1、手性拆分分離技術(shù)在藥物研發(fā)中的應用河北大學藥學院目 錄 手性藥物分離的重要性1 測定與獲得單一對映體的方法2 手性分離原理3 在藥物研發(fā)中解決的問題4鏡平面對映體 A對映體 B手性分子 手性藥物分離的重要性1Chirality & Its ConsequenceBuilding blocks of life -amino acids, sugars, enzyme.(origin of life)Mirror ImageMirror ImageDrugs, agrochemicals, food additives, fragrances, archeology, ecophysiology,

2、 etc.Consequence:Chiral molecules in biological materials Most enzymes are chiral reagents because their binding site is chiral Many drug molecules are synthesized as racemates Either both molecules have comparable activity or one is inactive.服用過鎮(zhèn)靜藥物肽胺哌啶酮的孕婦產(chǎn)下了四肢呈海豚狀的畸形兒。隨后的研究表明，肽胺哌啶酮的兩個對映體中只有（R）-對映

3、體具有鎮(zhèn)靜作用，而（S）-對映體是一種強力致畸劑，會導致胎兒畸形。LOGO 表 一些具有不同手性的藥物的藥效差別有效異構(gòu)體不良異構(gòu)體多巴（Dopa）（S）-異構(gòu)體，治療帕金森癥（R）-異構(gòu)體，嚴重副作用氯胺酮（Ketamina）（S）-異構(gòu)體，麻醉劑（R）-異構(gòu)體，致幻劑青霉素胺（Pexicillamine）（S）-異構(gòu)體，治療關(guān)節(jié)炎（R）-異構(gòu)體，突變劑心得安（Propranol）（S）-異構(gòu)體，治療心臟?。≧）-異構(gòu)體，致性欲下降巴比妥類化合物（S）-異構(gòu)體，鎮(zhèn)靜藥，對中樞神經(jīng)系統(tǒng)有抑制作用（R）-異構(gòu)體, 驚厥劑，具有中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮作用乙胺丁醇（Ethambutol）（S）-異構(gòu)體，治

4、療結(jié)核病（R）-異構(gòu)體致盲高效液相色譜高效液相色譜具有四個特點:(1)分離效能高 (2)選擇性高 (3)檢測靈敏度高 (4)分析速度快高效液相色譜法在手性藥物的分離中應用廣泛,目前常用的方法有 手性衍生化試劑法、手性流動相添加劑法、手性固定相法。Introduction of chromatographyThe most widely used analytical separations techniqueUtilizes a liquid mobile phase to separate components of mixtureUses high pressure to push sol

5、vent through the columnThe developer of chromatographyRussian scientist：M. S. Tswett (1906)Chromatography basically involves the separation of mixtures due to differences in the distribution coefficient (equilibrium distribution) of sample components between two different phases. One of these phases

6、 is a mobile phase and the other is a stationary phase.HPLC的儀器配置及流程溶劑 色譜泵自動進樣器 HPLC色譜柱檢測器廢液數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)色譜圖：HPLC圖形結(jié)果（Chromatogram）色譜圖即色譜柱流出物通過檢測器時所產(chǎn)生的響應信號對時間的曲線圖，其縱坐標為信號強度，橫坐標為保留時間。 色譜峰保留時間（分）基線峰高峰寬響應值通用LC固定相 1)基質(zhì)材料 細粒度（3，5，10 m ）、 均勻、球型、高純度的SiO2 I 硅酸鈉（水玻璃）-制SiO2 凝膠 II 四乙氧基硅烷Sol-gel技術(shù)制超純硅膠 1.通用HPLC固定相填料通用L

7、C固定相Packing column and monolithic columnsPacked column A porous particle Stationary phase PolymermonolithSilica monolith液相色譜原理 基本概念及方法開發(fā)液相色譜實驗所需的基本參數(shù)流動相：種類及配比，等度或梯度固定相：色譜柱類型及內(nèi)徑、長短流動相輸送系統(tǒng)參數(shù)：流速檢測器參數(shù)：紫外檢測波長，靈敏度等溫度控制進樣量以上參數(shù)即構(gòu)成一個具體的HPLC方法；亦稱色譜條件環(huán)糊精及其衍生物 為修飾過的環(huán)糊精衍生物，作為手性選擇劑，鍵合在硅膠上硅膠外消旋體8000 psi 高壓填裝 分子印跡聚

8、合物（MIP）概述分子識別設(shè) 想首次合成發(fā) 展酶/底物 抗原/抗體 激素/受體Pauling 抗原為模板合成抗體，1940Wulff, MIP, 1972Mosbach, Nature ,1993What are MIPs?Synthetic polymers with well-defined surface cavities created by templateMIP can recognise the template in presence of similar molecules Shape selectivity Binding groups on cavity surfaceA

9、pplications in separation science, catalysis, organic chemistry, immunoassays, sensors,分子印跡技術(shù)的基本原理 PrearrangementPolymerizationExtractionMolecular imprinting technologyMosbach(The first user of non-covalent methodology) Pauling(The first developer of MIP) Characteristics of MIP:PredeterminationSpeci

10、fic recognitionPracticability MIP的制備模板分子、功能單體、交聯(lián)劑、聚合反應Nature Biotechnology,2002,20,884通過非共價鍵將印跡分子固定。 洗脫后留下的空腔有特定選擇性。Common monomers and crosslinkers in MIP聚合方式本體聚合懸浮聚合乳液聚合溶漲聚合原位聚合表面聚合最簡單的制備方法制備球形MIP產(chǎn)率最高適合作為色譜介質(zhì)制備成本高球形MIP均勻性好在硅膠基質(zhì)上Preparation of imprinted polymer Preparation of imprinted polymer MIP - for what purpo