1、高效液相色譜法測(cè)定樂(lè)山梔子熊果酸含量蒲清榮，唐燦，張彥燕，李云鵬，趙劍，劉智權(quán)【摘要】目的為操縱樂(lè)山梔子的質(zhì)量，創(chuàng)立高效液相色譜法測(cè)定樂(lè)山梔子中熊果酸含量的要領(lǐng)。要領(lǐng)接納高效液相色譜法，以熊果酸為化學(xué)比擬品，結(jié)實(shí)相：UltiateT18鍵合硅膠柱(4.6250,5)，活動(dòng)相：甲醇水冰醋酸三乙胺90100.030.06，流速0.6lin-1，溫度25，波長(zhǎng)210n測(cè)定樂(lè)山梔子熊果酸含量。效果熊果酸在0.13.0g范疇內(nèi)峰面積A與其質(zhì)量出現(xiàn)精良的線(xiàn)性干系，其回歸方程為：A12954.8829452850.9603，r0.9996，n7；3批樂(lè)山梔子中熊果酸的含量別離為0.25550.0016gg-

2、1藥材，RSD0.6221%，n4；0.2658250.003491gg-1藥材，RSD1.313%，n4；0.2588750.006198gg-1藥材，RSD2.394%，n4；細(xì)密度實(shí)行RSD1.754%，儀器細(xì)密度精良；不變性實(shí)行RSD3.493%,在3.5h測(cè)定熊果酸的含量是不變的；重現(xiàn)性實(shí)行RSD0.9051%，均勻接納率101.9%。結(jié)論高效液相色譜法得當(dāng)樂(lè)山梔子中熊果酸的含量測(cè)定，該要領(lǐng)操縱輕便，效果不變，細(xì)密度、重現(xiàn)性、接納率較好，值得推廣?！娟P(guān)鍵詞】樂(lè)山梔子；熊果酸；含量測(cè)定；高效液相色譜法Keyrds：FrutusGardeniaefrLeshanity；Ursliaid;

3、ntentdeterinatin；HPL梔子為茜草科植物梔子GardeniajasinidesEllis的枯燥成熟果實(shí)，主產(chǎn)于浙江、四川、江西、重慶、湖北等剩梔子具有瀉火除煩、清熱、涼血解毒之成果，用于熱病心煩、黃疸、尿赤、血淋澀痛、血熱吐衄、目赤腫痛、火毒瘡癰等證。根據(jù)當(dāng)代藥理研究證明，熊果酸為梔子緊張有用身分，具有明顯而敏捷低落谷丙轉(zhuǎn)氨酶，消退黃疸，增長(zhǎng)食欲和規(guī)復(fù)肝成果的作用，這在茵梔黃注射液、茵陳蒿湯等方劑中得到普及的應(yīng)用。梔子治療急性黃疸型肝炎、病毒性肝炎重要是通過(guò)其有用身分熊果酸實(shí)現(xiàn)的,熊果酸是梔子利膽退黃、抗病毒性肝炎的重要有用身分。梔子熊果酸還具有解熱落溫、抗炎、抗腫瘤等活性。有

4、報(bào)道表白，梔子苷的生理活性有限，其利膽作用、庇護(hù)肝損傷、低落轉(zhuǎn)氨酶方面均不及梔子中熊果酸顯著，并且梔子苷分子中雙鍵性子生動(dòng)，不不變，易產(chǎn)生反響。比擬而言，梔子熊果酸受熱更不變，因此操縱梔子熊果酸含量具有非常緊張的質(zhì)量評(píng)價(jià)意義16。本研究通過(guò)高效液相色譜法測(cè)定樂(lè)山梔子熊果酸含量，為創(chuàng)立樂(lè)山梔子質(zhì)量新尺度提供參考。1儀器與質(zhì)料SSI高效液相色譜儀；UltiateT18鍵合硅膠柱(4.6250,5)；AS3120AUltrasnileaner；AP-01P真空泵；HaierBD-176DA電冰箱；SHHV21型長(zhǎng)風(fēng)三用電熱恒溫水浴箱；ZK072型電熱真空枯燥箱；RE-52B型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器；AS701K

5、DTUltrasnileaner；UV-9200型紫外可見(jiàn)光分光光度計(jì)；FA1104電子天平；Sh10A型水份快速測(cè)定儀；50目分樣篩；KdakEasyshareZ7590數(shù)位相機(jī)；ASIfx-4800p電子盤(pán)算器；冰醋酸、甲醇、三乙胺為闡發(fā)純，色譜純甲醇；熊果酸化學(xué)比擬品110742-202216,約20g,供含量測(cè)定用中國(guó)藥品生物成品檢定所、梔子產(chǎn)自四川樂(lè)山經(jīng)課題組斷定為茜草科植物梔子GardeniajasinidesEllis的枯燥成熟果實(shí)。2要領(lǐng)與效果2.1色譜條件結(jié)實(shí)相：UltiateT18鍵合硅膠柱(4.6250,5)；活動(dòng)相為甲醇水冰醋酸三乙胺90100.030.06；流速0.6

6、lin-1；溫度25；波長(zhǎng)210n7。2.2梔子熊果酸提取條件優(yōu)選以藥材粒徑、甲醇參加量、超聲提取時(shí)間、超聲提取次數(shù)4因素3程度，以熊果酸收率為指標(biāo)，選用L934正交表優(yōu)選梔子熊果酸提取條件為：梔子藥材破壞為50目粉末，參加甲醇量為藥材量的5倍，每次超聲提取60in，超聲提取3次，可使熊果酸收得率到達(dá)最大，且經(jīng)濟(jì)公正，將另文報(bào)道。2.3熊果酸尺度曲線(xiàn)繪制8細(xì)密稱(chēng)取熊果酸化學(xué)比擬品2.0g60減壓枯燥24h，用無(wú)水甲醇定容于10l容量瓶中，即得0.2gl-1的熊果酸比擬品溶液。熊果酸在0.13.0g范疇內(nèi)峰面積A與其質(zhì)量出現(xiàn)精良的線(xiàn)性干系，其回歸方程為：A12954.8829452850.960

7、3，r0.9996，n7。2.4細(xì)密度實(shí)行細(xì)密汲取上述熊果酸比擬品溶液10l，其積分面積RSD1.754%，n5，表白該要領(lǐng)、該儀器測(cè)定熊果酸細(xì)密度切合要求。2.5不變性實(shí)行細(xì)密汲取上述熊果酸比擬品溶液10l，每隔30in測(cè)定1次，其積分面積RSD3.493%，n5。表白熊果酸用該要領(lǐng)在該儀器上3.5h內(nèi)測(cè)定效果較不變，切合要求。2.6梔子熊果酸含量測(cè)定重現(xiàn)性實(shí)行照前面“2.2項(xiàng)梔子熊果酸的提取工藝，測(cè)得梔子熊果酸含量RSD0.9051%，表白該要領(lǐng)重現(xiàn)性實(shí)行切合要求。2.7梔子熊果酸加樣接納率實(shí)行照前面“2.2項(xiàng)梔子熊果酸的提取工藝提取，取該溶液2l，參加上述熊果酸比擬品溶液0.3l，均勻加

8、樣接納率為101.9%，表白該要領(lǐng)測(cè)定梔子熊果酸的加樣接納率切合要求。2.83批樂(lè)山梔子熊果酸含量測(cè)定根據(jù)“2.2項(xiàng)的提取條件提取3批樂(lè)山梔子熊果酸，根據(jù)上述測(cè)定條件別離測(cè)定熊果酸含量，測(cè)定效果見(jiàn)表19。3討論顛末網(wǎng)羅樂(lè)山、云南、貴州、湖南、河南等地的梔子并測(cè)定熊果酸含量，創(chuàng)造樂(lè)山梔子含量最高，證明其確為質(zhì)量精良的正宗川梔子。實(shí)行創(chuàng)造，上述熊果酸比擬品溶液積分面積為1.51052.5105，峰高為61037103，理論塔板數(shù)約1.2104時(shí)，峰高法盤(pán)算效果與真實(shí)值的偏向?yàn)?.240%，積分面積盤(pán)算效果與真實(shí)值的偏向?yàn)?.415%，表白峰高法比積分面積法更靠近真實(shí)值，尤其實(shí)用于熊果酸峰與齊墩果酸

9、及其衍生物峰未完全分開(kāi)時(shí)。思量到樂(lè)山梔子中熊果酸峰與齊墩果酸及其衍生物峰完全分開(kāi)，并且峰高法盤(pán)算效果與峰面積法盤(pán)算效果無(wú)明顯性差異，出于風(fēng)俗思量，本文仍接納峰面積法測(cè)定樂(lè)山梔子熊果酸的含量。表1樂(lè)山梔子熊果酸含量(略)冰醋酸重要用于改進(jìn)熊果酸與齊墩果酸及其衍生物圖譜分散度，由于冰醋酸具有揮發(fā)性，對(duì)熊果酸與齊墩果酸及其衍生物圖譜分散度存在必然程度的顛簸，通過(guò)重復(fù)實(shí)行，才得到較樂(lè)成的圖譜。假設(shè)改用不具有揮發(fā)性的磷酸，那么能改進(jìn)熊果酸與齊墩果酸及其衍生物圖譜分散度的顛簸性，大概更輕易樂(lè)成，有待于進(jìn)一步研究。熊果酸提取溫度最幸虧60以下，樣品溶液置于0冰箱中貯存，測(cè)按時(shí)闡發(fā)室的溫度操縱在25擺布，以制

10、止熊果酸剖析對(duì)效果造成影響?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1李開(kāi)泉，陳武，熊筱娟，等.烏索酸化學(xué)、藥理及臨床應(yīng)用希望J.中成藥，2002,24(9)：709.2熊筱娟，陳蔚云，崔江龍，等.烏索酸對(duì)動(dòng)物實(shí)行性肝損傷及膽汁的影響J.中藥材，2022,26(8)：578.3熊筱娟，陳蔚云，崔江龍，等.烏索酸對(duì)大鼠膽汁的影響J.中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2022,31(4)：54.4張靜，鄧濤，陳會(huì)敏，等.熊果酸按捺胃癌細(xì)胞BG-823增殖并誘導(dǎo)凋亡J.武江大學(xué)學(xué)報(bào)醫(yī)學(xué)版，2022,26(3)：375.5張維文，黎銀燕，張貴平，等.熊果酸誘導(dǎo)人乳腺癌細(xì)胞F-7凋亡的實(shí)行研究J.中藥材，2022,28(4)：297.6傅春升，婁紅祥，張學(xué)順.梔子的化學(xué)身分與藥理作用J.外洋醫(yī)學(xué)植物藥分冊(cè)，2022,19(4)：152.7謝瑩，杭太俊