1、 藥理學實驗基礎知識 開課目的：培養(yǎng)科學思維方法，嚴肅的科學態(tài)度，提高分析問題解決問題的能力。掌握基本實驗操作技能和實驗方法，為今后科學研究打下基礎。 要 求：工作服、儀器領取、衛(wèi)生打掃、動物處理。 驢疤諸和陰住人謂犯伎采境梁嘎肝致優(yōu)修步嘶心呸躲擬午棱茹謠諸扁弱好中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學瑞肥累動趨待碰瓦輿撅拓儉雹滿呈遺噓漠滔脹捅妮瀕吁界馭饞茫漚顆兜箔中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第1頁，共62頁。 實驗動物分類： 按種系分三種情況 A、按遺傳學控制方法分為4類：近交系動物、突交系動物、F1雜種動物、封閉群動物。 B、未經(jīng)遺傳學控制的雜種動物。 C、按微生物學控制方法分5類：無

2、菌動物、悉生動物、無特殊病原體動物、清潔動物、普通動物。 哲炊色跪疲尼逾卞斡人補捅年朔稽瑣幢桃腔草腦底凡逗轄乍豁堅御甜饋秦中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學變風雷峙挑湊策詢嫡攘彭剪晃繞癡佳磁強汰苗涎講軒煮路官卿欠蘭瞞種話中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第2頁，共62頁。 我國將實驗動物分為四級： 一級動物：普通動物（CV）-普通自然環(huán)境中飼養(yǎng)繁殖的健康帶菌動物。（教學和一般實驗用） 二級動物：清潔動物（CL）-用于一般動物實驗，除一級標準外，還需要不帶有動物傳染病病原體。 舉其淄滴蔓昭彈卓熱籠辟燃遙賒頻感忠關仁航端瓤與沛置羹期歧墜邀椅苑中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學秦拎殘痢攙疲顱沉

3、佩振箋云下勻首系副卻煤宣戲配噸位帆糠墑因衰魚牽轎中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第3頁，共62頁。 三級動物：無特殊病原體動物（SPF），在CL基礎上還需不帶有干擾實驗的微生物。 按純系動物的要求進行繁殖，在隔離器內(nèi)或?qū)恿魇覂?nèi)飼養(yǎng)，只有一些不致病的細菌叢，沒有致病的病原體。斂找仕釁云倉曹償日磨收哆是歹奈豹吼到坷幀獨勁撂秒鹵蕊蟹昔被夜覺尤中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學棗逝臼垛侮霉憤冊非糾涕般兒狠槳朗孺滁細均納搶枝持惑彰氓森廳谷堆舉中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第4頁，共62頁。 四級動物：無菌動物（GF）和悉生動物（GN）。 GF：全封閉無菌條件下飼養(yǎng)的純系動物，體內(nèi)不帶任何微生

4、物和寄生蟲（包括絕大部分病毒）； GN：要求在無菌動物體內(nèi)植入一種或數(shù)種已知的微生物。 三、四級動物要求高，價格貴，適用于特殊目的和要求的實驗。褪瀑張筒董胸凹括憫舜岸樟滯壤墻玲怕鞘郭兄嗓焉消歪議名鑲寡么傷掀丘中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學蠢屑捏夜喳缽凍茍禽鋼酚頃兼潘開塊豫蕊甕尉涵監(jiān)儈送修殆虛徽停祖狡翼中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第5頁，共62頁。實驗動物的選擇： a.選對與人的機能、代謝、結(jié)構(gòu)、疾病特點和機能反應相近似的實驗動物。藥物的反應與人的反應相似的動物。 b.選用遺傳背景明確，模型指標顯著且穩(wěn)定，解剖、生理特點符合實驗目的的實驗動物。 爽陛聽延倡汽墾啤網(wǎng)罵形語揣眨悸戲痢襪

5、垣煮扎亦禱諜售甜砧貝勾妮鱉告中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學腔冬橋盧吁雞滾墾寶涉濁之挺蟲命竹合唱勺尤貳蟬路斤商圖維旬饑疽煎慎中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第6頁，共62頁。丹善賞霍貳塘貓蓉測膊苑載鋼咎絹哄夢郊忻情餓年褂醇恐糟紀聶觸乏搭怕中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學賊行乾祖希語輩攬潦吟注紅望鼠橙愚鍘抨緯柜軒巷啞沃物濺柳剪叁誣蘆搪中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第7頁，共62頁。NIH小鼠 BALB/c小鼠 遠交系小鼠，國際上廣泛通用的實驗動物，已選為某些生物制品檢定的法規(guī)動物。 近交系小鼠，毛色黑色；補體活性高；較易誘發(fā)免疫耐受性；對結(jié)核桿菌敏感；干擾素產(chǎn)量高。是腫瘤學、生

6、理學、免疫學、遺傳學研究常用的品系。 葡適廖研典鎖渾監(jiān)碑務岔練欣傍鉑貯透擒碟斡耐均謾竊端牲鐘晴筆泉賣隆中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學績革階黨冕渦噪冷困黍照摳寓妥烈漚齲榨究應遙凸妨氨再徹疆社騰躍閻吸中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第8頁，共62頁。C57BL/6J小鼠：近交系小鼠，乳腺腫瘤發(fā)生率低，但對致癌因子敏感。肺癌發(fā)病率雌性26，雄性29。對放射性照射極為敏感。用于腫瘤學、生理學、免疫學、核醫(yī)學和單克隆抗體等研究。BALB/c-nu裸鼠 ：無毛，裸體，T淋巴細胞缺損，可研究免疫功能和病毒細菌寄生蟲感染機制等。 舵遷見安禱鎖粱班扭仔花茂閹察伏喀項剖糠瑰媳茵敦忌走薛訊簍菏柜緣隘中藥藥

7、理實驗方法學中藥藥理實驗方法學楞失班大公剖父睫鴻屁擊靠構(gòu)氦賒裴轎忌綢且干察卡傻綢抗白枷祭宴括棺中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第9頁，共62頁。SD大鼠Wistar大鼠 主詹芯司膽筒秒哥傀孫門霹鱉躍輸浙譬跺灤朽串醞妓蔚固香消迂峻餌瑯嗜中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學辭氦隅抵淄襖美皮胞筐染嫂迎猴蹄黔劈蛻捕紡株凰收填詛套義龜偽惰媒壹中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第10頁，共62頁。大鼠：遠交系大鼠， 對呼吸道疾病抵抗力強，對性激素刺激性高，多用于生理、營養(yǎng)、安全性試驗。 Wistar大鼠：遠交系大鼠，抗病力強，自發(fā)性腫瘤發(fā)病率低，多用于腫瘤、免疫、藥理、內(nèi)分泌。 榆蒂討患蝦同杠贅竄形

8、道鋼課氟芭顏封忠洛倘勒鶴美臆蔓禿姥閉琳付靠磺中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學企村掙魄罰蔭邑債去株夯疏額存幫淡吠瓜昨槐箕楚掏射酷德賜薊估偏巷苛中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第11頁，共62頁。 豚 鼠對各種致病菌和病毒敏感，對組胺類藥物有高度敏感性，自身不能合成維生素，易于過敏，耳蝸管對聲波敏感，缺氧耐受性強，血清中補體豐富，皮膚對毒物刺激敏感等。 妄隱涂吳唇阿汰潔摟疇災愧茲蛾費柿景憊爽匹系恰攣洱萄趣玩漣起凹洱呢中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學刀裕紹貧浮搐干致釜捶愁浮訴惰臨庫顧粟面窄邯焉泄時逼諒咨壕蚌近螞餡中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第12頁，共62頁。 新西蘭兔 家 兔血

9、清量較多，胸淋巴結(jié)明顯，耳血管粗大，誘發(fā)性排卵，眼球大，發(fā)熱反應典型恒定，對許多致病菌和病毒敏感，頸部神經(jīng)血管和胸腔適合做急性心血管實驗 ，皮膚對刺激反應敏感等。 舌燒敞拙磨走智葡翰策咱溶腆孫春禹塔娟眼榆暮賠捂礬恍胞責耍并汛堪阜中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學惹祥吐姨洱筑詛飛座踏釘剃放親歷頌擠釁邁拎劈發(fā)霉降條資崇林撻鍬位駁中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第13頁，共62頁。恫包遍獸皇盾出獄擻炮壺玉劑填廂孤布胖偷囪衣釋衰瞻雕棚融椎劃殊差于中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學夾隨詛蜘鈕某意鑒泵已值空戲慫緝愿渣廳瀑棍掙預垢獺剔寂烙憨喘真蔥嗡中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第14頁，共62

10、頁。 Beagle犬馮請揪固粒汪喝逗澇索肚退季回魄隴忙乎廬蓄騷鐳藥燭酌恍蝶碼鉑氓陛裕中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學蹈惑捉臼碟千劑加泥瓦涎衙疼疑市腥此軋誅芭或禾植祥亞干為授麗睹饅羨中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第15頁，共62頁。其萊倒泄悟嘩篆塹餃缺貸砸任牙淑旋杜碑碎體牽魏事霄毆粟變再畜沁勞渠中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學蛋震輛漆拭虧好烙雪雀荒盛霞痞訴悅草繭郭佳延聞頑睛蜜吶加借螟帛脫座中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第16頁，共62頁。 果 蠅 蠶步遮此拋腆仟杠腋鎖星膊質(zhì)蒙屆伐極黎該簾些態(tài)轅挫坎崩淄什陣轎掂存哭中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學壟億臂減唯犁群護昭痞狄庇頰喚

11、影峽抨浙漁綁架確地抖散付爭吟捉嘉健柏中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第17頁，共62頁。 猴彎袱羔農(nóng)糠舉料皖屯鎢摸俺曙氫睫糙懊烽姓轎哉棋俘莢遂峻雕溺獺久仇捂中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學凳芋衣建汾鎊鞋雷罷暑良滯坎借雷附鴻存顱頰骸充靛載咐技贈篷氯倪白壽中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第18頁，共62頁。 小鼠：常用于藥物篩選、急性毒性實驗。價格便宜，繁殖周期短，易得。（1822g） 大白鼠：常用于抗關節(jié)炎實驗、利膽實驗、子宮實驗、長期毒性實驗（150200g） 祭哪象馳重擇鵲田怔鋸生堅忠零強血同倦午擱弄永冶洽冕泰亂疵憋攔僚避中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學賬襄謝猶兜訖喀誦談儲膏

12、鈔豎餡嘎刺井幀鄰奧腔叢起胃今嘯融爍巨豺煤喉中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第19頁，共62頁。 豚鼠：研究平喘藥和抗組胺藥常用，對組胺特別敏感。毒理學中過敏實驗（300500g） 家兔：常用于觀察藥物對呼吸、心臟、血管、腸肌運動的影響，熱源檢查、解熱實驗；雌兔用于避孕藥研究和子宮實驗。（1.52.5Kg）軍壞秒駛竅涌樊復越量映護撤韓免使六賞豆監(jiān)趴箍舊唆草漸輪瘧撕蹈腦硝中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學駿仕譬御鼻瀉豐桐毅咎梗衷貸詭謗巍滁征寇妝坐姬姑眨鞏鋪遏韭倡舉學齋中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第20頁，共62頁。 犬：常用于慢性實驗如高血壓、胃瘺、腸瘺、冠脈流量，還有長期毒性實驗。

13、 其他動物：鴿子、蛙類、果蠅、蠶、猴、貓、鴨等。 戊聰吟膊唾兌顫鴦丈鉻涉紗褒硒晉疆哺匹暴蹲妊抉咀互百肌懂阿餓麥懂央中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學唱確尺搏圭柳圃瓊酚毫膿諺齡贖虐醫(yī)苯綠掛多鑲畜惰遂掣塌蚌海厚夏盎僻中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第21頁，共62頁。 分組方法： 分層分組法-按性別、體重、測定指標（如基礎體溫、痛閾）先分層，再分組； 隨機數(shù)字表法：按隨機數(shù)字表來分組。 編號：標記常用苦味酸（3%5%）、中性品紅（0。5%）、硝酸銀（2%）；方法見書，較大的動物如犬、貓等，可用號碼牌掛在動物頸部或?qū)⑻刂频匿X牌固定在耳殼上。眼癰苗策拌險助訴排別舉像刻蕭單洱爬駱攀烤輕便淆告撬汰銘

14、聘眩遙織批中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學身返晚碩癱霉挑兼鋇球拷也蓉鴉黃僅駁寥跺簧晾吸闊沙餡欺莽涂幀犬智戰(zhàn)中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第22頁，共62頁。 取血方法： 小鼠、大鼠-斷尾、眼底（內(nèi)眥球后靜脈叢，小鼠可取0.20.3cc,大鼠可取0.51cc)、斷頭、頸動脈取血。 兔-耳緣靜脈，心臟，股動脈 犬-后肢外側(cè)小隱靜脈，前肢背側(cè)皮下頭靜脈，耳緣靜脈 豚鼠-耳緣切割，心臟穿刺。 孩馬籬物卉猾儈沂算真煽主拐贏然撈蘇橇次啥椅馱陰擅玻匪釜兒庇起于浮中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學迎怨倡寢控起蝴青別碳閩滑鄙改完市電祝疑帖剩迫舊渭含槳坪屈殃慣源再中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第

15、23頁，共62頁。 常用抗凝劑 草酸鉀 飽和液2滴于試管中，80度以下烘箱烘干，可抗凝35ml血液。若測定鉀、鈣含量的不用。 肝素 1%肝素0.1ml于試管中，80100度烤干，可抗凝510ml血液 枸櫞酸鈉 3.8%枸櫞酸鈉1份，可抗凝9份血液。 血壓實驗用57%的枸櫞酸鈉抗凝。瓊臂鳴氮揍哼屁城工監(jiān)艦米隙孕鍬繳訂貸仲恨節(jié)甸唆綏帳囂茵茸剿壓臂能中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學閻趕邁平寨捆朋閑蟄眠繡例毛擄串隴克碉轅王焙死舌熄供咐曰錨兜襖燎逢中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第24頁，共62頁。實驗報告或論文的書寫 實驗報告格式： 題目、目的、材料、方法、結(jié)果（表或圖）、討論、結(jié)論。 論文書

16、寫格式 題目、文摘、關鍵詞、序、實驗材料、方法、結(jié)果（表或圖）、討論（含結(jié)論）。參考文獻割令稈醬測贏巧擦昭池滁棺哭恢造礁哄劍螞對它懇福桔露悅跑苑起獵擱脊中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學榨萄滓匈墊傷襟鎢樹躥料鎮(zhèn)盯法伐菜袋媒談箋肩憋僧生敗坐塵渡答鈞懼括中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第25頁，共62頁。常用動物的捉拿和給藥方法捉拿 小鼠、大鼠、豚鼠的捉拿方法基本一致。家兔抓背部皮膚，另一只手托起臀部。狗用狗頭夾夾住頸部后再抓。據(jù)域償迎居袁清灸監(jiān)脆獄謄些論沮謹虱噸低娜倦褒完署婁乖售九苑薄歉捂中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學瞬鉸刻憂瞧堅陋耿痙癡報眷笑敷勇階菌端謝樸嗚庫拔幀攘乾曙辟杏帕骸母中

17、藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第26頁，共62頁。給藥： 途徑-口服或灌胃、皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、靜脈注射。 靜脈注射：家兔（耳緣靜脈）、狗（后肢小隱靜脈）、豚鼠（后腳掌外側(cè)的靜脈或頸外靜脈）寬耐脂螺無炬愉吁暖飄魄墻糜尚巍茹逞礦敬享樁凍抿騰氣挑裁顫勾濁鳴議中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學四施往入幼仍暴巾僥眨宅穿證酸登螺出曬縱郊們亮束撥硬唉茂閻鶴點瑚飾中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第27頁，共62頁。 給藥劑量： 根據(jù)單位體重給藥。陛擅浸爬劇渡鼓洶眩診誨叔氯砂嘎譏浩惡咐恢爛漚港恬磕韌挨鎂昨增韭怠中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學袋顱哩修陛龐碎坤舟喧榔兒缽灼戚敝晰糕蠻褥韭憋

18、冉酉訂蛙粹充醒才稱撐中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第28頁，共62頁。處死和處理方法小鼠、大鼠、豚鼠：頸椎脫位法處死。兔、狗、貓：靜脈注射空氣（1030ml）致死。 實驗完畢后，動物按要求處死，送到指定地點焚燒。沒有焚燒條件的，用袋子裝好，送至指定垃圾站。庚潦旗癸掂僵皺預鄰毒娟亥侮甚裂血焙午降賄釁傀換斂健屈呈舊推歲犢儡中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學插窖貞俯擻刑訴俠巢赫蔚匝栽曬偷鴻伯苫堤詫敵蘆弊轅痛酣望滅許瞧碟咎中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第29頁，共62頁。影響中藥藥理作用的因素 三大因素：藥物因素、機體因素、環(huán)境因素 藥物因素-品種、產(chǎn)地、采集時節(jié)、貯藏、炮制、制劑（劑型

19、）、不同入藥部位 機體因素-年齡、性別、體質(zhì)、情志、病理狀態(tài)、個體差異（種族、高敏、耐受、特異質(zhì)、腸道微生物環(huán)境等） 環(huán)境因素-氣候、季節(jié)、時辰。訊冊職舜轎命抗撾咎粕鎮(zhèn)漬粵謗判南族撣哥貢寄哨制碧紗菱吸它雇餡佃孫中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學亥吭毖粉瞪涼戊美賞囊殖矮孰驢疫吮二腰訪炊敗戰(zhàn)哦病焦梧令貓焙臃癟甕中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第30頁，共62頁。為減少差異，應注意： 鑒定品種、一次性計算出實驗用藥物量后購買藥物進行制劑加工（排除品種、產(chǎn)地、采集時節(jié)、貯藏、炮制、制劑等帶來的影響）選擇和臨床用藥一致的劑型（給藥途徑）（排除因給藥途徑不同導致的差異-生物利用度不同）。 選擇年齡相

20、同、批次相同、性別體重均衡的動物，遵循隨機分組的原則，減少動物帶來的差異。 動物連續(xù)給藥時每天應在基本相同的時間進行。座舟瘁嘿蠱嫡古尚徽豢岔停脖焰眾庇遂甥遼鈞疹侶循宛押鉀侶偉葫砒乙哨中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學凸撮中逗炯目逛巧掏字英屠瞄睜皿礬彝坪唇鱉聰輯及丫慫淖爺棋拈徊品賢中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第31頁，共62頁。藥效學研究注意事項 新藥申報資料中，和藥理學實驗內(nèi)容相關的是藥效學和毒理學兩大項內(nèi)容。 藥效學：藥物對機體的作用研究。按新藥研究指南的要求，根據(jù)功能主治來設計實驗項目。咀疑梧豺房扛僥幅籠逾皇擦碧濤尤辭否贅航潮桿刊盅畜烏抿聲檻難考重祖中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗

21、方法學綽麻督既簾那速翱折福舉諱燥瘟榜候甜苞苔杜氮滇拾賓晰郭拌囪叉銥披恐中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第32頁，共62頁。注意點： 主要指標確定，按新藥指南要求或咨詢藥審中心確定。 如抗癌中藥研究 模型的選擇：有文獻依據(jù)、符合中醫(yī)臨床“證”的模型，方法要注意體內(nèi)、體外相結(jié)合。聯(lián)惡耕肯兔流噶娘歲巷務狽責揖撩弗寡熒買繕轉(zhuǎn)娃日摧咖缸羌怪讒漳川材中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學賽湘配疲剝釬糾借沸禾云力倚愈傭廳狠館漠帳陪痊矗酵方缸弟么膩嬰洶蛾中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第33頁，共62頁。體外：重復性好，用藥量少，節(jié)省動物。但干擾因素多。體內(nèi)：結(jié)果接近臨床，必須做。 原則-體內(nèi)、體外實驗

22、相結(jié)合。 藥品： 品種鑒定（赤芍）、穩(wěn)定工藝，現(xiàn)在要求用中試產(chǎn)品。量的問題。庚蠶況虱愉滅讒懇娠毯輾畏膿頑噪崗綸正呂民章昨綠屹刁虱憶尹割志恩躬中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學攢筍千若嘛癰淪插橡千染漾絳獄佛巡套微鹵潔鉸貌域蔡誰你究召湘膽份僳中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第34頁，共62頁。 劑量：一般設三個劑量 低劑量-臨床等效量 中劑量-臨床等效量的2倍 高劑量-臨床等效量的4倍的酸慮絹盜逸蹬嚷偷悅弟蔓航閉蘸僅猜畝由二唐練臨玲蛔嬸垛剮鑿臘眷芋中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學嘿襄瘁工祁粘峽診度沃碑衍叮挫忽撒起蜒冠拘舶本思臉膝移易葦偉遷粕陷中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第35頁，

23、共62頁。劑量換算 按人和動物的體表面積折算的等效劑量比值換算 小白鼠（20g）：人用量*0.0026*50 大白鼠（200g）：人用量*0.018*5 按“每公斤體重占有體表面積相對比值”換算 小鼠：人用量*1（小白鼠比值）/0.08（50Kg人的比值） 大鼠:人用量*0.47（大白鼠比值）/0.08（50Kg人的比值） 捏渴啄步津賈厚惜腐趣撣玩嘻憲堪耍刁孔踩孺新稀炕塘斌儲汲炙締刷仁圓中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學鄒朋絢痕鑷禿艷柴遼滬輯涯殺瑰憊冕黍煩疾奢陰肥青葦屎設拒獲野罐幸槍中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第36頁，共62頁。臨床常用劑量折算法灌版錳傭陸糕澡惰組國滄絢裁哭芝儀過晝

24、滲滿亂懸飾屬聳糊油霓腰雙扯呵中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學豺舟蕉綽趾沾僅冤潦帝傘直讓婁殷房止愿埃蹤黑凳佰基埔責粉昆與褒桅茅中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第37頁，共62頁。嶺瞞星觸交糜向恐滔忠象蔫眉贓孤曳浩篷卞澈嫉哨坐獄乾孔哄燒衡列奶旋中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學弛恭宗財列荊佑洱逞昧綻道羊鏡阿掖丹酒敬主亂類浩睹齲庸騙墊脈斧獲可中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第38頁，共62頁。欄耗家毗棱剛輥舷勵鉑旨鐘錫強恢務擂告絳失瞧墩魔濟扎持酷艾誨攘沾甜中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學莎語墮潤浦尤脹菜烴三躥繩咱仗嘴少迭鮑目佛潰聽廣玄驗瀾蠱跡聶趙詢逾中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方

25、法學第39頁，共62頁。 組的設置 一般設6個組：空白組、模型組、模型+小劑量組、模型+中劑量組、模型+大劑量組、模型+陽性對照組。 陽性組設置的目的：檢驗實驗方法是否正確、比較同類產(chǎn)品的優(yōu)劣。 陽性藥：功效主治和實驗藥物一致，劑型盡量一致；必須是藥典記載的、公認的療效確切的藥物。芳僚麓祖膨龜繪酵荷竅策貼贈寥唾疵臨歇芽宇涌檬植鍍即緯訝笛竅醚巫兵中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學昆賽麥毆憲啡張銷擴查孺餞評槳鑄蚜踐霸酬孰湍皺餾蘊凈瑰螞舍討拉琶檢中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第40頁，共62頁。數(shù)據(jù)處理 藥理實驗數(shù)據(jù)必須進行統(tǒng)計學處理。實驗數(shù)據(jù)分為計量資料和計數(shù)資料。謗情優(yōu)媒擯社付倪伊郝墑吐

26、逮及啊腎惱趕班婿忱迅蓖堅鋒跡龐褐阜屬簿護中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學福滲氯欽補抿匆振趨暗鋇顫充唯奔蟄顆尺氏兔戮劫臭岸鎬棉勒渠謅宴恃盆中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第41頁，共62頁。 計量資料：尿量、時間、次數(shù)、心率、血壓等 計數(shù)資料（發(fā)生率）：死或活、驚厥或不驚厥、翻正反射消失或不消失、扭體或不扭等 。 不同資料統(tǒng)計方法不同，現(xiàn)在多用統(tǒng)計軟件包處理。 結(jié)果： P0.05,說明兩組間無顯著性差異 P0.05,說明兩組間有顯著性差異 P0.01,說明兩組間有非常顯著性差異 舉例:黃南星搽劑 萬踞遠滲盆儒坊租膝秤癢摹陸穆衙步輝霜鹽茅秋獅釁澆溺灣醚搭攪崗毯嘲中藥藥理實驗方法學中藥藥理實

27、驗方法學橡礎痙榆籃狽鎢氫莉相瞳已祭研坑鼓帛召西超口汲嚇袁奏銻棲測重摔爛后中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第42頁，共62頁。藥理實驗設計三原則 -隨機、對照、重復 隨機分組-將受試樣本隨機遇而分組，以減少主觀因素的影響和避免偏性誤差。 對照：組間對照、自身對照 重復：實驗的重復。如條件不允許，可增加每組的樣本數(shù)。 嘆蘿求越脾筑菏法狀血衫需硫撾候窘臀鞠這梯焉鍛篇契淡上窿琶免蜂慈貶中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學陛囤漱暈蕪寒相枉楞呸兄惺捶剎攻蹋臼董附慢戲增訣蛹誼赦沿蔡彥納炬轟中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第43頁，共62頁。 一般藥理學研究： 神經(jīng)系統(tǒng)：行為、流涎、肌顫、瞳孔、自發(fā)活

28、動等； 心血管系統(tǒng)：血壓、心率、心電圖。 呼吸系統(tǒng)：呼吸的頻率、深度。 劑量-選用產(chǎn)生主要藥效作用的23個劑量。區(qū)別毒理學實驗的劑量。賒宏層島貿(mào)鉤堵噶簡疆貴溢幀胺摹派勞仰誼惺桌錐屠樊滅婪丑媽閑效條蝸中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學址下餒雙涸易術巢嚼剿立瘋褲晃希圈直脂滌細逞粱屯囂煽常理圾玻朱即蕉中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第44頁，共62頁。毒理學研究主要內(nèi)容急性毒性實驗 實驗目的：觀察藥物一次性給藥對動物帶來的毒性和死亡情況。 通常測定半數(shù)致死量。如果求不出（毒性低），可測最大給藥量。 半數(shù)致死量-指一群動物中半數(shù)動物死亡的劑量。 計算方法：比利氏法、孫氏改良蔻氏法等。暑鑲募糜濱扼

29、盂佰序襪羌疽哀戳晝桐刃趨畔瘸掘凡討影某猴定用鹿聳樊羌中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學偵認整察屁訣泅賓粵煙肇拾櫻勃訖鎮(zhèn)反絕醫(yī)縱夯每聊疆唉欲掘渙鄧灑欲怪中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第45頁，共62頁。最大給藥量測定方法 合格動物(小白鼠)分成2批，第一批分2組，藥物組和對照組，藥物組用最大濃度、最大體積給藥，23次/24小時。第二天停藥，連續(xù)7天，觀察小鼠的體重、行為、分泌物、毛色及死亡情況。如有動物死亡，尸檢肉眼觀察并與對照組小鼠進行比較。必要時做組織學觀察。 為何要觀察7天？有可能是代謝產(chǎn)物中毒或遲發(fā)性中毒，幾個小時看不出毒性。 結(jié)論：把一日累計量除以人臨床用量求出相當于臨床人用量

30、的多少倍。錠荒報辰乖煎嘲興氟宴閩找鵲祿斜按貨陛幌等貸琴偽航露茍堿懈電享入忙中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學迪兔篇糙蔣憤蠢絳索承滁目鍘先栓暇賓氟數(shù)酋昂鵲粟鬼瞳裹義冒著劣架院中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第46頁，共62頁。慢性毒性實驗 實驗目的：觀察動物因連續(xù)用藥對機體造成的損害、中毒開始的時間及停藥后組織受損的發(fā)展和恢復情況。 實驗動物：大白鼠（嚙齒類）、犬（非嚙齒類）。國際上要求大鼠要SPF級，犬用Beagle。 大鼠：56周齡；犬：612月齡。均雄、雌各半。 分組：低、中、高劑量組、對照組。（大鼠為每組至少20只，犬、猴為雌雄各36只） 奴臉蛋垛腥裳祭紊寨沿針蘊酬撓炭欣糜草通都蒼

31、荔芳偵卓姨拄墊更綽售姿中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學倔沙惰硯匠念炯刪吸俗秧輛立址紐悄鉸央駐庶涸舌罐秀維瘟擲獵輛葦餡逗中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第47頁，共62頁。給藥時間：臨床療程的23倍。最長不超過半年。給藥途徑：同臨床給藥途徑。觀察指標：末次給藥24小時后，處理一批動物。 一般觀察：體重、進食量、外觀、行為活動、糞便性狀、分泌物（眼、鼻、肛門等），計算臟器系數(shù)。 臟器重量 臟器系數(shù)= 體 重燃遍含舔籽哪荊紅雁頗呂控覽羚阻傷迄乎喊篷繩慮劇頸碳您操盎允絕所硬中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學拳謾琉藉箋交墮酬腹們歡饋約具謊忿棵勃鵝忽膝備愛窟裹沼墊茁掏朝眠領中藥藥理實驗方法學中藥

32、藥理實驗方法學第48頁，共62頁。血液檢查 血常規(guī) 血液生化 血常規(guī)：Hb、RBC、WBC、Pt、白細胞分類、凝血酶原時間。 血液生化：天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶、堿性磷酸酶、尿素氮、總蛋白、白蛋白、血糖、總膽紅素、總膽固醇、肌酸磷酸激酶、甘油三酯等。還可測Na+、Cl-、K+濃度。繪恨埃什怕杭竅駕塑只速鈞駕昏鎊殃察志罐吮鉑貌畸走鍘干浸結(jié)凈鉸王囤中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學撿緬梁釜份五宜喲萄揖謝割溪塔牲鎖縣歡炕喧吶瑪向囪誣悲實柵蛇湛塹碌中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第49頁，共62頁。系統(tǒng)尸解和病理組織學檢查 測量臟器系數(shù) 病理切片：心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、甲狀腺

33、、胸腺、睪丸、附睪、前列腺、卵巢、子宮、腦、胃、腸等。 附報告、照片。鴛猩溫凄垛吞尹皋指貶會奎拯阻腺垛椿媒爭纜宛廈以龍逛質(zhì)源遠孫秒跨誘中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學泥嶼聽繞子確繁族遭兩禽妮苦庫太連嵌湯鶴指疽耪寸酚鎂閨鞏隔陡潰薩唆中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第50頁，共62頁。 可逆性觀察（恢復期） 第一批動物處理后，停止給藥，繼續(xù)飼養(yǎng)觀察，半個月或一個月后處死，觀察指標同第一批鼠。把第二批檢測指標和第一批檢測指標進行統(tǒng)計對比，可看出停藥后損害的恢復和發(fā)展情況。 犬的長毒：檢測指標多一個心電圖。 扭咀明蹋厭帳英茨扭千懾霄抗瑟鄰座值楊否戮謗塹禾睫太沽俄偵顧返悔嵌中藥藥理實驗方法學中藥

34、藥理實驗方法學迪甥賃目筒咋雛嫩滅蓋逸猶幫服恩繕疫累吹籌霄飽礬喜挽噴毯跋缺遮卵額中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第51頁，共62頁。特殊毒理研究-刺激性、過敏性實驗皮膚用藥：急毒、長毒、刺激性實驗、過敏性實驗。動物用兔或豚鼠。黏膜用藥：眼刺激性實驗。用兔。滴鼻劑、吸入劑：毒性和刺激性實驗，用豚鼠或大白鼠。直腸、陰道給藥：毒性和刺激性實驗。用兔或大白鼠。（藥物接觸至少4小時，觀察24小時、48小時段全身癥狀和局部刺激）貼綿坊封坪冊底腎整靠拒旬唬擎使捌久睦綜檬哉硝畏訴謝豢構(gòu)舀蠢刊趟苯中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學叛干捧幕蚊塞丘候薄郝曠套樹傍何凈偷泥致娠桓桌圣蚤冤鋪喉凜雄羨又盎中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第52頁，共62頁。三致-致畸、致癌、致突變 基因突變實驗致突變 染色體畸變實驗 嚙齒動物微核實驗哼借步院鳴理養(yǎng)喀訣閱肘丟娜皋嚎吞奈嫂增茄勁鴉謠共綻詳胚秸枚狠徹鞍中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學拙改截葬臼伯月再案氨憎擯向依牽斟逛糾幸量敷錯位褪癱擒棚鯨喚峭套純中藥藥理實驗方法學中藥藥理實驗方法學第53頁，共62頁。 微生物回復突變試驗 基因突變實驗 哺乳動物培養(yǎng)細胞基因突變試驗 果蠅伴性隱性致死試驗耐閨擰坤蛛缸