1、中藥制劑的檢查,中藥制劑的檢查,制劑通則檢查 一般雜質(zhì)檢查 特殊雜質(zhì)檢查 微生物限度檢查,中藥制劑雜質(zhì)的檢查,雜質(zhì)指能危害人體健康或影響藥物質(zhì)量的物質(zhì)，可分為一般雜質(zhì)和特殊雜質(zhì)。 一般雜質(zhì)：指在藥材的采集、收購、加工以及制劑的生產(chǎn)或貯存過程中引入的雜質(zhì)，如酸、堿、水分、氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬、砷鹽等，其檢測方法在藥典附錄中均有規(guī)定。 特殊雜質(zhì)：指在制劑的生產(chǎn)和貯存過程中，根據(jù)其來源、生產(chǎn)工藝及藥品的性質(zhì)引入的雜質(zhì)。,雜質(zhì)來源,由中藥材的原料中帶入。 在生產(chǎn)制備過程中帶入。 貯存過程中受外界條件的影響而使中藥制劑的理化性質(zhì)改變而產(chǎn)生。,雜質(zhì)的限量檢查,雜質(zhì)限量是指藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量

2、，通常用百分之幾或百萬分之幾來表示。 如制川烏中要求含酯型生物堿以烏頭堿計不得過0.15% 。 許多中藥制劑中要求重金屬小于10ppm，砷鹽小于2ppm。,雜質(zhì)限量檢查方式,同純物質(zhì)或?qū)φ掌放渲瞥傻娜芤罕容^反應(yīng)結(jié)果（納氏比色管） 觀察供試液有無正反應(yīng),雜質(zhì)限量計算方法,限量檢查法：取一定量與被檢雜質(zhì)相同的純物質(zhì)或其他對照品配制成標(biāo)準(zhǔn)溶液，與一定量供試藥物的溶液，在相同處理條件下，比較反應(yīng)結(jié)果，從而確定雜質(zhì)限量是否超過規(guī)定。,阿膠砷鹽檢查,取本品2克，加氫氧化鈣1克，混合，加少量水，攪勻，干燥后先用小火燒灼使炭化，再在500600熾灼使完全灰化，放冷，加鹽酸3ml與適量的水使溶解成30ml，分取

3、溶液10ml，加鹽酸4ml與水14ml，依法檢查砷鹽。如果標(biāo)準(zhǔn)砷溶液（每1ml相當(dāng)于1ug的砷）取用量為2ml。 求砷鹽的限量？,對有些制劑進(jìn)行雜質(zhì)檢查，不用標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行對比，而是在供試品溶液中加入試劑，在一定反應(yīng)條件下，觀察有無正反應(yīng)出現(xiàn)，即從該測定條件下的反應(yīng)靈敏度來控制雜質(zhì)限量。 如肉桂油中重金屬檢查：取肉桂油10ml，加水10ml與鹽酸1滴，振搖后，通硫化氫氣體使飽和，水層與油層均不得變色。,一般雜質(zhì)檢查方法,重金屬檢查法 重金屬是指在實驗條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯色的金屬雜質(zhì)。包括Ag+、Cu2+、Pb2+等十幾種金屬離子，由于在藥品生產(chǎn)中遇到鉛的機(jī)會較多，而且鉛易積蓄中毒，

4、故檢查時以鉛為代表。,基本原理,在弱酸性條件下，硫代乙酰胺發(fā)生水解，產(chǎn)生硫化氫，可與重金屬離子生成有色硫化物的均勻混懸液。 反應(yīng)式： 在堿性條件下，硫化鈉與重金屬離子作用生成不溶性硫化物。,檢查方法,可分為四種檢查方法 第一法適用于供試品不經(jīng)有機(jī)破壞，在酸性溶液中顯色的重金屬限量檢查； 第二法適用于供試品需經(jīng)有機(jī)破壞后，在酸性溶液中顯色的重金屬限量檢查 ； 第三法適用于檢查能溶于堿而不溶于稀酸（或在稀酸中即生成沉淀）的藥品中的重金屬檢查 ； 第四法適用于有色溶液或重金屬限量低的品種；,第一法,取25ml納氏比色管兩支，甲管中加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量與醋酸鹽緩沖液2ml后，加水或各藥品項下規(guī)定的溶劑稀

5、釋成25ml，乙管中加入按各藥品項下規(guī)定的方法制成的供試品溶液25ml；再在甲乙兩管中分別加硫代乙酰胺試液各2ml，搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，乙管中顯出的顏色與甲管比較，不得更深。,第二法,取供試品一定量，緩緩熾灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.51.0ml，使洽濕潤，用低溫加熱至硫酸除盡后，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸氣除盡后，放冷，在500600熾灼至完全灰化，放冷，加鹽酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨試液至對酚酞指示液顯中性，再加醋酸鹽緩沖液2ml，微熱溶解后，移置納氏比色管中，加水稀釋成25ml；另取配制供試品溶液的試劑，置瓷皿中蒸干后，加醋酸鹽緩沖液2

6、ml與水15ml，微熱溶解后，移置納氏比色管中，加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量，再用水稀釋成25ml；照第一法檢查，即得。,第三法,取供試品適量，加氫氧化鈉試液5ml與水20ml溶解后，置納氏比色管中，加硫化鈉試液5滴，搖勻，與一定量的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液同樣處理后的顏色比較，不得更深。,注意事項,方法靈敏度：標(biāo)準(zhǔn)鉛液的用量以20g（相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液2ml）時加硫代乙酰胺試液后所顯顏色最適合目視法觀察。小于10g或大于30g，呈色太淺或太深均不利于目視比較。 反應(yīng)條件：硫代乙酰胺試液與重金屬反應(yīng)的最佳pH值是3.5，硫代乙酰胺試液加入量以2ml時呈色最深，最佳顯色時間為2分鐘。,供試液有顏色時的處理：供試品在加硫代

7、乙酰胺試液以前如帶色，可用稀焦糖液調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)溶液，使兩者顏色一致，而后加入硫代乙酰胺試液。若滴加稀焦糖溶液，仍不能使顏色一致，可加其他對測定無干擾的試液來調(diào)色。 中藥制劑中重金屬檢查的前處理：先將藥品灼燒破壞，使有機(jī)物分子中的重金屬游離，灼燒溫度控制在500600。,砷鹽檢查法,指用于藥品中微量砷（以As計算）限量檢查的方法。 中國藥典規(guī)定方法 古蔡法 二乙基二硫代氨基甲酸銀法,古蔡法 基本原理 采用鋅和酸作用所產(chǎn)生的初生態(tài)氫與供試品中微量砷鹽化合物反應(yīng)生成揮發(fā)性砷化氫，再與溴化汞試紙作用生成黃色至棕色的砷斑，再比較供試品與標(biāo)準(zhǔn)砷溶液在同一條件下所顯的砷斑的顏色的深淺，以確定供試品的含砷限度。,

8、反應(yīng)式,產(chǎn)生的砷化氫與溴化汞試紙作用,（黃色）,（棕色）,注意事項,方法靈敏度：反應(yīng)靈敏度約為（以As計），中國藥典規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)砷斑為2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液（相當(dāng)于2gAs）所形成的色斑，此濃度得到的砷斑色度適中，清晰，便于辯認(rèn)。 反應(yīng)液的酸度：反應(yīng)液的酸度相當(dāng)于2mol/L的鹽酸液。 反應(yīng)溫度和時間：溫度控制在2540，時間為45分鐘。,鋅粒的影響：鋅粒的大小影響反應(yīng)速度，選擇2mm左右的鋅粒較為適宜。 汞試紙的選擇：選用質(zhì)量較好、組織疏松的中速定量濾紙，溴化汞試紙宜新鮮配制。 醋酸鉛棉花的作用：供試品和鋅粒中可能含有少量的硫化物，在酸性溶液中產(chǎn)生氣體，干擾實驗，故需采用醋酸鉛棉花吸收除去。,中藥制劑

9、中砷鹽檢查的前處理：中藥材及中藥制劑在檢查砷鹽時需先進(jìn)行有機(jī)破壞，將結(jié)合態(tài)的砷轉(zhuǎn)化為游離態(tài)的砷，常用的方法有酸破壞法、堿破壞法、直接炭化法等。,舉例,取三批樣品各10片，研細(xì)，稱取1g，分別加入氫氧化鈣0.5g，混勻，加水少量攪勻，置水浴上蒸干后，先用小火燒灼使炭化，在500600熾灼至完全炭化，放冷，加鹽酸2ml使殘渣溶解，將溶液轉(zhuǎn)移至A瓶中，另取水21ml洗滌坩堝，洗液并入A瓶，加鹽酸5ml ，依法檢查（中國藥典2005年版一部附錄IXF）。對照的標(biāo)準(zhǔn)砷溶液也同法進(jìn)行有機(jī)破壞后再制備標(biāo)準(zhǔn)砷斑。,二乙基二硫代氨基甲酸銀法（Ag-DDC法）,基本原理 利用金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫，與藥品中

10、的微量亞砷酸鹽反應(yīng)生成具有揮發(fā)性的砷化氫，用二乙基二硫代氨基甲酸銀溶液吸收，使之還原生成紅色膠態(tài)銀，與同條件下一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液所產(chǎn)生的紅色膠態(tài)銀在510nm處測吸光度，進(jìn)行比較。,注意事項,有機(jī)堿液的選擇：需加入一定量的有機(jī)堿以中和反應(yīng)中的二乙基二硫代氨基甲酸，中國藥典有機(jī)堿采用三乙胺。 反應(yīng)的溫度和時間：在2540水浴中反應(yīng)45分鐘為宜。,鐵鹽檢查法,硫氰酸鹽法 巰基醋酸法,硫氰酸鹽法,原理：利用硫氰酸鹽在酸性溶液中與Fe3+生成紅色可溶性硫氰酸鐵的配位離子，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液用同法處理后所顯顏色進(jìn)行比較 。,注意事項,方法靈敏度：溶液中含F(xiàn)e3+為2050g時，色澤梯度明顯易于區(qū)別，低于或

11、高于時，色澤太深或太淺，均不利于比較。 加入稀鹽酸的目的：在中性和堿性溶液中， Fe3+水解形成棕色的水合羥基鐵離子或紅棕色的氫氧化鐵沉淀，故反應(yīng)應(yīng)在酸性溶液中進(jìn)行。 加入過硫酸銨的目的：它是一種氧化劑可氧化供試品中的Fe2+成Fe3+ ，同時可防止由于光線使硫氰酸鐵還原或分解褪色。 光線和溫度影響顏色的穩(wěn)定性：光線強(qiáng)或溫度高均使得硫氰酸鐵還原或分解褪色。,巰基醋酸法,基本原理 利用巰基醋酸與Fe3+作用，巰基醋酸還原Fe3+為Fe2+，在氨堿性溶液中作用生成紅色配位化合物，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液經(jīng)同法處理后產(chǎn)生的顏色進(jìn)行比較。,硫酸鹽檢查法,基本原理 利用硫酸鹽與氯化鋇在酸性溶液中作用，生成硫酸

12、鋇的白色渾濁液，與一定量的標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液與氯化鋇在同一條件下生成的渾濁比較。,氯化物檢查法,基本原理 利用氯化物在硝酸酸性溶液中與硝酸銀試液作用，生成氯化銀的白色渾濁液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液在相同條件下生成的氯化銀渾濁液比較，判斷是否超過了限量。,干燥失重測定法,干燥失重是指藥品在規(guī)定的條件下，經(jīng)干燥后所減失的重量，主要是指水分、結(jié)晶水，也包括其他揮發(fā)性的物質(zhì)如乙醇等。由于這些物質(zhì)的存在，會引起藥品的水解或發(fā)霉變質(zhì)，而使藥品失效。因此要進(jìn)行干燥失重或水分的測定。,檢查方法,常壓恒溫干燥法：又叫烘干法，是指將樣品放在烘箱中，在規(guī)定溫度下進(jìn)行干燥，適用于受熱較穩(wěn)定中藥制劑的測定。 干燥劑干燥法：

13、適用于受熱易分解或揮發(fā)的供試品檢查。常用的干燥劑有：變色硅膠、五氧化二磷、硫酸。 減壓干燥法：適用于熔點(diǎn)低、受熱不穩(wěn)定及較難趕除水分的供試品檢查。 熱分析法：是測定物質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)與溫度關(guān)系的一類儀器分析方法。常用的有熱重分析法、差熱分析法、差示掃描量熱法等。,注意事項,供試品的顆粒大小一般在2mm以下。 一般供試品的取樣量約為1g。 供試品的厚度不可超過5mm，如為疏松物質(zhì)，厚度不可超過10mm。 每次干燥后應(yīng)先置干燥器內(nèi)放冷至室溫，然后稱定重量。 恒重系指供試品連續(xù)2次干燥后的重量差異在0.3mg以下，干燥至恒重的第2次及以后各次的稱重均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)干燥1h后進(jìn)行。,水分測定,測定

14、方法 烘干法 甲苯法 減壓干燥法 氣相色譜法,烘干法,定義：適用于不含或含少量揮發(fā)性成分的藥品。 測定方法：取供試品25g平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中，厚度不超過5mm，疏松樣品不超過10mm，精密稱定，打開瓶蓋，在100105干燥5小時，將瓶蓋蓋好，移置干燥器中，冷卻30分鐘，精密稱定重量，再在上述溫度干燥1小時，冷卻，稱重，至連續(xù)兩次稱重的差異不超過5mg為止。根據(jù)減失的重量，計算供試品中含水量。,甲苯法：適用于含揮發(fā)性成分的藥品。 減壓干燥法：適用于含有揮發(fā)性成分的貴重藥品。 氣相色譜法：適用于中藥制劑中微量水分的精密測定。,熾灼殘渣檢查法,熾灼殘渣：中藥中的有機(jī)物經(jīng)熾灼炭化，再加硫酸

15、濕潤，加熱使硫酸蒸氣除盡后，于高溫（700800）熾灼至完全炭化，使有機(jī)質(zhì)破壞分解變?yōu)閾]發(fā)性物質(zhì)逸出，殘留的非揮發(fā)性無機(jī)雜質(zhì)成為硫酸鹽，稱為熾灼殘渣。,注意事項,取樣量應(yīng)根據(jù)熾灼殘渣限量來決定。 加熱時，必須先用小火加熱，切不可直接大火加熱。 如需將殘渣留作重金屬檢查，則熾灼溫度必須控制在500600。 具有揮發(fā)性的無機(jī)成分中藥受熱揮發(fā)或分解，殘留非揮發(fā)性雜質(zhì)，也可用熾灼殘渣法檢查。,灰分測定法,總灰分：中藥經(jīng)粉碎后加熱，高溫?zé)胱浦粱曳?，則其細(xì)胞組織及其內(nèi)含物成為灰燼而殘留，由此所得的灰分為“生理灰分”即總灰分。 規(guī)定中藥的總灰分限度，對于保證中藥的品質(zhì)和潔凈程度，有一定意義。,酸不溶性灰分：

16、中藥經(jīng)高溫?zé)胱频玫降目偦曳旨欲}酸處理，得到不溶于鹽酸的灰分。 由于在酸中鈣鹽等無機(jī)物可溶而泥土、砂石等不溶解，因此酸不溶性灰分的測定對于那些生理灰分本身差異較大，特別是在組織中含有草酸鈣較多的中藥，能更準(zhǔn)確的表明其中泥土砂石等雜質(zhì)的摻雜含量。,特殊雜質(zhì)的檢查方法,西洋參中人參的檢查：這二種參為同屬不同種，前者補(bǔ)氣養(yǎng)陰，清熱生津，用于氣虛陰虧，內(nèi)熱，咳喘痰血；后者具大補(bǔ)元?dú)猓瑥?fù)脈固脫，補(bǔ)脾益肺，生津安神的功效，用于體虛欲脫，肢冷微脈，脾虛食少，肺虛咳喘，心力衰竭，心源性休克等。兩者功效主治完全不同，加之前者的價格為后者的幾倍，故需進(jìn)行檢查。兩者雖然都含有皂苷，但種類和數(shù)量都有差別，利用此差別對其

17、進(jìn)行鑒別。,土大黃苷的檢查：正品大黃中主要含蒽苷及苷元，含少量的土大黃苷及其苷元。土大黃苷為二苯乙烯的衍生物。劣等大黃中的土大黃苷含量高，因此土大黃苷成為大黃的物殊雜質(zhì)，許多國家的藥典規(guī)定大黃中不得檢出土大黃苷，2005年版中國藥典對大黃藥材及其制劑也規(guī)定檢查土大黃苷。,烏頭酯型生物堿的檢查,烏頭中的雙酯型生物堿（如烏頭堿）毒性大，是烏頭有大毒的主要成分，因此要對烏頭及其制劑進(jìn)行酯型生物堿的檢查。常用的有比色法和薄層層析法。 比色法：利用雙酯型生物堿在堿性條件下與鹽酸羥胺反應(yīng)生成異羥肟酸，再與Fe3+反應(yīng)，生成紅色的異羥肟酸鐵，520nm波長處有特征吸收，因此在此波長測定吸收，從而算出濃度而控

18、制川烏的毒性成分含量。,比色法-制川烏中酯型生物堿的檢查,對照品溶液的制備：精密稱取烏頭堿對照品20mg，置10ml量瓶中，加無水乙醇溶解并稀釋至刻度。 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：精密量取對照液溶液0、0.25、0.50、1.0、1.5、2.0、2.5ml，分別置25ml量瓶中，均加無水乙醇使成2.5ml，各精密加入堿性鹽酸羥胺試液1.5ml，搖勻，在6065水浴中保溫10分鐘，放冷，加高氯酸鐵試液13ml，搖勻，放置5分鐘，精密加入高氯酸試液8ml，用高氯酸鐵試液稀釋至刻度，搖勻，放置15分鐘，以第一份為空白，照中國藥典分光光度法在520nm的波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。,測定法,取制川烏粉約10g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加乙醚50ml與氨試液4ml，密塞搖勻，放置過夜，濾過，藥渣加乙醚50ml，連續(xù)振搖1小時，濾過，藥渣再用乙醚洗滌34次，每次15ml，濾過，洗液與濾液合并，低溫蒸干。殘渣加氯仿2ml使溶解，轉(zhuǎn)入分液漏斗中，用氯仿3ml分次洗滌容器，洗液并入分液漏斗中，用硫酸液（0.05mol/l）提取3次，每次5ml，酸液依次用同一氯仿10ml振搖洗滌，合并酸