1、醫(yī)學(xué)微生物學(xué) 七年制大課講授提綱,西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)教研室 董曉慧 教授,七年制大課講授目錄第二篇 細(xì)菌學(xué),第13章 球菌 第14章 腸桿菌科 第15章 弧菌屬 第16章 螺桿菌屬和彎曲菌屬 第17章 分支桿菌屬 第18章 厭氧性細(xì)菌 第19章 棒狀桿菌屬 第20章 醫(yī)學(xué)相關(guān)的其他細(xì)菌,細(xì) 胞 壁,第十三章 球菌（coccus）,病原性球菌（pathogenic coccus）亦稱化膿性球菌 G+ 葡萄球菌、鏈球菌、肺炎鏈球菌等 G- 腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等 第一節(jié) 葡萄球菌屬 (Staphylococcus) 分布廣泛、 少數(shù)致病 人體：正常菌群成員，致病 株帶菌率20%50%（

2、70%） 一、金黃色葡萄菌(S. aureus) （一）生物學(xué)性狀 1形態(tài)染色：球形，直徑約0.8m，葡萄串狀排列的G+菌，無鞭毛，無芽胞，體外不形成莢膜,細(xì) 胞 壁,細(xì) 胞 壁,半固體體培養(yǎng)基中,2培養(yǎng)特性： 條件：營養(yǎng)一般，兼性厭O2或需O2，37，PH 7.4， 菌落：直徑約2mm，園形，有金黃色素，光滑型， 在血平板上可形成透明溶血環(huán)。,3抵抗力： 較強(qiáng): 耐干燥；耐高鹽（10-15%NaCl）;耐藥性；8030min 死亡；對(duì)消毒劑和堿性染料敏感。 4分類： 按色素及生化反應(yīng)不同：分3種 按噬菌體敏感性：分4群23型,5抗原結(jié)構(gòu)復(fù)雜，重要的有： （1）莢膜(capsule)：多糖，體

3、外培養(yǎng)少見。 （2）葡萄球菌A蛋白(staphylococcal protein A, SPA):菌體表面蛋白，可與IgG 的Fc段結(jié)合，建立協(xié)同凝集試驗(yàn)；抵抗吞噬；激活補(bǔ)體，促T、B細(xì)胞分裂，引起超敏反應(yīng)等。 （3）磷壁酸：多糖A,具粘附作用；半抗原； （4）肽聚糖：具活化補(bǔ)體、刺激熱源產(chǎn)生等活性；其抗體有促吞噬、促膿腫形成等功能。 （二）致病性與免疫性： 具多種毒力因子：表面結(jié)構(gòu)：如莢膜、肽聚糖、SPA等；酶類；毒素；,1致病物質(zhì): （1）凝固酶(coagulase) ：能使人或兔血漿發(fā)生凝固，是致病性的重要標(biāo)志。有兩種： 游離凝固酶(free coagulase) ：類似凝血酶元 結(jié)合凝

4、固酶(bound coagulase) ：纖維蛋白原受體 在機(jī)體內(nèi)凝固血漿,保護(hù)細(xì)菌，抵抗吞噬和殺菌 物質(zhì)；細(xì)菌不易擴(kuò)散，使感染局限化。,（2）葡萄球菌溶素（staphylolysin） ： 有、等，都是蛋白質(zhì)，對(duì)人致病的主要是溶素。 抗原性強(qiáng)，可被相應(yīng)抗體中和。主要損傷細(xì)胞膜，破壞紅細(xì)胞等多種組織細(xì)胞。 （3）殺白細(xì)胞素(leukocidin) ： 有F、S兩個(gè)組分，分別與細(xì)胞膜上的受體 卵磷脂和神經(jīng)節(jié)苷脂結(jié)合，改變細(xì)胞膜結(jié) 構(gòu)，破壞中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，導(dǎo)致細(xì) 胞死亡，形成膿栓，加重組織損傷。,（4）腸毒素（enterotoxin）：耐熱（100 30min）,耐蛋白酶。有A、B、C、D等

5、9個(gè)血清型，食入后引起急性胃腸炎。具有超抗原活性，激活T細(xì)胞，釋放過量細(xì)胞因子而致病。 （5）剝脫毒素（exfoliatin）：分A、B兩個(gè)血清型，與皮膚GM4樣糖脂結(jié)合，發(fā)揮絲氨酸蛋白酶功能，破壞細(xì)胞間連接，引起燙傷樣皮膚綜合征。 （6）毒性休克綜合征毒素-1（TSST-1）：由細(xì)菌染色體編碼，能引起發(fā)熱，增加對(duì)內(nèi)毒素的敏感性，發(fā)生多器官功能紊亂。,2所致疾?。?（1）侵襲性疾?。夯撔愿腥荆嗤緩角秩霗C(jī)體，導(dǎo)致多部位感染。 局部感染： 癤、癰、 毛囊炎、傷口化膿、 氣管炎、肺炎、膿胸。 全身感染：敗血癥、膿毒血癥。 （2）毒素性疾?。河赏舛舅匾?食物中毒：產(chǎn)腸毒素菌株污染食物，繁殖產(chǎn)毒，

6、食后1-6h發(fā)生急性胃腸炎（惡心、嘔吐、腹疼、腹瀉），1-2d恢復(fù)。,燙傷樣皮膚綜合征： 多見新生兒， 由剝脫毒素引起。 皮膚發(fā)生 彌慢性紅斑和水泡 毒性休克綜合癥： 由TSST-1毒素引起, 高熱，低血壓，嘔吐、 腹瀉、肌疼，皮疹，休克等。,3 免疫性 機(jī)體天然免疫力重要， 感染后建立的特異性免疫力不強(qiáng)，故可反復(fù)感染。 （三）微生物學(xué)檢查法 1標(biāo)本：從感染部位取含菌材料，如膿汁、滲出液、血液、腦脊液、糞便等 2直接涂片檢查： 制備標(biāo)本片，革蘭染色 鏡檢，觀察菌體特征。 3分離培養(yǎng)與鑒定 標(biāo)本接種血平板， 37 24h培養(yǎng)，觀察菌落特征； 致病性鑒定：金黃色素，透明溶血環(huán)，凝固酶（+），甘露醇

7、分解（+），藥物敏感試驗(yàn)等；,4腸毒素檢查： 標(biāo)本：嘔吐物，糞便、剩余食物 方法： 幼貓?jiān)囼?yàn)：培養(yǎng)濾液注射6-8周令幼貓腹腔， 若4h內(nèi)發(fā)生嘔吐、腹瀉、發(fā)熱或死亡者，可能有腸毒素。 ELISA方法：檢測標(biāo)本中腸毒素抗原； 5分子生物學(xué)方法：核糖體分型、PCR技術(shù)等，分析細(xì)菌質(zhì)粒和基因組DNA。 （五）防治原則： 一般預(yù)防： 治療：抗生素；藥物敏感試驗(yàn)。,二、凝固酶陰性葡萄球菌（coagulase- negative staphylococcus, CNS） 種類：表皮、腐生、溶血和頭葡萄球菌等10余種，是醫(yī)院感染的重要病原菌。 （一）生物學(xué)性狀 血漿凝固酶陰性，常見的是表皮葡萄球菌和腐生葡萄球

8、菌。,（二）致病性： 條件致病，在各種感染中的比例，僅次于大腸埃希菌。 致病物質(zhì)與粘質(zhì)（slime）有關(guān),可抗吞噬抗殺菌物質(zhì)。 臨床常見： 1）泌尿系感染 引起急性膀胱炎的主要病原菌； 2）敗血癥 血培養(yǎng)中常見病原菌，居第三位； 3）手術(shù)后感染 引起外科感染常見病原菌； 4）植入性醫(yī)用器械引起的感染。,耐藥譜,（三）微生物檢查法,標(biāo)本,膿汁，血液,分離培養(yǎng),凝固酶陰性 甘露醇陰性,直接涂片鏡檢,革蘭陽性葡萄球菌,生長現(xiàn)象,色素白色或檸檬色,生化反應(yīng),質(zhì)粒圖譜,（四）防治原則,防,注意 消毒隔離,防止 醫(yī)源性感染,防止 耐藥性產(chǎn)生,治,抗菌素 藥敏試驗(yàn),耐藥性轉(zhuǎn)移,第二節(jié) 鏈球菌屬 (Strep

9、tococcus),種類多，分布廣。有些為正常菌群，少數(shù)為致病菌。 醫(yī)學(xué)上重要的鏈球菌：化膿性鏈球菌、無乳鏈球菌、糞腸球菌、牛鏈球菌等（詳見教材 P190 表13-4) 一、鏈球菌的結(jié)構(gòu)和分類 （一）結(jié)構(gòu)：球形或卵圓形，鏈狀 排列，培養(yǎng)早期（2-4h）有莢膜 1. C多糖抗原：群特異性抗原 2. M 蛋 白: A群鏈球菌的 主要毒力因子 3. 其他蛋白: M樣蛋白:免疫球蛋白結(jié)合蛋白 T蛋白: 與毒力無關(guān)可用于分型,（二）分類 1.按溶血現(xiàn)象：分三類 甲型溶血性鏈球菌 (-hemolytic streptococcus) 草綠色溶血環(huán)，條件致病。 乙型溶血性鏈球菌 (-hemolytic st

10、reptococcus) 透明溶血環(huán)， 致病性強(qiáng)。 丙型鏈球菌 (-streptococcus) 無溶血環(huán)，不致病,2.按抗原結(jié)構(gòu)： C多糖抗原：分成A、B、C、20個(gè)群,對(duì)人致病者多屬A群。 表面蛋白抗原：根據(jù) M抗原不同， A群約分100個(gè)型，B群分4個(gè)型， C群分13個(gè)型。 3按生化反應(yīng)分類:肺炎鏈球菌、溶血性鏈球菌等,二、 化膿性鏈球菌 (Streptococcus pyogenes) （一）生物學(xué)性狀 1形態(tài)染色：球形或卵圓形，直徑0.6-1.0m，鏈狀排列，培養(yǎng)早期（2-4h）有莢膜。無芽胞，無鞭毛，胞壁外有菌毛樣結(jié)構(gòu)和M蛋白。,2培養(yǎng)特性： 營養(yǎng)要求高：在含血液、血清培養(yǎng)基上生長

11、良好； 菌落：灰白、光滑型，細(xì)小菌落（0.5-0.75mm） 有透明溶血環(huán)。 3生化反應(yīng)： 菊糖分解試驗(yàn)（-） 膽汁溶菌試驗(yàn)（-） 觸酶試驗(yàn)（-）,（二）致病性和免疫性 1致病物質(zhì)： (1)粘附素：脂磷壁酸（LTA）、菌毛樣結(jié)構(gòu)，屬菌體表面結(jié)構(gòu)成分。上皮細(xì)胞表面纖連蛋白（Fn）為受體，菌體表面脂磷壁酸（LTA）、 M蛋白等可與其結(jié)合，是重要的定植因子。 M蛋白：抗吞噬；為異嗜性抗原，與某些超敏反應(yīng)性疾病有關(guān)。 (2)鏈球菌溶血素(streptolysin)： 溶血素O（SLO）：溶解紅細(xì)胞，破壞白細(xì)胞和血小板，對(duì)心肌有毒害作用。對(duì)O2敏感，抗原性強(qiáng)，臨床可測定“O”抗體效價(jià)，輔助診斷風(fēng)濕熱。

12、溶血素S（SLS）：對(duì)O2穩(wěn)定，無抗原性。,(3)致熱外毒素（pyrogenic exotoxin,SPE) 又稱紅疹毒素或猩紅熱毒素，耐熱（96 45min），抗原性較強(qiáng),有A、B、C三個(gè)血清型。其中SPEA和C具有超抗原活性。 (4)侵襲性酶 都是擴(kuò)散因子 透明質(zhì)酸酶：分解組織中透明質(zhì)酸，增強(qiáng)通透性 鏈激酶（SK）：溶纖維蛋白酶，可溶解血塊； 鏈道酶（DNase ，SD）：降解膿汁中高粘度的DNA SD-SK皮試可測定細(xì)胞免疫功能 2所致疾?。和ㄟ^飛沫、直接接觸或污染物多途徑感染，引起多種疾病。,（1）化膿性感染： 淋巴管炎,淋巴結(jié)炎，蜂窩組織炎，扁桃體炎，咽峽炎，鼻竇炎，中耳炎，產(chǎn)褥熱等

13、。 壞死性筋膜炎、鏈球菌毒性休克綜合征等可引起多臟器功能衰竭等嚴(yán)重癥狀。,(2)毒素性疾?。盒杉t熱，急性呼吸道傳染病，由產(chǎn)SPE菌株所致。,(3)非化膿性感染(超敏反應(yīng)性疾病)： 風(fēng)濕熱:兒童多見,咽峽炎后發(fā)生,表現(xiàn)為多發(fā)性關(guān)節(jié)炎，心肌炎等。 急性腎小球腎炎:兒童多見，預(yù)后良好。 機(jī)理：、超敏反應(yīng)。 3免疫性： 感染后機(jī)體可獲一定的免疫力，主要增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的功能。 由于鏈球菌型別多，各型間無交叉免疫，故可反復(fù)感染。,（三）微生物學(xué)檢查法： 1涂片染色鏡檢：菌體特征 2分離培養(yǎng)：接種血瓊脂平板，菌落特征 溶血應(yīng)與葡萄球菌鑒別：觸酶試驗(yàn)（-）； 溶血應(yīng)與肺炎鏈球菌鑒別： 菊糖發(fā)酵試驗(yàn)（-），膽汁溶

14、菌試驗(yàn)（-）。 3ASO 試驗(yàn):是中和試驗(yàn)，測患者血清中抗“O”抗體，250單位左右，輔助診斷風(fēng)濕熱；400單位，活動(dòng)性風(fēng)濕熱 。 4抗DNaseB試驗(yàn)：皮膚感染，ASO不會(huì)升高；懷疑鏈球菌所致腎小球腎炎，應(yīng)作抗DNaseB試驗(yàn)。 （四）防治原則： 一般預(yù)防： 治療：應(yīng)用抗生素，青霉素G為首選.,三、肺炎鏈球菌（S.pneumoniae)：成雙排列的G+菌，尖端相背，鈍端相對(duì)，有莢膜，是細(xì)菌性肺炎的主要病原菌。 四、其他醫(yī)學(xué)相關(guān)鏈球菌 （一）草綠色鏈球菌：溶血，為口腔正常菌群 變異鏈球菌：牙菌斑、齲齒。 牛鏈球菌：偶爾引起心肌炎， 咽峽炎鏈球菌：與膿腫形成有關(guān)，特殊情況下可引起細(xì)菌性心內(nèi)膜炎。

15、 （二）無乳鏈球菌和停乳鏈球菌： 無乳鏈球菌：主要引起新生兒敗血癥，腦膜炎，肺炎，死亡率較高；也可引起皮膚感染、心內(nèi)膜炎、腎盂腎炎等； 停乳鏈球菌：引起咽喉炎、腎盂腎炎；,第三節(jié) 奈瑟菌屬（Neisseria ) 是一群革蘭陰性、有莢膜和菌毛的雙球菌，大多為正常菌群，只有淋球菌和腦膜炎球菌對(duì)人致病。 淋病奈瑟菌（ Neisseria gonorrhoeae） 淋病是淋菌性尿道炎的簡稱，為淋球菌所致的泌尿生殖系統(tǒng)的急性或慢性化膿性感染,是我國目前第一大性病。 一.生物學(xué)性狀 1腎形，直徑0.6-0.8m 常位于中性粒細(xì)胞內(nèi)，成雙 排列，無鞭毛、莢膜，有菌 毛，革蘭染色陰性。,2培養(yǎng)條件 對(duì)營養(yǎng)要

16、求高，巧克力血平板，在5-10%CO2，35培養(yǎng)48小時(shí)后，可見0.5-1mm左右的灰白色小而光滑的菌落。 3抵抗力弱，對(duì)冷、熱、干燥均敏感，對(duì)抗菌素也敏感，但易產(chǎn)生耐藥性。,4、表面抗原 1）菌毛蛋白 介導(dǎo)對(duì)非纖毛化上皮細(xì)胞粘附；抵抗中性粒細(xì)胞的殺菌作用，在細(xì)胞內(nèi)繁殖，導(dǎo)致細(xì)胞崩解； 2）外膜蛋白 介導(dǎo)細(xì)菌與精子、紅細(xì)胞、宮頸內(nèi)膜等敏感細(xì)胞的粘附，阻止吞噬溶酶體形成。 3）脂寡糖（lipooligosaccharide LOS） 由脂質(zhì)A和核心寡糖組成，具內(nèi)毒素活性。引起局部炎癥和全身反應(yīng)，導(dǎo)致粘膜糜爛脫落，形成典型的膿性分泌物。,二、致病性與免疫性 1致病物質(zhì) 菌毛蛋白、脂寡糖，Por蛋白

17、、Opa蛋白、Rmp蛋白、IgA1蛋白酶、鐵蛋白受體等。 （詳見P-198 表13-7） 2所致疾病 （1）淋病 傳染源 人是唯一宿主， 無癥狀攜帶者是主要儲(chǔ)存宿主。 傳播途徑 性接觸傳播，垂直傳播，間接傳播(女性可通過污染的衣褲、床上用品、毛巾、浴盆等傳播)。 潛 伏 期 3-5天,臨床表現(xiàn)： 局限于泌尿生殖道感染，引起尿道炎，出現(xiàn)尿痛、尿頻、尿道流膿等。 男性僅引起前尿道炎，也可擴(kuò)散引起前列腺炎，精囊炎，附睪炎，尿道球腺炎等,女性主要引起尿道炎與子宮頸炎，可擴(kuò)散引起盆腔炎，子宮內(nèi)膜炎，輸卵管炎等 ，是導(dǎo)致不育不孕原因之一。,(2)淋菌性結(jié)膜炎 （膿漏眼）新生兒產(chǎn)道 感染。 母體患有淋菌性陰

18、道炎、 子宮頸炎時(shí)，嬰兒出生時(shí) 會(huì)引起淋菌性眼炎 。 3免疫性 無天然抵抗力，多數(shù)可自愈。雖可產(chǎn)生特異抗 體，但不持久，再感染和慢性患者普遍存在。,三微生物學(xué)檢查法 1取材：泌尿生殖道膿性分泌物 2直接涂片鏡檢： 中性粒細(xì)胞內(nèi)找到革蘭陰性雙 球菌，有診斷意義。急性期陽性率可達(dá)60-95。 3.分離培養(yǎng)與鑒定： 目的做藥敏試驗(yàn) （1）用選擇培養(yǎng)基，在36，70濕度，5-10CO2環(huán)境中，培養(yǎng)24-48h觀察菌落。 （2）可根據(jù)菌落形態(tài)、革蘭染色、氧化酶試驗(yàn)和糖發(fā)酵試驗(yàn)等鑒定。 （3）慢性淋病咽部和直腸分泌物，用此法檢出率較高 4. 直接檢測 ： 采用酶免疫法(FIA)、直接免疫熒光法（DFA）、

19、PCR快速診斷.,四、防治原則 1早期診斷，盡早用藥,徹底治療。 無合并癥者，采用單次大劑量給藥方案； 有合并癥者，連續(xù)每天給藥，保證足夠治療時(shí)間；對(duì)性伴侶應(yīng)同時(shí)治療。 2新生兒 1硝酸銀或其他銀鹽溶液滴眼，防止淋菌感染。,第十四章 腸桿菌科（Snterobacteriaceae),一大群通過糞-口途徑傳播、生物學(xué)性狀近似的G-桿菌。種類繁多（30屬120種）。常寄居腸道（正常菌群；條件致病菌；少數(shù)為病原菌）。 一、腸桿菌科細(xì)菌的生物學(xué)特性 共同生物學(xué)特征： 1形態(tài)與結(jié)構(gòu)基本相似（無鑒別意義） 中等大小G-， 大多有鞭毛和菌毛， 少數(shù)有莢膜或包膜， 無芽胞,2培養(yǎng)特性基本相同（無鑒別意義） 培

20、養(yǎng)條件一般，液體培養(yǎng)基混濁生長； 菌落為中等大小、灰白、光滑型,3生化反應(yīng)活潑，但有差異（可用以鑒別） 乳糖發(fā)酵試驗(yàn) （）多為腸道非致病菌 （）多為腸道致病菌,4抗原結(jié)構(gòu)復(fù)雜： O抗原：菌體抗原 （細(xì)胞壁脂多糖） H抗原：鞭毛抗原 （鞭毛蛋白） 莢膜或包膜抗原： 如Vi、k抗原。 菌毛抗原： 5細(xì)菌素：大腸菌素、沙雷菌素等 6毒素與酶：內(nèi)毒素、外毒素 7易變異：耐藥性變異、H-O變異，S-R變異等。,二、常見腸桿菌科細(xì)菌的主要生物學(xué)性狀 （一）埃希菌屬（Escherichia) 代表菌為大腸埃希菌（正常菌群-營養(yǎng)作用，條件致病菌，某些血清型具有致病性；衛(wèi)生學(xué)檢測指標(biāo)） 1.形態(tài)結(jié)構(gòu)： 有周鞭毛

21、和菌毛， 感染菌株有包膜， 2.生化反應(yīng)： 發(fā)酵乳糖， 在鑒別培養(yǎng)基上形成有色菌落。 IMViC試驗(yàn)結(jié)果為；,3.抗原結(jié)構(gòu)： O170種，是分型的基礎(chǔ)； H56種， K100種，根據(jù)耐熱性不同，又分L（菌毛）、A（莢膜）、B（莢膜抗原）三型。 大腸埃希菌血清型表示法：按OKH排 如：O111K58(B4)H2，,(二)克雷伯菌屬、腸桿菌屬及沙雷菌屬 1、克雷伯菌屬：有5個(gè)種 肺炎克氏菌：俗稱肺炎桿菌，球桿形，無鞭毛、菌落大，呈粘液狀 2、腸桿菌屬：有11個(gè)種，周身鞭毛 3、沙雷菌屬：有6個(gè)種和一個(gè)群，有兩種色素 （三）變形桿菌屬：有4個(gè)種，多形態(tài)，運(yùn)動(dòng)活潑 遷涉生長現(xiàn)象：呈擴(kuò)散性生長，形成以接

22、種部位為中心的厚薄交替、同心圓形的波狀菌苔。 （四）枸櫞酸桿菌屬 （五）葡萄糖非發(fā)酵桿菌： 對(duì)很多抗生素具天然耐藥性,第二節(jié) 條件致病性腸道桿菌 一、條件致病性腸道桿菌的種類 主要是大腸埃希菌，其次為變形桿菌、腸桿菌屬等 二、致病機(jī)制與臨床表現(xiàn) 大腸埃希菌（E.coli) 毒力因子：內(nèi)毒素、K抗原、P菌毛、外毒素等。 1腸外感染（條件致病-寄居部位改變） 尿路感染：尿道炎、膀胱炎、腎盂腎炎等。 其 它：腹膜炎、闌尾炎、敗血癥、腦膜炎等。,2腹瀉：某些血清型引起的腸內(nèi)感染 （詳見教材 P207 表14-1） （1）腸產(chǎn)毒型大腸埃希菌（ETEC）： 引起嬰幼兒和旅游者腹瀉。致病機(jī)制： 腸毒素： 不

23、耐熱腸毒素（LT）：B亞單位與上皮細(xì)胞GM1神經(jīng)節(jié)苷脂結(jié)合,A亞單位與腺苷環(huán)化酶作用,ATP轉(zhuǎn)化cAMP,細(xì)胞分泌亢進(jìn)，導(dǎo)致腹瀉。 耐熱腸毒素（ST）：低分子多肽，激活鳥苷環(huán)化酶-胞內(nèi)cGMP增高，導(dǎo)致腹瀉。 其它：菌毛（定植因子）、LPS、K抗原等,（2）腸侵襲型大腸埃希菌（EIEC）：較少見，亦稱志賀樣大腸埃希菌。主要侵犯大兒童和成人。 致病機(jī)制：質(zhì)粒介導(dǎo)侵襲和破壞腸粘膜；內(nèi)毒素；無動(dòng)力，生化反應(yīng)和抗原結(jié)構(gòu)與志賀菌相似 （3）腸致病型大腸埃希菌（EPEC）：嬰幼兒腹瀉 致病機(jī)制：不產(chǎn)生腸毒素，質(zhì)粒介導(dǎo)（粘附素）粘附和破壞腸粘膜細(xì)胞。,（4）腸出血型大腸埃希菌（EHEC）：主要是0157:H

24、7，血性腹瀉。 致病機(jī)制：菌毛、毒素（VT）,Intimate Adherence of EHEC to Epithelial Cells,The “l(fā)ife cycle” of E. coli O157:H7,5-10% prevalence in animals 40% prevalence in farms,（5）腸集聚型大腸埃希菌（EaggEC） 嬰兒持續(xù)性腹瀉， 脫水或血便。 致病機(jī)制： 粘附素、 腸毒素（同ST）,巨噬細(xì)胞吞噬大腸埃希菌,致病性大腸桿菌引起的腹瀉,在環(huán)境和食品衛(wèi)生學(xué)上，常被用作糞便污染的檢測指標(biāo), 3個(gè)大腸菌群/1L飲水 5個(gè)大腸菌群/100ml果汁 100個(gè)細(xì)菌總

25、數(shù)/1ml飲水,衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查,大腸菌群指數(shù),每1000ml水中大腸菌群數(shù),我國飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)：,細(xì)菌總數(shù),每1ml或1g樣品中細(xì)菌總數(shù),第三節(jié) 志賀菌屬(Shigella) 俗稱痢疾桿菌(dysentery bacterium) 一、 生物學(xué)性狀 無鞭毛，有菌毛，有O、K抗原。 按O抗原分4群40余型及亞型 A群（S.dsenteriae) 痢疾志賀菌 10個(gè)型 B群(S.flexneri) 福氏志賀菌 13個(gè)型 C群(S.boydii) 鮑氏志賀菌 18個(gè)型 D群(S.sonnei) 宋內(nèi)志賀菌 1個(gè)型 二、致病性 1致病物質(zhì) （1）侵襲力：K抗原和菌毛（粘附、 穿透上皮，在固有層形成病灶

26、）,（2）內(nèi)毒素：作用于腸粘膜 提高通透性：促內(nèi)毒素吸收，引起發(fā)熱、神志障 礙、中毒性休克等全身反應(yīng)； 破壞腸粘膜： 形成炎癥、潰瘍、膿血粘液便等； 作用腸壁植物神經(jīng)：致腸功能紊亂，痙攣，腹痛、 里急后重； （3）外毒素： 僅A群型和型能產(chǎn)生，亦稱志賀 毒素（ST；VT），B亞單位與細(xì)胞糖脂受體結(jié)合，A亞單位作用60S核糖體，導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成中斷。 ST具有： 腸毒素性：類似大腸埃希菌腸毒素； 細(xì)胞毒性：對(duì)肝細(xì)胞、Vero、HeLa細(xì)胞均有毒； 神經(jīng)毒性：可引起神經(jīng)麻痹、死亡。,2所致疾?。杭?xì)菌性痢疾（菌?。?，人類易感 傳染源：病人、帶菌者 傳播途徑：糞口途徑 感染類型： （1）急性菌?。?局部

27、癥狀：膿血便、腹痛、里急后重； 全身表現(xiàn)：發(fā)熱、神志障礙、休克； 急性中毒性菌?。盒憾嘁?，無明顯的胃腸道癥狀，表現(xiàn)為全身中毒，高燒、昏迷、DIC，多器官衰竭，死亡率高 。 （2）慢性菌?。翰〕?月，局部癥狀為主。,3免疫性：病后機(jī)體建立的免疫主要為SIgA,局限、期短、型別多，故可多次發(fā)病。 三、微生物學(xué)檢查法： 1標(biāo)本：膿血便、肛拭 2分離培養(yǎng)與鑒定 標(biāo)本接種腸道鑒別（選擇）培養(yǎng)基： 37 24h培養(yǎng)，取無色、透明、小的菌落進(jìn)行系列生化反應(yīng)及血清學(xué)試驗(yàn)鑒定 3毒力試驗(yàn)Senery試驗(yàn)（致豚鼠角結(jié)膜炎）,4快速診斷法： 免疫熒光菌球法： 標(biāo)本材料接種含特異熒光抗體的液體培養(yǎng)基， 37 ，4-

28、8h,熒光鏡下檢查熒光菌球。 協(xié)同凝集試驗(yàn)：志賀菌IgG抗體+SPA菌株，患者糞便上清液加入后，觀察是否凝集，輔助診斷。 分子生物學(xué)方法(PCR,核酸雜交等查菌DNA) 四、防治： 特異性預(yù)防:口服多價(jià)Sd活疫苗； 治療：抗生素，注意多重耐藥菌株。,第三節(jié) 沙門菌屬（Salmonella) 2000種以上血清型，僅少數(shù)致?。ㄊ喾N） 一、生物學(xué)性狀： 周身鞭毛,有菌毛；生化反應(yīng)鑒定有意義 抗原結(jié)構(gòu)：O抗原：約58種,特異性差； H抗原：有兩相,I相特異性高； 表面抗原：少數(shù)菌有Vi抗原； 二、致病性 1致病物質(zhì)： （1）侵襲力： 由侵襲素基因（inv基因）介導(dǎo)，粘附和侵入腸上皮細(xì)胞(M細(xì)胞)

29、，深入固有層。 vi抗原的保護(hù)：抗吞噬、抗殺菌物質(zhì),（2）內(nèi)毒素:體溫升高，白細(xì)胞數(shù)下降等。 （3）腸毒素：鼠傷寒沙門菌等可產(chǎn)生。 2所致疾?。河兴姆N類型 （1）腸熱癥：傷寒（傷寒沙門菌），副傷寒（甲型副傷寒沙門菌、肖氏沙門菌和希氏沙門菌） 傳染源：病人、帶菌者 傳播途徑：糞一口途徑 發(fā)病過程：,病原菌食入后在腸及淋巴結(jié)中繁殖 第一次菌血癥擴(kuò)散（發(fā)熱、不適等） 侵入肝、膽、脾、腎等中繁殖 第二次菌血癥（持續(xù)高熱、肝脾腫大等） 糞便排菌（腸出血或穿孔） 尿液排菌 2-3周恢復(fù),（2）胃腸炎（食物中毒）：鼠傷寒、豬霍亂、腸炎沙門菌等，食入被污染食物，6-24h急性胃腸炎，發(fā)熱、惡心、嘔吐、腹疼、腹

30、瀉，一般2-3d自愈。嚴(yán)重者休克，腎衰死亡。 （3）敗血癥：豬霍亂沙門菌等， 病原菌經(jīng)消化道侵入血循環(huán)，敗血癥（高熱、寒戰(zhàn)、厭食、貧血等）多見兒童和免疫力低下的成人 （4）無癥狀帶菌者：傷寒副傷寒恢復(fù)后，因膽囊?guī)Ь杉S便排菌約1年。 三、免疫性： 細(xì)胞免疫是主要防御機(jī)制 體液免疫有輔助的殺菌作用,傷寒和付傷寒食物中毒敗血癥 第1周取靜脈血可疑食物 血 第1-3周取骨髓 嘔吐物 第2周起取糞、尿 糞,四、微生物學(xué)檢查,1.查抗原:,標(biāo)本,鑒別培養(yǎng)基,生化反應(yīng),血清學(xué)鑒定,雙糖鐵等,玻片凝集試驗(yàn),分離培養(yǎng)與鑒定,快速診斷: 1)協(xié)同凝集試驗(yàn)、對(duì)流免疫電泳等，檢測標(biāo)本中的可溶性抗原； 2)分子生物

31、學(xué)技術(shù),檢測標(biāo)本中的細(xì)菌抗原或細(xì)菌核酸。 2.測抗體-血清學(xué)診斷： 腸熱癥，多用肥達(dá)（Widal)試驗(yàn)，也可用間接血凝法、ELAISA等。,肥達(dá)試驗(yàn) 概念：用已知傷寒沙門菌O抗原和H抗原，以及甲型副傷寒、肖氏、希氏沙門菌H抗原的診斷菌液，與受檢者血清作試管或微孔板凝集試驗(yàn)，測定有無相應(yīng)抗體及其效價(jià)的試驗(yàn)。輔助診斷腸熱癥。 結(jié)果解釋注意事項(xiàng)： 正常值： 傷寒沙門菌O凝集效價(jià)低于1：80； H凝集效價(jià)低于1：160；副傷寒沙門菌H凝集效價(jià)低于1：80； 動(dòng)態(tài)觀察：病程中逐周復(fù)查，若效價(jià)遞增或恢復(fù)期效價(jià)比初次升高4倍者，有意義；,H與O抗體的診斷意義 O抗體IgM：出現(xiàn)早，維持約半年 H抗體IgG：

32、出現(xiàn)晚，維持?jǐn)?shù)年。 故：O，H 可輔助診斷 O，H 一般否定診斷 O，H 既往感染、預(yù)防接種，非特異回憶反應(yīng) O，H 感染早期 其它：少數(shù)腸熱病人，肥達(dá)試驗(yàn)始終正常（Ab不升高）,（4）傷寒帶菌者的檢出 查血清中Vi抗體，若效價(jià)1：10，再糞便分離培養(yǎng)沙門菌。 四、防治原則： 特異預(yù)防： 死疫苗：傷寒副傷寒三聯(lián)疫苗，皮下注射。 活疫苗： Ty21a活疫苗，口服接種。 治療：抗生素,第十五章 弧菌屬 (Vibrio),第一節(jié) 霍亂弧菌（V.cholerae) 一、生物學(xué)性狀： 1形態(tài)染色：中等大小G-弧菌，有單鞭毛和菌毛，有些有莢膜，運(yùn)動(dòng)異?；顫?。 2培養(yǎng)：營養(yǎng)要求不高 溫寬（繁殖溫度為18-3

33、7）； 嗜堿（堿性蛋白胨水，PH8.8-9.0）； 無鹽（可在無鹽環(huán)境中生長）,3抗原構(gòu)造與分型 根據(jù)O抗原分155個(gè)血清群， O1群與O139群引起霍亂 O1群：根據(jù)菌體抗原組成分三個(gè)血清型： 小川型（A、B） 稻葉型（A、C） 彥島型（A、B、C） 根據(jù)表型差異分二個(gè)生物型： 羊紅細(xì)胞溶解 雞紅細(xì)胞凝集 古典生物型： （-） （-） EL-Tor生物型： （+） （+） O139與O1群無交叉抗原，有與O1群不同的脂多糖和莢膜多糖抗原；但毒性基因、外膜蛋白等與O1群流行株相似.,4抵抗力：不強(qiáng)，對(duì)熱、酸、消毒劑敏感，但在水中存活1-3周或更久。 二、致病性與免疫性 1致病物質(zhì) （1）霍亂腸

34、毒素：由ctxA和ctxB等基因編碼，組成有： A亞單位：毒素亞單位。在細(xì)胞內(nèi)被酶解為A1和A2。A1通過活化Gs，使cAMP水平升高，致使細(xì)胞分泌亢進(jìn); B亞單位：結(jié)合亞單位，五聚體，能與小腸粘膜上皮細(xì)胞GM1神經(jīng)節(jié)苷脂受體結(jié)合。,B亞單位與小腸粘膜上皮細(xì)胞GM1神經(jīng)節(jié)苷脂受體結(jié)合,A亞單位 裂解為 A1和A2兩條多肽， A1亞單位進(jìn)入 細(xì)胞發(fā)揮毒性作用,A1活化AC，使ATP轉(zhuǎn)化成cAMP，使之在細(xì)胞內(nèi)含量增高,cAMP水平升高，導(dǎo)致腸腺上皮細(xì)胞分泌功能亢進(jìn)，大量水和電解質(zhì)在腸腔堆積，引起劇烈腹瀉。,霍亂毒素作用機(jī)制圖解,（2）鞭毛：運(yùn)動(dòng)、穿過粘液層 菌毛：粘附定植粘膜表面 相關(guān)基因有:a

35、cf基因（編碼粘附素）、 tcpA基因（編碼菌毛蛋白亞單位） 其它毒力因子： hlyA基因(編碼溶血-溶細(xì)胞蛋白） hap基因(編碼血凝素/蛋白酶，有助細(xì)菌解離） 0139群： 具有多糖莢膜和特殊LPS毒性決定簇。,2所致疾病： 霍亂系烈性腸道傳染病，是我國甲類法定傳染病。 毒素、菌體均不進(jìn)入血流，僅局部感染 傳染源：病人，無癥狀感染者 傳播途徑：糞-口途徑（水） 食入病原菌，于小腸粘膜粘附繁殖產(chǎn)毒 毒素致瀉 2-3d 腸液大量分泌，引起劇烈嘔吐、腹瀉（米泔水樣） 失水、失鹽、酸中毒、低血壓休克及腎衰， 循環(huán)衰竭，死亡率高（60%） 痊愈后可有短期帶菌,霍亂病人,3、免疫性 感染后機(jī)體可獲牢固

36、的保護(hù)性免疫力 （抗菌和抗毒素抗體） O1群與O139群無交叉免疫保護(hù) 三、微生物學(xué)檢查法 1標(biāo)本：糞便，肛拭，水樣品，置堿性保存液中 2直接鏡檢：懸滴法，運(yùn)動(dòng)迅速； 革蘭染色：G-弧菌 3分離培養(yǎng)：堿性蛋白胨水增菌 TCBS選擇培養(yǎng)基（因分解蔗糖呈黃色菌落） 生化反應(yīng)，血清學(xué)試驗(yàn)玻片凝集反應(yīng)鑒定,四、防治原則： 特異預(yù)防：O1群霍亂弧菌死疫苗； B亞單位一全菌滅活口服疫苗； 基因工程減毒活疫苗。 治 療：及時(shí)補(bǔ)充液體和電解質(zhì)、抗生素。 第二節(jié) 副溶血弧菌 主要引起食物中毒,第十六章 螺桿菌屬和彎曲菌屬 幽門螺桿菌 是慢性胃炎的主要病原體，與消化道潰瘍和胃癌的發(fā)生關(guān)系密切。它能夠抵抗胃酸,定植

37、于胃粘膜的隱窩. 空腸彎曲菌 是食源性胃腸炎的主要病原體，與肉類、牛奶的消毒處理有關(guān)，也與污染水源有關(guān)。 表現(xiàn)為急性自限性胃腸炎，有發(fā)熱，腹瀉和腹痛等臨床癥狀。 第一節(jié) 螺桿菌屬（Helicobacter) 分胃螺桿菌和腸肝螺桿菌兩大類,代表菌是幽門螺桿菌.,幽門螺桿菌（ Helicobacter pylori） 一、生物學(xué)性狀 細(xì)長彎曲呈螺形、S形或海鷗狀，在胃粘膜粘液層中呈魚群樣排列，應(yīng)用抗生素或胃粘膜病理改變后可呈球形（休眠狀態(tài)）。菌體一端或兩端有多根鞭毛，運(yùn)動(dòng)活潑，革蘭陰性。 營養(yǎng)要求高，血平板培養(yǎng)3-5天后可見細(xì)小半透明菌落,對(duì)酸耐受性強(qiáng)，適宜用-70和液氮冷凍保存。 生化反應(yīng)：脲素

38、酶、過氧化氫酶和氧化酶均呈陽性 二、致病性 感染 非常普遍，經(jīng)口感染，只能生活于胃粘膜上。 致病物質(zhì) 侵襲因子：鞭毛、菌毛和脲素酶；多種胞外酶, 外毒素： 空泡毒素A ( VacA ) 87KDa的蛋白; 細(xì)胞毒素相關(guān)毒素A ( CagA ) 128KDa的蛋白質(zhì)，抗原性強(qiáng); 均可使胃粘膜上皮細(xì)胞空泡樣變、壞死，誘發(fā)消化性潰瘍；,致病機(jī)制 引起慢性胃炎和消化性潰瘍，是多種致病因子協(xié)同作用，兩種學(xué)說： 1、漏屋學(xué)說： 毒素（脲素酶） 細(xì)胞空泡樣病變 IL-8及免疫復(fù)合物 炎癥反應(yīng) 2、胃泌素聯(lián)系學(xué)說： 微環(huán)境PH改變 胃泌素 胃酸胃蛋白酶 粘膜損傷 誘發(fā)胃癌的機(jī)制可能為： 1、感染 胃竇部粘膜損

39、傷 胃內(nèi)高PH值狀態(tài) 致癌物質(zhì)亞硝胺、亞硝基化合物合成 ； 2、激活炎癥反應(yīng) 多種細(xì)胞因子、自由基等釋放 細(xì)胞基因組 DNA分子斷裂突變 細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化。,胃粘膜破壞,三、微生物學(xué)檢查法 1標(biāo)本 組織活檢標(biāo)本 2快速診斷方法有： 直接涂片鏡檢； 快速脲素酶分解試驗(yàn)； 檢測抗幽門螺桿菌抗體與抗脲素酶抗體； 分子生物學(xué)技術(shù)檢測幽門螺桿菌； 尿素呼吸試驗(yàn)。 四、防治原則 1疫苗正在研究，可能有預(yù)防和治療雙重作用。 2治療 采用以膠體、抑酸劑為基礎(chǔ)，再加抗生素的三聯(lián)療法，療程二周。,第二節(jié) 彎曲菌屬（Campylodacter) 彎曲狀的革蘭陰性菌，空腸彎曲菌（C.jiejuni)感染較常見，是全球性引

40、起胃腸道感染的病原體之一，也可引起腸外感染。 一、生物學(xué)性狀 菌體兩端尖，呈弧形、螺旋形或海鷗形，有極鞭毛，運(yùn)動(dòng)活潑；生化反應(yīng)不活潑，抵抗力較弱。,二、致病性和免疫性 傳染源：動(dòng)物及禽類；傳播途徑：糞-口途徑； 致病物質(zhì)：鞭毛、菌毛； 內(nèi)毒素、外毒素（類似霍亂毒素）； 所致疾?。函d攣性腹痛，腹瀉，血便，有發(fā)熱、頭痛等癥狀，免疫力低下的人可引起菌血癥和敗血癥，甚至引起心、腦、肺等多種臟器的損傷。 三、微生物學(xué)檢查法 1、直接涂片鏡檢 弧形或海鷗形、革蘭陰性；懸滴法：魚群樣螺旋式運(yùn)動(dòng)； 2、分離培養(yǎng) 含多粘菌素和萬古霉素的選擇培養(yǎng)基； 3、血清學(xué)檢測 間接凝集試驗(yàn)； 4、分子生物學(xué)方法 斑點(diǎn)雜交法

41、。 四、防治原則 管水、管糞、管污染食物,第十七章 分枝桿菌屬（Mycobacterium),主要有：結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群 非結(jié)核分枝桿菌 麻風(fēng)分枝桿菌 特點(diǎn)：1.專性需氧，營養(yǎng)要求高，生長緩慢； 2.菌體含脂量高，無鞭毛、芽胞，不產(chǎn)生內(nèi)、外毒素 ； 3.含大量分枝菌酸，一般不易著色；具有抗酸特性亦稱抗酸桿菌（acid-fast bacilli)； 4.引起疾病呈慢性，并伴有肉芽腫。,第一節(jié) 結(jié)核分枝桿菌 (Mycobacterium tuberculosis) 一、生物學(xué)性狀 1形態(tài)染色： 細(xì)長微彎有分枝的G+桿菌,菌體胞壁含脂量高（占干重60%），大量分枝菌酸(mycolil acid)包繞

42、肽聚糖，影響染料穿入。 抗酸染色：菌體紅色；其它蘭色。 L型細(xì)菌（Much顆粒）：呈顆粒狀或絲狀； 異煙肼影響分枝菌酸合成抗酸染色轉(zhuǎn)陰性。,結(jié)核分枝桿菌抗酸染色,2培養(yǎng)特性： 專性需O2，營養(yǎng)要求高，pH6.47.0，37，生長緩慢; 常用羅氏培養(yǎng)基,3-4周,形成顆粒狀、“菜花狀”菌落；液體培養(yǎng)基中生長迅速，1-2周，分離陽性率高。,3生化反應(yīng)： 不發(fā)酵糖類。 熱觸酶試驗(yàn)陰性（與非結(jié)核分枝桿菌鑒別） 4抵抗力：耐干燥，耐酸堿，耐染料 對(duì)濕熱、紫外線和常用消毒劑敏感 對(duì)鏈霉素、異煙肼、利福平、吡嗪酰胺等藥物敏感 5變異性：易發(fā)生變異，類型較多 形態(tài)變異：細(xì)菌L型 毒力變異：卡介苗研制 耐藥性變

43、異：多重耐藥菌株，發(fā)生原因有： 原發(fā)性耐藥：自發(fā)突變。 繼發(fā)性耐藥：用藥不當(dāng)，經(jīng)突變選擇產(chǎn)生。,二、致病性和免疫性 結(jié)核分枝桿菌既不產(chǎn)生內(nèi)外毒素，又無侵襲力，與致病性相關(guān)的因素可能是： 細(xì)菌在組織細(xì)胞內(nèi)大量繁殖引起炎癥反應(yīng)； 菌體成分和代謝產(chǎn)物的毒性作用； 機(jī)體對(duì)菌成分產(chǎn)生的免疫病理損傷作用； 1致病物質(zhì) （1）脂質(zhì)：與細(xì)菌毒力有關(guān)，有 索狀因子：與毒力密切相關(guān)，破壞細(xì)胞線粒體，抑制白細(xì)胞游走，引起慢性肉芽腫。 磷脂：促使單核細(xì)胞增生，形成結(jié)核結(jié)節(jié)。 蠟質(zhì)D：具佐劑作用，誘發(fā)遲發(fā)型超敏反應(yīng) 硫酸腦苷酯：導(dǎo)致不完全吞噬，胞內(nèi)寄生特性；,（2）蛋白質(zhì)：結(jié)核菌素是主要成分，與蠟質(zhì)D結(jié)合，激發(fā)遲發(fā)型超

44、敏反應(yīng)。 （3）多糖：引起局部病灶的細(xì)胞浸潤。 （4）分枝桿菌生長素：對(duì)鐵有親和力，與宿主競爭鐵 2致病機(jī)制：結(jié)核病人群易感；多途徑侵入（呼吸道、消化道、皮膚損傷）；引起多種組織器官的病變；肺部感染肺結(jié)核，最常見。 （1）細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)：CD4細(xì)胞致敏后，可產(chǎn)生多種淋巴因子，激活巨噬細(xì)胞，可有效殺滅細(xì)菌，宿主免于發(fā)病或趨于康復(fù)。 （2）遲發(fā)型超敏反應(yīng)：T細(xì)胞介導(dǎo)，巨噬細(xì)胞為效應(yīng)細(xì)胞，針對(duì)細(xì)菌的超常反應(yīng)。引起細(xì)胞壞死，形成空洞，細(xì)菌易大量繁殖并擴(kuò)散。 這兩種免疫反應(yīng)的強(qiáng)弱，決定了感染的結(jié)果和預(yù)后。,特點(diǎn)： 原發(fā)結(jié)核(peimary tuberculosis)：感染率高，多見于兒童，特點(diǎn)： 易

45、擴(kuò)散：淋巴肺門淋巴結(jié)腫大；氣管粟粒性肺結(jié)核，少數(shù)發(fā)展為活動(dòng)性肺結(jié)核或其它部位結(jié)核病。 易痊愈：90%以上形成纖維組織、鈣化，不治自愈； 原發(fā)后結(jié)核（post- peimary tuberculosis )：多見于成人，由外源性或內(nèi)源性感染所致， 特點(diǎn)： 機(jī)體已有特異性免疫力，免疫保護(hù)和變態(tài)反應(yīng)共存，故病灶多局限，也可形成空洞，病程較長。,肺外感染 結(jié)核桿菌經(jīng)血擴(kuò)散，引起腦、腎、骨關(guān)節(jié)等結(jié)核； 痰菌咽下，可引起腸結(jié)核，結(jié)核性腹膜炎等； 擴(kuò)散感染的多為細(xì)菌L型。 3免疫性： 以細(xì)胞免疫為主，屬感染免疫（有菌免疫） 免疫保護(hù)與超敏反應(yīng)同時(shí)存在。 免疫保護(hù)：核糖體RNA誘導(dǎo) 遲發(fā)型超敏反應(yīng)：結(jié)核菌素蛋

46、白和蠟質(zhì)D誘導(dǎo),5結(jié)核菌素試驗(yàn)：是應(yīng)用結(jié)核菌素進(jìn)行皮膚試驗(yàn)，來測定機(jī)體對(duì)結(jié)核分枝桿菌是否引起超敏反應(yīng)的一種試驗(yàn)。其原理是型超敏反應(yīng)。 制劑：純蛋白衍化物（PPD），有兩種 PPD-C（結(jié)核分枝桿菌制成） BCG-PPD（卡介苗制成） 方法：2種PPD各5單位分別注射兩前臂皮內(nèi)， 48-72 小時(shí)后觀察，局部紅腫硬結(jié)直徑。 意義： 5mm 陽性 15mm 強(qiáng)陽性 輔助臨床診斷感染 若PPD-C側(cè)紅腫大，為感染， 若BCG-PPD側(cè)紅腫大，為BCG接種所致 5mm 陰性 但應(yīng)考慮以下情況,感染初期 老年人 嚴(yán)重病人或有其它傳染病 獲得性細(xì)胞免疫功能低下（可用PHA皮試確定，排除假陰性） 三、微生物

47、學(xué)檢查法 1標(biāo)本：根據(jù)感染部位，取痰、尿、糞、腦脊液、胸水、腹水等 2染色鏡檢： 直接或濃縮集菌后涂片： 抗酸染色法，IK法染色（顯示L型）， 金胺染色（金黃色熒光菌體）,3濃縮集菌： 可提高檢出率 直接離心沉淀濃縮：胸水、腹水、腦脊液 4%NaOH處理后再離心沉淀濃縮: 痰、糞、膿 4分離培養(yǎng) 標(biāo)本處理（4% NaOH處理15min) 接種培養(yǎng)基 37，2-4周培養(yǎng) 涂片染色鏡檢、生化反應(yīng)、藥敏試驗(yàn)等,5動(dòng)物試驗(yàn)： 材料注射豚鼠，3-4周后觀察淋巴結(jié)腫大，肝、肺部病灶。 6快速診斷 多聚酶鏈反應(yīng)（PCR）鑒定細(xì)菌DNA 核酸探針雜交技術(shù) 五、防治原則： 預(yù)防接種： 新生兒接種卡介苗 ； 發(fā)現(xiàn)

48、和治療痰菌陽性者，控制結(jié)核??； 治療原則：早期、聯(lián)合、規(guī)則、足量、全程用藥。 常用鏈霉素、異煙肼、利福平、乙胺丁醇等。,第十八章 厭氧性細(xì)菌（anaerobic bacteira),第一節(jié) 厭氧芽胞梭菌（Clostridum) 破傷風(fēng)梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌和艱難梭菌 破傷風(fēng)梭菌（C.tetani) 一、生物學(xué)性狀： 細(xì)長G+桿菌，有周身鞭毛 和芽胞（園、比菌體粗、 位于頂端，呈鼓槌狀），無莢膜； 芽胞抵抗力強(qiáng)。100 1h被 殺，土壤和灰塵中可存活數(shù)年。,專性厭氧培養(yǎng)，菌落呈菌膜狀爬行生長物，有溶血；液體培養(yǎng)基中混濁變黑。,二、致病性與免疫性 1感染條件：芽胞 + 缺氧傷口， 發(fā)芽繁殖產(chǎn)

49、毒致病， 2致病物質(zhì) 破傷風(fēng)溶血毒素（tetanolysin): 作用尚不清楚 破傷風(fēng)痙攣毒素（tetanospasmin)： 由大質(zhì)粒編碼，毒素對(duì)脊髓前角細(xì)胞和腦干細(xì)胞有高度的親和力，毒性極強(qiáng)（1ug)，不耐熱，可被蛋白酶破壞。 組成有：,B鏈（重鏈）：結(jié)合神經(jīng)細(xì)胞、運(yùn)轉(zhuǎn)毒素分子。 與運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元外胞質(zhì)膜上受體結(jié)合；毒素細(xì)胞小泡運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元傳入神經(jīng)末梢中樞神經(jīng)系統(tǒng)；重鏈N端膜轉(zhuǎn)位輕鏈胞質(zhì)。 A鏈（輕鏈）：毒性部分，為鋅內(nèi)肽酶。 裂解儲(chǔ)存有抑制性神經(jīng)介質(zhì)（r-氨基丁酸、甘氨酸）小泡上膜蛋白特異性肽鍵，阻止抑制性神經(jīng)介質(zhì)的釋放，使運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元持續(xù)興奮，導(dǎo)致骨骼肌強(qiáng)烈痙攣。肌肉活動(dòng)的興奮與抑制失調(diào)，屈肌

50、、伸肌同時(shí)收縮，出現(xiàn)破傷風(fēng)癥狀。,3所致疾?。?破傷風(fēng)表現(xiàn)為肌肉麻痹性痙攣，咀嚼肌痙攣（苦笑面容、牙關(guān)緊閉），頸及背肌持續(xù)痙攣（角弓反張、四肢痙攣），呼吸肌痙攣（窒息死亡，死亡率20%）。,4免疫性： 屬外毒素免疫，抗毒素發(fā)揮中和作用， 致病毒素量微少，不足以引起免疫，故病后不會(huì)獲得牢固免疫力。 三、微生物學(xué)檢查法： 一般不作,四、防治原則： 1、特異預(yù)防：人工主動(dòng)免疫，注射白百破三聯(lián)疫苗；對(duì)軍人和易受創(chuàng)傷人員注射破傷風(fēng)類毒素； 2、緊急預(yù)防： 正確處理傷口，清創(chuàng)擴(kuò)創(chuàng)； 人工被動(dòng)免疫，注射破傷風(fēng)抗毒素（TAT），1500-3000 單位，同時(shí)注射類毒素做主動(dòng)免疫； 3、特異性治療： 大劑量破傷

51、風(fēng)抗毒素： “早期、足量（10-20萬單位） 防過敏” 抗生素：四環(huán)素，紅霉素等,第二節(jié) 無芽胞厭氧菌 種類多，包括G+和G-的球菌和桿菌 人體正常菌群中占絕對(duì)優(yōu)勢 一、主要與感染相關(guān)的種類 G-桿菌：脆弱類桿菌；G-球菌：韋榮菌； G+球菌：消化鏈球菌；G+桿菌：雙歧桿菌 二、致病性 1、致病條件 條件致病菌，混合感染多見。 2、細(xì)菌毒力 侵襲力，毒素和SOD 3、感染特征 1）內(nèi)源感染，多呈慢性過程 2）無特定病型，大多為化膿性感染 3）分泌物或膿液粘稠，有惡臭,4）用氨基糖苷類抗生素（鏈、卡那、慶大霉素）無效 5）普通培養(yǎng)無菌生長 4、所致疾病： 1）腹腔感染 2）女性生殖道和盆腔感染

52、3）口腔與牙齒感染 4）呼吸道感染 5）敗血癥 6）中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染：腦膿腫等 三、微生物學(xué)檢查法 標(biāo)本可直接涂片鏡檢或用厭氧培養(yǎng)并鑒定 四、防治原則 破壞厭氧環(huán)境，正確選用抗生素,第十九章 棒狀桿菌屬,菌體一端或兩端膨大呈棒狀的G+ 桿菌，柵欄狀排列， 無莢膜、鞭毛，不產(chǎn)生芽胞，有異染顆粒。 白喉棒狀桿菌是重要的致病菌。 一、生物學(xué)性狀 1形態(tài)染色： 細(xì)長微彎G+棒狀桿菌，常呈V、L狀。 有異染顆粒： 美蘭染色顆粒深染 奈瑟染色菌體黃褐，顆粒蘭黑 2培養(yǎng)特性： 營養(yǎng)要求高，常用呂氏血清培養(yǎng)基。 亞碲酸鉀鑒別培養(yǎng)基菌落呈黑色（輕型）,3抵抗力：對(duì)濕熱抵抗力不強(qiáng)，但耐冷耐干燥，在普通環(huán)境中存活數(shù)

53、天-數(shù)周,對(duì)消毒劑,抗生素敏感。 二、致病性 1致病物質(zhì)白喉外毒素：毒性強(qiáng)、抗原性強(qiáng)。 由-棒狀噬菌體的毒素基因（tox）編碼， 溶原有-棒狀噬菌體的白喉?xiàng)U菌能產(chǎn)生外毒素 A片段 穩(wěn)定、耐熱、耐蛋白酶作用，是毒性功能區(qū)；進(jìn)入細(xì)胞后，可滅活細(xì)胞延伸因子（EF-2），阻斷蛋白質(zhì)合成，引起組織壞死和病變。 B片段 不穩(wěn)定，對(duì)酸敏感，有兩個(gè)功能區(qū)： 受體結(jié)合區(qū)：與易感細(xì)胞結(jié)合（心肌和神經(jīng)細(xì)胞），轉(zhuǎn)位區(qū)：使A片段進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)中。,2所致疾病：白喉 傳染源：病人，帶菌者 傳播途徑：呼吸道吸入（飛沫、污染物品） 發(fā)病機(jī)理： 病原菌 吸入 鼻咽喉粘膜上繁殖、產(chǎn)毒 外毒素作用： 局部：滲出性炎癥，形成灰白色假膜

54、全身：中毒癥狀(心肌炎、軟腭麻痹、聲音嘶啞、 腎上腺功能障礙等),白喉假膜,三、免疫性 主要是外毒素免疫，產(chǎn)生的抗毒素可中和外毒素, 病后、隱性感染或預(yù)防接種后，均可獲得特異性免疫力。 錫克氏試驗(yàn)： 四、微生物學(xué)檢查法 1標(biāo)本：咽喉假膜部位棉拭 2直接涂片鏡檢： 美蘭染色菌體及排列特征。 奈瑟染色異染顆粒。 3分離培養(yǎng)： 呂氏血清斜面增菌培養(yǎng)，進(jìn)一步檢查 亞碲酸鉀培養(yǎng)基黑色菌落。,4毒力試驗(yàn)： 體外法：瓊脂ELeK平板法： 協(xié)同凝集試驗(yàn)：檢測標(biāo)本中外毒素抗原 體內(nèi)法：動(dòng)物（豚鼠）檢測細(xì)菌產(chǎn)生的外毒素 五、防治原則： 1、人工主動(dòng)免疫：特異性預(yù)防 接種白喉類毒素（白百破三聯(lián)疫苗） 2、人工被動(dòng)免疫：緊急預(yù)防 注射白喉抗毒素，作皮試 3、治療： 抗生素： 青霉素，紅霉素 白喉抗毒素：“早期、 足量（2-10萬單位） 、防過敏”,第二十章 醫(yī)學(xué)相關(guān)的其他細(xì)菌,假單胞菌屬:銅綠假單胞菌; 軍團(tuán)菌屬:嗜血軍團(tuán)菌； 芽胞桿菌屬:炭疽芽胞桿菌；布氏菌屬：布氏菌； 嗜血桿菌屬:流感嗜血桿菌；耶爾森菌屬:鼠疫耶氏菌 第一節(jié) 假單胞菌屬 (Pseudomonas) 已發(fā)現(xiàn)200多種，其中銅綠假單胞（P.aeruginosa） 為臨床常見病原菌。 1882年從臨床膿液標(biāo)本中 分離到,因其能產(chǎn)生綠色水 溶性色素，故膿液呈綠色, 俗稱綠膿桿菌.,廣泛存在于水、土壤