1、流式高通量多因子檢測技術及應用 題綱II. AimPlex多因子檢測技術的原理和特質III.需具備什么樣的實驗條件，才能開展AimPlex檢測工作？ VI. AimPlex產品應用 I.多因子檢測技術在生物醫(yī)藥研究中的應用 流式多因子檢測技術在生物醫(yī)藥研究中的應用細胞因子與疾病免疫調節(jié)作用：調節(jié)著每個細胞乃至組織活動；直接參與了細胞間相互作用以及細胞外微環(huán)境的變化參與疾病發(fā)生：類風濕性關節(jié)炎； 強直性脊柱炎SLE； 銀屑??； 細胞因子風暴以Th淋巴細胞為樞紐的細胞因子調節(jié)網細胞因子與疾病治療多因子檢測技術xMapR&DMillplexBioplexLuminex平臺CBAFlowcytomix

2、流式基礎上AimPlex流式多重定量技術 檢測細胞表面蛋白或胞內蛋白多因子檢測與疾病研究腫瘤生物學免疫相關代謝心血管疾病干細胞研究神經生物學腫瘤移植細胞凋亡更少樣本高通量更短時間多因子檢測涵蓋了很多研究領域多因子檢測產品廣泛應用于疾病的研究 腫瘤 (如肝癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、子宮頸癌等) 心血管疾病 (如高血壓、動脈粥樣硬化) 糖尿病、肥胖癥 自閉癥、老年癡呆癥 自身免疫性疾病 (系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風濕性關節(jié)炎、哮喘、 過敏反應等) 炎癥感染 (如結腸炎、克羅恩氏病、敗血癥等) 傳染性疾病 (如艾滋病、肝炎等) 其它 (如多發(fā)性硬化癥、營養(yǎng)不良、青光眼、阻塞性肺病、銀 屑病等)多因子檢

3、測應用領域開發(fā)研究大學政府專業(yè)管理機構醫(yī)學中心藥物研發(fā)生物技術企業(yè)藥物公司臨床研究醫(yī)院醫(yī)學中心早期診斷臨床實驗室大學檢測測試中心實驗室診斷醫(yī)院專業(yè)檢測機構所有流式細胞儀客戶 基礎醫(yī)學、生物學研究 基礎免疫學研究 細胞生物學如信號傳導、凋亡 癌癥研究、傳染病等藥物開發(fā)和療效研究什么是AimPlex多因子檢測技術？AimPlex多因子檢測技術：利用不同尺寸、不同熒光強度的多個微球群實現多因子的檢測利用該技術，配合任何一臺配備488nm激發(fā)光的流式細胞儀，即可實現24個指標的同步檢測。 AimPlex技術原理流式細胞儀檢測熒光，從而實現對蛋白抗原的檢測；結合抗原標準品的標準曲線，可實現對蛋白抗原的定

4、量檢測。 一系列熒光強度不同的微球包被有特異性捕獲抗體，與待測樣本孵育后，加入檢測抗體，形成“三明治”復合物45123不同大小，不同熒光強度的捕獲微球，在FCM FL4檢測不同的目標蛋白PE 熒光強度即為靶蛋白量456123微球FL2 (Reporter Parameter)FL4(Differentiator Parameter)不同大小種類微球分布AimPlex檢測過程60分鐘的抗原抗體孵育30分鐘生物素化檢測抗體孵育20分鐘鏈霉素親和素-PE孵育具有488nm激發(fā)光源AimPlex結果的提取和分析流式細胞儀： 幾乎所有流式細胞儀都可以使用，只要FCAP Array 3.0 軟件可計算被測

5、樣本中待檢物的濃度標準曲線分析FCAP array 3.0 Software曲線自動生成線性或對數形式顯示回歸曲線擬合Human Th1/Th2 Standard: Blank樣本檢測舉例Human Th1/Th2 Standard: 14 pg/mlHuman Th1/Th2 Standard: 42 pg/mlHuman Th1/Th2 Standard: 123 pg/mlHuman Th1/Th2 Standard: 370 pg/mlHuman Th1/Th2 Standard: 1,111 pg/mlHuman Th1/Th2 Standard: 3,333 pg/mlHuman

6、Th1/Th2 Standard: 10,000 pg/mlHuman Th1/Th2 unknown 1Human Th1/Th2 unknown 2AimPlex優(yōu)勢 高通量，多指標同時檢測一個標本多達24個指標 需要標本量少節(jié)省樣品（25 L）、試劑、實驗空間、儀器設備 選擇靈活研究人員可以根據實驗需要，自由組合檢測指標 耗時短整個過程只需3個多小時 要求低 - 適用于所有含488激發(fā)光的流式細胞儀 寬范圍，高靈敏 -更寬檢測范圍，高靈敏度，高特異性，高重復性更寬的檢測范圍Lower concentration range standard curve for better calcul

7、ation of samples with very low AFP concentration藥明康德客戶需求：檢測小鼠肝癌模型的AFP濃度AimPlex and Luminex產品對比人外周血不同處理后分別用Aimplex Th1/Th2/Th17 (7個指標）檢測和Luminex試劑盒檢測結果對比AimPlex ELISAAimPlexELISA樣本量15uL 350-700ul 所需檢測板 1塊 7塊 操作時間4h47h 檢測范圍2-5000pg/mL 2 - 1500pg/ml 反應體系同一 不同 價格 10800元18000元VS例子：40個樣本 7個指標：IFN-gamma,IL

8、-10,IL-17A,IL-2,IL-4,IL-6,TNF-alpha可供測試的樣品來源高度多樣化血清血漿腦脊液條件培養(yǎng)基各種細胞裂解液各種組織裂解液 - 肺、支氣管、子宮內膜組織、肝、脾、腦、宮頸等組織。 淚液前列腺液初乳、羊水各種膿腫液腹水、肝囊腫液支氣管肺泡灌洗液骨裂解液、滑液等齦溝液、唾液、痰液血凝塊普通常見樣品非常規(guī)樣品幾乎所有液質(fluids)的生物樣本！小鼠血凝塊樣本檢測Serum and blood clot lysate samples of mice treated with or without (Con) LPS were tested using AimPlex m

9、ouse cytokine assays. This experiment indicates that besides serum, blood clot (after lysed with AimPlex lysis buffer) can be used for measurements of many cytokines in blood and precious serum samples can be saved for other assays. Page 35AimPlex產品形式預混多因子單因子抗原標準品單因子檢測試劑盒預混多因子檢測試劑盒種屬：人、小鼠、大鼠、靈長類，狗低價

10、定制 Th1/Th2/Th17 7-plex kitT輔助細胞對免疫系統(tǒng)的建立和功能健全起重要作用。AimPlex人和鼠及NH PTh 17多重檢測系列產品可同步定量檢測由Th1， Th2，Th17和Treg細胞分泌的細胞因子，為Th細胞功能鑒定提供有效的檢測工具。IFNgamma, IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-17A and TNFalpha需具備什么樣的實驗條件，才能開展多因子檢測工作？ AimPlex易于在普通實驗室開展AimPlex Filter Plate WasherAimPlex不同應用領域試劑盒應用分組名稱候選待檢物呼吸道炎癥組sCD30, sE-s

11、electin, sICAM-1, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p70, IL-13, IL-17A, , IFN-gamma, MCP-1, TNF-alpha, sVCAM-1, NGF特應性皮炎組sCD30, sICAM-1, IL-4, IL-5, IL-13, TNF- alpha擴充的心血管組Adiponectin, sCD40L, CRP, sE-selectin, sICAM-1, IL-1beta, IL-6, IL-8, , MCP-1, MPO, PAI-1, sP-selectin, TNF-alpha, t-PA, sVCA

12、M-1糖尿病組Adiponectin, CRP, sICAM-1, IFN-alpha, IFN-gamma, Iso-Insulin, IL-1beta, IL-6, IL-8, IL-10, , Leptin, MCP-1, MIP-1alpha, MIP-1beta, NGF, PAI-1, Resistin, TNF-alpha, TNF-beta, t-PA生長和分化組G-CSF, IFN- alpha, IFN-gamma, IL-1beta, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p70, IL-13, , IL-23, MCP-1,

13、 NGF, TNF-alpha免疫調控組sCD30, sCD40L, IL-4, IL-6, IL-10, IL-12p70, IL-13, IL-23, IFN-alpha, IFN-gamma, TNF-alpha炎癥組sCD30, sCD40L, CRP, sE-selectin, G-CSF, sICAM-1, IFN- alpha, IFN-gamma, IL-1beta, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p70, IL-13, IL-17A, , IL-23, MCP-1, MIG, MIP-1alpha, MIP-1beta, sPECAM-1, sP

14、-selectin, TNF-alpha, sTNF-R1, sVCAM-1多發(fā)性硬化癥組sCD30, sICAM-1, IFN-gamma, IL-4, IL-8, IL-10, IL-12p70, IL-17A, , MCP-1, MIP-1beta, TNF-alpha, TNF-beta, sVCAM-1AimPlex不同應用領域試劑盒擴充的肥胖癥組Adiponectin, sCD40L, CRP, sICAM-1, IL-6, , Leptin, MCP-1, MPO, NGF, OPG, PAI-1, Resistin, TNF-alpha, sTNF-R1疼痛組sICAM-1,

15、IL-1beta, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p70, IFN-gamma, MCP-1, MIP-1 alpha, MIP-1beta, NGF, TNF-alpha, sVCAM-1先兆子癇組Adiponectin, IFN-gamma, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p70, , TNF-alpha類風濕性關節(jié)炎組sCD30, sE-selectin, sICAM-1, sICAM-3, IFN-alpha, IL-1beta, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p70, IL-13, IL-17A

16、, , IL-23, MCP-1, MIP-1alpha, sP-selectin, TNF-alpha, sVCAM-1膿毒癥/敗血性休克癥組Sepsis (CRP, sE-selectin, IL-1beta, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p70, , MCP-1, MIP-1 alpha, MIP-1beta, PAI-1, TNF- alpha, sVCAM-1), Septic shock (IL-1beta, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-13, IFN-gamma, G-CSF, MCP-1, PAI-1, TNF-alpha)系統(tǒng)性紅斑狼瘡組sCD30, sCD40L, IFN- alpha, IL-6, IL-10, IL-12p70, IL-13, , NGF, TNF-alpha, sVCAM-1腫瘤壞死因子/腫瘤壞死因子受體組sCD30, sCD40L, NGF, OPG,TNF-alpha, TNF-beta, sTNF-R1移植組CRP,ICAM and VCAM, sVCAM-1,sCD30, sICAM-1, IFN- alpha, IFN-gam