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土壤中蛔蟲(chóng)卵的檢查及活力測(cè)定法第1頁(yè)/共24頁(yè)檢驗(yàn)土壤蛔蟲(chóng)卵的原理,是先用堿性溶液和已經(jīng)處理過(guò)的土壤樣品充分混合,分離蛔蟲(chóng)卵,繼用比重較蛔蟲(chóng)卵比重大的溶液為漂浮液,使蛔蟲(chóng)卵漂浮在溶液的表面,從而收集檢驗(yàn)之;或加入清水,因蛔蟲(chóng)卵的比重大于水的比重,使蛔蟲(chóng)卵沉在水底,從中吸取蛔蟲(chóng)卵檢驗(yàn)之。所用方法為改良飽和硝酸鈉漂浮監(jiān)察法。第2頁(yè)/共24頁(yè)改良飽和硝酸鈉漂浮法(1)取回土樣,剔除菜葉、樹(shù)皮等大雜物,壓碎土樣中的大顆粒;(2)過(guò)篩先后用孔徑3mm的銅篩和孔徑為2mm的銅篩過(guò)篩,收集過(guò)篩后的土樣;(3)取2支50毫升大離心管,各放入過(guò)篩后的土樣10g,加5%氫氧化鈉溶液至40或45ml刻度線;第3頁(yè)/共24頁(yè)改良飽和硝酸鈉漂浮法(4)充分混合,離心,每分鐘2,000轉(zhuǎn),離4分鐘;(5)傾去上部的氫氧化鈉(即棄去上部堿性溶液);(6)加入飽和硝酸鈉溶液攪拌混勻,每分鐘2000轉(zhuǎn),離心4分鐘;(7)離心后,再加飽和硝酸鈉溶液滿至管口,覆上18mm×18mm蓋玻片;(8)靜置15min后,取下蓋玻片置于載玻片上鏡檢。第4頁(yè)/共24頁(yè)第5頁(yè)/共24頁(yè)受精豬蛔蟲(chóng)卵大?。?0~87×40~60μm形狀:橢圓形或圓形,卵殼厚,外包有粗糙凹凸不平的蛋白膜,內(nèi)含尚未分裂呈顆粒的卵細(xì)胞。人蛔蟲(chóng)卵大?。?5~75×35~50μm(平均60μm)形狀:短橢圓形或近圓形,卵殼厚,呈雙線層,其外包有一層厚而呈乳頭狀突起的蛋白膜土壤中的動(dòng)物蛔蟲(chóng)卵與人蛔蟲(chóng)卵第6頁(yè)/共24頁(yè)牛羊蛔蟲(chóng)卵大小:69~95×60~77μm形狀:近球形,外有似蜂窩狀蛋白膜。人蛔蟲(chóng)卵第7頁(yè)/共24頁(yè)犬弓蛔蟲(chóng)卵大?。?5×90μm形狀:近球形,也常有呈卵形,有粗糙凹凸不平卵殼,卵殼內(nèi)充滿黑褐色到黑色的尚未分裂,呈顆粒狀內(nèi)含物。人蛔蟲(chóng)卵第8頁(yè)/共24頁(yè)貓弓蛔蟲(chóng)卵大?。?5×75μm形狀:同犬弓蛔蟲(chóng)卵。人蛔蟲(chóng)卵第9頁(yè)/共24頁(yè)蛔蟲(chóng)卵活力測(cè)定方法第10頁(yè)/共24頁(yè)含一個(gè)卵細(xì)胞活受精蛔蟲(chóng)卵,外包有乳頭狀突起的蛋白膜脫蛋白膜活受精蛔蟲(chóng)卵外包蛋白膜的死受精蛔蟲(chóng)卵,卵細(xì)胞移向一端脫蛋白膜的死受精蛔蟲(chóng)卵,卵細(xì)胞移向一端
一、直接鏡檢法(死活蛔蟲(chóng)卵的形態(tài)比較)第11頁(yè)/共24頁(yè)空泡化死受精蛔蟲(chóng)卵外包蛋白膜死受精蛔蟲(chóng)卵,卵內(nèi)脂肪變性,細(xì)胞質(zhì)形成空泡第12頁(yè)/共24頁(yè)含幼蟲(chóng)的活受精蛔蟲(chóng)卵卵殼內(nèi)幼蟲(chóng)變形的死受精蛔蟲(chóng)卵第13頁(yè)/共24頁(yè)人活蛔蟲(chóng)卵形態(tài)
含一個(gè)卵細(xì)胞活受精蛔蟲(chóng)卵,外包有乳頭狀突起的蛋白膜
脫蛋白膜活受精蛔蟲(chóng)卵
含2個(gè)卵細(xì)胞活受精蛔蟲(chóng)卵
含16個(gè)卵細(xì)胞活受精蛔蟲(chóng)卵
第14頁(yè)/共24頁(yè)未受精蛔蟲(chóng)卵外包鋸齒狀突起的蛋白膜
脫蛋白膜的未受精蛔蟲(chóng)卵
含幼蟲(chóng)的活受精蛔蟲(chóng)卵
第15頁(yè)/共24頁(yè)死蛔蟲(chóng)卵形態(tài)
外包蛋白膜的死受精蛔蟲(chóng)卵,卵細(xì)胞移向一端
脫蛋白膜的死受精蛔蟲(chóng)卵,卵細(xì)胞移向一端
桑椹期脫蛋白膜死蛔蟲(chóng)卵
死受精蛔蟲(chóng)卵,在卵細(xì)胞上部可見(jiàn)透明細(xì)胞質(zhì)
外包蛋白膜死受精蛔蟲(chóng)卵,卵內(nèi)脂肪變性,細(xì)胞質(zhì)形成空泡
第16頁(yè)/共24頁(yè)死蛔蟲(chóng)卵形態(tài)
脫蛋白膜死受精蛔蟲(chóng)卵,在卵細(xì)胞上部形成空泡
卵細(xì)胞皺縮死受精蛔蟲(chóng)卵
空泡化死受精蛔蟲(chóng)卵
卵細(xì)胞崩解的死受精蛔蟲(chóng)卵
卵細(xì)胞崩解的死受精蛔蟲(chóng)卵
第17頁(yè)/共24頁(yè)死蛔蟲(chóng)卵形態(tài)卵細(xì)胞不規(guī)則裂開(kāi)的死受精蛔蟲(chóng)卵
卵胚變形的死受精蛔蟲(chóng)卵
內(nèi)含物變形死受精蛔蟲(chóng)卵
卵殼內(nèi)幼蟲(chóng)變形的死受精蛔蟲(chóng)卵
第18頁(yè)/共24頁(yè)二、染色法鑒別蛔蟲(chóng)卵死活第19頁(yè)/共24頁(yè)(一)原理美藍(lán)、伊紅、硼砂染液(簡(jiǎn)稱M.E.B)溶于水呈堿性?;钕x(chóng)卵可以還原堿性染料,降低著色力,不易被染色。死蟲(chóng)卵不能還原堿性染料,容易著色?;紫x(chóng)卵外層蛋白膜容易被著色,染色前需脫去蛋白膜。第20頁(yè)/共24頁(yè)(二)步驟1、脫蛋白膜將收集的蛔蟲(chóng)卵加入30%次氯酸鈉,作用數(shù)分鐘,并經(jīng)常振蕩,再用蒸餾水洗2次,即可脫掉蛋白膜。第21頁(yè)/共24頁(yè)2、染色鏡檢吸取蟲(chóng)卵沉淀物一滴置于載玻片上,加M.E.B染色液一滴,上覆蓋玻片,靜置3~5分鐘后鏡檢?;蛘撸∠x(chóng)卵沉淀物1滴放入小試管內(nèi),加入染色液染30分鐘,再用蒸餾水洗2~3次,吸取沉淀物鏡檢。3、注意:
M.E.B的PH值應(yīng)在10左右
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