病原微生物標本的采集保存及運輸綿陽市CDC微檢所周良君病原微生物標本的采集保存及運輸綿陽市CDC微檢所1主要內(nèi)容正確采集、保存、運輸標本的意義采集標本的用途標本采集的原則常見傳染病標本采集的種類各種標本的采樣時間和方法標本的保存標本的安全運輸標本采集時生物安全主要內(nèi)容正確采集、保存、運輸標本的意義2正確采集、保存、運輸標本的意義標本的質(zhì)量的好壞直接影響實驗結(jié)果的正誤，而標本的質(zhì)量與標本的采集、保存、運輸密切相關(guān)，標本采集、保存不當可導致假陰性、假陽性結(jié)果的出現(xiàn)。因此正確地采集、保存、運輸標本是保證實驗室檢驗結(jié)果準確可靠的前提。正確采集、保存、運輸標本的意義標本的質(zhì)量的3采集標本的用途可以分為以下兩類：一類是用于細菌或病毒病原的檢測（病原分離或核酸檢測）常用標本如：糞便、咽拭子、血液、氣管分泌物、腦脊液等；另一類標本是用于病原抗體檢測標本通常包括血液和腦脊液采集標本的用途可以分為以下兩類：4標本采集的原則早期采集采集時間最好是發(fā)病初期、發(fā)熱期、癥狀典型期在藥物使用前采集無菌采集采集的標本應無外源性污染。盛裝標本的容器應為一次性或經(jīng)高壓滅菌的無菌容器，不能用酸類或消毒劑處理采集的標本要適量且具有代表性安全采集標本防止標本中病原微生物的傳播和自身感染標本采集的原則早期采集采集時間最好是發(fā)病初期、發(fā)熱期、5常見傳染病采集標本的種類呼吸道傳播的病毒性疾?。鞲?、禽流感、甲型H1N1流感、SARS、麻疹、風疹等）咽拭子含漱液

痰液血清標本腦脊液尸檢組織下呼吸道標本常見傳染病采集標本的種類呼吸道傳播的病毒性疾?。鞲?、禽流感6常見傳染病采集標本的種類腸道傳播的病毒性疾?。ㄈ耸帧⒆?、口病）糞便標本咽拭子標本血液標本皰疹液

肛拭子標本尸檢標本腦脊液標本

常見傳染病采集標本的種類腸道傳播的病毒性疾?。ㄈ耸?、足、口病7常見傳染病采集標本的種類經(jīng)呼吸道傳播的細菌性疾病（如流腦）咽拭子腦脊液血液瘀點、瘀斑常見傳染病采集標本的種類經(jīng)呼吸道傳播的細菌性疾?。ㄈ缌髂X）8常見傳染病采集標本的種類蟲媒傳播的疾?。ㄒ倚湍X炎）血液腦脊液常見傳染病采集標本的種類蟲媒傳播的疾?。ㄒ倚湍X炎）9常見傳染病采集標本的種類經(jīng)消化道傳播的細菌性疾?。▊?、細菌性痢疾、細菌性感染性腹瀉、霍亂等)糞便（肛拭子）可疑食物嘔吐物血液、腦脊液、尿液（傷寒腸熱癥）常見傳染病采集標本的種類經(jīng)消化道傳播的細菌性疾病（傷10常見傳染病采集標本的種類人感染豬鏈球菌?。ㄖ饕?jīng)破損皮膚粘膜傳播的疾病）腦脊液血液瘀點、瘀斑胸、腹水常見傳染病采集標本的種類人感染豬鏈球菌?。ㄖ饕?jīng)破損皮膚粘膜11常見標本采集的時間、方法用于抗原檢測的標本咽拭子采集病人發(fā)病3日內(nèi)的咽拭子標本，用于病原檢測（病原分離、核酸檢測的陽性率較高）?；颊哂们逅诤?，用專用采樣棉簽，令患者仰頭張口，將無菌拭子（用無菌鹽水浸濕）伸入口腔適度用力拭抹雙側(cè)咽后壁部位，應避免觸及口腔及舌部；（必要時可使用壓舍板），迅速將棉簽放入裝有3-5ml保存液的15ml外螺旋蓋采樣管中，在靠近頂端處折斷棉簽桿，旋緊管蓋并密封，以防干燥。采樣管外表貼上標簽，注明患者的姓名、樣本的種類、采樣的時間、采樣人等基本信息。常見標本采集的時間、方法用于抗原檢測的標本12懸雍垂懸雍垂13

含嗽液：發(fā)熱72小時內(nèi)采集。含漱液通過用小體積（5-10ML）的無菌鹽水含漱獲得，并收集液體到有旋轉(zhuǎn)蓋的50ml塑料管離心管中.痰液：只采集重癥病人，無時間限制。病人將痰液咳入無菌平皿中，然后用棉簽刮取痰液放入含4～5ml樣本運輸液的螺口試管中。病人將痰液咳入無菌、內(nèi)裝4～5ml標本運送液、帶墊圈的50ml螺口塑料管中。下呼吸道標本（適用于氣管插管病人）：只采集重癥病人，無時間限制。收集氣管吸取液或支氣管灌洗液5~10ml放入無菌、帶墊圈的50ml螺口塑料管中。含嗽液：14皰疹液瘀點瘀斑先用75%的酒精對皰疹液瘀點瘀斑周圍的皮膚進行消毒，待皮膚干燥后，用消毒針將皰疹液瘀點瘀斑挑破用棉簽蘸取液體，迅速將棉簽放入內(nèi)裝有3-5ml保存液的采樣管中，在靠近頂端處折斷棉簽桿，旋緊管蓋并密封?？赏瑫r采集多個皰疹液瘀點瘀斑作為一份標本。采樣管外表貼上標簽，注明患者的姓名、樣本的種類、采樣的時間、采樣人等基本信息。皰疹液瘀點瘀斑15糞便標本一般采集病人發(fā)病3日內(nèi)的糞便標本，用于病原檢測。用藥前自然排便的標本，采集膿血粘液部分量2-3g，液體便取絮狀物1-2ml，采集后立即放入無菌采便管內(nèi)（或保存液中)。采樣管外表貼上標簽，注明患者的姓名、樣本的種類、采樣的時間、采樣人等基本信息。糞便標本16用于抗原檢測的標本肛拭子標本采集病人發(fā)病3日內(nèi)的肛拭子標本，用于病原檢測。用專用采樣棉簽，從患兒肛門輕輕插入，適度用力弧型左右擦拭數(shù)下，拔出后,迅速將棉簽放入裝有3－5ml保存液的15ml外螺旋的采樣管中，在靠近頂端處折斷棉簽桿，旋緊管蓋，并密封，以防干燥。采樣管外表貼上標簽，注明患者的姓名、樣本的種類、采樣的時間、采樣人等基本信息。用于抗原檢測的標本肛拭子標本17用于抗原檢測的標本尸檢標本病人死亡后越早采集越好。采集腦、肝、肺和腸淋巴結(jié)等重要組織標本，每一采集部位分別使用單獨的消毒器械。每種組織應多部位取材，每部位應取2-3份約5-10g的組織，淋巴結(jié)2個，分別置于15ml-50ml無菌的有外螺旋蓋的凍存管中，采樣管外表貼上標簽，注明患者的姓名、樣本的種類、采樣的時間、采樣人等基本信息。用于抗原檢測的標本尸檢標本18用于抗原檢測的標本腦脊液標本當患者出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀時，可采集腦脊液標本，進行病原分離或核酸，抗體檢測。采集時間為出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀后3天內(nèi)，采集方法采用腰椎穿刺，采集量為1.0-2.0ml。采集后立即裝入無菌帶墊圈的凍存管中。采樣管外表貼上標簽，注明患者的姓名、樣本的種類、采樣的時間、采樣人等基本信息。用于抗原檢測的標本腦脊液標本19用于抗原檢測的標本血液標本作血液病原培養(yǎng)時，嚴格用無菌穿刺法采肘靜脈血，移入無菌的有螺口的抗凝的容器或血培養(yǎng)瓶中送檢，或直接接種血平皿。血培養(yǎng)瓶接種比例一般按1：5-1：10，目的是稀釋血液中的抗菌藥物、抗體等殺菌物質(zhì)。

用于抗原檢測的標本血液標本20用于抗體檢測的標本血清單份血清急性期血清IgM抗體雙份血清采集急性期（發(fā)病0-7d）和恢復期（發(fā)病14-30d）雙份配對血清同時檢測，如IgG抗體滴度有4倍以上升高才有意義。靜脈采集3-5ml全血，置于真空無菌采血管中，自凝后，分離血清，將血清移到2ml外螺旋的血清保存管中，貼上標簽，注明患者的姓名，采集急性期和恢復期血清瓶蓋最好采用不同的顏色，以便區(qū)分。將血清置于-20℃以下冰箱中冷凍保注意:全血標本不可冷凍用于抗體檢測的標本21用于抗體檢測的標本腦脊液一般于出現(xiàn)神經(jīng)癥狀時采集，查IgM只需一份腦脊液，而查IgG則需收集兩次，時間間隔，保存同前所述。用于抗體檢測的標本腦脊液22病原微生物標本的保存

病原微生物的保存取決于運送時間的長短及不同病原微生物對干燥、溫度、營養(yǎng)、pH值的耐受能力。能確保目標細菌的存活并抑制其他微生物的過度生長，應選擇合適的培養(yǎng)基和推薦保存溫度。

病原微生物標本的保存病原微生物的保存取決于運送時間的長短23病原微生物標本的保存細菌用于分離培養(yǎng)細菌的標本應在運送培養(yǎng)基中運送并保存于合適的溫度。分離不同的病原菌使用的運送培養(yǎng)基也不同，一般冷藏運送（奈瑟菌屬，流感嗜血桿菌應在35～37?C保溫運送）病原微生物標本的保存細菌24病原微生物標本的保存病毒用于分離病毒的標本，一般應放在保溫容器（0?C～4?C）里，最好12小時內(nèi)送達實驗室，最長放置不可超過4天，如不能立即分離病毒時，應將標本-20?C凍存保存，放置不可超過1周。若長期儲存，最好在－70?C凍存。采集病毒拭子推薦使用：滅菌人造纖維拭子（如聚酯纖維）和塑料棒注意采集咽拭子或肛拭子等用于檢測核酸時不能使用棉拭子和木質(zhì)拭子棒，因為這類材料中含有核酸擴增抑制劑病毒采樣液推薦使用：病毒保存液（含有蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑，阻止細菌和真菌生長的抗生素，緩沖液）

專用病毒采樣盒（海南興南峰醫(yī)藥器械有限公司，TelFax病原微生物標本的保存病毒25免疫檢測標本的保存用于檢測抗原或抗體的標本可在4?C～8?C保存24～28h，在－20?C保存時間更長。檢測抗體的血清可在4?C保存約一個星期，最長10天；超過一周必須在-20?C下冷凍。免疫檢測標本的保存用于檢測抗原或抗體的標本可在4?C～8?C26檢測核酸樣品要求低溫快速送檢從標本采集到檢測的間隔時間要盡可能短，并盡可能將標本處于冷藏狀態(tài)。檢測前保存時間較長時則需冷凍標本防止核酸降解。檢測核酸樣品要求低溫快速送檢27標本的運輸標本包裝標本必須放在大小合適的帶螺旋蓋、內(nèi)有橡膠圈的塑料管里擰緊；將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋里密封，每袋裝一份標本；在塑料管上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、姓名；標本的運輸標本包裝28標本的運輸標本包裝填寫標本送檢登記表（應包括的基本信息：姓名、性別、年齡、職業(yè)，現(xiàn)住址、發(fā)病日期、標本種類、采集日期、一般的臨床癥狀等），連同塑料管用另一塑料袋密封；將裝標本的密封袋放入專用運輸箱內(nèi)，放入冰排，用具吸水和緩沖能力的材料填充同一患者兩份以上的密封標本，可放在同一個塑料袋內(nèi)再次密封。所有容器必須印有生物危險標識運輸標本的外包裝必須有明確的標簽，標明寄送人和接收人的詳細聯(lián)系方式、包裝日期和運輸日期等標本的運輸標本包裝29標本應在帶有冰袋或者冰排的泡沫箱或保溫箱中運輸。保證樣品運送所需溫度的方法為維持4?C～8?C，運送盒中要填充冰袋。為保證-20?C條件，在外包裝袋內(nèi)裝干冰，但需確保二氧化碳能釋放以防爆炸。為保證－70?C條件，可采用液氮用來儲存和運送。

標本運送要求專人專車病原微生物標本的采集保存及運輸課件講義30生物安全傳染性疾病的臨床樣本中均存在活的病原微生物，在突發(fā)公共衛(wèi)生事件中往往樣本的病原體及傳播途徑不詳，因此在采樣過程要注意生物防護1、配備具有采集微生物樣本所需要的生物安全防護水平相適應的設(shè)備個人防護用品：隔離服、帽、口罩、手套、防護鏡、防護器材生物安全傳染性疾病的臨床樣本中均存在活的病原微生物，在突發(fā)公31生物安全2、具有掌握相關(guān)專業(yè)知識和操作技能技術(shù)人員3、具有有效的防止病原微生物擴散和感染的措施4、采集樣本時要防止刺傷、機械創(chuàng)傷，如發(fā)生以外，應及時消毒處理和免疫接種，報告主管領(lǐng)導并進行醫(yī)學觀察生物安全2、具有掌握相關(guān)專業(yè)知識和操作技能技術(shù)人員32謝謝！謝謝！33病原微生物標本的采集保存及運輸綿陽市CDC微檢所周良君病原微生物標本的采集保存及運輸綿陽市CDC微檢所34主要內(nèi)容正確采集、保存、運輸標本的意義采集標本的用途標本采集的原則常見傳染病標本采集的種類各種標本的采樣時間和方法標本的保存標本的安全運輸標本采集時生物安全主要內(nèi)容正確采集、保存、運輸標本的意義35正確采集、保存、運輸標本的意義標本的質(zhì)量的好壞直接影響實驗結(jié)果的正誤，而標本的質(zhì)量與標本的采集、保存、運輸密切相關(guān)，標本采集、保存不當可導致假陰性、假陽性結(jié)果的出現(xiàn)。因此正確地采集、保存、運輸標本是保證實驗室檢驗結(jié)果準確可靠的前提。正確采集、保存、運輸標本的意義標本的質(zhì)量的36采集標本的用途可以分為以下兩類：一類是用于細菌或病毒病原的檢測（病原分離或核酸檢測）常用標本如：糞便、咽拭子、血液、氣管分泌物、腦脊液等；另一類標本是用于病原抗體檢測標本通常包括血液和腦脊液采集標本的用途可以分為以下兩類：37標本采集的原則早期采集采集時間最好是發(fā)病初期、發(fā)熱期、癥狀典型期在藥物使用前采集無菌采集采集的標本應無外源性污染。盛裝標本的容器應為一次性或經(jīng)高壓滅菌的無菌容器，不能用酸類或消毒劑處理采集的標本要適量且具有代表性安全采集標本防止標本中病原微生物的傳播和自身感染標本采集的原則早期采集采集時間最好是發(fā)病初期、發(fā)熱期、38常見傳染病采集標本的種類呼吸道傳播的病毒性疾?。鞲?、禽流感、甲型H1N1流感、SARS、麻疹、風疹等）咽拭子含漱液

痰液血清標本腦脊液尸檢組織下呼吸道標本常見傳染病采集標本的種類呼吸道傳播的病毒性疾?。鞲小⑶萘鞲?9常見傳染病采集標本的種類腸道傳播的病毒性疾?。ㄈ耸?、足、口病）糞便標本咽拭子標本血液標本皰疹液

肛拭子標本尸檢標本腦脊液標本

常見傳染病采集標本的種類腸道傳播的病毒性疾?。ㄈ耸?、足、口病40常見傳染病采集標本的種類經(jīng)呼吸道傳播的細菌性疾病（如流腦）咽拭子腦脊液血液瘀點、瘀斑常見傳染病采集標本的種類經(jīng)呼吸道傳播的細菌性疾?。ㄈ缌髂X）41常見傳染病采集標本的種類蟲媒傳播的疾病（乙型腦炎）血液腦脊液常見傳染病采集標本的種類蟲媒傳播的疾?。ㄒ倚湍X炎）42常見傳染病采集標本的種類經(jīng)消化道傳播的細菌性疾?。▊?、細菌性痢疾、細菌性感染性腹瀉、霍亂等)糞便（肛拭子）可疑食物嘔吐物血液、腦脊液、尿液（傷寒腸熱癥）常見傳染病采集標本的種類經(jīng)消化道傳播的細菌性疾?。▊?3常見傳染病采集標本的種類人感染豬鏈球菌?。ㄖ饕?jīng)破損皮膚粘膜傳播的疾?。┠X脊液血液瘀點、瘀斑胸、腹水常見傳染病采集標本的種類人感染豬鏈球菌?。ㄖ饕?jīng)破損皮膚粘膜44常見標本采集的時間、方法用于抗原檢測的標本咽拭子采集病人發(fā)病3日內(nèi)的咽拭子標本，用于病原檢測（病原分離、核酸檢測的陽性率較高）?；颊哂们逅诤?，用專用采樣棉簽，令患者仰頭張口，將無菌拭子（用無菌鹽水浸濕）伸入口腔適度用力拭抹雙側(cè)咽后壁部位，應避免觸及口腔及舌部；（必要時可使用壓舍板），迅速將棉簽放入裝有3-5ml保存液的15ml外螺旋蓋采樣管中，在靠近頂端處折斷棉簽桿，旋緊管蓋并密封，以防干燥。采樣管外表貼上標簽，注明患者的姓名、樣本的種類、采樣的時間、采樣人等基本信息。常見標本采集的時間、方法用于抗原檢測的標本45懸雍垂懸雍垂46

含嗽液：發(fā)熱72小時內(nèi)采集。含漱液通過用小體積（5-10ML）的無菌鹽水含漱獲得，并收集液體到有旋轉(zhuǎn)蓋的50ml塑料管離心管中.痰液：只采集重癥病人，無時間限制。病人將痰液咳入無菌平皿中，然后用棉簽刮取痰液放入含4～5ml樣本運輸液的螺口試管中。病人將痰液咳入無菌、內(nèi)裝4～5ml標本運送液、帶墊圈的50ml螺口塑料管中。下呼吸道標本（適用于氣管插管病人）：只采集重癥病人，無時間限制。收集氣管吸取液或支氣管灌洗液5~10ml放入無菌、帶墊圈的50ml螺口塑料管中。含嗽液：47皰疹液瘀點瘀斑先用75%的酒精對皰疹液瘀點瘀斑周圍的皮膚進行消毒，待皮膚干燥后，用消毒針將皰疹液瘀點瘀斑挑破用棉簽蘸取液體，迅速將棉簽放入內(nèi)裝有3-5ml保存液的采樣管中，在靠近頂端處折斷棉簽桿，旋緊管蓋并密封。可同時采集多個皰疹液瘀點瘀斑作為一份標本。采樣管外表貼上標簽，注明患者的姓名、樣本的種類、采樣的時間、采樣人等基本信息。皰疹液瘀點瘀斑48糞便標本一般采集病人發(fā)病3日內(nèi)的糞便標本，用于病原檢測。用藥前自然排便的標本，采集膿血粘液部分量2-3g，液體便取絮狀物1-2ml，采集后立即放入無菌采便管內(nèi)（或保存液中)。采樣管外表貼上標簽，注明患者的姓名、樣本的種類、采樣的時間、采樣人等基本信息。糞便標本49用于抗原檢測的標本肛拭子標本采集病人發(fā)病3日內(nèi)的肛拭子標本，用于病原檢測。用專用采樣棉簽，從患兒肛門輕輕插入，適度用力弧型左右擦拭數(shù)下，拔出后,迅速將棉簽放入裝有3－5ml保存液的15ml外螺旋的采樣管中，在靠近頂端處折斷棉簽桿，旋緊管蓋，并密封，以防干燥。采樣管外表貼上標簽，注明患者的姓名、樣本的種類、采樣的時間、采樣人等基本信息。用于抗原檢測的標本肛拭子標本50用于抗原檢測的標本尸檢標本病人死亡后越早采集越好。采集腦、肝、肺和腸淋巴結(jié)等重要組織標本，每一采集部位分別使用單獨的消毒器械。每種組織應多部位取材，每部位應取2-3份約5-10g的組織，淋巴結(jié)2個，分別置于15ml-50ml無菌的有外螺旋蓋的凍存管中，采樣管外表貼上標簽，注明患者的姓名、樣本的種類、采樣的時間、采樣人等基本信息。用于抗原檢測的標本尸檢標本51用于抗原檢測的標本腦脊液標本當患者出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀時，可采集腦脊液標本，進行病原分離或核酸，抗體檢測。采集時間為出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀后3天內(nèi)，采集方法采用腰椎穿刺，采集量為1.0-2.0ml。采集后立即裝入無菌帶墊圈的凍存管中。采樣管外表貼上標簽，注明患者的姓名、樣本的種類、采樣的時間、采樣人等基本信息。用于抗原檢測的標本腦脊液標本52用于抗原檢測的標本血液標本作血液病原培養(yǎng)時，嚴格用無菌穿刺法采肘靜脈血，移入無菌的有螺口的抗凝的容器或血培養(yǎng)瓶中送檢，或直接接種血平皿。血培養(yǎng)瓶接種比例一般按1：5-1：10，目的是稀釋血液中的抗菌藥物、抗體等殺菌物質(zhì)。

用于抗原檢測的標本血液標本53用于抗體檢測的標本血清單份血清急性期血清IgM抗體雙份血清采集急性期（發(fā)病0-7d）和恢復期（發(fā)病14-30d）雙份配對血清同時檢測，如IgG抗體滴度有4倍以上升高才有意義。靜脈采集3-5ml全血，置于真空無菌采血管中，自凝后，分離血清，將血清移到2ml外螺旋的血清保存管中，貼上標簽，注明患者的姓名，采集急性期和恢復期血清瓶蓋最好采用不同的顏色，以便區(qū)分。將血清置于-20℃以下冰箱中冷凍保注意:全血標本不可冷凍用于抗體檢測的標本54用于抗體檢測的標本腦脊液一般于出現(xiàn)神經(jīng)癥狀時采集，查IgM只需一份腦脊液，而查IgG則需收集兩次，時間間隔，保存同前所述。用于抗體檢測的標本腦脊液55病原微生物標本的保存

病原微生物的保存取決于運送時間的長短及不同病原微生物對干燥、溫度、營養(yǎng)、pH值的耐受能力。能確保目標細菌的存活并抑制其他微生物的過度生長，應選擇合適的培養(yǎng)基和推薦保存溫度。

病原微生物標本的保存病原微生物的保存取決于運送時間的長短56病原微生物標本的保存細菌用于分離培養(yǎng)細菌的標本應在運送培養(yǎng)基中運送并保存于合適的溫度。分離不同的病原菌使用的運送培養(yǎng)基也不同，一般冷藏運送（奈瑟菌屬，流感嗜血桿菌應在35～37?C保溫運送）病原微生物標本的保存細菌57病原微生物標本的保存病毒用于分離病毒的標本，一般應放在保溫容器（0?C～4?C）里，最好12小時內(nèi)送達實驗室，最長放置不可超過4天，如不能立即分離病毒時，應將標本-20?C凍存保存，放置不可超過1周。若長期儲存，最好在－70?C凍存。采集病毒拭子推薦使用：滅菌人造纖維拭子（如聚酯纖維）和塑料棒注意采集咽拭子或肛拭子等用于檢測核酸時不能使用棉拭子和木質(zhì)拭子棒，因為這類材料中含有核酸擴增抑制劑病毒采樣液推薦使用：病毒保存液（含有蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑，阻止細菌和真菌生長的抗生素，緩沖液）

專用病毒采樣盒（海南興南峰醫(yī)藥器械有限公司，TelFax病原微生物標本的保存病毒58免疫檢測標本的保存用于檢測抗原或抗體的標本可在4?C～8?C保存24～28h，在－20?C保存時間更長。檢測抗體的血清可在4?C保存