學(xué)習(xí)資料收集于網(wǎng)絡(luò)，僅供參考【MALDI-TOFMS】（基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜）培訓(xùn)預(yù)習(xí)提綱一儀器概況儀器名稱：基質(zhì)輔助激光解析電離一飛行時間質(zhì)譜儀MatrixAssistedLaserDesorptionIonization-TimeofFlightMassSpectrometerMALDI-TOF公 司：美國應(yīng)用生物系統(tǒng)AppliedBiosystem型 號：VoyagerDE—STR特 點(diǎn)：DEDelayedExtraction 延遲引出PSD：PostSourceDecay源后裂解技術(shù)指標(biāo)：MassAccuracyLinearMode,ExternalCalibration:學(xué)習(xí)資料學(xué)習(xí)資料收集于網(wǎng)絡(luò)，僅供參考W±0.05%forangiotensin[1,296.6853]andmyoglobin[16,952.5].ReflectorMode,ExternalCalibration:^±0.008%forACTH18-39[m/z2,565.1989].W±0.005%forE.colithioredoxin[m/z1,1674.4]±0.005%forACTH18-39MassResolution:ReflectorResolution:三20,000forinsulin(m/z5,734).三12,000forACTHclips.LinearResolution:三3,000angiotensin.三3,500forACTH18-39[m/z2,465.1989].三1,000formyoglobin(m/z16,952).二100forBSA(m/z66,431).學(xué)習(xí)資料學(xué)習(xí)資料收集于網(wǎng)絡(luò)，僅供參考Sensitivity:Routinedetectionof5fmolofneurotensinwithasignaltonoiseration(S/N)>80:1.Post-SourceDecayMassAccuracy:W0.2withdefaultcalibration.應(yīng)用：MALDI-TOF儀器作為一種可以確定大分子精確分子量的工具，可以對納米材料、生物材料，高分子聚合物等的分子量及聚合度進(jìn)行測定及碎片結(jié)構(gòu)定性，有機(jī)合成反應(yīng)的質(zhì)量評價，蛋白質(zhì)、多肽、核酸、寡糖等生物分子的分子質(zhì)量測定蛋白質(zhì)、多肽酶解產(chǎn)物肽圖譜測定，蛋白質(zhì)、多肽的氨基酸順序分析。二原 理.質(zhì)譜儀分類學(xué)習(xí)資料

學(xué)習(xí)資料收集于網(wǎng)絡(luò)，僅供參考?行機(jī)質(zhì)潸位從應(yīng)川用性分!后機(jī)城潸儀同位素質(zhì)譜儀弋訃分析歷瞪位I,其中有機(jī)加譜儀由于應(yīng)用特點(diǎn)不同又分為*門)”相色睛一順謂不;用位(GC-MS)1，相色揩一四極質(zhì)湃儀tQiiadinplf)氣粕色譜一飛行時閭城譜儀(limeOfflight)

氣相色潸一高子副質(zhì)澧儀t—啊)切液相色普一質(zhì)徜聯(lián)用僅'LC-MS>i 液和色漕一四極質(zhì)諧位(Qiiadinple):漆明住告一乜行時同成搟儀(TimeOfflieltlJI 波相色耀一離子映質(zhì)講儀(ImTjbp)U)苴他［基質(zhì)輔坳激光解析電離一飛行時間所滯位(Matdi-TOF)I 傅利葉變操質(zhì)譜儀CET-MS)無機(jī)質(zhì)譜儀色拮司火花源雙聚偉康譜儀:盛施耨介牙離子體質(zhì)譜儀IliidiLcttvelyC'oupkdPIasuhi1CPMS)二就離子破譜儀iS?coiidflr\-loii-fSIMS^雙聚焦質(zhì)精儀四極H質(zhì)吊儀雙聚焦質(zhì)精儀四極H質(zhì)吊儀從質(zhì)量分析器的不同分飛行時間質(zhì)清儀離子阱廈諾位他利用變核質(zhì)譜儀學(xué)習(xí)資料學(xué)習(xí)資料收集于網(wǎng)絡(luò)，僅供參考一般質(zhì)譜儀結(jié)構(gòu)a.離子源IonSource電子電離源(ElectronIonization,EI)化學(xué)電離源(ChemicalIonization,CI)快原子轟擊源(FastAtomBombardment,FAB)電噴霧源(ElectronSprayIonization,ESI)大氣壓化學(xué)電離源(AtmosphericPressureChemicalIonization,APCI)激光解析源(LaserDesorption,LD)b.質(zhì)量分析器MassAnalyzer雙聚焦分析器(DoubleFocusingAnalyzer)四極桿分析器(QuadrupleAnalyzer)學(xué)習(xí)資料學(xué)習(xí)資料收集于網(wǎng)絡(luò)，僅供參考飛行時間質(zhì)量分析器（TimeOfFlightAnalyzer)離子阱質(zhì)量分析器（IonTrapAnalyzer)傅利葉變換離子回旋共振分析器(FourierTransformIonCyclotronResonanceAnalyzer)c.檢測器Detectord.真空系統(tǒng)VacuumSystemMALDI-TOF原理MALDI MatrixAssistedLaserDesorptionIonization基質(zhì)輔助激光解析電離基質(zhì)對分析物起著溶劑的作用，并且把分析物分子彼此分離開，從而減少了分子間的很強(qiáng)的相互作用力，使分析物簇群形成的可能性減至最??；當(dāng)激光脈沖照射時，由于基質(zhì)濃度遠(yuǎn)高于分析物濃度，確保激光能量大部分被基質(zhì)吸收而最小限度地照射分析物?；|(zhì)分子吸收的能量轉(zhuǎn)變成固體混合物內(nèi)基質(zhì)的電子激發(fā)能，瞬間使其由固態(tài)轉(zhuǎn)變成氣態(tài)，形成基質(zhì)離子。學(xué)習(xí)資料

學(xué)習(xí)資料收集于網(wǎng)絡(luò)，僅供參考在中性分析物和激發(fā)出的基質(zhì)離子、質(zhì)子及金屬陽離子之間的碰撞過程中，發(fā)生了分析物的離子化，便產(chǎn)生了質(zhì)子化分子或陽離子化分子。這過程并不導(dǎo)致高分子發(fā)生鏈斷裂，通常只生成分子離子及分子離子的多聚體。離子化后的分子被電場加速進(jìn)入飛行時間質(zhì)量分析器而被檢測。TOF——TimeOfFlight飛行時間假設(shè)被分析物離子化后帶電荷為ze,加速電壓V和飛行距離L一定，被電場加速后的分子離子具有相同的動能:二2（二2（質(zhì)荷比）二即質(zhì)荷比與飛行時間t的平方成正比。只要測得飛行時間，即可換算成質(zhì)荷比。在檢測時，質(zhì)荷比小的離子先到達(dá)檢測器。注意:這里是質(zhì)荷比，而非分子量，與分子離子所帶的電荷數(shù)有關(guān)。學(xué)習(xí)資料學(xué)習(xí)資料收集于網(wǎng)絡(luò)，僅供參考Maldi-TOF的特點(diǎn)(1)軟電離，不會把分子打碎(2)檢測范圍寬(〉400KDalton)(3)可以檢測混合物(4)耐鹽(5)靈敏度高(可達(dá)fmol級)Etc.突出特點(diǎn)：DE-DelayedExtraction延遲引出PSD-PostSourceDecay源后裂解ABI公司的VoyagerDE-STRMALDI-TOFMS提高儀器分辨率采取了兩個行之有效的方法：Reflector增大了離子飛行路程且不增加飛行管長度，提高了分辨率DelayedExtraction延遲引出技術(shù)VoyagerDESTRMS儀器構(gòu)造學(xué)習(xí)資料學(xué)習(xí)資料收集于網(wǎng)絡(luò)，僅供參考LaserIIHIIIIIITurboPumpLineardetectorNewFocusingLensandBeamSteeringPlateOpiate°Ext曰電。LaserIIHIIIIIITurboPumpLineardetectorNewFocusingLensandBeamSteeringPlateOpiate°Ext曰電。nMew6micronWiderTimedReflectorIonSelectorDetector口印rxGTlGCtOr'A'idsrR^flsctor TurboPumpEntranceAperture真空系統(tǒng)VacuumSystem激光源LaserN2,337nm,LaserIntensity可調(diào)高壓HighVoltage：：XCat曹黑溜黑能麒e G型xgridPotentialGradient,voltaPotentialGradient,IonizationRegion學(xué)習(xí)資料學(xué)習(xí)資料收集于網(wǎng)絡(luò)，僅供參考高壓范圍：20-25KV涉及到的參數(shù)：DelayTime，grid%飛行管FlightTube無場區(qū)，離子勻速飛行檢測器Detector共有兩個檢測器：Reflector/Linear（對應(yīng)兩種模式）檢測器類型：MCP（MicrochannelPlate微通道片/alsoMultichannelPlate多通道片）6實驗成功的關(guān)鍵因素a.基質(zhì)Matrix基質(zhì)的作用：一是從激光脈沖中吸收能量；二是使被測分子分離成單分子狀態(tài)。第一個作用要求基質(zhì)對激光光源有很強(qiáng)的吸收，因此目前文獻(xiàn)報道的基質(zhì)化合物均為含苯環(huán)的有機(jī)化合物;第二個作用要求基質(zhì)和被測高分子具有很好的相容性，同時不能有分子間的相互作用。學(xué)習(xí)資料學(xué)習(xí)資料收集于網(wǎng)絡(luò)，僅供參考b,離子化試劑IonizationAgent合成高分子化合物一般難以通過加質(zhì)子使其離子化，往往需要添加堿金屬鹽類或銀、銅等過渡金屬鹽類形成離子絡(luò)合物，達(dá)到離子化的目的。對于極性高分子化合物（含有雜原子，如PMMA）來說，堿金屬鹽類是比較有效的離子化試劑。（NaTFA）沒有雜原子的非極性合成高分子（如PS）,加入銀或銅鹽后可以成功的離子化。（AgTFA）含胺官能團(tuán)的化合物（如蛋白質(zhì)、多肽），可有基質(zhì)幫助（提供氫離子）直接質(zhì)子化，不需外加金屬離子。c,溶劑Solvent溶劑對分子量和分子量分布均有一定的影響。理想的情況是基質(zhì)、樣品和鹽都使用同一種溶劑，以免結(jié)晶時分層。選擇溶劑的先后：水、水+乙月青+TFA、THF或甲醇、其他學(xué)習(xí)資料學(xué)習(xí)資料收集于網(wǎng)絡(luò)，僅供參考d.樣品制備技術(shù)如合適的濃度、配比、點(diǎn)樣方法等。7綜述文獻(xiàn)MassSpectrometryofPolymersandPolymerSurfaces,S.D.HantonChem.Rev2