1、.幾種干細胞的研究進展（文獻綜述）朱芳芳09 級生科 2班 40908104【摘要】 干細胞是一類具有自我復(fù)制能力的多潛能細胞，在一定條件下，它可以分化成多種功能細胞。 根據(jù)干細胞所處的發(fā)育階段分為胚胎干細胞和成體干細胞。 根據(jù)干細胞的發(fā)育潛能分為三類： 全能干細胞、多能干細胞和單能干細胞。干細胞是一種未充分分化，尚不成熟的細胞， 具有再生各種組織器官和人體的潛在功能， 醫(yī)學(xué)界稱為“萬用細胞 ”。 由于干細胞具有可塑性 , 可用于治療各種外傷、病理損傷、組織缺陷性疾病、 免疫缺陷性疾病和遺傳疾病等 , 可用于各種醫(yī)學(xué)實驗 , 幾乎涉及所有醫(yī)學(xué)范疇 , 具有廣闊發(fā)展前景?！娟P(guān)鍵詞】 胰腺干細胞

2、人胚胎干細胞 神經(jīng)干細胞 細胞培養(yǎng) 臨床應(yīng)用20 世紀是生命科學(xué)發(fā)展最為迅猛的時代 ,它已成為自然科學(xué)中最引人注目的領(lǐng)域。 1998 年美國兩個實驗室分別報告了人胚胎干細胞 (embryonic stem cell ,ES 細胞 ) 和胚胎生殖細胞 (embryonic germcell , EG細胞 ) 建系成功。 ES 細胞是人體內(nèi)最原始的細胞,它具有較強的再生能力 ,在干細胞因子和多種白細胞介素的聯(lián)合作用下可擴增出各類細胞 ,分離、保存并在體外人工大量培養(yǎng)使之成為各種組織和【 1、 2】器官已成為干細胞研究的首要課題。.1. 胰腺干細胞的研究及發(fā)展1. 1 人類胰腺干細胞的分化和起源 對

3、人類而言 ,胚胎胰腺的發(fā)育起源于內(nèi)胚層兩個的原基背側(cè)和腹側(cè)原基 , 背側(cè)的原基是由前腸膨部分化而成 , 于胚胎第 26 天出現(xiàn) ; 腹側(cè)的原基則由膽十二指腸原基的膽管凸部分化而成 , 在28 31 天出現(xiàn) ; 41 天以后 , 較大的背側(cè)和腹側(cè)原基漸漸融合生長 , 形成胰腺的雛形 , 逐漸發(fā)育為分泌導(dǎo)管及沿其排列的腺泡及管道 , 其后腹側(cè)原基形成成型胰腺的胰頭(包括鉤突 ) ,【 3】背側(cè)原基則發(fā)育為胰體和胰尾。1. 2 胰腺胚胎干細胞的分離和培養(yǎng) 目前對于胰腺胚胎干細胞的分離培養(yǎng) , 主要有酶消化法、懸浮培養(yǎng)法和氣液界面培養(yǎng)法等。但最常用和效果較好的為酶消化法 , 它獲取的細胞數(shù)比其他的方法

4、要多 , 而且對細胞的破壞較小。將獲取的胚胎胰腺組織剪成小塊, 用膠原酶 A消化分離 30 60 分鐘 (于 37) 后, 用Hank s 液沖洗幾次 (于4) ,再經(jīng)過高速離心 , 即可獲取胰腺上皮細胞, 將之置于培養(yǎng)基中進行培【 4】養(yǎng)擴增。1. 3胰腺胚胎干細胞的展望 胰腺干細胞的巨大潛能 , 為臨床上治療糖尿病展示了一個美好的前景 , 但仍需充分了解胰腺干細胞的特性 ,關(guān)鍵環(huán)節(jié)在于突破胰腺干細胞的標志物, 它是了解細胞生物學(xué)的通道。胰腺干細胞作為供移植替換受損的胰島組織的能力是無限的, 但在臨床運用前如何控制其定向分化、基因修飾和選擇、 提純等是廣泛開展的重要前提 ; 另在臨床運用后如

5、何防止移植的干細胞形成胚胎組織瘤 , 也是需進一步研討的內(nèi)容。總之, 胰腺干細胞對人類發(fā)育生.物學(xué)的基礎(chǔ)研究和臨床醫(yī)學(xué)都具有相當重要的意義, 如果一旦攻克胰腺干細胞這個難題 , 將會在內(nèi)分泌界及糖尿病的治療上產(chǎn)生一次【 4】重大革命。2. 胚胎干細胞的研究及發(fā)展2. 1人類胚胎干細胞的來源 主要有 : (1) 從人類胚胎的囊胚期內(nèi)細胞群中直接分離多能干細胞 1 ; (2) 從終止妊娠的胎兒組織中分離出多能干細胞 2 ; (3) 體細胞核轉(zhuǎn)移 。2. 2人胚胎干細胞系的建立1989 年 Prea 嘗試從人畸胎瘤分離 ES細胞 ,初步證明了人 ES 細胞系建立的可能性。 1998 年Thomson

6、 領(lǐng)導(dǎo)的小組將合法獲得的體外受精的人早期胚胎在體外培養(yǎng)至囊胚期,利用免疫外科手術(shù)去除透明帶,以抗 BeWO 細胞的單抗作免疫標記 ,剔除外層細胞 ,以35Gy射線照射小鼠胚胎成纖維細胞作飼養(yǎng)層,以DMEM+胎牛血清 + 谷氨酰胺 + 巰基乙醇 +非必需氨基酸作為培養(yǎng)液 ,體外培養(yǎng)人囊胚內(nèi)細胞群 ,915d 后將長出的細胞團吹散或者用胰酶或 EDTA 消化 ,然后繼續(xù)在小鼠滋養(yǎng)層細胞上生長 ,挑選具有均一的未分化形態(tài)的單克隆細胞團 ,吹散成 50100 個細胞的小團后再行培養(yǎng) ,如此重復(fù)直至成系。2. 3人類胚胎干細胞的應(yīng)用前景 (1) 細胞、組織修復(fù)和移植治療 :這里胚胎干細胞的定向分化是關(guān)鍵

7、 ,還要解決有關(guān)免疫學(xué)障礙問題或直接應(yīng)用核移植工程來制備帶有患者自己基因組的 ES細胞 ; (2) 基因治療:這將涉及干細胞的轉(zhuǎn)基因操作和適當分化載體細胞的選擇 ,通過基因打靶、突變和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)制作各種實驗?zāi)Ｐ?,研究發(fā)育、腫瘤、.免疫以及人類遺傳病的有關(guān)問題; (3) 藥物毒理試驗 : ES/ EBs及其分化細胞都可作為有關(guān)藥物的針對性篩選系統(tǒng)。能:許多細胞譜系分化中的調(diào)控因子就是通過這種手段證明的?！?】3. 神經(jīng)干細胞研究的研究及發(fā)展3. 1 神經(jīng)干細胞的分布及培養(yǎng)神經(jīng)管形成以前 , 在整個神經(jīng)板檢測到神經(jīng)干細胞的選擇性標記物神經(jīng)巢蛋白(nestin),是細胞的【 6】骨架蛋白。 構(gòu)成

8、小鼠神經(jīng)板的細胞 , 具有高效形成神經(jīng)球的能力。但目前尚不能肯定神經(jīng)板與神經(jīng)干細胞是否具有相同的誘導(dǎo)機制。 神經(jīng)管形成后 , 神經(jīng)干細胞位于神經(jīng)管的腦室壁周邊。 關(guān)于成腦神經(jīng)干細胞的分布 , 研究顯示成年嗅球、皮層、室管膜層或者室管膜下層、紋狀體、海馬的齒狀回顆粒細胞下層等腦組織中分布著神經(jīng)干細胞。研究發(fā)現(xiàn)脊髓、隔區(qū)也分離出神經(jīng)干細胞, 這些研究表明 , 神經(jīng)干細【 7】胞廣泛存在于神經(jīng)系統(tǒng)。 在中央管周圍的神經(jīng)干細胞培養(yǎng)后亦可形成神經(jīng)球并產(chǎn)生神經(jīng)元。3. 2 神經(jīng)干細胞的應(yīng)用展望 目前神經(jīng)干細胞的來源、 分離、培養(yǎng)及鑒定還有許多工作要做, 神經(jīng)干細胞誘導(dǎo)、分化及遷移機制有待進一【 8】步研究

9、。通過細胞培養(yǎng)技術(shù)及基因組的研究, 如DNA微列陣技術(shù) ,進一步明確成體神經(jīng)干細胞的確切位置, 可以設(shè)計藥物特異性地激活這些細胞。進一步認識神經(jīng)干細胞的本質(zhì)和控制分化基因, 通過調(diào)控靶基因 , 可以從神經(jīng)干細胞誘導(dǎo)產(chǎn)生特定的分化細胞來滿足各種需要。橫向分化的發(fā)現(xiàn)對神經(jīng)干細胞的研究和應(yīng)用具有重要意義,人們可望從自體中分離誘導(dǎo)出神經(jīng)干細胞, 有可能解決神經(jīng)干細胞.【 9】的來源問題?？傊?, 神經(jīng)干細胞的應(yīng)用將有廣闊的前景。參考文獻：【 1】 O Rah illy R, et al. 2nd edn. W iley2L iss, N ew Yo rk,1996.【2】 黎靖中圖分類號 : R322

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