1、1，特集2微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用，課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)，2，1，培養(yǎng)基分為哪兩種，2，培養(yǎng)基一般含有什么營養(yǎng)物質(zhì)？ 另外，需要滿足什么樣的要求？3、獲得純培養(yǎng)物的關(guān)鍵是什么？4、避免雜菌污染的方法主要有哪些4個(gè)方面，5、消毒、滅菌是什么，常用方法是什么？ 6、制造牛肉膏胨固體培養(yǎng)基的方法步驟，7、如何打倒平板？ 3.微生物類群，微生物，原核類：真核類，非細(xì)胞類：細(xì)菌，支原體，放線菌，藍(lán)藻，個(gè)體微小，結(jié)構(gòu)簡單，酵母菌4，1 .細(xì)菌形態(tài)，5細(xì)菌主要以二分裂繁殖(如右圖)，2 .細(xì)菌繁殖，3 .細(xì)菌菌落，定義：單一或少數(shù)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖，形成肉眼可見的具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的亞細(xì)胞群，稱為菌落。

2、 特征：大小、形狀、光澤度、顏色、硬度、透明度等。 功能：每種細(xì)菌在一定條件下形成的菌落，可作為菌種鑒定的重要依據(jù)。 6、一些菌落及其形態(tài)，7、一些菌落及其形態(tài)，8，4 .病毒結(jié)構(gòu)，由核酸和蛋白質(zhì)構(gòu)成。 9、病毒結(jié)構(gòu)、10、吸附、注入、合成、放出、組裝、5 .病毒繁殖、病毒增殖一般是核酸合成核酸和蛋白質(zhì)的吸附注入、6 .病毒的營養(yǎng)方式、寄生、11、微生物所需的五種營養(yǎng)要素物質(zhì)、微生物所需的營養(yǎng)物質(zhì)和功能、1 .碳源無機(jī)碳源： CO2； NaHCO3等有機(jī)碳源：糖類、脂肪酸、花生粉餅、石油等構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)和某些代謝產(chǎn)物的微生物的能量源，概念、源：作用：1 .微生物的碳源，12，無機(jī)氮源： N2、N

3、H4、NO3-、NH3等。 有機(jī)氮源：能為微生物提供n元素的營養(yǎng)物質(zhì)，如尿素、牛肉膏、胨、氨基酸等。 主要用于合成含有蛋白質(zhì)、核酸和n的代謝產(chǎn)物。 2 .微生物的氮源，概念：源：作用：3 .生長因子，常見生長因子：概念：作用：微生物生長不可缺少的微量有機(jī)物。 酶和核酸的組成成分。 維生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。 13 .培養(yǎng)基、培養(yǎng)基(培養(yǎng)液)是人工制備的，是微生物生長專用的營養(yǎng)基質(zhì)。 1 .培養(yǎng)基的種類和用途，2 .不同的微生物多采用不同的培養(yǎng)基處方(參照教材附錄內(nèi)容)，3 .每種培養(yǎng)基都一般含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì)。 另外，微生物的生長需要滿足pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)例如：生長因子(

4、即需要細(xì)菌的生長，自己不能合成的化合物例如維生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶)和氧、二氧化碳、滲透壓等要求。14、培養(yǎng)基種類，不添加凝固劑，添加凝固劑，瓊脂，工業(yè)生產(chǎn)，觀察微生物運(yùn)動(dòng)，分類鑒定，微生物分離，鑒定，活菌計(jì)數(shù)，保存菌種，含有化學(xué)成分不明的天然物質(zhì)，工業(yè)生產(chǎn)，培養(yǎng)基成分明確，分類鑒定，添加培養(yǎng)基中的化學(xué)物質(zhì)，不需要的微生物的加入培養(yǎng)、分離所需微生物的培養(yǎng)基中的指示劑和化學(xué)藥品，識(shí)別不同種類的微生物，識(shí)別不同種類的微生物，選擇培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基、15、液體培養(yǎng)基：表面生長、均一混濁生長、沉淀成長、back、半固體培養(yǎng)基： (是否運(yùn)動(dòng))，無動(dòng)力，有動(dòng)力(分散)，固體培養(yǎng)

5、基：分離導(dǎo)入了菌落，16個(gè)目的基因的受體細(xì)胞，選擇幾個(gè)培養(yǎng)基，分離加入青霉素的培養(yǎng)基、酵母菌、霉菌等真菌，分離不加氮源的無氮培養(yǎng)基、固氮菌，加入含碳有機(jī)物分離自營養(yǎng)微生物，加入青霉素等抗生素的培養(yǎng)基、back、17、血清中含有多種蛋白質(zhì)(白蛋白、球蛋白、鐵蛋白等)的多種金屬離子的激素粘著蛋白、冷析球蛋白、膠原質(zhì)等附著促進(jìn)物質(zhì)。 各種生長因子轉(zhuǎn)鐵蛋白不明的成分在人工合成培養(yǎng)基中只能維持細(xì)胞的生存，為了使細(xì)胞生長繁殖，需要補(bǔ)充一定量的天然培養(yǎng)基(如血清)。 18 .無菌技術(shù)，1 .無菌技術(shù)概念，無菌操作是指在培養(yǎng)微生物的操作中，防止雜菌污染的方法。 消毒定義：利用化學(xué)或物理的方法，殺死部分微生物的

6、過程。 2、消毒和滅菌概念兩者的差異，滅菌的定義：用化學(xué)試劑和物理方法消滅所有微生物，達(dá)到完全無菌的過程，包括所有細(xì)菌的繁殖體、芽胞、霉菌和病毒。 滅菌和消毒技術(shù)是微生物工作中最普通最重要的技術(shù)。 煮沸消毒法： 100煮沸5-6分鐘。 巴氏消毒法：用70-75煮30分鐘或80分鐘。 化學(xué)藥劑消毒法：用75%酒精、新潔面等進(jìn)行皮膚消毒的氯氣消毒水源。 紫外線消毒。 消毒的方法：3 .常用的消毒和滅菌方法，20、燒灼滅菌、干熱滅菌：用160-170加熱1-2h。 高壓蒸汽滅菌： 100kPa，121下15-30min .滅菌方法：21，最常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌，可以殺死所有生物，包括最耐熱的

7、微生物休眠體在內(nèi)，幾乎不損害培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分。 有些玻璃器具可以采用高溫的干熱滅菌。 為了防止雜菌，特別是空氣中的雜菌污染，試管和玻璃燒瓶需要用適當(dāng)?shù)娜尤】?，通常用棉塞住?也可以使用各種金屬、塑料、硅膠帽。 空氣中的其他微生物不能通過。 平盤是用正反兩面板固定的，這個(gè)器具是為了防止空氣中的微生物污染而設(shè)計(jì)的。 22，2 .實(shí)驗(yàn)操作(以大腸菌的培養(yǎng)為例)，制備牛肉糊的胨培養(yǎng)基，1 .計(jì)算2 .稱量3 .溶解4 .將滅菌：玉米瓶放入高壓蒸汽滅菌鍋中，壓力100kPa、溫度121、滅菌1530min。 5 .反平板：培養(yǎng)基冷卻到50左右時(shí)，在酒精燈附近變成反平板。 2d后觀察平板，沒有雜菌污染

8、就不能接種。23、逆平板操作、24、精制大腸菌、平板劃線法和稀釋涂布平板法。 微生物接種的常用接種方法有：1 .平板劃線的操作方法，平板劃線的操作，25、26、二是，由于縫隙中殘留的各個(gè)細(xì)胞不能形成規(guī)則的菌落，所以菌落沿著縫隙生長，形成條紋狀的菌落。 27，28，2 .稀釋涂布平板的操作方法，29，30，31，4 .菌種的保存，在固體斜面培養(yǎng)基上接種，菌落生長后，保存在4冰箱中。3 .微生物恒溫培養(yǎng).長期保存：甘油冷凍管藏法.臨時(shí)保存：32，3 .結(jié)果分析和評(píng)價(jià).不通過培養(yǎng)基制作的培養(yǎng)基在恒溫槽中保溫12天后，如果菌落不生長，說明培養(yǎng)基的制備成功，否則有必要重新制備。 接種操作是否滿足無菌要求，說明培養(yǎng)基中生長的菌落顏色、形狀、大小基本一致，如果符合大腸桿菌菌落的特征，接種操作就滿足要求，說明培養(yǎng)基中出現(xiàn)其他菌落時(shí)，在接種中還沒有要求無菌操作，分析原因.是否及時(shí)進(jìn)行了周密的觀察，與記錄培養(yǎng)12h和24h后