1、.,標(biāo)本采集方法,.,標(biāo)本的定義：是指采取患者少許的血液、排泄物（糞、尿）、分泌物（痰、鼻分泌物）、嘔吐物、體液（胸腔積液、腹腔積液）和脫落細(xì)胞（食道、陰道）等樣品， 經(jīng)過(guò)物理、化學(xué)和生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)和方法對(duì)其進(jìn)行檢驗(yàn)，作為判斷患者有無(wú)異常存在的依據(jù)。,.,本章重點(diǎn)： 掌握標(biāo)本采集的原則 掌握痰標(biāo)本、血標(biāo)本、尿標(biāo)本、糞標(biāo)本的采集方法,.,標(biāo)本采集的意義 明確診斷 觀察病情 指導(dǎo)制定治療措施,.,標(biāo)本采集的原則,遵照醫(yī)囑 充分準(zhǔn)備： 1）患者準(zhǔn)備 2）用物準(zhǔn)備 3）護(hù)士自身準(zhǔn)備 嚴(yán)格查對(duì)：檢查項(xiàng)目、患者姓名、床號(hào)、住院號(hào) 正確采集：方法、時(shí)間、量、容器 及時(shí)送檢,.,明確檢驗(yàn)項(xiàng)目、檢驗(yàn)?zāi)康募白?/p>

2、意事項(xiàng) 標(biāo)本的容器貼好標(biāo)簽，附上驗(yàn)單：患者的姓名、科室、床號(hào)、住院號(hào)、送檢目的、送檢日期和時(shí)間等 每次采集血標(biāo)本時(shí)應(yīng)做到“三個(gè)一”：一患者、一化驗(yàn)單、一容器 一般培養(yǎng)標(biāo)本的采集應(yīng)在使用抗生素之前 culture,.,各種標(biāo)本的采集,一、痰標(biāo)本的采集 二、咽拭子標(biāo)本的采集 三、尿標(biāo)本的采集 四、糞便標(biāo)本的采集 五、血液標(biāo)本的采集,.,各種標(biāo)本的采集,一、痰液標(biāo)本的采集 痰常規(guī)標(biāo)本 痰培養(yǎng)標(biāo)本 24小時(shí)痰標(biāo)本,.,三種痰標(biāo)本的區(qū)別,.,共同點(diǎn)：驗(yàn)單,.,.,.,能自理的患者： 晨起后用清水漱口 以清晨第一口痰為宜 深吸氣后用力咳出氣管深處的痰液 不可混入漱口液、唾液、鼻涕等 無(wú)法咳痰或不合作者：

3、用吸痰法收集（集痰器）,.,.,痰標(biāo)本采集注意事項(xiàng) 1、如查癌細(xì)胞，應(yīng)立即送檢或用95%乙醇或用10%甲醛固定后送檢 2、不可將唾液、漱口水、鼻涕等混入痰液中 3、收集痰液宜在清晨，因此時(shí)痰量較多，痰內(nèi)細(xì)菌也較多，提高陽(yáng)性率。,.,痰培養(yǎng)標(biāo)本,采集與運(yùn)送,.,病原體種類繁多而復(fù)雜,使下呼吸道感染病原診斷成為難題,細(xì)菌（包括放線菌與奴卡菌，厭氧菌與分枝桿菌） 真菌（包括肺孢子菌） 病毒 支原體、衣原體與立克次體 原蟲(chóng) 寄生蟲(chóng),.,咳痰途經(jīng)口咽部,唾液中口咽部定植菌的濃度可達(dá)108-109/ml。 研究顯示，國(guó)內(nèi)常規(guī)痰標(biāo)本中約半數(shù)存在唾液嚴(yán)重污染現(xiàn)象。,不可避免地受到污染,.,我國(guó)痰細(xì)菌培養(yǎng)現(xiàn)狀,

4、標(biāo)本送檢率低 苛養(yǎng)菌檢出率極低 結(jié)果重復(fù)性差 報(bào)告速度慢 感染菌與污染菌不易區(qū)分 藥敏結(jié)果與治療反應(yīng)存在差距,.,咳痰標(biāo)本的采集,標(biāo)本采集方法 醫(yī)師或護(hù)士直視下采集標(biāo)本 病人先漱口，去除表面的菌群 教育病人深咳，收集從下呼吸道咳出的痰液 臨床上約半數(shù)咳痰標(biāo)本不合格！,.,關(guān)于咳痰標(biāo)本,在抗生素應(yīng)用前采集痰標(biāo)本; 標(biāo)本采集后12h內(nèi)必須立即進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室處理 咳痰標(biāo)本應(yīng)用最早且廣泛，但也是最受爭(zhēng)議的標(biāo)本 取標(biāo)本前應(yīng)摘去牙托，清潔口腔如刷牙和漱口 深咳，采集標(biāo)本過(guò)程中要有專業(yè)的醫(yī)務(wù)人員指導(dǎo) 無(wú)痰可用35NaCl 5ml霧吸約5min導(dǎo)痰 也可用物理療法、體位引流、鼻導(dǎo)管抽吸等法取痰,.,幾種下呼吸道直

5、接采集的標(biāo)本,經(jīng)氣管穿刺吸引（transtracheal aspiration,TTA） 經(jīng)胸壁針刺吸引（transthoracic needle aspiration, TNA） 經(jīng)支氣管鏡采樣 支氣管肺泡灌洗（bronchoalveolar lavage, BAL） 經(jīng)支氣管鏡直接吸引 防污染樣本毛刷（protective specimen brush, PSB） 開(kāi)胸肺活檢（open-lung biopsy，OLB） 經(jīng)人工氣道吸引分泌物（endotracheal aspirates，ETA）,.,痰培養(yǎng)的送檢次數(shù),對(duì)于普通細(xì)菌性肺炎，痰標(biāo)本送檢每天1次，連續(xù)23天。不建議24h內(nèi)多次采

6、集，除非痰液外觀性狀出現(xiàn)改變； 懷疑分枝桿菌感染者，應(yīng)連續(xù)收集3天清晨痰液送檢； 懷疑軍團(tuán)菌或深部真菌感染，痰標(biāo)本理想的送檢次數(shù)尚無(wú)定論。,.,痰培養(yǎng)的運(yùn)送和保存,盡快（2h）送至實(shí)驗(yàn)室。 如不能及時(shí)送達(dá)，應(yīng)將標(biāo)本暫存于4，但放置時(shí)間不可超過(guò)24h。 厭氧培養(yǎng)標(biāo)本的最佳運(yùn)送時(shí)間取決于標(biāo)本量。 被口咽部菌群污染的標(biāo)本如咳痰等不可用于厭氧菌培養(yǎng)。,.,二、咽拭子標(biāo)本采集 目標(biāo)：從咽部和扁桃體取分泌物作細(xì)菌培養(yǎng)或病毒分離，協(xié)助診斷。,.,操作步驟及要點(diǎn),操作前準(zhǔn)備,核對(duì),點(diǎn)燃酒精燈，指導(dǎo)患者張口發(fā)“啊”音， 用長(zhǎng)棉簽蘸 以敏捷、輕柔的動(dòng)作擦拭 兩側(cè)腭弓、咽扁桃體上的分泌物，取畢， 將試管口及棉塞在酒

7、精燈火焰上消毒后 插入棉簽，塞緊。,將棉簽插入 試管中送檢,.,咽拭子標(biāo)本采集注意事項(xiàng) 作真菌培養(yǎng)時(shí)，須在口腔潰瘍面采集分泌物 避免交叉感染 注意棉簽不要觸及其它部位，防止污染標(biāo)本，影響其他結(jié)果 避免在進(jìn)食2小時(shí)內(nèi)采集標(biāo)本，以防嘔吐,.,上呼吸道標(biāo)本,.,上呼吸道感染：,絕大部分呼吸道感染局限于口咽、鼻咽和鼻腔部位； 導(dǎo)致 咽痛、鼻涕、常常會(huì)發(fā)熱。感染喉部、中耳、鼻竇炎、結(jié)膜炎或角膜炎。 可能與嚴(yán)重疾病百日咳、流行性感冒、麻疹和傳染性單核細(xì)胞增多癥并存。,.,.,不同的采樣拭子對(duì)標(biāo)本的檢測(cè)結(jié)果有影響嗎?,?,.,棉+木棍,抑菌區(qū)域的產(chǎn)生由于棉中所含的脂肪酸以及從木棒中滲出的樹(shù)脂和甲醛。,.,三

8、、尿標(biāo)本的采集,尿標(biāo)本的分類 尿常規(guī)標(biāo)本 尿培養(yǎng)標(biāo)本 12h或24h尿標(biāo)本,.,1、尿常規(guī)標(biāo)本 查尿液的性狀，有無(wú)管型和細(xì)胞，并作尿蛋白和尿糖的定性檢測(cè) 用物準(zhǔn)備：一次性尿杯,.,自理的病人：清晨首次尿，1/3到1/2杯 留置導(dǎo)尿：集尿袋中放出尿液,.,2、尿培養(yǎng)標(biāo)本 用于細(xì)菌培養(yǎng)和細(xì)菌敏感試驗(yàn) 用物：,.,中段尿留取法： 1、導(dǎo)尿術(shù) 2、按導(dǎo)尿術(shù)清潔外陰、尿道口囑患者排去前段尿用試管留取5-10ml中段尿液,.,.,尿培養(yǎng)標(biāo)本,采集與運(yùn)送,.,你知道嗎？,尿液通常是無(wú)菌的或一過(guò)性有少量微生物，但是尿道內(nèi)或尿道周圍皮膚的菌群會(huì)污染尿液標(biāo)本，從而可能導(dǎo)致錯(cuò)誤的培養(yǎng)結(jié)果。 診斷癥狀明顯的病人（如尿

9、急、尿頻、尿痛），一份標(biāo)本就已足夠，治療48-72小時(shí)后再采集第二份標(biāo)本。對(duì)于癥狀不明顯的病人，需采集2-3份標(biāo)本。懷疑腎結(jié)核時(shí)，應(yīng)連續(xù)3天采集晨尿。 多次收集或24小時(shí)尿不能用作培養(yǎng)。 申請(qǐng)單上必須注明病人癥狀是否明顯，這對(duì)于定量培養(yǎng)分析非常重要，尤其只有少量尿液標(biāo)本。 室溫都有利于病原菌和污染菌會(huì)生長(zhǎng)繁殖，因此若30min內(nèi)不能及時(shí)培養(yǎng)尿液則必須冷藏，但也不能超過(guò)24小時(shí)。,.,尿培養(yǎng)標(biāo)本,清潔中段尿 導(dǎo)尿?qū)Ч苣?經(jīng)恥骨上皮膚穿刺采集膀胱內(nèi)尿液 送檢標(biāo)本以晨起第一次尿液為佳 不能立即送檢者，可暫存4冰箱，但保存不超過(guò)8h,.,清潔中段尿液,盡量取早晨第一次尿液 棄去開(kāi)始流出的尿液，以沖刷尿

10、道口的細(xì)菌，取能代表膀胱部位病原菌的中段尿 詳細(xì)告知病人以下操作步驟 女性病人 收集標(biāo)本前用清洗液沖洗干凈，從前向后仔細(xì)擦洗尿道區(qū)域 分開(kāi)陰唇，開(kāi)始排尿 排出幾毫升后，不停止尿流，采集中段尿 男性病人 回縮包皮并清洗龜頭 排出幾毫升后，不停止尿流，采集中段尿,.,導(dǎo)尿管尿液,集尿袋內(nèi)的尿液不能用作培養(yǎng)； 導(dǎo)尿管末端的尿液也不能用于培養(yǎng)，因?yàn)楹茈y避免沒(méi)有尿道菌群污染。 留置導(dǎo)管尿液標(biāo)本常通過(guò)專門的采樣端口采集，不能把導(dǎo)尿管與尿袋拔開(kāi)后收集尿液。 采樣端口用酒精消毒；必要時(shí)，可先夾住導(dǎo)尿管但不能超過(guò)30分鐘；將注射器針頭插入采樣端口，抽吸出尿液；注入無(wú)菌杯或試管中,.,恥骨上穿刺吸取尿液,常用于患

11、兒、泌尿道厭氧菌感染或脊柱損傷病人等。 可避免尿道或會(huì)陰細(xì)菌的污染，但對(duì)膀胱內(nèi)少量尿液的小兒難以實(shí)施。 方法：消毒自臍以下至尿道之間區(qū)域的皮膚，局麻穿刺點(diǎn)部位；在恥骨聯(lián)合與臍連線上，高于恥骨聯(lián)合2cm處進(jìn)針刺入膀胱；取20ml尿液；置于無(wú)菌容器中并送往實(shí)驗(yàn)室。 可用于厭氧菌檢測(cè),.,3、12h或24h尿標(biāo)本 尿生化或尿濃縮查結(jié)核桿菌 7pm(am)排空膀胱翌日7am 請(qǐng)病人先把尿液排到便盆或便壺內(nèi)，再置于3000-5000ml帶蓋的清潔容器內(nèi)。 用物：容器（30005000ml） 防腐劑,.,.,常用防腐劑： 甲醛： 防腐和固定，用于作尿愛(ài)迪計(jì)數(shù)（12小時(shí)尿細(xì)胞計(jì)數(shù)）等 每30ml尿液加 40

12、%甲醛液1滴 濃鹽酸： 作用：保持尿液在酸性環(huán)境中，防止尿中激素被氧化。常用于內(nèi)分泌系統(tǒng)的檢驗(yàn)，如17-酮類固醇、17-羥類固醇 24小時(shí)尿中加5-10ml,.,甲苯： 保持尿液的化學(xué)成分不變，常用作尿蛋白、尿糖的定量測(cè)定。 用法：每100ml尿液中加入0.5%1%甲苯2ml，使之形成一薄膜，覆蓋于尿液的表面，防止細(xì)菌感染。如果測(cè)定尿中的鈉、鉀、氯、肌酐 、肌酸等需加10ml。,.,尿標(biāo)本采集注意事項(xiàng) 女患者月經(jīng)期不宜留取尿標(biāo)本 會(huì)陰部分泌物過(guò)多時(shí)，應(yīng)先清潔再?zèng)_洗，再收集。 做早孕檢查試驗(yàn)應(yīng)留晨尿 留取尿培養(yǎng)標(biāo)本時(shí)，無(wú)菌操作 留取12h或24h尿標(biāo)本，集尿瓶應(yīng)放在陰涼處，根據(jù)檢驗(yàn)要求加防腐劑。

13、,.,四、糞便標(biāo)本采集 意義、目的： 1、了解消化道炎癥、梗阻、出血、寄生蟲(chóng)感染等 2、了解消化道狀況，粗略判斷胰腺的外分泌功能 3、糞便隱血可作為消化道惡性腫瘤的診斷篩查試驗(yàn) 4、檢查糞便中有無(wú)細(xì)菌感染，防止腸道感染,.,.,便盒,.,大便培養(yǎng),.,.,采集糞便標(biāo)本的注意事項(xiàng)： 1、采集培養(yǎng)標(biāo)本時(shí)，如患者無(wú)便意，用長(zhǎng)無(wú)菌棉簽蘸生理鹽水，由肛門插入6-7cm，順一個(gè)方向輕輕旋轉(zhuǎn)后取出，將棉簽插入培養(yǎng)試管內(nèi)，蓋緊送檢。 2、病人服用驅(qū)蟲(chóng)藥或做血吸蟲(chóng)孵化實(shí)驗(yàn)，應(yīng)留取全部糞便送檢。 3、患者如有腹瀉，水樣便應(yīng)盛于便盆內(nèi)送檢,.,五、血液標(biāo)本的采集,.,.,血標(biāo)本的分類和目的 全血：用作血沉、血常規(guī)和

14、測(cè)定血液中某些物質(zhì)的含量，如肌酐、尿素氮、尿酸、血糖等 血清：全血自然凝固后析出的液體,用于生物化學(xué)、免疫學(xué)檢測(cè)等，如血清酶、脂類、電解質(zhì)、肝功能 血培養(yǎng)標(biāo)本：查找血液中的致病菌,.,.,采集法,1、靜脈采血法 全血 血清 血培養(yǎng) 2、動(dòng)脈血標(biāo)本采集法 常用于血?dú)夥治?3、毛細(xì)血管采集法 常用于血常規(guī)檢查,.,常用抗凝劑,EDTA (乙二胺四乙酸) 通過(guò)與血中鈣離子形成螯合物,從而阻止血液凝固 常用類型: K2EDTA: EDTA二鉀 塑料試管以噴霧狀態(tài)抗凝. ICSH推薦. 需充分混勻 K3EDTA: EDTA三鉀(玻璃試管以液體狀態(tài)抗凝) 可能因采血量不足液體抗凝劑對(duì)標(biāo)本有稀釋作用,從而導(dǎo)

15、致錯(cuò)誤的實(shí)驗(yàn)結(jié)果 Na2EDTA: EDTA二鈉 應(yīng)用: 常規(guī)液學(xué)實(shí)驗(yàn), 輸血前試驗(yàn), 糖化血紅蛋白 (HbA1C),血紅蛋白電泳現(xiàn)象分析. 枸櫞酸鈉: 如血凝（1：9）、血沉（1：4） 肝素：如血黏液 氟化鈉 (固體) 草酸鉀類似EDTA都是通過(guò)去除 血液中的鈣而達(dá)到抗凝作用.氟化鈉幫助保存分析前的血糖. -血糖保存劑 ACD (液體) 促凝劑： 礬土水泥，以鋁礬土和石灰石為原料，經(jīng)鍛煉制成 纖維蛋白原,.,常用抗凝劑,肝素 通過(guò)阻止凝血途徑的最后一步驟而起到抗凝作用. 通常使用的形式: 肝素鋰 肝素鈉 某些情況下,也可能使用肝素氨 應(yīng)用: 特殊化學(xué)試驗(yàn)、血流變學(xué)、檢測(cè) 定性的表面抗源、血漿

16、生化 、急 診生化，不適合做電解質(zhì),.,常用抗凝劑,枸櫞酸三鈉 只有一種形式,但有不同的濃度. 0.105 mol/L (約為 3.1% 濃度) 新的塑料枸櫞酸鈉試管使用0.109 mol/L (約為 3.2%) 0.129 mol/L (約為3.8% concentration) NCCLS推薦使用低濃度的抗凝劑(0.105 0.109 mol/L) 抗凝劑與血液的比例是19 應(yīng)用: 凝血試驗(yàn) (抗凝藥物的監(jiān)測(cè), 凝血因子分析),.,常用抗凝劑,氟化鈉/草酸鉀 草酸鉀類似EDTA都是通過(guò)去除 血液中的鈣而達(dá)到抗凝作用.氟化鈉幫助保存分析前的血糖. 應(yīng)用:血漿中血糖分析 GTT(葡萄糖耐量試驗(yàn)

17、,.,常用抗凝劑,枸櫞酸鈉 血沉試驗(yàn)要求的枸櫞酸鈉濃 度是3.8% （相當(dāng)于0.129mol/L） 注意：抗凝劑與血液的比例 為14,.,添加劑(分離膠),SST 和PST 分離膠試管 化學(xué)惰性物,觸變*聚酯或丙稀酸具有一定密度的媒介物存在于血漿/ 血清和血細(xì)胞. 離心后在血漿/血清和血細(xì)胞之間 起到屏障隔離作用. 粘質(zhì)變化 (可逆的)根據(jù)使用的離心 力(例如, rcf),.,添加劑(促凝劑),促凝劑(硅化物) 在塑料試管內(nèi)壁有混濁的添加劑涂層 含有促凝劑的試管必須顛倒混勻. (混勻縮短了凝血時(shí)間,加快了血塊收縮和血清的吸出,避免了過(guò)多的表面活性劑的濃度,.,KHB 真空采血管產(chǎn)品基本類型,.

18、,血常規(guī)管,適用于血常規(guī)、血型鑒定、交叉配血試驗(yàn)及臨床血液學(xué)檢查，并適用于血?dú)夥治?、糖化血紅蛋白、藥物濃度測(cè)定、心梗三項(xiàng)、肌鈣蛋白、B型尿鈉肽前體 抗凝劑：EDTA-K2、 EDTA-K3 血液標(biāo)本量最少為1ml 采血后立即顛倒180度搖勻5-8次,.,血沉管,適用于血沉（ESR)檢測(cè) 抗凝劑：檸檬0.129mol/L 抗凝劑與血樣的體積比(1：4 ) 采血后立即顛倒180度搖勻5-8次,.,血凝管,適用于PT、APTT、PT、D-二聚體、凝血因子檢測(cè)等。 抗凝劑：檸檬酸鈉0.129mol/L 抗凝劑與血樣的體積比(1：9) 采血后立即顛倒180度搖勻5-8次,.,肝素管,適用于急診生化、血粘

19、度等檢測(cè)、血氨（淡綠色） 抗凝劑：肝素鋰、肝素鈉 肝素鋰除具備肝素鈉的特性，還可以用于微量元素的檢測(cè) 血粘度檢測(cè)血標(biāo)本用量5mL 采血后立即顛倒180度搖勻5-8次,.,普通管,適用于臨床生物化學(xué)、免疫學(xué)標(biāo)本、各種病毒檢測(cè)、微量元素檢測(cè)（淡綠色肝素管）、血庫(kù)檢查血液標(biāo)本 未添加任何抗凝或促凝成分。 由于檢測(cè)項(xiàng)目多，血標(biāo)本盡量抽足,.,分離膠促凝管,用于臨床生化學(xué)、免疫學(xué)檢查、藥物檢測(cè) 添加惰性分離膠與促凝劑，加速血液凝固，它具有操作溫度范圍廣，凝血速度快，無(wú)纖維蛋白二次析出現(xiàn)象等優(yōu)點(diǎn) 采血后立即顛倒180度搖勻5-8次,.,血糖管,用于血糖、糖耐量、紅細(xì)胞電泳、抗堿性血紅蛋白、糖溶血等項(xiàng)目 抑

20、制性抗凝劑有效阻止血糖代謝，確保血糖72小時(shí)內(nèi)檢測(cè)恒定 抗凝劑：EDTA，氟化鈉 采血后立即顛倒180度搖勻5-8次,.,.,采血順序,.,特別注意: EDTA管（紫）絕對(duì)不能放在血清管前，因其中的鉀可能對(duì)血清造成污染，特別會(huì)使血鉀增高。 采血管數(shù)較多時(shí)，凝血管先采十分必要，因?yàn)殡S著采血時(shí)間的延長(zhǎng)，凝血因子會(huì)發(fā)生變化。但不建議首采，,.,促腎上腺皮質(zhì)激素徹底（ACTH）,臨床免疫多采用普通試管（紅色）或分離膠管（黃色） ACTH采用的是血常規(guī)管（紫色）23ml 注意定點(diǎn)采血：早8點(diǎn)或4點(diǎn)采血標(biāo)本， ACTH分子不穩(wěn)定，采集后立即送檢或置于48冰箱。 注意：試管需要事先冷藏。 ACTH受應(yīng)激影響

21、大，故抽血前應(yīng)事先留置導(dǎo)管 測(cè)基礎(chǔ)ACTH時(shí)，患者清晨空腹、臥床（4am后不再起床），8am由事先留置靜脈導(dǎo)管抽血,.,口服葡萄糖耐量（OGTT）試驗(yàn),早餐空腹取血（空腹8-14小時(shí)后），取血后于5分鐘內(nèi)服完溶于250-300ml水內(nèi)的無(wú)水葡萄糖75g（如用1分子結(jié)晶水葡萄糖，則為82.5g） 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中不喝任何飲料，不吸煙、不做劇烈運(yùn)動(dòng)、無(wú)須臥床 從口服第一口糖水記時(shí)，于服糖后30分鐘、1小時(shí)、2小時(shí)及3小時(shí)取血標(biāo)本 試驗(yàn)前3日每日碳水化合物攝入量不少于150g（3兩） 試驗(yàn)前停用影響OGTT的藥物，如避孕藥、利尿劑、-腎上腺能阻滯劑、苯妥因鈉、煙酸3-7天，服用糖皮質(zhì)激素者不做OGTT試驗(yàn)

22、,.,血脂類測(cè)定,要求患者素食三天，空腹抽血，抽血前24小時(shí)不要做劇烈運(yùn)動(dòng)及飲酒,.,內(nèi)分泌系列檢測(cè),注意患者生理期的變化，避免情緒過(guò)分激動(dòng)，抽血前應(yīng)休息一段時(shí)間（一般約20分鐘）,.,輸血科常見(jiàn)檢測(cè)項(xiàng)目,1.血型定型 標(biāo)本需要：35ml（不得少于3ml） 標(biāo)本采集要求：標(biāo)本不抗凝或EDTA抗凝 不抗凝：沒(méi)有纖維蛋白原， 避免纖維蛋白原析出引起假凝集，但是獲得紅細(xì)胞不方便； 抗凝：必須EDTA抗凝 檢查內(nèi)容：ABO正定型、反定型、RH血型,.,2.交叉配血 標(biāo)本血量： 35ml（不得少于3ml） 標(biāo)本不抗凝或EDTA抗凝 交叉配血方法：鹽水法、凝聚胺法、抗球蛋白配血法和微柱凝膠卡技術(shù)等,.,3

23、.新生兒溶血病標(biāo)本 標(biāo)本應(yīng)該包括新生兒、新生兒父親和新生兒母親 新生兒：一管不抗凝、一管EDTA抗凝，每管45ml 新生兒父親：34ml，EDTA抗凝 新生兒母親：35ml，EDTA抗凝,.,4.自身免疫性溶血性貧血標(biāo)本 標(biāo)本量：須有兩管，一管抗凝、一管不抗凝，每管35ml,.,5.輸血反應(yīng)標(biāo)本 一旦出現(xiàn)輸血反應(yīng)，應(yīng)根據(jù)輸血反應(yīng)癥狀采集標(biāo)本 懷疑免疫懷溶血性輸血反應(yīng)，應(yīng)立即抽取受血者血液2份，1份進(jìn)行血液膽紅素檢測(cè)，1份進(jìn)行抗體篩選和交叉配血，采用肝素或者EDTA抗凝 懷疑細(xì)菌污染引起的輸血反應(yīng)，采集1份血標(biāo)本，肝素或者EDTA抗凝，應(yīng)防止細(xì)菌污染 其他原因的輸血反應(yīng)，采集1份血標(biāo)本，采用肝素

24、或者EDTA抗凝,.,6.產(chǎn)前檢查 標(biāo)本包括孕婦和丈夫的血標(biāo)本： 孕婦：34ml，EDTA抗凝 丈夫：34ml，EDTA抗凝,.,7.特殊檢測(cè) 特殊檢測(cè)： 患者疑難血型鑒定； 在醫(yī)院進(jìn)行抗體篩選陽(yáng)性，或者患者交叉不合； 交叉配血有困難 標(biāo)本量：至少5ml EDTA抗凝,.,科室要做到血標(biāo)本八不送,血標(biāo)本量少于3ml不送 血標(biāo)本申請(qǐng)單所填項(xiàng)目不符不送 血標(biāo)本無(wú)標(biāo)簽或填寫(xiě)不清、信息過(guò)于簡(jiǎn)單（例如只有患者的姓）不送 用右旋糖酐等大分子物質(zhì)治療后采集的血標(biāo)本未作標(biāo)記說(shuō)明不送（如已標(biāo)記說(shuō)明應(yīng)將細(xì)胞洗滌） 非醫(yī)護(hù)人員送標(biāo)本不送（護(hù)工送標(biāo)本需要經(jīng)過(guò)培訓(xùn)并授權(quán)，禁止閑雜人員送標(biāo)本） 用肝素治療者的血標(biāo)本未用魚(yú)

25、精蛋白對(duì)抗使之凝結(jié)不送 血標(biāo)本溶血不送（溶血性疾病例外，為了防止對(duì)溶血結(jié)果誤判為陰性，建議反定型及交叉配血的細(xì)胞中加入EDTA溶液。由于EDTA能句螯合補(bǔ)體激活所需的Mg2+和Ca2+，故可阻斷補(bǔ)體活化引起的紅細(xì)胞破壞，即溶血）,.,血培養(yǎng) 1、預(yù)防敗血癥 2、確定致病細(xì)菌，確定抗生素 3、監(jiān)控抗生素的濃度和細(xì)菌殺死的情況,.,肉湯,瓊脂,.,.,Aerobic rubik 需氧瓶 Anaerobic neirubik 厭氧瓶 注入血液時(shí)的順序？,.,抽血培養(yǎng)的注意事項(xiàng)： 1、嚴(yán)格無(wú)菌操作 2、檢查培養(yǎng)瓶的有效期 3、一般血培養(yǎng)的采血量為5ml，亞急性心內(nèi)膜炎患者，為提高培養(yǎng)陽(yáng)性率，采血量增至

26、1015ml,.,“只有在發(fā)熱時(shí)，才需要進(jìn)行血培養(yǎng)?！?關(guān)于血培養(yǎng)指征,想采就采,？,.,答 案：血培養(yǎng)的指征,當(dāng)懷疑血流感染或膿毒癥時(shí)，應(yīng)常規(guī)行血培養(yǎng) 懷疑患者有血流感染的癥狀有： 不明原因的發(fā)燒(38)或體溫過(guò)低(36) 白細(xì)胞增多（ 10,000/ul），粒細(xì)胞減少（ 1,000ul） 休克，寒顫，僵直 嚴(yán)重的局部感染(腦膜炎，心內(nèi)膜炎，肺炎，腎盂腎炎，腹部術(shù)后感染，) 心率異常加快 低血壓或高血壓 呼吸頻率加快,.,“何時(shí)采血進(jìn)行血培養(yǎng)，無(wú)特殊時(shí)間要求?！?關(guān)于采血時(shí)機(jī),？,.,0,30,60,時(shí)間 (分鐘),體溫,血培養(yǎng)采血時(shí)機(jī),細(xì)菌濃度,.,答 案：采集血培養(yǎng)樣本的最佳時(shí)間,盡可能

27、在患者寒戰(zhàn)或開(kāi)始發(fā)熱時(shí)采血 在患者接受抗生素治療前采血 如患者已經(jīng)應(yīng)用抗菌藥物進(jìn)行治療，應(yīng)在下一次用藥之前采血培養(yǎng),.,“為減輕患者痛苦，只從一個(gè)穿刺部位采一份血液標(biāo)本即可?！?關(guān)于采血套數(shù)及部位,？,.,基本概念,成人“一套” 血培養(yǎng)應(yīng)該包括需氧瓶和厭氧瓶各一個(gè)，也叫“一份” 注意：一次穿刺采血，算“一套”，采集第二套應(yīng)從另一個(gè)穿刺點(diǎn)獲得。 兒童一般只做需氧培養(yǎng)，但仍需從多個(gè)部位采集多次。特殊患者才考慮厭氧培養(yǎng)。,.,采血套數(shù),Weinstein et al. Detection of Bloodstream Infections in Adults: How Many BloodCultu

28、res Are Needed J Clin Microbiol. 2007; 45:3546-3548,.,表皮葡萄球菌的臨床意義,23套血培養(yǎng)，有助于污染的判斷。,Tokars, JI. Clin Infect Dis 2004; 39:333,污染菌,致病菌,？,采集1套無(wú)法判斷是病原菌還是污染菌。,.,答 案 ：關(guān)于血培養(yǎng)套數(shù)與采血部位,每位患者每次采血最少2套，3套更好 初發(fā)患者，絕不能只采1套標(biāo)本 多個(gè)穿刺部位采血。因多部位同時(shí)發(fā) 生污染的幾率較小，便于對(duì)結(jié)果進(jìn)判斷,.,“兩套血培養(yǎng)采集間隔無(wú)特殊要求?！? 關(guān)于采血間隔,？,.,答案：關(guān)于標(biāo)本采集間隔時(shí)間,對(duì)于非持續(xù)性菌血癥，同時(shí)或

29、短時(shí)間內(nèi)采集23套血培養(yǎng)，因?yàn)轶w內(nèi)巨噬細(xì)胞吞噬系統(tǒng)會(huì)在1530min內(nèi)清除掉進(jìn)入人體內(nèi)的細(xì)菌。 可疑急性心內(nèi)膜炎患者要立即取血作血培養(yǎng)，30分鐘內(nèi)完成3套血培養(yǎng)的采集，采集后立即進(jìn)行抗菌藥的經(jīng)驗(yàn)治療。如果24小時(shí)內(nèi)報(bào)告陰性，則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng)。 可疑的亞急性心內(nèi)膜炎患者每間隔30分鐘至1h采集1套，連續(xù)采集3套標(biāo)本。如果24小時(shí)內(nèi)報(bào)告陰性，則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng)。,.,“每瓶采集多少血液無(wú)特殊要求?！? 關(guān)于采血量,？,.,采血量(ml)與檢出率的關(guān)系,Overall,血培養(yǎng)物每增加一毫升，真性菌血癥 成年人微生物的檢出率增加3,但并非越多越好，超過(guò)一定數(shù)量的采血量會(huì)稀釋培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的肉湯，使肉湯無(wú)法有效中和血中的抑制物質(zhì)（補(bǔ)體、抗體、抗生素）。所以血液與肉湯的最佳比例為1：41：10,.,答 案：關(guān)于采集血液量,采血量是影響靈敏度最關(guān)鍵因素 成人一份標(biāo)本2個(gè)培養(yǎng)瓶（需氧厭氧），每瓶810ml，共20ml；要求至少采兩份標(biāo)本，即40ml。 兒童一般只需采集需氧瓶，在保證采集血量1總血量下，一般為13ml 采血量不足時(shí)應(yīng)優(yōu)先保證需氧瓶，因臨床90以上的感染為需氧菌或兼性需氧菌感染,.,先采生化、凝血標(biāo)本，再采血培養(yǎng)標(biāo)本?！?關(guān)于各種血液標(biāo)本的采集順序,？,.,血培養(yǎng)對(duì)無(wú)菌操作的要求比注射、采集生化、凝血等其它標(biāo)本要高。 所以要最先采集血培養(yǎng)標(biāo)本。 污染