腫瘤免疫治療總參謀部總醫(yī)院第1頁/共41頁腫瘤免疫治療的發(fā)展歷程（按論文報導(dǎo)時間先后）2007年超級免疫粒細胞抗癌技術(shù)1991年CIK細胞（細胞因子誘導(dǎo)的殺傷細胞）1982年LAK細胞（淋巴因子激活的殺傷細胞）1994年出現(xiàn)細胞融合瘤苗，后來發(fā)展成DC瘤苗技術(shù)1989年CD3AK（CD3單克隆抗體激活的殺傷細胞）1986年TIL（腫瘤浸潤淋巴細胞）2001年DC與CIK共培養(yǎng)第2頁/共41頁腫瘤生物治療的特點具有腫瘤特異性（高度選擇性）作用機理及毒副作用與常規(guī)治療不同不容易產(chǎn)生耐藥毒副作用較小第3頁/共41頁腫瘤生物治療方法第4頁/共41頁

腫瘤生物治療的發(fā)展歷程第一代：細胞因子技術(shù)，IFN、IL、TNF、CSF、TGF等第二代：細胞技術(shù)，LAK、TIL、CTL等第三代：非特異性免疫細胞治療技術(shù)，如：CIK細胞特異性腫瘤疫苗治療技術(shù)，如：DC細胞

第四代：CAR-T第5頁/共41頁生物治療化療放療手術(shù)腫瘤綜合治療第四大腫瘤治療模式作為第三代生物治療技術(shù)，CIK/DC免疫治療由于其明確的治療優(yōu)勢已成為繼手術(shù)、放療、化療之后的第四大腫瘤治療模式。腫瘤綜合治療第6頁/共41頁腫瘤生物治療主要作用

直接調(diào)節(jié)腫瘤細胞的生長和分化，抑制腫瘤生長，使腫瘤縮?。?/p>

促使腫瘤細胞從低分化向高分化發(fā)展，提高腫瘤細胞對人體抗腫瘤免疫應(yīng)答的敏感性，有利于殺傷癌細胞；

特異性地作用于腫瘤新生血管，影響腫瘤的營養(yǎng)供應(yīng)，導(dǎo)致腫瘤細胞壞死，而正常細胞則不受影響；

刺激病人體內(nèi)產(chǎn)生免疫應(yīng)答反應(yīng)，使體內(nèi)有更多的抗癌細胞產(chǎn)生，增強抗癌能力；

刺激造血功能，促進骨髓抑制的恢復(fù)，使病人可以耐受全身大劑量的放療或化療，減輕病人接受抗癌治療時的損傷，增加對抗癌治療的耐受性，提高放、化療的效果。第7頁/共41頁CIK細胞治療技術(shù)簡介CIK（cytokines-inducedkillercell，細胞因子誘導(dǎo)的殺傷細胞）是將人體外周血單個核細胞（PBMC）在體外模擬人體內(nèi)環(huán)境，用多種細胞因子（如CD3McAb、IL-2、IFN-γ、IL-1α等）共同培養(yǎng)增殖后獲得的一群異質(zhì)細胞。其中CD3+CD56+雙陽性細胞是CIK細胞群體中主要的效應(yīng)細胞。CIK細胞兼具有T細胞強大的抗瘤活性和NK細胞的非MHC限制性的廣譜殺瘤、抗病毒活性CIK又被稱為具有NK細胞作用的T淋巴細胞CIK細胞分泌的細胞因子能有效激活機體的免疫系統(tǒng)，提高病人自身抗腫瘤和抗病毒的能力。第8頁/共41頁CIK細胞形態(tài)14d×20第9頁/共41頁CIK細胞殺瘤機理LFA-1=ICAM-1CD3交連腫瘤細胞識別第10頁/共41頁CIK細胞抗腫瘤作用機制圖第11頁/共41頁CIK細胞殺傷腫瘤細胞電鏡照片第12頁/共41頁CIK細胞抗腫瘤的優(yōu)勢增殖速度快，主要效應(yīng)細胞CD3+CD56+細胞的增殖可達1000倍。殺瘤活性高：其殺傷活性遠高于其它細胞療法，如：LAK。殺瘤譜廣：CIK細胞對消化道腫瘤、肺癌、腎癌、惡性黑色素瘤、淋巴瘤、肝癌、白血病等均表現(xiàn)出強大的殺傷活性。對耐藥腫瘤同樣可以起到殺傷的作用。殺瘤活性不受某些免疫抑制劑的影響（如環(huán)孢素A（CSA）和FK506）。能抵抗腫瘤細胞引發(fā)的效應(yīng)細胞Fas-FasL凋亡。對正常骨髓造血前體細胞毒性很小。第13頁/共41頁CIK細胞回輸前后患者外周血效應(yīng)細胞亞群的變化

CD3+CD3+CD4+CD3+CD8+CD3+CD56+回輸前73.1±3.436.4±3.134.5±5.26.5±2.010.8±3.6回輸后76.2±8.538.2.4±9.840.0±9.820.1±7.215.7±4.9摘自：《解放軍醫(yī)學(xué)雜志》2004年4月29卷第4期，自體CIK細胞治療肝癌的安全性和有效性評價。（施明等）第14頁/共41頁DC數(shù)突狀細胞因其成熟時有數(shù)突樣或偽足樣突起而得名。是目前已知的體內(nèi)功能最強的抗原呈遞細胞（APC），與其它APC相比，其最大特點是能顯著刺激已活化的或記憶性Ｔ細胞作為DC前體存在于外周血、骨髓等多種組中，多種細胞因子能在體外刺激DC的生長和分化。具有激活靜息性T淋巴細胞成為抗原特異性細胞毒性T淋巴細胞（cytotoxicTlymphocytes,CTL）的特殊功能。第15頁/共41頁

樹突細胞（dendriticcell,DC）外形不規(guī)則，細胞核大、不規(guī)則，胞質(zhì)較少，由于這類細胞具有長的胞漿突起，呈樹突狀故稱為樹突細胞。第16頁/共41頁DC形態(tài)7d×40第17頁/共41頁這里添加文字這里添加文字DC細胞抗瘤優(yōu)勢與特點：很少量的DC即可激發(fā)強大的T細胞殺瘤反應(yīng)可致敏輔助T細胞的多種細胞因子，以激活靜止狀態(tài)的T細胞（DC刺激免疫反應(yīng)的特點）幫助重建腫瘤患者對腫瘤細胞的免疫監(jiān)視功能第18頁/共41頁DC-CIK共培養(yǎng)技術(shù)簡介

是在CIK誘導(dǎo)體系中加入已誘導(dǎo)成熟的DC，共同培養(yǎng)，直至細胞成熟。DC-CIK共培養(yǎng)，不僅能夠提高CIK細胞殺傷作用，而且也能顯著提高DC的功能。

第19頁/共41頁采集外周全血60-100ml分離PBMCCIK細胞誘導(dǎo)及培養(yǎng)DC誘導(dǎo)及培養(yǎng)DC成熟腫瘤抗原成熟DC-CIK5-7d5-7d12-16d適當因子適當因子適當因子活率≥90%數(shù)量5-10×109細菌、真菌、支原體檢測第20頁/共41頁DC-CIK聯(lián)合培養(yǎng)細胞特點增殖活性提高第21頁/共41頁DC-CIK聯(lián)合培養(yǎng)細胞特點：細胞毒活性提高第22頁/共41頁腫瘤綜合基礎(chǔ)優(yōu)化治療一線選擇！CIK/DC免疫治療與三大常規(guī)治療方法的對比優(yōu)勢第23頁/共41頁這里添加文字這里添加文字這里添加文字生物醫(yī)學(xué)細胞實驗室GMP認證的200平米整體萬級、局部百級實驗室，必備的設(shè)備完善的實驗室管理和技術(shù)標準操作手冊及嚴格的治療保證系統(tǒng)全程檢測、保證細胞保證細胞數(shù)量與質(zhì)量。第24頁/共41頁CIK/DC細胞治療流程第一步：采集患者外周血第二步：DC/CIK培養(yǎng)第三步：觀察細胞數(shù)量質(zhì)量第四步：CIK/DC回輸?shù)?5頁/共41頁CIK/DC細胞治療流程第26頁/共41頁CIK/DC細胞治療的適應(yīng)癥適用于各種不同病程階段腫瘤的治療（Ｔ細胞淋巴癌/瘤除外）■

呼吸系統(tǒng)：肺癌（小細胞肺癌、鱗癌、腺癌）等■

消化系統(tǒng)：肝癌、胃癌、腸癌食道癌胰腺癌等■

泌尿系統(tǒng)：腎癌、腎上腺癌、膀胱癌、前列腺癌及其轉(zhuǎn)移癌等■

血液系統(tǒng)：急慢性白血病、淋巴瘤（除T細胞淋巴瘤）?！?/p>

其他腫瘤：惡性黑色素瘤、鼻咽癌、乳腺癌、舌癌等。

對胸水、腹水的胸腹腔灌注治療效果顯著?！?7頁/共41頁CIK/DC細胞治療注意事項與禁忌癥以下情況慎用或遵醫(yī)囑：1．正在使用免疫抑制藥物，或器官移植后長期使用免疫抑制劑的患者；2．正在接受化療、放療患者，不能與化療、放療同時應(yīng)用，一般要求間隔1周或以上；3．嚴重肝、腎功能異常者；4．嚴重凝血功能異常者；5．近期內(nèi)有活動性出血史者；6．嚴重感染未控制或高熱患者；7．嚴重的心腦血管疾病、糖尿病患者；8.嚴重自身免疫性疾病患者；9.孕婦或哺乳期婦女；10．頑固性或持續(xù)性癲癇患者；11.RH陰性患者（自體血可用）。第28頁/共41頁禁忌癥：1.Ｔ細胞淋巴癌/瘤患者；2.HIV陽性患者；3.嚴重過敏體質(zhì)者，尤其對IL-2過敏患者。CIK/DC細胞治療注意事項與禁忌癥第29頁/共41頁CIK/DC細胞治療的安全性及不良反應(yīng)DC細胞治療和CIK細胞治療的安全性好，至今未有嚴重不良反應(yīng)（嚴重的變態(tài)反應(yīng)、肝腎功能損害、骨髓抑制等）的報道。

少部分患者可出現(xiàn)一過性類流感樣癥狀，如發(fā)燒、頭痛、關(guān)節(jié)酸痛，按常規(guī)處理即可，大多可自行緩解。其治療有效性確切，安全性高，副作用極小，在廣泛的臨床應(yīng)用中得到證實。第30頁/共41頁聯(lián)合治療方案聯(lián)合治療的意義術(shù)后+CIK/DC快速恢復(fù)手術(shù)造成的免疫損傷；特異性清除術(shù)后微小殘余腫瘤病灶，防治轉(zhuǎn)移與復(fù)發(fā)；增強對化療藥物敏感性；增強放療敏感性，減少放療毒副作用；抵抗化療藥物的免疫抑制作用；支持骨髓功能衰竭后的免疫重建；放療+CIK/DC化療+CIK/DC常規(guī)治療無效CIK/DC單用直接殺傷腫瘤細胞；活化后產(chǎn)生大量炎性細胞抑制瘤、殺瘤；誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡；促進T細胞增殖活化；提高機體免疫力；推薦CIK/DC聯(lián)合治療方案第31頁/共41頁典型病例

董某，男，66歲右腎顆粒細胞癌,雙肺轉(zhuǎn)移治療9個月后,接近CR治療前治療后第32頁/共41頁部分患者治療后腫瘤體積先增大，而后逐步縮小。第33頁/共41頁

細胞回輸前后第34頁/共41頁臨床有效性的研究1、2000年YamazakiT等人在柳葉刀雜志報道了CIK預(yù)防肝癌根治性腫瘤切除術(shù)后復(fù)發(fā)的隨機對比臨床研究。統(tǒng)計顯示，經(jīng)過CIK治療的病人肝癌復(fù)發(fā)的危險降低了41%，3年無復(fù)發(fā)率為48%(對照組：33%)。2、天津醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院任秀寶等應(yīng)用DC-CIK治療非小細胞肺癌并進行了3年臨床研究。術(shù)后42例生物治療+化療組與同期42例常規(guī)化療對照組對比2年總生存率顯著提高94.7，對照組為78.8%±7.0%（P＜0.05)。3、上海第二軍醫(yī)大曹雪濤、萬濤教授等2008年完成了150例轉(zhuǎn)移性晚期大腸癌應(yīng)用腫瘤抗原負載DC細胞治療的臨床研究，研究結(jié)果CR+PR達到46.2%，顯著高于隨機對照化療組22.5%。第35頁/共41頁

4、蘇州大學(xué)附屬第三醫(yī)院蔣敬庭等進行CIK治療29例老年人中晚期胃癌患者副反應(yīng)分析。結(jié)果回輸患者PR8例，MR9例，SD7例，PD5例，總緩解率58.6%5、廣州中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院司徒杰等報道了9例腎癌患者CIK治療的情況。應(yīng)用CIK治療后，腎癌患者體內(nèi)的T細胞亞群比例有治療前的抑制狀態(tài)恢復(fù)到正常比例，患者隨訪最長4年均無復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移。第36頁/共41頁目的：評價非小細胞肺癌患者術(shù)后行常規(guī)化療，再接受DC細胞活化的CIK細胞治療對患者免疫反應(yīng)的作用。方法84例I－III期非小細胞肺癌對照組42例，術(shù)后只行常規(guī)化療研究組42例，術(shù)后行化療，并采取DC活化的CIK細胞治療評價無病生存率和總生存率檢測CIK細胞針對腫瘤細胞的細胞毒性結(jié)果CIK細胞的細胞毒性:通過DC細胞的活化被顯著提高2年總生存率:研究組>對照組（P<0.05）2年無病生存率：無顯著差異。DC細胞活化的CIK細胞治療在腫瘤無進展患者能增加具有抗瘤作用的細胞因子的產(chǎn)生（包括：IFN-γ，MIG，TNF－α和TNF－β），但在發(fā)生復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的患者體內(nèi)無此作用。DC細胞活化的CIK細胞提高非小細胞肺癌患者術(shù)后化療的抗腫瘤作用天津腫瘤醫(yī)院－任秀寶等美國《細胞治療》2009年，第11卷，第8期第37頁/共41頁經(jīng)肝動脈栓塞化療序貫聯(lián)合射頻消融和細胞因子誘導(dǎo)的殺傷細胞治療肝細胞癌的隨機研究中山大學(xué)腫瘤醫(yī)院影像介入中心，華南腫瘤學(xué)國家重點實驗室－趙明、吳沛宏、曾益新等目的：隨機對照研究一組原發(fā)性肝癌病例治療對照組：肝動脈栓塞化療（TACE）序貫聯(lián)合CT導(dǎo)向下射頻消融（