1、實驗六實驗六植物染色體帶型分析植物染色體帶型分析 1、了解染色體帶型分析的有關概念。2、了解染色體C-帶顯色技術。3、學會植物染色體C-帶分析方法。一、實驗目的一、實驗目的二、實驗原理二、實驗原理 染色體是遺傳物質的載體，如果染色體發(fā)生變化了，生物的外在性狀必然發(fā)生變化。染色體數(shù)目的變化比較容易察覺，但是染色體結構和組成成分的變化就比較難以發(fā)現(xiàn)。染色體顯帶技術使不可察覺的染色體結構和成分變化轉變?yōu)榭梢远勘硎龅膸妥兓?染色體分帶技術：染色體經(jīng)物理、化學因素處理后，再進行染色，使其呈現(xiàn)特定的深淺不同帶紋（band）的方法。 染色體分帶技術可分為兩大類，一類是產(chǎn)生的染色帶分布在整個染色體和長度

2、上，如Q、G和R帶；另一類是局部性的顯帶，它只能使少數(shù)特定的帶或結構染色，如C、T和N帶等。 其中C-帶主要顯示著絲粒附近的異染色質，故稱為C-帶，其他異染色質均可顯示。染色體經(jīng)酸（HCl）、堿Ba(OH)2 和緩沖鹽溶液（2SSC）處理后， 再以Giemsa染液染色而顯示的帶型。它包括染色體C-帶結構特征、C-帶位置、染色強度，異染色質含量等。 作為細胞分類學指標，染色體C-帶核型可以從不同層次上反映其生物類群間的分類關系。染色體C-帶在同一屬內(nèi)有一明顯而恒定的C-帶結構模式，往往構成“標志性C-帶帶紋”，由此可以進行屬級分類單元的比較。材料：材料：經(jīng)C-分帶技術處理得到的黑麥染色體的圖片。

3、 器具：器具：顯微鏡、測微尺、毫米尺、鑷子、剪刀、繪圖紙、圓規(guī)、鉛筆等。 三、儀器與材料三、儀器與材料四、實驗說明四、實驗說明植物C帶主要包括四種帶型：1、著絲粒帶（centromeric band，C），是指著絲粒及其附件的帶。2、中間帶（intercalary band，I），分布于染色體著絲粒至末端之間的帶。3、末端帶（telomeric band，T），位于染色體的末端的帶。4、核仁縊痕帶（nucleolar onstriction band，N），是指核仁染色體特殊的帶型，位于核仁組織中心區(qū)。C帶分類方法：1、完全帶類型：處理染色后，同時出現(xiàn)四種帶型。2、不完全帶類型：只顯示三種以下

4、的帶類別。a CIN型：缺乏末端帶類型。b CTN型：不具有中間帶類型。c TN型：只有末端帶和縊痕帶。d N型：只有縊痕帶。四、實驗程序四、實驗程序 1、測量圖片上的每條染色體的相對長度，進行核型分析。 2、分析每條染色體C-帶位置。 3、每對同源染色體上相對應的C-帶是否純合，即在某一特定位置相配對的兩條染色體是否都具有帶紋，帶紋大小、染色程度是否一致，如不一致，則按雜合計。 4、各染色體C-帶帶紋的著色程度。 在同樣的處理程序下，染色體組中各染色體C-帶帶紋上存在恒定的深淺不同的著色反應，它表示C-帶結構異染色質在質上的差異?？梢运募壉硎痉ǎ禾貜姡喝旧珮O深；強：染色較深；中：染色程度中等

5、；弱：染色極淡。 5、根據(jù)以上C-帶各項統(tǒng)計結果，描述各染色體的C-帶特征，并據(jù)此繪制出黑麥染色體C-帶帶型示意圖。重要實驗步驟重要實驗步驟： 在觀察染色體C-帶型時，同時要考慮染色體長度、著絲粒位置等核型特征。實驗注意事項實驗注意事項 ： 帶型辨別是要考慮到因制片、分帶處理而導致的帶型可能出現(xiàn)的變化。另外染色體排隊時也要從大到小，短臂向上、長臂向下，各染色體的著絲粒排在一條直線上。 例如節(jié)節(jié)麥C-帶排隊：模式圖：對各染色體的描述1D：短臂具有端帶及亞端帶，長臂具有兩條不太明顯的中間帶。2D：短臂具有端帶及明顯的近著絲粒帶，長臂具端帶及兩條小的中間帶。3D：短臂顯示端帶及亞端帶。4D：短臂具有端帶及近著絲粒帶，長臂具有1條明顯的特征帶。5D：是節(jié)節(jié)麥中唯一一組隨體染色體，短臂具有端帶和1條中間帶，隨體經(jīng)C-分帶后不易觀察。6D：為等臂染色體，長臂及短臂各具有1條明顯的中間帶。7D：