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內(nèi)容一)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與細(xì)胞工廠二)生物制品三)疫苗四)現(xiàn)代生物技術(shù)與基因工程五)單克隆抗體與抗體藥物六)干細(xì)胞與體細(xì)胞治療第一頁(yè),共24頁(yè)。我們熟知的細(xì)胞培養(yǎng)——?jiǎng)游锛?xì)胞培養(yǎng)第二頁(yè),共24頁(yè)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)1)無菌環(huán)境:超凈臺(tái)、安全柜2)生長(zhǎng)環(huán)境:CO2培養(yǎng)箱3)營(yíng)養(yǎng)環(huán)境:培養(yǎng)基4)貼壁環(huán)境:培養(yǎng)瓶(皿)等、細(xì)胞工廠第三頁(yè),共24頁(yè)。動(dòng)物細(xì)胞的形態(tài)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞的生長(zhǎng)必須有可以貼附的支持物表面,依靠自身分泌的或培養(yǎng)基中提供的貼附因子才能在該表面上生長(zhǎng)、增殖,當(dāng)細(xì)胞在該表面生長(zhǎng)后,一般形成兩種形態(tài),即成纖維樣細(xì)胞型或上皮樣細(xì)胞型懸浮細(xì)胞:懸浮狀態(tài)生長(zhǎng),如淋巴細(xì)胞、Namalwa細(xì)胞兼性貼壁細(xì)胞:中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞、小鼠L929細(xì)胞第四頁(yè),共24頁(yè)。(一)貼附型:大多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞貼附生長(zhǎng),屬于貼壁依賴性細(xì)胞貼附:是大多數(shù)有機(jī)體細(xì)胞在體內(nèi)生存和生長(zhǎng)發(fā)育的基本存在方式結(jié)果:
基于貼附特性,使細(xì)胞與細(xì)胞之間相互結(jié)合形成組織,有機(jī)體的絕大多數(shù)細(xì)胞必須貼附于一固相表面才能生存和生長(zhǎng)。培養(yǎng)時(shí):這些細(xì)胞被放到體外環(huán)境中以后,同樣需要貼附于某一固相表面才能生存和生長(zhǎng),因而屬于貼附型細(xì)胞貼附(錨定或錨著)依賴型(性)細(xì)胞:唯有貼附于固相表面才能生存的細(xì)胞第五頁(yè),共24頁(yè)。貼附生長(zhǎng)型細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)常用的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、6孔板、96孔板第六頁(yè),共24頁(yè)。細(xì)胞貼附材料與表面貼附的固相表面材料:玻璃、塑料(聚苯乙烯)玻璃:本身具有親水性,適于細(xì)胞貼壁塑料:沒有親水性,不能使細(xì)胞貼壁,所以必須在
塑料表面進(jìn)行親水性接枝(等離子處理)第七頁(yè),共24頁(yè)。(二)懸浮型:見于少數(shù)特殊的細(xì)胞,如某些類型的癌細(xì)胞及白血病細(xì)胞。胞體圓形,不貼于支持物上,呈懸浮生長(zhǎng)。這類細(xì)胞容易大量繁殖。概念:培養(yǎng)時(shí)不貼附于底物而呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)
或以機(jī)械方法使保持懸浮狀態(tài)下生長(zhǎng)來源:自血,脾或骨髓,血中白細(xì)胞癌腫細(xì)胞特點(diǎn):在懸浮中生長(zhǎng)良好細(xì)胞圓形,單個(gè)或小細(xì)胞團(tuán)優(yōu)點(diǎn):生存空間大,提供數(shù)量大,傳代方便(不需消化),
易于收獲,可獲得穩(wěn)定狀態(tài)缺點(diǎn):純化不方便,不能通過離心將死、活細(xì)胞分離第八頁(yè),共24頁(yè)。懸浮生長(zhǎng)型細(xì)胞第九頁(yè),共24頁(yè)。懸浮培養(yǎng)磁力攪拌器第十頁(yè),共24頁(yè)。大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞工廠培養(yǎng)技術(shù)在大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)中的應(yīng)用.doc第十一頁(yè),共24頁(yè)。轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)的缺點(diǎn)轉(zhuǎn)瓶技術(shù)為傳統(tǒng)的貼壁細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),細(xì)胞接種在旋轉(zhuǎn)的圓筒形培養(yǎng)器-轉(zhuǎn)瓶中,培養(yǎng)過程中轉(zhuǎn)瓶不斷旋轉(zhuǎn),使細(xì)胞交替接觸培養(yǎng)液和空氣。缺點(diǎn):勞動(dòng)強(qiáng)度大,占地空間大,單位體積提供細(xì)胞生長(zhǎng)的表面積小,細(xì)胞生長(zhǎng)密度低,瓶間差異較難控制等,因而難以產(chǎn)業(yè)化或規(guī)?;a(chǎn)。重要的是:轉(zhuǎn)瓶由于不是靜止培養(yǎng),產(chǎn)品質(zhì)量經(jīng)常達(dá)不到要求或由于細(xì)胞易破碎而存在DNA毒性潛在危險(xiǎn),據(jù)稱國(guó)家準(zhǔn)備淘汰轉(zhuǎn)瓶生產(chǎn)技術(shù)。
第十二頁(yè),共24頁(yè)。細(xì)胞工廠用于大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)與生產(chǎn)第十三頁(yè),共24頁(yè)。細(xì)胞工廠關(guān)鍵技術(shù):貼壁處理:高真空等離子接枝表面處理(know-how:接枝材料與接枝技術(shù))材料性能:生物相容性(無細(xì)胞毒性)多層焊接技術(shù):密封性與牢固性滅菌技術(shù):Y射線輻照第十四頁(yè),共24頁(yè)。細(xì)胞工廠競(jìng)爭(zhēng)NuncCorningDHS第十五頁(yè),共24頁(yè)。DHS細(xì)胞工廠DHS大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)單頁(yè).pdf第十六頁(yè),共24頁(yè)。NuncCellFactory第十七頁(yè),共24頁(yè)。CorningCellSTACKChamberChoiceoftraditionalsurfacetreatment(TC),newCorning?CellBIND?Surfaceforenhancedcellattachment,orUltra-LowAttachmentSurfaceforreducedcellattachment第十八頁(yè),共24頁(yè)。CorningCellSTACKChamber第十九頁(yè),共24頁(yè)。三種細(xì)胞工廠的比較材料:均為PS塑料表面處理:各自的Know-how頂層:DHS同Nunc,便于顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況焊接工藝:Nunc采用超聲焊接,Corning采用特殊膠粘接,Corning的更加牢固(不易開裂),所以DHS采用Corning的粘接工藝只有DHS是可以定制任意層的細(xì)胞工廠第二十頁(yè),共24頁(yè)。細(xì)胞工廠的使用..\easyfill\NUNC_EasyFill_FINAL_WM_0510.wmv第二十一頁(yè)
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