1、課時(shí)跟蹤檢測(cè)（二） 的基本操作程序基因工程課時(shí)跟蹤檢測(cè)（二）基因工程的基本操作程序（滿分50分時(shí)間25分鐘）一、選擇題（每小題2分，共20分）1.下列關(guān)于基因工程的敘述，正確的是（）A.目的基因和受體細(xì)胞均可來自動(dòng)植物或 微生物B.限制酶和DNA連接酶都能識(shí)別特定的堿基序列，是兩類常用的工具酶C.人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原具有生物活性D.載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)解析：選A 目的基因和受體細(xì)胞均可來自動(dòng)、植物或微生物；基因工程中常用的工具酶有 限制酶和DNA連接酶，前者能識(shí)別特定的堿基 序列；大腸桿菌為原核生物，不含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高 爾基體等細(xì)胞

2、器，不能對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行加工，其合成的胰島素原無生物活性；載體中的抗性基 因?yàn)闃?biāo)記基因，其作用是有利于篩選含重組 DNA的細(xì)胞，不能促進(jìn)目的基因的表達(dá)。.下列用于判斷目的基因是否轉(zhuǎn)移成功的 方法中，不屬于分子檢測(cè)的是（）A.通過害蟲吃棉葉看其是否死亡B.轉(zhuǎn)基因生物基因組DNA與DNA探針能 否形成雜交帶C.轉(zhuǎn)基因生物中提取的 mRNA與DNA探 針能否形成雜交帶D.轉(zhuǎn)基因生物中提取的蛋白質(zhì)能否與抗體 形成雜交帶解析：選A分子水平的檢測(cè)包括三個(gè)方 面：通過DNA分子雜交檢測(cè)目的基因是否插入 受體細(xì)胞染色體的DNA上；通過RNA與DNA 雜交，檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄；通過抗原一抗體 雜交，檢測(cè)目的基因是

3、否翻譯。通過害蟲吃棉葉 看其是否死亡，屬于個(gè)體生物學(xué)水平的檢測(cè)。.下列關(guān)于PCR技術(shù)的敘述，正確的是()A. PCR技術(shù)建立在對(duì)擴(kuò)增的目的基因序列 完全已知的基礎(chǔ)上B.該技術(shù)需要解旋酶和熱穩(wěn)定的 DNA聚 合酶C.該技術(shù)需要一對(duì)特異性的引物，要求一 對(duì)引物的序列是互補(bǔ)的D.該技術(shù)應(yīng)用體內(nèi)DNA雙鏈復(fù)制原理， 也需要模板、原料、能量、酶等條件解析：選D PCR技術(shù)擴(kuò)增的目的基因序 列不一定是已知的，A錯(cuò)誤；PCR技術(shù)是通過 高溫來使DNA解旋的，不需要解旋酶，B錯(cuò)誤; 該技術(shù)需要的一對(duì)引物，分別能與模板 DNA的 兩條鏈的末端堿基配對(duì)，其序列不是互補(bǔ)的，C錯(cuò)誤。4,下列關(guān)于基因表達(dá)載體的敘述，錯(cuò)

4、誤的是()A.基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心B.其上的啟動(dòng)子和終止子都是有特殊結(jié)構(gòu) 的DNA片段一般用抗生素抗性基因作為標(biāo)記基因D.雖然基因工程中的受體細(xì)胞有所不同， 但構(gòu)建的基因表達(dá)載體都是一樣的解析：選D由于受體細(xì)胞有植物、動(dòng)物、 微生物之分，目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法不 同，所以，表達(dá)載體的構(gòu)建也有所差別5.右圖是基因工程中基因表達(dá)載體的模式圖，若結(jié)構(gòu) X是表達(dá)載體所必需的，則X最可能是（）A.熒光蛋白基因B.啟動(dòng)子C.限制酶DNA連接酶解析：選B 一個(gè)完整的基因表達(dá)載體應(yīng)包 括啟動(dòng)子、終止子、目的基因和標(biāo)記基因。.下列關(guān)于基因表達(dá)載體導(dǎo)入微生物細(xì)胞 的敘述中，錯(cuò)誤的是（）A.常用原

5、核生物作為受體細(xì)胞，是因?yàn)樵?核生物繁殖快，且多為單細(xì)胞，遺傳物質(zhì)相對(duì)較 少B.受體細(xì)胞所處的一種能吸收周圍環(huán)境中 DNA分子的生理狀態(tài)稱為感受態(tài)C.感受態(tài)細(xì)胞吸收 DNA分子需要適宜的 溫度和酸堿度D.感受態(tài)細(xì)胞吸收重組表達(dá)載體 DNA分 子的液體只要調(diào)節(jié)為適宜的pH即可，沒必要用 緩沖液解析：選D將基因表達(dá)載體導(dǎo)入微生物細(xì) 胞時(shí)，需在一定條件（如適宜的溫度、pH等）下, 將基因表達(dá)載體和感受態(tài)的微生物細(xì)胞混合培 養(yǎng)，在培養(yǎng)過程中，可能會(huì)影響pH的變化，因 此要加入緩沖液，以保持適宜的 pH。.利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)竣酸酯酶（CarE）制劑的流程如下圖所示，下列敘述正確的是()A .過程需使用

6、DNA聚合酶.過程需使用解旋酶和 PCR獲取目的 基因C.過程使用的感受態(tài)細(xì)胞可用 NaCl溶 液制備D.過程可利用DNA分子雜交鑒定目的 基因是否已導(dǎo)入受體細(xì)胞解析：選D 過程是逆轉(zhuǎn)錄過程，需要逆 轉(zhuǎn)錄酶催化；從cDNA文庫中獲取所需要的目的 基因，根據(jù)基因的核甘酸序列、基因的功能、基 因在染色體上的位置或基因翻譯產(chǎn)物蛋白質(zhì)等 特性來獲取，不需要用解旋酶，也不需要 PCR; 用CaCl2溶液處理大腸桿菌，可使其成為感受態(tài) 細(xì)胞；鑒別目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞可利用 DNA分子雜交技術(shù)。.以下甲、乙兩圖表示從細(xì)菌細(xì)胞中獲取目的基因的兩種方法，以下說法錯(cuò)誤的是 （）A.甲方法可建立該細(xì)菌的基因組文

7、庫B.乙方法可建立該細(xì)菌的 cDNA文庫C.甲方法要以脫氧核甘酸為原料D.乙方法需要逆轉(zhuǎn)錄酶參與解析：選C 甲方法是從細(xì)菌的DNA中直 接提取，故可以建立該細(xì)菌的基因組文庫；乙方 法是由信使RNA逆轉(zhuǎn)錄得到的目的基因，故可 以建立該細(xì)菌的cDNA文庫。甲方法只要利用 DNA限制性核酸內(nèi)切酶將其原有的 DNA切斷 即可，不需要以脫氧核甘酸為原料。乙方法需要 逆轉(zhuǎn)錄酶參與，并且以脫氧核甘酸為原料。綱織酢的分腐相美詢海 獲得；1小AmKNA niRMA- 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、O(2)A過程需要的酶有 和O(3)要把重組質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌，首先必須 用 處理土壤農(nóng)桿菌，使土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)變?yōu)閼B(tài)；然后將

8、在緩沖液中混合培養(yǎng)完成轉(zhuǎn)化過程。(4)含有重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌侵染離體棉 花葉片組織后，將離體棉花葉片組織培養(yǎng)成再生 植株要經(jīng)過 C和E。如要確保再生植株中含有抗蟲基因，可在 C過程的培 養(yǎng)基中加入。(5)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因植株的卡那霉素抗性 基因的傳遞符合孟德爾遺傳規(guī)律。將轉(zhuǎn)基因植第17頁株與雜交,其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數(shù)量比為1: 1。若該轉(zhuǎn)基因植株自交，則其后代中抗卡那霉素型與 卡那霉素敏感型的數(shù)量比為。解析：（1）基因工程的基本操作程序主要包括 四個(gè)步驟：目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu) 建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè) 與鑒定。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程中，需要用 同種限制酶切割目的基因和載體，使它們產(chǎn)生相 同的黏性末端，再用DNA連接酶把這兩個(gè)DNA 片段連接起來。（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入目的基因 時(shí)，首先必須用 Ca2+處理土壤農(nóng)桿菌，使土壤 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)變?yōu)楦惺軕B(tài)；然后將重組質(zhì)粒和感受態(tài) 細(xì)胞在緩沖液中混合培養(yǎng)完成轉(zhuǎn)化過程。（4）植物 組織培養(yǎng)過程的關(guān)鍵步驟是脫分化和再分化。因 為只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那 霉素培養(yǎng)基上生長，故若要確保再生植株中含有 抗蟲基因，可在C過程的培養(yǎng)基中加入卡那霉第18頁 素。(5)轉(zhuǎn)基因植株相當(dāng)于雜合子，與非轉(zhuǎn)基因植 株雜