體鞘膜； 其它物質(zhì)濃縮成_（球形）。,第三階段：精子變形,細(xì)胞核,高爾基體,中心體,線粒體,原生質(zhì)滴,4、精子的形態(tài)：,（1）外形似蝌蚪，分_、_

15、、_、三大部分。,（2）不同種動(dòng)物精子的形態(tài)_，大小略有_，與動(dòng)物的體形大小_。,頭 頸 尾,相似,不同 無(wú)關(guān),二、卵子的發(fā)生,1.場(chǎng)所：,2.時(shí)期：,卵子的發(fā)生是在卵巢內(nèi)完成 的(卵巢有產(chǎn)卵與排卵、分泌多種激素這二大功能）。,性別分化以后,（放射冠）,3、過(guò)程：,雌性胎兒卵巢內(nèi)的卵原細(xì)胞，通過(guò)有絲分裂增加其數(shù)量，并演變?yōu)槌跫?jí)卵母細(xì)胞，被卵泡細(xì)胞包圍,形成卵泡。初級(jí)卵母細(xì)胞經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂變?yōu)槌墒斓穆炎印?減數(shù)第一次分裂的時(shí)間是在雌性動(dòng)物排卵前后完成的，結(jié)果是產(chǎn)生1個(gè)次級(jí)卵母細(xì)胞和1個(gè)第一極體(暫不分離),進(jìn)入輸卵管,準(zhǔn)備與精子受精。,減數(shù)第二次分裂時(shí)間是在精子和卵子結(jié)合的過(guò)程中，結(jié)果是產(chǎn)生1個(gè)成

16、熟卵子和3個(gè)第二極體。,三、精子與卵子的發(fā)生比較,四、受精作用,1、概念:,3、場(chǎng)所:,1、概念:指精子和卵子結(jié)合形成合子 (即受精卵)的過(guò)程。,2、受精的標(biāo)志:在卵黃膜和透明帶的間隙可以觀察到兩個(gè)極體時(shí); 受精完成的標(biāo)志：雌雄原核的融合。,3、場(chǎng)所:受精是在輸卵管內(nèi)完成的。,4、過(guò)程,受精前的準(zhǔn)備階段,受精階段,準(zhǔn)備階段1：精子獲能,準(zhǔn)備階段2：卵子的準(zhǔn)備,準(zhǔn)備階段1：精子獲能,即精子必須在雌性動(dòng)物生殖道內(nèi)發(fā)生相應(yīng)生理變化后，才能獲得受精能力的現(xiàn)象。,準(zhǔn)備階段2：卵子的準(zhǔn)備,即卵子在輸卵管內(nèi)成熟到減數(shù)第二分裂中期（M）時(shí)，才具備受精能力。,受精階段,包括精子穿越放射冠和透明帶、進(jìn)入卵黃膜、雌

17、雄原核形成和精卵結(jié)合等內(nèi)容。,精、卵相遇,頂體反應(yīng),頂體酶釋放,頂體酶溶解透明帶,接觸透明帶,穿越放射冠,溶解卵丘細(xì)胞 （放射冠）,穿越透明帶,接觸卵黃膜,產(chǎn)生透明帶反應(yīng),形成第一道屏障（作用 ）,精子被微絨毛抱合,精子外膜與卵黃膜融合,精子進(jìn)入卵,精子進(jìn)入卵后,變化,變化,變化,產(chǎn)生卵黃膜封閉作用,形成第二道屏障 （作用？）,尾部脫離核膜破裂,形成雄原核,形成雌原核,激活卵子完成減數(shù)第二次分裂，排出第二極體,發(fā)育 移動(dòng) 接觸 合并,形成受精卵,受精作用的特點(diǎn)和實(shí)質(zhì),特點(diǎn): 1、只有一個(gè)精子與一個(gè)卵細(xì)胞結(jié)合，形成一個(gè)受精卵。 2、進(jìn)入卵細(xì)胞的只是精子的頭部（細(xì)胞核） 3、受精卵的細(xì)胞質(zhì)幾乎都只

18、來(lái)自卵細(xì)胞。,實(shí)質(zhì): 雄原核與雌原核 的融合。,五、胚胎發(fā)育,1、卵裂期的特點(diǎn)：,細(xì)胞分裂方式為_ 細(xì)胞數(shù)目_ 胚胎總體積_或略有_ 每個(gè)細(xì)胞體積_, DNA總量_但_,有絲分裂,增加,不增加,縮小,減小,增加,每個(gè)細(xì)胞DNA含量不變,2、早期胚胎發(fā)育的幾個(gè)階段,桑椹胚：,囊胚：,原腸胚：,桑椹胚：細(xì)胞均屬于全能細(xì)胞。,細(xì)胞開始分化;內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)發(fā)育成各種組織, 滋養(yǎng)層將來(lái)發(fā)育成胎膜、胎盤;出現(xiàn)囊胚腔后，進(jìn)一步擴(kuò)大會(huì)導(dǎo)致孵化。,原腸胚：內(nèi)細(xì)胞團(tuán)表皮的細(xì)胞形成外胚層，下方的細(xì)胞形成內(nèi)胚層，出現(xiàn)原腸腔。,3.2體外受精和早期胚胎培養(yǎng),專題3:胚胎工程,1.試管動(dòng)物技術(shù),是指通過(guò)人工操作使卵子和精子

19、在體外條件下成熟和受精，并通過(guò)培養(yǎng)發(fā)育成早期胚胎后，再經(jīng)胚胎移植（到受體母親體內(nèi)）產(chǎn)生后代的技術(shù)。,采集良種母牛的卵母細(xì)胞,卵母細(xì)胞的體外培養(yǎng),采集良種公牛精子,精子體外獲能,體外受精,良種牛體外受精胚胎早期培養(yǎng),胚胎移植,受體牛,良種犢牛,成熟期牛,屠宰加工廠,市場(chǎng),采集卵巢中的 卵母細(xì)胞,“試管?！惫S化生產(chǎn)的技術(shù)流程圖,體外受精,1.卵母細(xì)胞的收集和培養(yǎng),對(duì)不同動(dòng)物,采取卵母細(xì)胞的方法不同,2.精子的收集和獲能,1)收集的方法:假陰道法,手握法和電刺激等 2)獲能處理: 培養(yǎng)法：嚙齒動(dòng)物、 家兔和豬 化學(xué)法：牛、羊,3.受精,在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫^(guò)程,胚胎的早期培養(yǎng),一般

20、比較復(fù)雜 培養(yǎng)液: 水、無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及動(dòng)物血清等. 培養(yǎng)發(fā)育到適宜階段時(shí)，可將其取出向受體移植或冷動(dòng)保存.,2.胚胎移植 1).概念: 將雌性動(dòng)物的早期胚胎,或經(jīng)體外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi),使之發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。,一 胚胎移植,2）.胚胎移植的現(xiàn)狀和意義,（1)加速育種工作和品種改良； （2)大量節(jié)省購(gòu)買種畜的費(fèi)用； （3)一胎多產(chǎn)； （4)保存品種資源和瀕危物種； （5)可以充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛力,縮短繁殖周期,增加一生繁殖的后代數(shù)量。,3）.胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ),（1).供體和受體具相同的生理環(huán)境

21、； （2).早期胚胎處于游離狀態(tài),為胚胎的收集提供了可能； （3).受體對(duì)移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥； （4).胚胎與受體能建立正常的組織聯(lián)系,但遺傳物質(zhì)沒有改變。,4)、胚胎移植的基本程序 （1）供體、受體的選擇和同期發(fā)情處理 （2）配種或進(jìn)行人工受精 （3）胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存 （4）胚胎移植 （5）移植后是否妊娠的檢查,（1）.對(duì)供體、受體進(jìn)行選擇,供體： 遺傳性能和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的個(gè)體； 受體： 健康和正常繁殖能力的個(gè)體 處理： 同期發(fā)情 具體做法： 注射促性腺激素。,（2）.采集卵母細(xì)胞 方法： 超數(shù)排卵 具體做法： 注射促性腺激素,（2）.配種或人工受精,精子來(lái)源：

22、同種優(yōu)良的雄性動(dòng)物。,（3）.胚胎的收集,在配種或輸精后第7天，用特制的沖卵裝置，把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來(lái)。,（3）.對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查,（3）.胚胎的保存或移植,（4）.胚胎的移植,方法一：手術(shù)法 具體做法：引出受體子宮和卵巢，將胚胎注入子宮角，縫合創(chuàng)口。 方法二：非手術(shù)法 將裝有胚胎的移植管送入受體母牛子宮的相應(yīng)部位，注入胚胎。,（5）.對(duì)受體母牛進(jìn)行是否妊娠的檢查(第二次檢查),（6）.受體母牛產(chǎn)下胚胎移植的犢牛,選擇,供體母牛,受體母牛,同期發(fā)情處理,超數(shù)排卵,供體公牛,配種,沖卵(胚胎),胚胎質(zhì)量檢查、培養(yǎng),胚胎移植,妊娠檢查,分娩（胚胎移植的犢牛）,總結(jié)：,3、胚胎分割 （1

23、）胚胎分割的概念 （2）胚胎分割特點(diǎn) （3）胚胎分割的理論基礎(chǔ) （4）胚胎分割操作過(guò)程,1).概念: 采用顯微手術(shù)（機(jī)械方法）的方法將早期胚胎分割成2分胚,4分胚或8分胚,經(jīng)體內(nèi)或體外培養(yǎng)后植入受體，以得到同卵雙胎或同卵多胎的技術(shù)。,2).特點(diǎn)： 后代具有相同的遺傳物質(zhì)， 因此胚胎分割可以看做動(dòng)物無(wú)性繁殖或克隆的方法之一。 3)、理論基礎(chǔ): 動(dòng)物胚胎細(xì)胞的全能性。 所以胚胎分割的時(shí)期為： 囊胚或桑椹胚。,4)、選擇的胚胎： 發(fā)育良好的,形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚。 5)、使用的主要儀器： 實(shí)體顯微鏡和顯微操作儀。 6)、具體操作 用分割針或分割刀片將胚胎切開，吸出其中的半個(gè)胚胎，注入預(yù)先準(zhǔn)備好的空

24、透明帶中，或直接將裸半胚移植給受體。,胚胎分割移植的顯微操作,7)、操作注意事項(xiàng)： 對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí)，要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割。 原因：內(nèi)細(xì)胞團(tuán)一般到囊胚階段才出現(xiàn)，它是發(fā)育為胚胎本身的基礎(chǔ)細(xì)胞，其他細(xì)胞為滋養(yǎng)細(xì)胞，只為胚胎和胎兒發(fā)育提供營(yíng)養(yǎng)。若分割時(shí)不能將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，會(huì)出現(xiàn)含內(nèi)細(xì)胞團(tuán)多的部分正常發(fā)育的能力強(qiáng)，少的部分發(fā)育受阻或發(fā)育不良，甚至不能發(fā)育等問題。,7)、操作注意事項(xiàng)： 胚胎分割的份數(shù)越多，操作的難度會(huì)越大，移植的成功率也越低。 早期胚胎的體積很小，只有在顯微鏡下才能看到；再者，細(xì)胞數(shù)目是有限的。分割的份數(shù)越多，不但難以做到均等分割，每一份的細(xì)胞數(shù)會(huì)越少，而且作為囊胚期的

25、胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞所受的影響會(huì)更大。因此，分割的份數(shù)越多，技術(shù)的難度會(huì)越大，移植后的恢復(fù)和發(fā)育的難度會(huì)越大，移植成功率自然會(huì)降低。,4. 胚胎干細(xì)胞,（1）什么是胚胎干細(xì)胞？ 簡(jiǎn)稱是什么？ （2）胚胎干細(xì)胞的來(lái)源。 （3）胚胎干細(xì)胞的特性。 （4）胚胎干細(xì)胞的應(yīng)用。,1).概念： 簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞,是由早期胚胎或原始性腺中分離出來(lái)的一類細(xì)胞。,2).特點(diǎn): （1）形態(tài)：體積小,細(xì)胞核大,核仁明顯； （2）功能：具有發(fā)育的全能性,可經(jīng)誘導(dǎo)分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞; （3）在體外培養(yǎng)的條件下，ES細(xì)胞可以增殖而不發(fā)生分化。對(duì)它可以進(jìn)行冷凍保存，也可以進(jìn)行遺傳改造。,3).主要用途,（1）

26、.治療人類的某些頑癥 利用ES細(xì)胞可以誘導(dǎo)分化形成新的組織 細(xì)胞的特性，移植ES細(xì)胞可使壞死或退化的部位得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能。目前，在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方面，用ES細(xì)胞誘導(dǎo)分化出的某些組織細(xì)胞已成功地治愈糖尿病、肝衰竭、心衰竭和成骨不良等疑難病癥。,（2）.培育出人造組織器官，用于器官移植。 隨著組織工程技術(shù)的發(fā)展，通過(guò)ES細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化，還可以培育出人造組織器官，解決目前臨床上存在的供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題。,（3）.ES細(xì)胞也是理論上研究體外細(xì)胞分化的理想材料。 ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上，或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中，能夠維持不分化的狀態(tài)。 在培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子,就可以誘導(dǎo)ES細(xì)

27、胞向不同類型的組織細(xì)胞分化.,專題5 生態(tài)工程,干裂的土地，赤紅的荒山，意味著不斷惡化的 ，幼苗的上方是蔚藍(lán)的地球，地球似乎化作一滴甘露，滋潤(rùn)著大地；幼苗又可寓意為_工程，雖然柔弱，卻頑強(qiáng)地支撐著地球；地球和幼苗組合和諧，象征著希望。,生態(tài)環(huán)境,生態(tài),生態(tài)工程的概念：,人類應(yīng)用生態(tài)學(xué)、工程學(xué)、系統(tǒng)學(xué)、經(jīng)濟(jì)學(xué)等學(xué)科的基本原理和方法，通過(guò)系統(tǒng)設(shè)計(jì)、調(diào)控和技術(shù)組裝，對(duì)已破壞的生態(tài)環(huán)境進(jìn)行修復(fù)、重建，對(duì)造成環(huán)境污染和破壞的傳統(tǒng)生產(chǎn)方式進(jìn)行改善，并提高生態(tài)系統(tǒng)的生產(chǎn)力，從而促進(jìn)人類社會(huì)和自然環(huán)境和諧發(fā)展。,注意：,1.學(xué)科知識(shí)： ； 2.技術(shù)手段： ； 3.最終目的： 。,生態(tài)學(xué)、工程學(xué)、系統(tǒng)學(xué)、經(jīng)濟(jì)學(xué)

28、,系統(tǒng)設(shè)計(jì)、調(diào)控和技術(shù)組裝,促進(jìn)人類社會(huì)和自然環(huán)境的和諧發(fā)展,5.1 生態(tài)工程的基本原理,生態(tài)工程建設(shè)目的： 遵循自然界物質(zhì)循環(huán)的規(guī)律，充分發(fā)揮資源的生產(chǎn)潛力，防止環(huán)境污染，達(dá)到經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益的同步發(fā)展。,優(yōu)點(diǎn)：與傳統(tǒng)的工程相比，生態(tài)工程是一類少消耗、多效益、可持續(xù)的工程體系。,傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)模式 石油農(nóng)業(yè),弊端：不注重生態(tài)環(huán)境的保護(hù)，沒有考慮成本，經(jīng)濟(jì)的發(fā)展以巨大的生態(tài)環(huán)境破壞為代價(jià)。,模式內(nèi)容：大量使用化肥、農(nóng)藥、機(jī)械的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)方式。,生態(tài)工程與傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)的比較,主要是通過(guò)實(shí)行“循環(huán)經(jīng)濟(jì)”原則，使一個(gè)系統(tǒng)產(chǎn)生出的污染物，能夠成為本系統(tǒng)或者另一個(gè)系統(tǒng)的生產(chǎn)原料，從而實(shí)現(xiàn)廢棄物的資源化，而實(shí)現(xiàn)循環(huán)經(jīng)濟(jì)最重要的手段之一是生態(tài)工程。,生態(tài)經(jīng)濟(jì)(循環(huán)經(jīng)濟(jì)),模式：實(shí)現(xiàn)原料產(chǎn)品原料產(chǎn)品的生產(chǎn)體系，實(shí)現(xiàn)廢棄物的資源化。,地球以有限的空間和資源，長(zhǎng)久維持著眾多生物的生存、繁衍和發(fā)展，奧秘就在于物質(zhì)能夠在各類生態(tài)系統(tǒng)中，進(jìn)行區(qū)域小循環(huán)和全球地質(zhì)大循環(huán)，循環(huán)往復(fù)，分層分級(jí)利用，從而達(dá)到取之不盡、用之不竭的效果。而沒有物質(zhì)循環(huán)的系統(tǒng)，就會(huì)產(chǎn)生廢棄物，造成環(huán)境污染，并最終影響到系統(tǒng)的穩(wěn)定和發(fā)展,1.物質(zhì)循環(huán)再生原理,二、生態(tài)工程所遵循的基本原理,二、生態(tài)工程所遵循的基本原理,遇蟲害而