微生物實驗室培養(yǎng)基的管理、使用及質(zhì)量控制主要內(nèi)容培養(yǎng)基的訂購和接收培養(yǎng)基的制備培養(yǎng)基的測試培養(yǎng)基的儲存1.培養(yǎng)基的訂購和接收訂購根據(jù)實驗室培養(yǎng)基清單所列存貨量、實驗室日常用量、供應(yīng)商提供的到貨期來確定定貨日及定貨量只能使用實驗程序所列的培養(yǎng)基;若實驗程序未列出，培養(yǎng)基則用知名公司的產(chǎn)品接收在培養(yǎng)基容器上標記：接收日期、到期日、培養(yǎng)基名稱

儲藏

大部分培養(yǎng)基、藥品及試劑應(yīng)保存在干燥、陰暗處，溫度在15-25℃之間，有些需要儲藏在2-8℃的冰箱內(nèi)，具體操作要按照培養(yǎng)基說明每種培養(yǎng)基儲藏柜建立說明并記錄以下信息：培養(yǎng)基名稱，批號，規(guī)格數(shù)量，有效期，到貨日期，驗收日期，存放地點，儲存條件根據(jù)“先入先出”原則，按到期日早晚排列，保證培養(yǎng)基保持新鮮及更新開封超過一年的培養(yǎng)基視為過期培養(yǎng)基要處理掉培養(yǎng)基入庫登記表2.培養(yǎng)基的制備培養(yǎng)基的準備和滅菌及分裝應(yīng)分別在單獨的區(qū)域進行，按實驗規(guī)程和說明進行并根據(jù)日常用量及保存期確定制備量。每次準備和滅菌都要在配置記錄表上記錄以下信息：配置日期，名稱，廠家，批號，使用量，配置量，配置前后pH,滅菌鍋編號，滅菌要求，操作人，備注

培養(yǎng)基配置記錄制備前的準備工作

仔細閱讀使用方法，包括是否需要燒開、滅菌、及添加劑，根據(jù)單位用量計算出需稱重量水

要使用純化水，如經(jīng)蒸餾、去離子或反滲透得到的水，應(yīng)符合環(huán)境保護局（EPA）中關(guān)于飲用水的標準，每周對其定期進行微生物和化學評估用帶磁力攪拌的加熱板、沸水浴或流動蒸汽來加熱以防燒焦或沸出，加熱時要保證磁力棒在攪動器皿和容器使用硅酸硼玻璃、不銹鋼、鋁或別的耐腐蝕材料，其容積至少要比所準備的培養(yǎng)基的體積大10%配制時先用半量的水將之充分振蕩混勻,再加入剩余的水并洗掉粘在壁上的殘余所有培養(yǎng)基都是熱敏感的,不要加熱超時培養(yǎng)基不含明膠或瓊脂的應(yīng)用冷水或僅需微熱來溶解

培養(yǎng)基含明膠或瓊脂的必須加熱至完全溶解,用沸水浴或流動蒸汽來加熱

滅菌之前要檢查是否完全溶解,是否有瓊脂顆粒粘壁

滅菌滅菌前貼上滅菌條，標上批號，填寫滅菌記錄表擰松蓋或塞以防溢出高壓蒸汽滅菌通常溫度為121℃，時間一般為（按裝培養(yǎng)基的容器容積）：1-100ml15分鐘;100ml-1l25分鐘;>1l30分鐘;管狀設(shè)備及過濾漏斗30分鐘;干物60分鐘具體時間及溫度應(yīng)該查看使用說明及時間/體積表一個滅菌周期完成后，小心打開滅菌鍋門使培養(yǎng)基冷卻5-10分鐘再拿出已滅菌培養(yǎng)基在蓋子擰緊后放入恒溫水浴鍋中（一般為50—55℃）滅菌后培養(yǎng)基pH的調(diào)整：使培養(yǎng)基冷卻至25℃，取單位體積的培養(yǎng)基，用pH計測試并用1mol/l的HCl或1mol/l的NaOH調(diào)至培養(yǎng)基要求的pH范圍，再根據(jù)添加的酸或堿的量來計算校正全部同種培養(yǎng)基的pH培養(yǎng)基不能重復(fù)滅菌滅菌記錄培養(yǎng)基使用登記表倒平板和分裝應(yīng)在無菌工作臺中進行倒平板時的溫度

45-55℃之間,以防在蓋上形成蒸汽；瓊脂溫度不對可導(dǎo)致培養(yǎng)基水過度蒸發(fā)而導(dǎo)致培養(yǎng)基收縮和凝結(jié)分裝用的瓶子或試管的體積應(yīng)該是所分裝培養(yǎng)基的1.5倍以上含熱敏感成分添加劑的培養(yǎng)基，其熱敏感成分用0.45μ的濾膜來過濾除菌，并在培養(yǎng)基冷卻到50℃后才能加入已凝的瓊脂培養(yǎng)基不能放在加熱板上直接加熱，微波爐或水浴可用來再熔化已凝的瓊脂培養(yǎng)基，注意加熱前要擰松蓋子培養(yǎng)基不能重復(fù)熔化，這會破壞其成分并增加污染機會已滅菌的、熔化的培養(yǎng)基要放在50℃恒溫水浴中冷卻并在6小時內(nèi)分裝

平板凝固后倒置平板進行培養(yǎng)和貯存，TBG等分裝后要放冰箱

象BS等有沉淀的培養(yǎng)基倒平板時注意振蕩使之濁度均一

平板上的氣泡可用本生燈焰輕輕加熱除去

平板上的水可造成微生物蔓延和菌落液化,可在30-40℃恒溫箱中除去

pH6.0以下的酸性培養(yǎng)基配制時要在溫和條件下，因為加熱可造成瓊脂和明膠分解;若已造成分解可按5.0克/升瓊脂來補充

平板架每次使用后用純水沖洗，紫外燈照射殺菌3.培養(yǎng)基的測試無菌實驗

無菌實驗是為了說明培養(yǎng)基被正確地滅菌，保證在實驗中出現(xiàn)的污染不是由不正確的滅菌而來肉湯要37℃培養(yǎng)24小時觀察無菌后才能使用

倒平板后要培養(yǎng)24小時觀察無菌后才能使用：細菌板放37℃培養(yǎng)箱，真菌板放28℃培養(yǎng)箱

裝在試管中的培養(yǎng)基培養(yǎng)24小時后若發(fā)現(xiàn)有長菌，則該批培養(yǎng)基要滅菌后扔掉在倒平板的同時倒一定數(shù)目的平板作為空白對照，并在該批平板將被使用的溫度和時間下培養(yǎng)，直到該批平板用完，記錄其陽性率若使用培養(yǎng)基來做傾注平板實驗，要同時用所有培養(yǎng)基倒一個空白板作培養(yǎng)陰陽性對照

取樣量應(yīng)為總平板、試管或瓶子數(shù)的1-2%，用ATCC菌種接種并應(yīng)產(chǎn)生預(yù)期效果

生長能力測試

每種培養(yǎng)基都要測試其支持、鑒別或抑制適當菌的能力對完全培養(yǎng)基可根據(jù)實驗室情況選用不同類型的代表種;對選擇、鑒別培養(yǎng)基應(yīng)選擇最能顯示其特征的微生物

生長能力測試——測試方法

接種能產(chǎn)生10-100個菌落的已知微生物的24小時培養(yǎng)物

接種10-3稀釋度的已知微生物的24小時培養(yǎng)物具體的選擇應(yīng)