臨床檢驗基礎(chǔ),胃液及十二指腸引流液的檢驗,要求：1、了解胃液和十二指腸引流液的含義，標(biāo)本的采集、適應(yīng)癥與禁忌癥2、熟悉檢驗的項目、檢驗方法及臨床意義,第一節(jié)胃液檢驗,一、胃液成分胃液（Gastricjuice）是胃粘膜各種不同細胞所分泌的消化液。純凈的胃液是一種無色透明的酸性液體。主要成份有鹽酸，各種酶，粘液，內(nèi)因子，電解質(zhì)及一些肽類激素等。,1、鹽酸（hydrochloric）：由壁細胞所分泌，其主要功能是激活胃蛋白酶原轉(zhuǎn)化為胃蛋白酶，消化蛋白質(zhì)，鹽酸還能抑菌，殺菌，促進胰液分泌和有助于鈣鐵的吸收。2、胃蛋白酶（pepsin）：由主細胞分泌，是胃液內(nèi)最主要的消化酶，其含量代表胃液的消化能力。3、粘液（mucus）：由胃粘膜表面上皮細胞和粘液細胞所分泌，其主要功能是形成粘液屏障，保護胃粘膜免受酸、胃蛋白酶及其他有害物質(zhì)的損傷等。4、碳酸氫鹽：由粘液細胞所分泌，構(gòu)成覆蓋于胃壁表面的粘液碳酸氫鹽屏障，對胃粘膜起保護作用。,5、內(nèi)因子（intrinsicfactor）：胃粘膜分泌的一種糖蛋白，其主要功能是促進腸道對VitB12的吸收，內(nèi)因子缺乏可引起惡性貧血。6、胃泌素（gastrin）：由胃粘膜G細胞分泌，其主要作用是促進胃酸分泌。還有刺激胃蛋白酶和內(nèi)因子分泌及營養(yǎng)胃腸粘膜的作用。7、前列腺素（PG）：人體胃腸組織均能合成PG，以胃粘膜最豐富。PG能防止胃內(nèi)有害物質(zhì)對粘膜的損傷及整體性刺激對胃粘膜的傷害。,胃液成分極其復(fù)雜，除以上成分外，還有許多電解質(zhì)和非消化酶等，如乳酸脫氫酶（LDH）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、堿性磷酸酶（ALP）等。除胃粘膜分泌的物質(zhì)外，還有少量唾液中的物質(zhì)如淀粉酶等。若有十二指腸液，胃液中還可出現(xiàn)膽汁酸等。,二、胃液檢查的適應(yīng)癥與禁忌癥1、胃液檢查的適應(yīng)癥有：（1）疑有低胃酸分泌或無胃酸分泌的疾病，如惡性貧血，胃粘膜巨大肥厚癥等、血管活性腸肽瘤等。（2）疑有高胃酸分泌的疾病，如胃沁素瘤等。（3）用胰島素試驗迷走神經(jīng)切除術(shù)的可能性。（4）確定有無胃液潴留并測定胃排空速度。（5）觀察某些藥物的治療效果。（6）決定胃潰瘍手術(shù)的方式等。,2、胃液檢查的禁忌癥有：（1）食管V曲張，食管狹窄，食管腫瘤等；（2）嚴(yán)重心臟病，高血壓，主動脈瘤等；（3）休克或妊娠晚期；（4）胃大出血患者。,三、胃液標(biāo)本的采集一般由臨床醫(yī)師或有經(jīng)驗的護士采集。采用插胃管法，檢驗前12小時禁食，禁水和禁服抗酸分泌的藥物，插管成功后抽胃液，連續(xù)抽小時的胃液，全部作為空腹胃液送檢，然后再給五肽胃泌素刺激劑連續(xù)采胃液小時，（每分鐘留一份，共份）用于測MAO與PAO。,四、胃液的檢驗主要包括理學(xué)檢查，化學(xué)檢查及顯微鏡檢查（一）理學(xué)檢查：包括量，色，粘液，氣味，食物殘渣，組織碎片，PH,分層等。1、量正常情況下日分泌量為2.53.0L，夜間400500ml，空腹F為1.21.5L、正常空腹12h的胃液殘余量約50ml，正?；A(chǔ)胃液量為10100ml。1）、大于100ml為胃液增多，見于十二指腸。胃泌素瘤；幽門梗阻，胃蠕動功能減退；十二指腸液反流等。2）、小于10ml為胃液減低，主要見于萎縮性胃炎或胃蠕動功能亢進。,2、顏色正常胃液為無色透明液體或略帶乳白色，含液及粘液多時可呈灰白色有膽汁返流液時呈黃綠色，見于幽門關(guān)閉不全或十二指腸狹窄，紅色表示有鮮血，少量紅色絲多由插管或抽吸時損傷粘膜所致咖啡渣樣則為胃癌，胃潰瘍及胃炎等病的陳舊性出血,粘液正常胃液有少量分布均勻的粘液若出現(xiàn)大量粘液提示胃有炎癥，特別是慢性胃炎4氣味正常胃液可略帶酸味。5食物殘渣正常胃液在小時后胃內(nèi)無食物殘渣若有食物殘渣或呈食糜樣，表示胃蠕動功能減退，幽門狹窄或梗阻，胃擴張，胃下垂等引起的胃排空延長，有胃滯留,6組織碎片正常胃液中無組織碎片，若出現(xiàn)組織碎片可見于胃癌，胃潰瘍患者7PH值正常為.，PH.為低酸，PH.為無酸）胃酸減低見于萎縮性胃炎，胃癌，繼發(fā)性IDA胃擴張，甲亢等）胃酸增多：見于十二指腸球部潰瘍，胃泌素瘤，幽門梗阻，慢性膽囊炎等,8分層正常分兩層，上層為粘液，下層為胃液病理時則下層混濁不清或有食物殘渣及其他可見成分于下層,（二）化學(xué)檢查,檢查的項目很多，常做的有：胃酸分泌量測定，尿素測定，乳酸測定等，胃酸分泌測定五太泌素法檢測BAO,PAO和MAOBAO為刺激前的基礎(chǔ)胃酸分泌量MAO為最大胃酸分泌量（為注射五肽胃泌素后的次胃酸分泌量的總和）,PAO為高峰胃酸分泌量（為兩次最高胃酸分泌量之和的倍）參考值：BAO(3.9+-1.98)mmol/lMAO(323)mmol/lPAO(20.6+-8.37)mmol/lBAO/MAO=0.2,臨床意義：）胃酸分泌增多見于十二指腸潰瘍，胃泌素瘤）胃酸分泌減低見于胃潰瘍，胃炎，胃癌，惡性貧血等,尿素測定原理：幽門螺旋桿菌是人胃內(nèi)唯一產(chǎn)生大量尿素酶的細菌，而尿素酶非胃粘膜本身所固有，它可分解尿素（urea），故尿素測定是檢查胃內(nèi)有無HP感染的方法之一。乳酸測定FeCl3法參考值陰性臨床意義：用于觀察胃內(nèi)食物滯留及協(xié)助診斷胃癌,隱血試驗參考值：陰性膽汁檢查參考值：陰性,（三）顯微鏡檢查,吸取胃液沉淀物鏡檢，必要時染色鏡檢，鏡檢內(nèi)容同糞便檢查臨床意義,第二節(jié)十二指腸引流液檢查,十二指腸引流液（duodenalfluiddrainge）包括十二指腸液（D液）、膽總管液（A膽汁）、膽囊液（B膽汁）和肝膽總管液（C膽液）；實際上，是十二指腸液、胰液、膽汁、少量胃液的混合物。,檢查的適應(yīng)癥有：1）疑有肝膽系統(tǒng)感染者；2）疑有傷寒帶菌者；3）檢查胰腺外分泌功能者；4）疑有腫瘤時進行細胞學(xué)檢查者；5）低張十二指腸X線造影者。檢查的禁忌癥：同胃液檢查,標(biāo)本采集空腹12小時狀態(tài)下，插入十二指腸引流管采集，盡量避免胃液的影響。插管成功后首先引流出D液，然后給予330g/L溫硫酸鎂刺激Oddi括約肌使之松弛，依次引流出A膽汁，B膽汁和C膽汁，采集D、A、B、C液后立即送檢。,檢查內(nèi)容：理學(xué)檢查、顯微鏡檢查、化學(xué)檢查、細菌學(xué)檢查,理學(xué)檢查,正常人十二指腸引流液的理學(xué)特性,1、膽汁排出異常1）無任何膽汁排出；2）無B膽汁排出；3）B膽汁流出增多。,2、膽汁粘稠度異常引流出異常粘稠膽汁，多見于膽石癥；引流出稀薄膽汁，多見于慢性膽囊炎。,3、膽汁透明度異常膽汁混濁：見于大量胃液混入。出現(xiàn)較多絮狀物：見于十二指腸炎、膽管炎、膽結(jié)石、消化性潰瘍、胰頭癌等。4、顆粒沉淀物和膽砂見于膽石癥,5、顏色異常1）出現(xiàn)血絲：多因插管損傷。2）血性：見于急性十二指腸炎癥、消化性潰瘍，膽囊癌等。3）污穢陳舊血塊：見于膽囊癌。4）白色：粘液增多所致。5）膿性：見于化膿性膽囊炎。6）綠色或黑褐色：見于膽管擴張伴感染或膽石癥。,顯微鏡檢查,由于胰酶有迅速消化和破壞細胞的作用，因此，最好在引流液中加入40%甲醛溶液68滴以固定其細胞形態(tài)直接將標(biāo)本沉渣涂片或者離心沉淀涂片鏡檢,一、細胞類：1）紅細胞；2）白細胞；3）上皮細胞；4）腫瘤細胞；,二、結(jié)晶正常無結(jié)晶膽石癥時可出現(xiàn)相應(yīng)的結(jié)晶：常見為膽固醇結(jié)晶、膽紅素結(jié)晶和膽紅素鈣結(jié)晶等。三、粘液正常引流液中可有少量粘液：粘液增多可見于十二指腸卡他性炎癥和膽管炎。,四、病原體1、寄生蟲及蟲卵：病理下常在B膽汁中發(fā)現(xiàn)藍氏賈第鞭毛蟲滋養(yǎng)體、華支睪吸蟲卵、鉤蟲卵、蛔蟲卵、糞圓線蟲蚴蟲、阿米巴滋養(yǎng)體等。2、細菌：正常膽汁中無細菌。膽管感染的主要致病菌是革蘭氏陰性桿菌，也可有混合感染。常用的檢查方法有直接涂片法和培養(yǎng)法。,化學(xué)檢查,主要是對胰腺外分泌功能進行檢查，為促胰酶素促胰液素試驗。檢查原理：給患者注射促胰酶素和促胰液素，通過十二指腸引流管采集胰液，檢查胰液流出量，胰液中HCO3濃度和淀粉酶的排出量用于評價胰腺的外分泌功能。,參考值：1）胰液流出量：70230ml/h。2）最高HCO3濃度：70125ml/L。3）淀粉酶：8807400U/kg體重。,臨床應(yīng)用,1、協(xié)助診斷某些寄生蟲病2、判斷膽石性質(zhì)3、診斷傷寒帶菌者4、診斷胰腺疾病。,精液和前列腺液的檢驗,要求：.了解精液、前列腺液的含義、成分、標(biāo)本的采集、檢驗項目及目的。2.熟悉精液、前列腺液常規(guī)檢驗的項目、方法及臨床意義。,第一節(jié)精液檢驗,一.精液檢驗標(biāo)本采集（一）采集方法.手淫法.體外排精法（二）注意事項.標(biāo)本采集的時機.標(biāo)本采集的次數(shù).標(biāo)本轉(zhuǎn)運.不完整的精液標(biāo)本不宜進行精液分析,二、精液常規(guī)檢驗主要項目：理學(xué)檢查（顏色、量、液化時間、粘稠度、）；鏡檢（精子活率、精子活力、精子密度、精子形態(tài)檢查、其它細胞、病原體等）。,（一）理學(xué)檢查外觀和氣味正常剛射出的精液有一股腥味，呈乳白色或灰白色精液量精液液化精子粘稠度,（二）顯微鏡檢查精子活力分析）精子活動率檢查精子活動率（）活動精子數(shù)（活動精子數(shù)不活動精子數(shù)）*）精子活動力檢查級不活動，死精子級活動不良，活動遲鈍，原地轉(zhuǎn)動級活動較好，精子活動，但方向不定,級活動良好，精子呈直線運動正常精液于排精后小時級活動精子，若級和級的精子視為異常精子密度與精子總數(shù)檢查）粗略估計法,）精子計數(shù)原理試劑操作計算精子數(shù)個中方格的精子數(shù)稀釋倍數(shù)精子總數(shù)：精子密度精液量（ml）臨床意義參考值：正常精子密度（）一次精子總數(shù)為（）,.精子形態(tài)學(xué)檢查正常精子（見圖）異常精子（見圖）未成熟的生殖細胞（見示意圖）.其他細胞：、腫瘤,三.精子穿透試驗.體內(nèi)穿透試驗.體外穿透試驗四.化學(xué)檢查精液中某些生化指標(biāo)的改變對男性病的診斷及治療有主要意義如、精子頂體酶、Zn、精漿檸檬酸、精漿果糖等。,五.免疫學(xué)檢查近年來免疫學(xué)檢查迅速發(fā)展，如：.抗精子抗體（AsAb）：混合抗免疫球蛋白試驗（MAR）免疫珠試驗精子凝集試驗.精漿免疫抑制物質(zhì).精漿免疫球蛋白測定,六.微生物學(xué)檢查.細菌.支原體.病毒.原蟲七.精子分析系統(tǒng),第二節(jié)前列腺液檢查,前列腺液為前列腺外分泌功能分泌的前列腺液占精液的，為乳白色液體。前列腺液的主要成份：電解質(zhì)、酶、免疫物質(zhì)、有形成份及其他一些物質(zhì)。檢查目的：用于慢性前列腺炎、病原性微生物及性傳播疾病的診斷。,一.標(biāo)本的采集二.理學(xué)檢查量、色、粘稠度、三.鏡檢.直接涂片鏡檢卵磷脂小體血細胞,）上皮前列腺顆粒細胞淀粉樣體精子結(jié)石其他,.涂片染色鏡檢腫瘤細胞檢查細菌學(xué)檢查四.化學(xué)檢查五.微生物學(xué)檢查細菌培養(yǎng)六.小結(jié),陰道分泌物及羊水的檢查,要求：1、了解陰道分泌物（白帶）及羊水的概念及及標(biāo)本的采集。2、掌握陰道分泌物常規(guī)檢查的項目、方法及結(jié)果報告與臨床意義。3、了解羊水檢驗的內(nèi)容及臨床意義。,第一節(jié)、陰道分泌物檢查,陰道分泌物（Vaginaldischarge）是女性生殖系統(tǒng)分泌的液體，主要由聯(lián)接關(guān)系粘膜，宮頸腺體，前庭大腺及子宮內(nèi)膜的分泌物混合而成，俗稱“白帶”（Leucorrhea)。,陰道結(jié)構(gòu)與功能：1、新生兒到青春期；2、青春期后；3、幼女期、絕經(jīng)期。標(biāo)本的采集：通常由婦產(chǎn)科醫(yī)師采集檢查的主要項目：一般性狀檢查、清潔度、寄生蟲、微生物等。,（一）、一般性狀檢查：正常陰道分泌物為白色稀糊狀，無氣味、量多少不等。異常的有下列情況：1、大量無色透明粘性白帶；2、膿性白帶3、豆腐渣樣白帶；4、血性白帶；5、黃色水樣白帶；6、奶油狀白帶。,（二）清潔度檢查：陰道清潔度（cleaningdegree）是根據(jù)高倍鏡下所見的上皮細胞、白細胞（或膿細胞）、陰道桿菌與雜菌的數(shù)量判斷劃分清潔度為IIV級。參考值：I、II度（無致病菌和特殊細胞）,臨床意義：（三）寄生蟲檢查1、直接涂片檢查：多見TV，其他：阿米巴、絲蟲。2、乳膠凝集試驗。,（四）微生物學(xué)檢查1、真菌2、淋病奈瑟菌3、陰道加德納菌4、衣原體5、梅毒螺旋體6、其他細菌：杜克雷嗜血桿菌、杜諾凡菌7、病毒（1）、單純皰疹病毒（HSV）（2）、人巨細胞病毒（HCMV）（3）、人乳頭狀病毒（HPV）,五、小結(jié),第二節(jié)羊水檢驗,一、概論：羊水：為婦女妊娠期間羊膜腔中的液體。1、羊水的來源：主要是由母體血漿通過胎膜進入羊膜腔的漏出液，亦有少量由胎兒皮膚透析而來。2、羊水的代謝：母體胎兒羊水間不斷進行液體交換，使羊水量保持相對恒定，羊水每3h可更新一次。,3、羊水量：隨胎齡而增加。妊娠8W時為510ml；12W：50ml；16W:150250ml；20W:300400ml；3638W：8001200ml；以后逐漸減少，足月時為500800ml。,4、羊水成分：羊水中，水分占9899%，12%是溶質(zhì)，其中半數(shù)是有機物和無機鹽，尚有少量為WBC和上皮細胞。5、羊水檢驗的目的（臨床應(yīng)用）,6、適應(yīng)癥1）高危妊娠有引產(chǎn)指征，需了解胎兒成熟度及測定胎盤功能，以選擇分娩的有利時機，降低圍產(chǎn)兒的死亡率。2）既往有多次原因不明的流產(chǎn)，早產(chǎn)或死胎，疑有胎兒遺傳性疾病者。3）需除外染色體異常者。4）性連鎖遺傳病攜帶者需確定胎兒性別時。5）身經(jīng)百戰(zhàn)有母兒血型不合，需檢查羊水中血型物質(zhì)及膽紅素，確定治療措施及判斷預(yù)后。,6）妊娠早期接受過大劑量電離輻射或患過嚴(yán)重病毒感染性疾病。7）檢查胎兒有無宮內(nèi)感染。7、標(biāo)本的采集：由婦產(chǎn)科醫(yī)師采集，一般選擇妊娠1620W經(jīng)羊膜穿刺，抽取羊水2030ml送檢。,二、羊水的理學(xué)檢查1、一般性狀正常為無色透明或淡黃液體。2、比密及pH。3、滲透壓及粘度。4、量。參考值：（1）B型超聲探測法AFV7cm為羊水過多AFI18cm為羊水過多（2）直接法和間接法妊娠16W時約為250ml妊娠晚期約1000ml,臨床意義：1、羊水過多見于：（1）胎兒畸形（2）胎兒臍帶病變（3）孕婦及胎兒各種疾?。?）多胎妊娠（5）特發(fā)性羊水多,2、羊水過少見于：（1）胎兒畸形；（2）過期妊娠；（3）胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩,三、羊水的化學(xué)檢查1、電解質(zhì)：K+、Na+、Cl-、Ca2+、Mg2+。2、有機成份：蛋白、脂肪、膽紅素、葡萄糖、代謝產(chǎn)物、AFP、酶類、激素等。四、羊水細胞1、胎膜的細胞2、胎兒表皮脫落細胞,五、胎兒成熟度檢查胎兒成熟度檢查的主要方法是通過檢測羊水中某種成份的消長來平價相關(guān)器官的功能狀況。（一）肺成熟度的檢查1.羊水泡沫試驗2.薄層色譜法3.磷脂酰甘油測定4.羊水吸光度測定5.熒光偏振微粘度測定,臨床意義檢查胎兒肺成熟對診斷新生兒特發(fā)性呼吸宭迫綜合征（IRDS）有重要價值。（二）腎成熟度檢查1.羊水肌酐測定參考值：176.8mol/L表示胎兒腎成熟131.7mol/L表示腎未成熟臨床意義羊水肌酐是一項反映胎兒腎成熟度的可靠指標(biāo)。,2.羊水葡萄糖測定參考值：0.56，提示胎兒腎發(fā)育成熟。0.80，提示胎兒腎未發(fā)育成熟。臨床意義羊水葡萄糖（AFG）主要來源于母體血漿，部分來自胎尿。測定AFG可以反映胎兒腎發(fā)育情況。（三）肝成熟度檢查羊水中膽紅素濃度與肝酶系統(tǒng)發(fā)育成熟有關(guān)，可用分光光度計直接檢測羊水中膽紅素。,參考值：4500.04，提示胎兒肝未發(fā)育成熟。臨床意義檢測羊水膽紅素作為判斷胎兒肝成熟度的一個指標(biāo)，還可以還可以輔助診斷胎兒溶血及評估溶血進展情況，為臨床處置提供依據(jù)。,（四）皮膚成熟度檢查計數(shù)羊水中脂肪細胞的百分率可作為胎兒皮膚成熟度的指標(biāo)。將羊水沉淀物用硫酸化羅藍染色，鏡檢脂肪細胞的出現(xiàn)率。參考值：脂肪細胞百分率20%，提示胎兒皮膚成熟，10%，為胎兒皮膚未成熟。臨床意義羊水中的脂肪細胞，來自胎兒皮膚腺及汗腺的脫落細胞，可作為評價胎兒皮膚成熟度的指標(biāo)。,（五）唾液腺成熟度檢查羊水中唾液腺型淀粉酶活性在妊娠36周后顯著增高，其活性反映胎兒唾液腺成熟程度。參考值：120，為成熟臨床意義羊水中唾液腺型淀粉酶活性快速增高，妊娠36周后其活性顯著上升?？勺鳛榕袛嗵和僖合俪墒斓闹笜?biāo)。,六先天性遺傳性疾病產(chǎn)前診斷（一）產(chǎn)前診斷和疾病種類1.產(chǎn)前診斷2.產(chǎn)前診斷疾病的種類1）染色體病2）單基因遺傳病3）多基因遺傳病,（二）染色體核型分析將羊水細胞進行染色體培養(yǎng)及核型分析。（三）先天性遺傳性疾病產(chǎn)前診斷1.性連鎖遺傳病1）羊水細胞性染色體檢查2）性別基因診斷2.神經(jīng)管缺陷1）AFP測定2）羊水總膽堿脂酶測定(TCHE)3）羊水中真性膽堿酶測定(ACHE),3.粘多糖沉積病1）甲苯胺藍定性試驗2）糖醛酸定性試驗4.胰腺纖維囊性變1）r-GT2）ALP5.羊水細胞內(nèi)酶分析,6.分子生物學(xué)技術(shù)在產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用1）核酸分子雜交法點雜交印跡雜交：限制酶圖譜法、核苷酸直接探測法、限制內(nèi)徹酶片斷長度多太性連鎖法。2）PCR小結(jié),痰液和支氣管肺泡灌洗液檢驗要求：1.了解痰標(biāo)本采集的主要方法，實驗室的內(nèi)容。2.熟悉理學(xué)檢查、顯微鏡檢查的項目及臨床意義。,第一節(jié)痰液檢查痰(sputum)是氣管和肺的分泌物。痰液檢查項目：一般性狀檢查、顯微鏡檢查、微生物檢查、生物化學(xué)檢查和免疫學(xué)檢查,一標(biāo)本采集自然咳痰法、氣管穿刺法、支氣管鏡抽吸法。二理學(xué)檢查1.量2.色正常人偶有少量白色或灰白色的粘液痰。（1）黃色、黃綠色見于肺炎、肺膿腫等（2）紅色