1、初始污染菌和微粒污染控制驗(yàn)證方案1.目的通過(guò)設(shè)計(jì)試驗(yàn)確認(rèn)XX半成品的儲(chǔ)存環(huán)境和存放有效期。其可能存在的環(huán)節(jié)如下：（1）在內(nèi)包裝封口前初始污染菌是否滿足控制要求（定期監(jiān)控）；（2）等待滅菌的產(chǎn)品，密封嚴(yán)實(shí)存放在外包間，其初始污染菌隨儲(chǔ)存時(shí)間變化。2.適用范圍本驗(yàn)證方案適用于本產(chǎn)品，通過(guò)試驗(yàn)研究，以確定在各種情況下的儲(chǔ)存有效期。3.發(fā)放范圍管理者代表、生產(chǎn)部和質(zhì)量部等有關(guān)部門(mén)及人員。4.規(guī)范性引用文件中華人民共和國(guó)藥典2015版 附錄 微生物限度檢查法5. 組織和職責(zé)根據(jù)驗(yàn)證工作量的大小，本公司成立驗(yàn)證組，由公司管理者代表任組長(zhǎng)，生產(chǎn)部、質(zhì)量部、有關(guān)部門(mén)及人員任組員。驗(yàn)證小組職責(zé)：負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的起

2、草、批準(zhǔn)；負(fù)責(zé)驗(yàn)證的協(xié)調(diào)工作，以保證驗(yàn)證方案規(guī)定項(xiàng)目的順利實(shí)施；負(fù)責(zé)驗(yàn)證數(shù)據(jù)結(jié)果的審核；負(fù)責(zé)驗(yàn)證報(bào)告的審批；負(fù)責(zé)發(fā)放驗(yàn)證證書(shū)；負(fù)責(zé)確定該項(xiàng)驗(yàn)證的再驗(yàn)證周期。5.1 主責(zé)部門(mén)本方案的主責(zé)部門(mén)為公司管理者代表，其職責(zé)為:負(fù)責(zé)審批驗(yàn)證方案和驗(yàn)證報(bào)告，頒發(fā)驗(yàn)證證書(shū)。5.2 相關(guān)部門(mén)本方案的相關(guān)部門(mén)為質(zhì)量部，其職責(zé)為：按標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程及驗(yàn)證方案進(jìn)行各項(xiàng)確認(rèn)，及時(shí)報(bào)告確認(rèn)結(jié)果，形成驗(yàn)證報(bào)告；負(fù)責(zé)操作培訓(xùn)和現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)督。6.步驟和方法6.1計(jì)劃及進(jìn)度本驗(yàn)證由質(zhì)量部提出完整的驗(yàn)證計(jì)劃，經(jīng)驗(yàn)證小組批準(zhǔn)后實(shí)施，由質(zhì)量部完成，整個(gè)驗(yàn)證活動(dòng)分為兩個(gè)階段完成：運(yùn)行確認(rèn)(OQ) 從 年 月 日到 年 月 日性能確認(rèn)(PQ) 從

3、 年 月 日到 年 月 日6.2 初始污染菌和微粒檢測(cè)方法及可接受標(biāo)準(zhǔn)6.2.1抽樣方法和抽樣規(guī)律以每一個(gè)生產(chǎn)批為產(chǎn)品抽樣批，隨機(jī)抽取樣品1片（長(zhǎng)寬約5cm2cm）記為1單位，在潔凈條件下精確稱重，并標(biāo)記。需要臨時(shí)或長(zhǎng)期存放時(shí)間預(yù)計(jì)不超過(guò)30天（1個(gè)月），綜合細(xì)菌的生長(zhǎng)規(guī)律及可能存在的存放天數(shù)，其抽樣檢測(cè)的時(shí)間設(shè)計(jì)為存入后：第1天、第2天、第3天、第5天、第7天、第15天、第30天。6.2.2 供試液制備1) 取0.9%的生理鹽水溶液10ml，盛于已滅菌的試管內(nèi)；2) 將取樣依次投入試管，充分搖勻。6.2.3接種與培養(yǎng)1) 取上述供試液1ml加入9ml生理鹽水溶液，稀釋成1:10；取上述稀釋液

4、2ml，分別注入2個(gè)已滅菌的平皿內(nèi)(每個(gè)平皿注入1 ml)；2) 同時(shí)取1ml加入盛有9ml生理鹽水溶液的試管中，稀釋成1：100，再取此稀釋液2ml，分別注入2個(gè)已滅菌平皿內(nèi)(每個(gè)平皿注入1 ml)；3) 用已滅菌的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，融化待冷卻到40-50，分別傾注15ml上述4個(gè)平皿，蓋好上蓋，并以順時(shí)針或逆時(shí)針?lè)较蚩焖俎D(zhuǎn)動(dòng)平皿，使供試液與培養(yǎng)基充分混勻。4) 以上平皿做好標(biāo)記，以免混淆。5) 待培養(yǎng)基凝固后，將平皿移入37的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)不少于482小時(shí)。6.2.4菌落計(jì)數(shù)1) 當(dāng)菌落數(shù)大于300 CFU時(shí)，應(yīng)將原液稀釋成1：1000，即取供試液1ml加入0.9%的氯化鈉溶液9ml中取得，然

5、后重新接種及培養(yǎng)。2) 當(dāng)細(xì)菌生長(zhǎng)呈片狀、花點(diǎn)樣菌落，該平皿不以計(jì)數(shù)。 3) 若片狀菌落不到平皿中的一半，而其余一半中菌落數(shù)分布又很均勻，則可將此半個(gè)平皿菌落計(jì)數(shù)后乘以2，以代表全平皿菌落數(shù)。4) 計(jì)數(shù)方法平均數(shù)值稀釋倍數(shù)菌落數(shù)/質(zhì)量（g）= 質(zhì)量a) 首先選取平均菌落數(shù)在30300之間的平皿，作為菌落總數(shù)測(cè)定的范圍。b) 如只有一個(gè)稀釋級(jí)平均菌落數(shù)在30300之間，則菌落數(shù)為該稀釋級(jí)的菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)。c) 如有兩個(gè)相鄰稀釋級(jí)的平均菌落數(shù)在30300之間，則先計(jì)算兩稀釋級(jí)菌落數(shù)的比值。 高稀釋級(jí)的平均平板菌落數(shù)稀釋倍數(shù)比值= 低稀釋級(jí)的平均平板菌落數(shù)稀釋倍數(shù)當(dāng)比值2時(shí)，則以2個(gè)稀釋級(jí)的平均

6、菌落數(shù)均值報(bào)告。當(dāng)比值2時(shí)，則以低稀釋級(jí)的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告。d) 如各稀釋級(jí)平均菌落數(shù)均在300以上，則按最高平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告；如各稀釋級(jí)平均菌落數(shù)均在30以下，則按最低平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告。e) 如各稀釋級(jí)平均菌落數(shù)均不在30300之間，則以最接近30或300的稀釋級(jí)平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告。f) 如各稀釋級(jí)平均菌落數(shù)均無(wú)菌落生長(zhǎng)或最低稀釋級(jí)平均菌落數(shù)小于1時(shí)，應(yīng)報(bào)告菌數(shù)為10個(gè)/g。g) 如有3個(gè)稀釋級(jí)平均菌落數(shù)均在30300之間，則以后2級(jí)計(jì)算級(jí)間比值報(bào)告。h) 菌落計(jì)數(shù)的報(bào)告，菌落數(shù)在10以內(nèi)時(shí)，按實(shí)有數(shù)值報(bào)告。大于100時(shí)，采用二位有效數(shù)字，在兩位有效數(shù)值

7、后面，應(yīng)以四舍五入法計(jì)算。在報(bào)告菌落數(shù)為“不可計(jì)”時(shí)，應(yīng)表明樣品的稀釋度。例：例次不同稀釋度的平均菌落數(shù)兩相鄰稀釋度菌數(shù)之比菌落總數(shù)個(gè)/g報(bào)告方式個(gè)/g10-110-210-31136516420-1640016000或1.610422760295461.63800038000或3.810432890271602.22710027000或2.71044不可計(jì)4650513-513000510000或5.1105527115-270270或2.7102i）總稀釋倍數(shù)計(jì)算時(shí)應(yīng)包括取樣時(shí)的10ml，即已稀釋10倍。6.2.5可接受標(biāo)準(zhǔn)初始污染菌和微?？刂浦担?00 CFU/單位6.3 驗(yàn)證內(nèi)容6.3.1包裝封口前的半成品生產(chǎn)批號(hào)初始污染菌檢測(cè)均值（CFU/單位）結(jié)果評(píng)價(jià)結(jié)論：滅菌前初始污染菌 主檢： 復(fù)檢： 日期： 年 月 日6.3.2等待滅菌的半成品存放時(shí)間初始污染菌檢測(cè)均值（CFU/單位）評(píng)價(jià)第1天第2天第3天第7天第15天第30天結(jié)論：半成品初始污染菌 主檢： 復(fù)檢： 日期： 年 月 日以上記錄要三次生產(chǎn)批。7.批準(zhǔn)結(jié)論驗(yàn)證組組長(zhǎng)對(duì)驗(yàn)證報(bào)告進(jìn)行審查、批準(zhǔn)、