1、馬錢子及其不同炮制品水煎出物中士的寧和馬錢子堿的含量測定【摘要】：目的用hpl法對馬錢子的江西法炮制品及其改進(jìn)法炮制品的水煎出物中士的寧和馬錢子堿含量進(jìn)展測定。方法色譜柱填料為硅膠,流動(dòng)相為正己烷-二氯甲烷-甲醇-濃氨水(47.547.550.35),檢測波長為254n。結(jié)果江西法炮制品及其改進(jìn)法炮制品中士的寧和馬錢子堿的含量較低。其中以醋浸砂炒品中的含量為最低。結(jié)論江西法及其改進(jìn)法炮制的馬錢子比其砂燙法和油炸法更易降低毒性,使其平安范圍增大,從而進(jìn)步其臨床用藥的平安性?！娟P(guān)鍵詞】馬錢子炮制士的寧馬錢子堿高效液相色譜法含量測定abstrat：bjetivehplethdasusedtdeter

2、inestryhnineandbruineinthedetinfseenstryhnianditspressedprdutsfjiangxiethdsandinnvatedethds.ethdssi2asusedasthestatinaryphase,n-hexanedihlrethaneethanlania(47.547.550.35)asthebilephase,ithdetetinavelengthat254n.resultthententsfstryhnineandbruineinthepressedprdutsfjiangxiethdsandinnvatedethdserel.the

3、ntentfthatinaetiaid-sakedprdutsaldedithhtsandasthelest.nlusinseenstryhnianditspressedprdutsfjiangxiethdsandinnvatedethdsanlerthetxiityandiprvethesafetyflinialuse.keyrds：stryhnsnux-vial.；pressing；stryhnine；bruine；hpl；deterinatin馬錢子為馬錢科植物stryhnsnux-vial.的枯燥成熟種子。主要成分為生物堿類,其中主要是士的寧,其次是馬錢子堿,為臨床常用毒劇中藥,具有通

4、絡(luò)止痛、散結(jié)消腫的成效。目前研究較多的主要是藥典法炮制的砂燙馬錢子和北方法炮制的油炸馬錢子,而馬錢子的江西傳統(tǒng)炮制方法及相關(guān)改進(jìn)法的研究較少,有些炮制方法如樟幫的尿泡滑石粉炒法和建幫的尿泡砂炒法甚至未見報(bào)道。本試驗(yàn)來用高效液相色譜法對馬錢子及其各炮制品的水煎出物中士的寧和馬錢子堿含量進(jìn)展了測定。1實(shí)驗(yàn)材料1.1儀器agilent1100series高效液相色譜儀,7725i柱溫箱,agilent1100色譜管理系統(tǒng),可變波長掃描紫外檢測器(vd)。1.2試藥對照品士的寧和馬錢子堿均購于中國藥品生物制品檢定所。士的寧(批號(hào)0705-200005)供含量測定用；馬錢子堿(批號(hào)0706-9403)供

5、鑒別用,經(jīng)純化后,用歸-化法測定含量為98.5%。甲醇為色譜純,其余試劑均為分析純。樣品馬錢子購自樟樹藥材市場,經(jīng)鑒定為馬錢科植物馬錢stryhnsnux-vial.的枯燥成熟種子。2樣品炮制2.1砂燙法取生馬錢子粉碎成細(xì)粉,按?中華人民共和國藥典?2022年版(一部)馬錢子項(xiàng)下方法炮制。2.2油炸法1取市售麻油,倒入鐵鍋中加熱至235左右(以400的溫度計(jì)距鍋底3處測定),投入馬錢子炸至老黃色為度(約3in),取出,瀝盡油,晾干即得。2.3樟幫尿泡法2原藥放入童便中浸49d(夏季放入冰箱中,溫度控制在1520左右)至鼓脹,取出,再用清水(長流水)漂約1421d,取出,刮去絨毛,再用水漂7d,

6、撈出,瀝干水,用樟刀切成腰子片,曬干。2.4樟幫尿泡滑石粉炒法2取尿泡馬錢子片,用滑石粉炒至黃色,篩去滑石粉,研末即可。2.5建幫尿泡砂炒法取原藥材參加童便浸泡,加蓋置49d后取出,用清水?dāng)嚢铔_洗盡尿汁,再加清水漂35d,取出,用碎瓷片刮去絨毛,切薄片,曬至全干。取定量的凈白砂,入鍋內(nèi)用武火炒至洪熱或輕松流利,倒入馬錢片,轉(zhuǎn)文火不斷翻炒至外表鼓起、轉(zhuǎn)棕褐色時(shí),迅速出鍋,篩去砂子,攤涼,再碾細(xì)末。2.6醋酸浸法取凈馬錢子,用水泡2d,潤半天,洗凈,切1.5的薄片,再用5%的醋酸溶液浸泡5d,水漂3d,枯燥,碾碎。2.7醋酸浸泡砂炒法取醋酸浸馬錢子片,按砂燙法項(xiàng)下炮制。2.8醋酸煮法取凈馬錢子用水

7、泡2d,潤半天,洗凈,切1.5的薄片,用%的醋酸溶液緩火煮1.5h,取出,晾干。2.9醋酸煮砂炒法取醋酸煮馬錢子片,按砂燙法項(xiàng)下炮制。3結(jié)果3.1色譜條件色譜柱：hypersilsi2(4.6200,5)；流動(dòng)相：正己烷-二氯甲烷-甲醇-濃氨水(47.547.550.35)；流速：1l/in；檢測波長：254n。士的寧和馬錢子堿的別離度值大于1.5,定量方法為外標(biāo)工作曲線法。士的寧和馬錢子堿的理論塔板數(shù)分別不低于2500和3000。3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精細(xì)稱取士的寧和馬錢子堿對照品分別為11.60g和11.20g,置25l容量瓶中,加氯仿至刻度,作為混合對照品溶液。精細(xì)汲取上述對照品溶液3、5

8、、7、9、11、13l,注入液相色譜儀,測定其峰面積積分值。以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo),峰面積值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。士的寧和馬錢子堿的回歸方程分別為：y2116.75x9.29,r0.9999；y1249.84x21.35,r0.9998。3.3精細(xì)度試驗(yàn)分別精細(xì)汲取上述對照品溶液15l,注入高效液相色譜儀,重復(fù)進(jìn)樣6次,計(jì)算,rsd分別為：士的寧2.01%,馬錢子堿1.75%。3.4重現(xiàn)性試驗(yàn)對砂燙品煎出液測定5次,結(jié)果士的寧平均含量為0.329%,rsd1.86%；馬錢子堿平均含量為0.108%,rsd2.68%。3.5穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一樣品試液,分別于2、4、6、8、10、12h進(jìn)展測定,得士的寧

9、和馬錢子堿的rsd分別為2.14%和2.32%。3.6回收率試驗(yàn)采用加標(biāo)回收法,取含量的炮制品5份,精細(xì)稱取,精細(xì)參加對照品貯備液適量,按樣品測定項(xiàng)下方法操作,計(jì)算回收率。結(jié)果見表1、表2。表1士的寧加標(biāo)回收率試驗(yàn)結(jié)果(略)表2馬錢子堿加標(biāo)回收率試驗(yàn)結(jié)果(略)3.7含量測定將馬錢子生品和炮制品切成小塊后粉碎成細(xì)末,過3號(hào)篩。精細(xì)稱取生品及其炮制品各3份,每份約5g,置100l燒杯中,加水35l浸1h,煎45in,濾出藥液,藥渣再加水20l,煎20in,過濾,合并濾液并定容至50l,再精細(xì)量取20l于分液漏斗中,加氨水調(diào)ph至910,用氯仿萃取4次(15、10、5、5l),合并氯仿萃取液,水浴濃

10、縮,定容至25l。按“3.1項(xiàng)下色譜條件測定,每次進(jìn)樣15l,求得樣品煎煮液中士的寧和馬錢子堿的含量。結(jié)果見圖1、表3、表4。表3不同炮制方法馬錢子中士的寧含量測定結(jié)果(略)表4不同炮制方法馬錢子中馬錢子堿含量測定結(jié)果(略)4結(jié)論馬錢子各炮制品的水煎出物中士的寧和馬錢子堿含量以油炸品和砂燙品為高,其中油炸品最高,與生品比擬仍達(dá)90%以上,這可能與馬錢子經(jīng)油炸和砂燙后質(zhì)地疏松,其化學(xué)成分易于煎出有關(guān)。江西法及其改進(jìn)法炮制品的水煎出物中士的寧和馬錢子堿含量較低,其中以醋浸砂炒品最低,士的寧含量為0.132%,僅為生品的31.7%,馬錢子堿含量為0.031%,僅為生品的21.8%。馬錢子堿的毒性為士的寧的1/8,但其療效卻只有士的寧的1/40,各炮制品中馬錢子堿含量下降均比士的寧大,到達(dá)了去掉療效差、毒性大的馬錢子堿的目的?？梢?江西法及其改進(jìn)法炮制的馬錢子比其砂燙法和油炸法更易降低毒性,使其平安范圍增大,從而進(jìn)步其臨床用藥的平安性。改進(jìn)法用5%醋酸溶液代替童便炮制馬錢子可縮短