1、藥物含量測定概述 藥品的含量測定是指 含量測定測定藥物含量的方法(1)容量分析法： 儀器設(shè)備簡單、易于操作、不需要使用化學(xué)對(duì)照品，成本低、速度較快，其準(zhǔn)確度和精密度都較高。(2)儀器分析法： 當(dāng)組分復(fù)雜、干擾成分較多難于用容量分析法測定含量時(shí)，選用專屬性較高的儀器分析方法。第二節(jié) 原料藥的含量測定 一、選用原則: : 根據(jù)藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)和使用該藥物生產(chǎn)制劑劑量等特點(diǎn)綜合考慮適宜的含量測定法。選用的含量測定法應(yīng)能準(zhǔn)確測試有效成分的含量，并應(yīng)具有一定的分辨力、專屬性、穩(wěn)定性和靈敏度，其準(zhǔn)確度和精密度均高。 二、常用方法（一）容量分析法首選 1、非水溶液滴定法和酸堿滴定法：如氨基酸類、有機(jī)

2、堿及其鹽類 2、醇溶液或水溶液中的銀量法：如膽茶堿、泛影酸、氯化鈉、異戊巴比妥鈉、苯巴比妥等原料藥。 3、碘量法：如維生素C、安乃近等 4、亞硝酸鈉法：如對(duì)氨基水楊酸鈉、鹽酸普魯卡因、苯佐卡因等。 5、鈰量法和高錳酸鉀法：如硝苯地平、尼群地平的含量測定選用鈰量法；硫酸亞鐵、亞硝酸鈉等選用高錳酸鉀法。 6、配位滴定法：如葡萄糖酸鈣、泛酸鈣、硫糖鋁等。 7、碘酸鉀法：碘化鈉、碘化鉀、卡托普利的含量測定( (二) ) 其它化學(xué)分析法次選1、重量分析法：如順鉑的含量測定和磺溴酞鈉中硫的含量測定。2、氮測定法：如尿素、撲米酮、吡嗪酰胺等原料藥的含量測定。(三) 儀器分析方法 1.紫外-可見分光光度法（U

3、V)： 用于分子結(jié)構(gòu)中含有共軛體系結(jié)構(gòu)、苯環(huán)或雜環(huán)的藥物在紫外光區(qū)有特征吸收光譜，可在近紫外光區(qū)進(jìn)行分光光度分析；有色藥物或與顯色劑反應(yīng)后在可見區(qū)有特征吸收的藥物，可選用可見分光光度法測定含量。 2.色譜法 (1)高效液相色譜法（HPLC)： 用于雜質(zhì)或干擾因素較多的品種的含量測定；優(yōu)點(diǎn)：分離效能高、分離速度快、應(yīng)用范圍廣、流出組分容易收集。(2)氣相色譜法（GC)： 如維生素E的含量測定。 5、含量測定法應(yīng)能適用于含量均勻度和溶出度的共同應(yīng)用，三種測定盡可能用相同的溶劑。 6、2000年版藥典規(guī)定復(fù)方制劑的含量測定，若不能直接采用吸收系數(shù)法，而又無其它適宜方法時(shí)，也可用合適的計(jì)算分光光度法，

4、對(duì)于含三個(gè)或三個(gè)以上組分的制品不宜選用此法；2010年版藥典規(guī)定：計(jì)算分光光度法一般不宜用作含量測定。 7、對(duì)于所含雜質(zhì)或賦形劑干擾含量測定，需先經(jīng)繁雜的分離才能測定，或各成分間互相干擾的制劑或復(fù)方制劑，可選用HPLC法。2010年版藥典大量采用了HPLC法。第三節(jié) 制劑的含量測定 一、選用原則： 1、可能時(shí)應(yīng)選用與原料藥相同的測定方法，一般首選容量分析法。 2、共存藥物、輔料、附加劑有干擾時(shí)，可考慮增加預(yù)處理 或改進(jìn)方法，排除干擾后用原料藥的測定方法。 3、制劑生產(chǎn)中新出現(xiàn)的降解產(chǎn)物有干擾時(shí)，可選用專屬性較高的方法。 4、主藥含量很小的制劑可選用靈敏度較高的方法，可用UV法或HPLC法但用U

5、V法時(shí)應(yīng)避免溶劑或降解產(chǎn)物的干 擾，選用的波長應(yīng)具有合適的峰形和吸收，吸收系數(shù)在100 以上，應(yīng)盡量減少使用有機(jī)溶劑，尤其避免使用有毒害作用的溶劑。二、共存成分無干擾時(shí)常用的含量測定方法 當(dāng)共存成分無干擾時(shí)，應(yīng)選用與原料藥相同的測定方法。測定之前必須對(duì)制劑進(jìn)行處理。用物理方法將輔料除去，如片劑可先溶解、濾過，取續(xù)濾液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，或?qū)V液蒸干，用溶劑溶解后，再測定；或經(jīng)提取分離并經(jīng)干燥后才進(jìn)行測定。 共存成分無干擾時(shí)常用的含量測定方法分三類： （一）容量分析法，如阿司匹林片等含量測定選用測定原料藥的酸堿滴定法；鹽酸美西律片選用測定原料藥的非水溶液滴定法；苯巴比妥片劑選用測定原料藥的銀量法；維生素C

6、制劑含量測定選用原料藥的碘量法；對(duì)氨基水楊酸鈉制劑選用原料藥的亞硝酸鈉法永停法指示終點(diǎn)測定含量；右旋糖酐鐵片劑與原料藥一樣采用高錳酸鉀法測定含量；（二）儀器分析法 中國藥典2010年版（二部）中制劑與原料藥的含量測定選用同一種儀器分析法的藥物很多。如酞丁安制劑、水楊酸鎂制劑用UV法中的對(duì)照品比較法測定含量，與原料藥一致；柳氮磺吡啶制劑、維生素B2制劑還是采用與其原料藥一致的吸收系數(shù)法測定含量；維生素A膠丸、維生素AD膠丸、維生素AD 制劑中維生素A 的含量測定與原料藥一樣，均用三點(diǎn)校正法測定。、頭孢菌素類、青霉素類和維生素B6的制劑與原料藥相同，均采用HPLC法測定含量；維生素E制劑與原料藥一

7、樣選用GC法測定含量。 （三）其他分析法 ，如注射用順鉑、磺溴酞鈉中注射液的含量測定與其原料藥均選用重量法；撲米酮片劑的含量測定與原料藥均選用氮測定法；當(dāng)原料藥未收載含量測定法時(shí)，其制劑可選用特有的物理性質(zhì)進(jìn)行測定。如谷氨酸鈉（鉀）的含量測定、右旋糖酐20（40、70）的含量測定選用旋光度測定法。三、共存成分有干擾時(shí)常用的含量測定方法 當(dāng)制劑的共存成分對(duì)藥物的含量測定有干擾，不能沿用原料藥的含量測定方法時(shí)，則應(yīng)另選合適的測定方法，以消除共存成分的干擾。其主要方法有： 第四節(jié) 藥物的含量計(jì)算 一、原料藥的含量計(jì)算：（一）計(jì)算公式 原料（%）=測得重（g）/供試品重（ g） 100% = mx/

8、ms 100%式中 mx 供試品的測得量，g； ms 供試品的質(zhì)量，g。原料藥的含量計(jì)算公式因所用方法不同而有區(qū)別。 （一）離子對(duì)雙相滴定法：中國藥典2010年版（二部）中鹽酸胺碘酮、鹽酸苯海索、鹽酸氯丙鈉林、聯(lián)芐唑和硝酸益康唑等5種藥物的制劑輔料對(duì)非水溶液滴定法測定含量有干擾，改用離子對(duì)雙相滴定法。（二）輔料無吸收、主藥有特征吸收的制劑選用UV法： UV法具有一定的專屬性，其準(zhǔn)確度和精密度均較高。當(dāng)制劑測定不能選用原料藥的化學(xué)測定方法，而該藥物在紫外光區(qū)又有特征吸收時(shí)，則首選UV法。（三）在紫外-可見區(qū)沒有特征吸收峰的可選用HPLC法，對(duì)制劑中主藥含量很少，又容易產(chǎn)生降解物，分離困難的品種，

9、可選用HPLC法。先用色譜法進(jìn)行分離，然后再進(jìn)行測定。中國藥典2010年版（二部）中大量采用HPLC法測定制劑的含量，部分制劑應(yīng)用二元梯度洗脫法，可同時(shí)測定樣品中的多種成分，達(dá)到整體控制藥品質(zhì)量的目的。 （二）容量分析法 .直接滴定法 原料（%）= TVF/ ms 100% F= C實(shí)測濃度（mol/l）/ C規(guī)定濃度（mol/l） 式中 T 滴定度 V 滴定液的體積，ml ms 供試品的質(zhì)量 F 所用滴定液的濃度與藥典規(guī)定不同時(shí)的校正系數(shù) 例題 非那西丁含量測定：精密稱取本品.3630g加稀鹽酸 回流h后，放冷，用亞硝酸鈉液（.1010mol/L)滴定，用去.00ml。每1ml亞硝酸鈉液（0

10、.1mol/L)相當(dāng)于17.92mg的C10H13O2N。計(jì)算非那西丁的百分含量。、剩余滴定法 原料（%）= T (V0-V) F/ ms X100%或 原料（%）= T (V-V0) F /ms X100% 例題尼可剎米的含量測定：精密稱取本品g，加冰醋酸10ml與結(jié)晶紫指示液滴，用高氯酸滴定液（0.1026 mol/L)滴定，至溶液顯藍(lán)綠色，消耗高氯酸滴定液8.31ml；并將 結(jié)果用空白實(shí)驗(yàn)校正，空白實(shí)驗(yàn)消耗高氯酸滴定液0.05ml。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L)相當(dāng)于17.82mg的C10H14N2O。計(jì)算尼可剎米的含量。（三）紫外可見分光光度法1.對(duì)照品比較法原料(%) =C

11、R（Ax /AR ）D V /ms X100%式中 CR 對(duì)照品溶液的濃度； AX 供試品溶液的吸光度； AR 對(duì)照品溶液的吸光度； D 稀釋倍數(shù) V 溶液體積 2、吸收系數(shù)法 原料（%） = A*1% /（E* L ） D V/ ms 100% 式中 A 吸光度 E 吸收系數(shù) L 液層厚度，1cm 例題 卡比馬唑的含量測定：精密稱取本品0.0512g，置 500ml的容量瓶中，加水使溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取 10.0ml，置100ml的容量瓶中，加鹽酸溶液（91000） 10ml， 用水稀釋至刻度，搖勻，照紫外-可見分光光度法，在292nm波長處測得吸光度為0.555，按C7H10N

12、2O2S的吸收系數(shù)（E)為557，計(jì)算卡比馬唑的含量。(四) 色譜法 (GC法和HPLC法）、內(nèi)標(biāo)法加校正因子法（1）系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 理論板數(shù) n=5.54(tR/Wh/2)2 分離度 R=2(tR2-tR1) /（W1+W2） 校正因子 f=（As /Cs）/（AR /CR ）（）含量測定原料(%)= f （Cs*Ax/As）/Cx 100% 例題按中國藥典2010年版（二部）的規(guī)定測維生素E，做系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)時(shí)的數(shù)據(jù)為： 物質(zhì) tR/min Wh/2/min W/min 對(duì)照品 8.88 0.25 0.6 內(nèi)標(biāo)物 5.74 0.6 1.2 取維生素E對(duì)照品20.80mg(98.0%)，精密

13、加入濃度為1.044mg/ml的內(nèi)標(biāo)物（正三十二烷）溶液 10.00ml溶解，取ul注入氣相色譜儀，對(duì)照峰面積為481763,內(nèi)標(biāo)物峰面積為238787,求維生素E的理論板數(shù)、維生素E與內(nèi)標(biāo)物的分離度和校正因子各為少？再精密稱取維生素E供試品22.68mg,內(nèi)標(biāo)物28.00mg，用氣相色譜法測得供試品峰面積為529887，內(nèi)標(biāo)物峰面積為644911，計(jì)算供試品中維生素E的含量。 例題貝諾酯的含量測定：精密稱取本品0.07495g,置100ml容量瓶中，加無水乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量1.0ml，置另一100ml容量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，照紫外-可見分光光度法

14、，在240nm的波長處測得吸光度為0.473；另取經(jīng)105干燥2h的貝諾酯對(duì)照品0.03667g,置100ml容瓶中，加無水乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1.0ml，置50ml容量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，測得吸光度為0.462，計(jì)算貝諾酯的含量。 2、外標(biāo)法 原料（%）=（CR Ax / AR ）Cx X100% 例題用高效液相色譜法外標(biāo)法測定頭孢拉定含量時(shí)，取頭孢拉定為94.1%和頭孢氨芐為2.3%的對(duì)照品35.35mg溶解定容為50ml，取10ul注入高相色譜儀，測得頭孢拉定峰面積為13842558，頭孢氨芐的峰面積為354934；另稱取頭孢拉定供試品35.88mg，溶解定

15、容為50ml，取10ul注入高相色譜儀，測得頭孢拉定峰面積為14158286，頭孢氨芐的峰面積為472368；按供試品的總量分別計(jì)算頭孢拉定和頭孢氨芐的百分含量。 3、面積歸一化法 A總=Ai=A1+A2+An (%)=Ai / A總100% 例題7 用氣相色譜法檢查大豆油的脂肪酸組成，相應(yīng)于棕櫚酸、硬酯酸、油酸、亞油酸和亞麻酸的峰面積分別為129758、43286、296522、654868、92570，按峰面積歸一化法，計(jì)算上述脂肪酸的百分含量。 二、制劑的含量計(jì)算 制劑的含量按標(biāo)示百分含量表示，主要討論片劑和注射劑的含量測定。標(biāo)示量（%） =實(shí)測含量/標(biāo)示量100% =測得量(g)/供試品重（