中央民族大學(xué)生命與環(huán)境科學(xué)學(xué)院生理學(xué)實驗報告家兔頸部動脈和神經(jīng)的分離及減壓神經(jīng)放電的引導(dǎo)家兔頸部動脈和神經(jīng)的分離及減壓神經(jīng)放電的引導(dǎo)和家兔動脈血壓的神經(jīng)與體液調(diào)節(jié)2023年１０月2８日【目的與規(guī)定】1．學(xué)習(xí)家兔頸部手術(shù)與分離積極脈神經(jīng)的方法。2．學(xué)習(xí)在體神經(jīng)沖動引導(dǎo)與記錄的方法，理解積極脈神經(jīng)的生理功能。3.掌握記錄和測量家兔動脈血壓的直接測量方法。4．觀測神經(jīng)和體液因素改變對家兔動脈血壓調(diào)節(jié)的影響,并分析該些因素的作用機(jī)制?！緦嶒炘怼?積極脈神經(jīng)是積極脈弓壓力感受器的傳入神經(jīng),又稱減壓神經(jīng)。神經(jīng)傳入沖動的頻率,在一定范圍內(nèi)隨積極脈血壓的升高或減少而相應(yīng)增長或減少，從而使壓力感受性反射增強(qiáng)或減弱,以維持動脈血壓的相對穩(wěn)定。由于家兔積極脈神經(jīng)獨(dú)成一束,易于分離，故常用家兔為實驗動物,進(jìn)行積極脈神經(jīng)沖動的引導(dǎo)與血壓實驗。在正常的生理情況下，人和高等動物的動脈血壓是相對穩(wěn)定的。這種相對穩(wěn)定性是通過神經(jīng)和體液因素的調(diào)節(jié)而實現(xiàn)的,其中以頸動脈竇-積極脈弓壓力感受器反射尤為重要。此反射即可使升高的血壓下降,又可使減少的血壓升高，故有血壓緩沖反射之稱謂。家兔的積極脈神經(jīng)在解剖上獨(dú)成一支,易于分離與觀測其作用?！緦嶒瀯游锛捌鞑摹考彝?、兔手術(shù)臺，常用手術(shù)器械，止血鉗、眼科剪、支架、氣管插管、Pｃ－Ｌab生物信號采集系統(tǒng)、保護(hù)電極、紗布、棉球、絲線、20ｍl注射器、20%-2５%氨基甲酸乙酯,肝素，去甲腎上腺素，生理鹽水;RM62４０生物信號采集系統(tǒng),手術(shù)剪1把，眼科剪1把，止血鉗，鑷子,電刺激連線,兔手術(shù)臺,注射器及針頭,血管插管，動脈夾,血壓換能器,鐵架臺,嬰兒秤，輸液裝置,照明燈，有色絲線；【實驗環(huán)節(jié)】1、實驗動物準(zhǔn)備1）麻醉:取家兔一只稱重，按4－5ml/Kg(1ｇ/Kg)耳緣靜脈注射2０%-2５%氨基甲酸乙酯進(jìn)行麻醉。２)固定剪毛:背位固定在兔手術(shù)臺上,剪去頸部手術(shù)視野中的被毛。３）手術(shù)分離血管與神經(jīng)A、頸部皮膚切口5-７cm，分離皮下組織B、分離肌肉層：鈍性分離C、行氣管插管：倒“T”切口，插管固定D、分離血管與神經(jīng)：一側(cè)：迷走神經(jīng)(１)、積極脈神經(jīng)(2)、頸動脈(１）另一側(cè)：迷走神經(jīng)(1)、頸動脈（3)(插管用)2、連接儀器引導(dǎo)減壓神經(jīng)放電活動打開Pc-Lａb生物信號采集系統(tǒng)，連接引導(dǎo)電極在第一通道中，設(shè)立通道功能為神經(jīng)放電,輸入實驗相關(guān)信息,采樣觀測減壓神經(jīng)放電活動。3、實驗裝置與連接:①將壓力換能器固定于鐵支架上,使換能器的位置盡量與實驗動物的心臟在同一水平面上。然后將換能器輸入至RM6240生物信號采集系統(tǒng)一通道。②壓力換能器的另一端與三通管相連。三通管的一個接頭將與動脈插管相連。在將動脈插管插入左頸總動脈前，先用盛有肝素的注射器與三通管另一接頭相連，旋動三通管上的開關(guān)，使動脈插管與注射器相通，推動注射器，排空動脈插管中的氣體,使動脈插管內(nèi)充滿肝素溶液，然后關(guān)閉三通管。4、儀器調(diào)試:在“實驗”菜單中選擇“循環(huán)——兔動脈血壓調(diào)節(jié)”。雙擊一通道，調(diào)節(jié)增益、采樣參數(shù)，使基線歸零,令圖形位于屏幕中央,便于觀測。5、動脈插管:在左頸總動脈的近心端夾一動脈夾,然后結(jié)扎其遠(yuǎn)心端（保存此結(jié)扎線頭)，在動脈夾與結(jié)扎之間一般應(yīng)相距２cm以上。在結(jié)扎端的下方用眼科剪作一斜口，向心臟方向插入動脈插管,用已穿好的絲線扎緊插入管尖嘴部分稍后處(注意此處務(wù)必扎緊)，并以遠(yuǎn)心端絲線將插管縛緊固定,以防插管從插入處滑出。6、靜脈插管:用一絲線將右側(cè)頸外靜脈遠(yuǎn)心端提起，用眼科剪在其下方做一斜口,向心臟方向插入靜脈插管，用已穿好的絲線扎緊插入管尖嘴部分稍后處，并以遠(yuǎn)心端絲線將插管縛緊固定,結(jié)扎血管同時防插管從插入處滑出,靜脈插管成功后立即開始輸液，并將輸液速度調(diào)慢。7、記錄血壓：一切準(zhǔn)備完畢,移去動脈夾,啟動記錄按鈕,開始記錄血壓曲線。8、實驗觀測：（1)記錄正常血壓曲線。（2)用血管夾夾閉右側(cè)頸總動脈20s,觀測血壓變化，待血壓曲線顯示正常后再進(jìn)行下一個實驗。（3)靜脈注射去甲腎上腺素：從右側(cè)頸外靜脈注射0.３ml去甲腎上腺素,觀測血壓變化,待血壓曲線顯示正常后再進(jìn)行下一個實驗。(4）刺激積極脈神經(jīng),：以５V,頻率２５Hｚ,連續(xù)１0ｓ的定期刺激刺激右側(cè)積極脈神經(jīng),觀測血壓變化,待血壓曲線顯示正常后再進(jìn)行下一個實驗。(5）刺激迷走神經(jīng):以１Ｖ，頻率2５Ｈz,連續(xù)１０s的定期刺激刺激右側(cè)迷走神經(jīng)，觀測血壓變化，待血壓曲線顯示正常后再進(jìn)行下一個實驗?！緦嶒灲Y(jié)果】1．夾閉一側(cè)頸總動脈血壓變化:2.按壓頸動脈竇是血壓變化:３.刺激迷走神經(jīng)：４．刺激迷走神經(jīng)中樞端：5.刺激迷走神經(jīng)外周端:６.刺激減壓神經(jīng):７.刺激減壓神經(jīng)外周端:8.刺激減壓神經(jīng)中樞端：9．注射腎上腺素:10.注射乙酰膽堿:【分析討論】夾閉一側(cè)頸總動脈1５ｓ后,觀測到兔動脈血壓升高的現(xiàn)象：?

這是由于頸動脈竇管壁的外膜下分布有豐富的感覺神經(jīng)末梢,是動脈張力感受器。這個感受器位于兔頸總動脈的遠(yuǎn)心端，頸內(nèi)動脈與頸外動脈的分叉交界處。夾閉頸動脈后,遠(yuǎn)心端的頸動脈竇張力感受器感受到血壓下降,傳出神經(jīng)沖動的頻率減慢。信息沿竇神經(jīng)上傳至延髓孤束核心血管中樞。使心迷走緊張減弱,心交感和心縮血管緊張加強(qiáng)，作用于心臟,使心率加快，心輸出量增長，血管收縮,血管外周阻力增長。從而血壓恢復(fù)性升高。若血壓下降過大,交感縮血管緊張還會擴(kuò)展到靜脈系統(tǒng),是靜脈收縮,促進(jìn)血液回心,使每博輸出量增長。?

２.刺激完整減壓神經(jīng)及其中樞端均可引起血壓下降，而刺激該神經(jīng)外周端基本不變:?

兔減壓神經(jīng)是傳入神經(jīng)，其作用是將積極脈弓感受器發(fā)出的沖動傳入延髓心血管中樞，反射性引起血壓減少。因此,刺激完整的減壓神經(jīng)或其中樞端,使傳入中樞的沖動增長,致血壓明顯下降，而刺激其外周端雖又沖動傳向外周,但不會引起血壓變化。?

3．刺激迷走神經(jīng)后觀測到，刺激迷走神經(jīng)和迷走神經(jīng)外周端都能引起明顯的減壓反映,而刺激迷走中樞端則沒有減壓反映，只是稍有輕微抬升變化：

迷走神經(jīng)中含從延髓下行的傳出纖維,通向心臟。節(jié)前纖維末端釋放Acｈ,節(jié)后纖維末端釋放Aｃｈ,屬于副交感神經(jīng)纖維，能使cAＭP濃度減少，心率減慢,心房收縮力減弱,傳導(dǎo)性減弱。從而使心輸出量變小,平均動脈壓減少。此外，尚有積極脈體化學(xué)感受器的上行纖維在迷走神經(jīng)中并行,化學(xué)感受器受刺激的效應(yīng)是血壓升高。所以,刺激迷走中樞不能引起減壓反映，卻可以使血壓輕微抬高。此外,若切斷兩側(cè)迷走神經(jīng)，迷走緊張消失，迷走吸氣興奮反射通路也斷了，動物的吸氣變深，周期變長,二級曲線周期性變得不明顯。

４.加入0.2ml0.0１%去甲腎上腺素后,觀測到平均動脈壓抬高。

這是由于去甲腎上腺素與血管平滑肌上的α和β2甲腎上腺素能受體結(jié)合，使血管收縮,管徑變小,外周阻力增長,從而使平均動脈壓升高。此外，去甲腎上腺素還可以使心率增長,心收縮力變大。只是縮血管效應(yīng)更明顯。

5．加入０.2mｌ0．01%乙酰膽堿后，觀測到一級曲線周期變慢,平均動脈壓下降。?

Aｃｈ能使cAMＰ濃度減少，心率減慢,心房收縮力減弱，傳導(dǎo)性減弱。心率變慢則流向外周的血量變多，舒張壓更低。心房收縮力減弱則收縮壓也有下降。平均動脈壓減少。但是由于血回心時間變長，因此，回心血量較多,脈壓增長。而大多數(shù)血管沒有Ach受體，Ach對外周阻力影響不大?！窘Y(jié)論】夾閉一側(cè)頸總動脈——家兔