草莓貯藏過程中常見微生物的影響

草莓是薔薇科多年生草本植物。果實呈鮮紅色，香氣濃郁，酸甜可口，柔軟多汁。它叫“水果女王”。等離子體是物質(zhì)的第四狀態(tài)，按溫度高低可分為低溫等離子體和高溫等離子體目前針對等離子殺菌保鮮效果的研究多集中在單次處理上，較少考慮在貯藏期內(nèi)間歇性處理對果實保鮮效果的影響。本試驗以新鮮草莓為原料，在整個貯藏期內(nèi)持續(xù)進(jìn)行PPA處理，并測定了草莓的菌落總數(shù)、腐爛率、色度、硬度、失重率、可溶性固性物含量及pH值等指標(biāo)，探究了PPA連續(xù)處理對草莓采后貯藏保鮮效果的影響。1材料和方法1.1草莓的篩選和培養(yǎng)新鮮草莓，購于杭州市世紀(jì)聯(lián)華超市，在半小時內(nèi)運(yùn)送至浙江大學(xué)紫金港校區(qū)實驗室，挑選大小一致、無病蟲害的草莓若干，備用；PDA培養(yǎng)基，北京陸橋技術(shù)股份有限公司；氯化鈉，分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。1.2噴氣機(jī)器和均質(zhì)器CTE-2000KW低溫等離子試驗電源，南京蘇曼等離子科技有限公司；TC-P2A色差儀，上海信聯(lián)創(chuàng)作電子有限公司；TA-XT2i質(zhì)構(gòu)儀，StableMicroSystem公司；DO-35634-40pH計，美國oaklon公司；PR101-α折光儀，日本atago公司；JN-400i拍擊式均質(zhì)器，寧波江南儀器廠；BSA2202S電子天平，sartorius公司；移液槍，德國eppendorf公司；SM-290W旋渦式噴氣機(jī)，南京蘇曼等離子科技有限公司；樂扣盒，尺寸30cm×25cm×15cm，購于杭州市世紀(jì)聯(lián)華超市。1.3控制板的ppa處理將草莓置于滅過菌的密閉樂扣盒中，用低溫等離子試驗電源制備低溫等離子體，待電源連通后，利用鼓風(fēng)機(jī)使低溫PPA通過管道到達(dá)裝有草莓的密閉空間進(jìn)行殺菌。將草莓分為3組，CK組不進(jìn)行任何處理；一次處理組進(jìn)行一次PPA處理，處理時間為5min，電流為6A，草莓處理量為30顆；連續(xù)處理組每隔72h進(jìn)行一次PPA處理，處理時間為5min，電流為6A，草莓處理量為每次30顆，共進(jìn)行5次PPA處理。每個處理設(shè)3組重復(fù)。處理后的果實置于90%濕度、10℃的冷庫中貯藏。1.4指標(biāo)和方法的測量1.4.1總結(jié)一致—菌落總數(shù)菌落總數(shù)采用CFU計數(shù)法進(jìn)行統(tǒng)計1.4.2腐敗率以草莓果實表面出現(xiàn)水漬狀病斑作為果實腐爛的判別依據(jù)。每隔72h測定腐爛果的個數(shù)，每組30顆果實，按照公式（1）計算腐爛率1.4.3腐爛面積的測定按果實腐爛面積大小將果實劃分為5級：0級，無腐爛；1級，腐爛面積小于果實面積的25%;2級，腐爛面積占果實面積的25%～50%;3級，腐爛面積大于果實面積的50%;4級，果實完全腐爛1.4.4單因素色散每隔72h取處理完畢的草莓，用色差儀對每組10顆草莓的表面顏色進(jìn)行測定，記錄a1.4.5硬度每隔72h取處理完畢的草莓，用裝備3mm探頭的質(zhì)構(gòu)儀對每組10顆草莓進(jìn)行硬度分析1.4.6失敗率每隔72h測定一次質(zhì)量，每組30顆果實，按照公式（4）計算失重率1.4.7可溶性固形物含量和ph值每隔72h取處理完畢的草莓，分別用折光儀和pH計對每組10顆草莓進(jìn)行可溶性固形物含量和pH值的測定1.5de麻黃縣sd分析所有數(shù)據(jù)均設(shè)有3組重復(fù)，并計算標(biāo)準(zhǔn)偏差（standarddeviation,SD）。利用IBMSPSSStatistics24軟件，通過鄧肯分析進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，P<0.05為差異顯著。采用Origin2021軟件進(jìn)行繪圖。2結(jié)果與分析2.1菌落總數(shù)的變化分布在草莓表面的微生物，通常是對人體健康造成危害的主要原因，也是導(dǎo)致草莓腐敗變質(zhì)的主要影響因素。不同處理后果實在貯藏期內(nèi)表面菌落總數(shù)的變化如圖1所示。由圖知，在貯藏期間，PPA連續(xù)處理組草莓表面菌落數(shù)始終最低，其次為一次處理組，CK組果實表面菌落數(shù)最多，并且從第9天開始，CK組草莓表面菌落呈增加趨勢，而連續(xù)處理組呈下降趨勢，這可能是PPA中含有的活性氧、活性氮等活性物質(zhì)對微生物產(chǎn)生了滅活作用2.2不同處理對草莓生理指標(biāo)的影響2.2.1對腐爛率和腐爛指數(shù)的影響腐爛率和腐爛指數(shù)是判斷果蔬保鮮效果的重要指標(biāo)。不同處理后果實在貯藏期內(nèi)腐爛率和腐爛指數(shù)的變化如圖2（見下頁）所示。CK組果實在第6天開始腐爛，腐爛率為1.11%，腐爛指數(shù)為0.27%，而一次處理組和PPA連續(xù)處理組則沒有發(fā)生腐爛。貯藏6～15d中，各組腐爛率和腐爛指數(shù)均逐漸增加，但一次處理組和PPA連續(xù)處理組草莓的腐爛率和腐爛指數(shù)均低于CK組。在貯藏期結(jié)束時，CK組草莓腐爛率為48.33%，腐爛指數(shù)為21.94%；一次處理組草莓腐爛率為38.33%，腐爛指數(shù)為20.56%;PPA連續(xù)處理組草莓腐爛率為26.67%，腐爛指數(shù)為15.83%；連續(xù)處理組草莓的腐爛率和腐爛指數(shù)顯著低于CK組（P<0.05），且明顯低于一次處理組，說明PPA處理能降低草莓的腐爛率和腐爛指數(shù)，而且連續(xù)處理的效果更好。2.2.2影響草莓顏色的決定顏色是草莓主要的外在品質(zhì)指標(biāo)之一，草莓顏色的變化受水分、花青素和呼吸速率的影響2.2.3影響草莓硬度的影響硬度是草莓果實主要品質(zhì)指標(biāo)之一，它與果實的后熟衰老密切相關(guān)2.2.4影響草莓產(chǎn)量的影響失重率是衡量果實在貯藏過程中失水多少的指標(biāo)，失重率過高不但影響果實的外觀，也是貯藏過程中損耗的一種表現(xiàn)2.2.5對可溶性固形物含量的影響可溶性固形物含量和pH值是反映果實營養(yǎng)價值及判斷果實耐貯藏能力的重要指標(biāo)由圖6可知，在貯藏結(jié)束時，一次處理組和PPA連續(xù)處理組可溶性固形物含量均高于CK組；但對整個貯藏期而言，CK組、一次處理組和PPA連續(xù)處理組可溶性固形物含量變化無明顯差異（P>0.05），說明PPA連續(xù)處理對草莓可溶性固形物含量沒有影響。此前也有研究表明，僅通過等離子體殺菌方式處理草莓對其可溶性固形物含量未產(chǎn)生明顯影響，如Sudha等在貯藏期間，連續(xù)處理組的pH值在6～12d時顯著高于CK組，這可能是連續(xù)PPA處理后果實表面微生物減少導(dǎo)致的。在Ma等3不同處理對草莓貯藏期間ph值的影響本文研究了PPA連續(xù)處理對草莓果實表面菌落數(shù)、腐爛率、腐爛指數(shù)及相關(guān)生理指標(biāo)的影響。試驗結(jié)果顯示，在貯藏期間，PPA連續(xù)處理組草莓果實的表面微生物數(shù)量、腐爛率和腐爛指數(shù)均顯著低于對照組（P<0.05），且明顯低于一次處理組。生理指標(biāo)分析結(jié)果顯示，PPA連續(xù)處理對草莓貯藏過程中的硬度、失重率和可溶性